全 文 ：书收稿日期:2012-04-21; 修订日期:2012-09-18
基金项目:国家“973”重点基础研究发展计划( No． 2006CB504100) ;
广东工业大学校级博士科研启动项目( No． 093002) ;
作者简介:郑俊霞( 1981-) ，女( 汉族) ，山西绛县人，现任广东工业大学讲
师，博士学位，主要从事天然产物活性成分研究工作．
* 通讯作者简介:张 焜( 1963-) ，男( 汉族) ，广东罗定人，现任广东工业
大学教授，博士研究生导师，博士学位，主要从事天然药物化学研究工作．
翠云草中黄酮及酚性成分研究
郑俊霞，郑 扬，张 磊，赵肃清，方岩雄，张 焜*
(广东工业大学轻工化工学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 研究翠云草 Selaginella uncinata ( Desv． ) Spring全草的 60%乙醇提取物中黄酮及酚性成分。方法 对翠云草
全草的 60%乙醇提取物依次用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，萃取物经硅胶、sephadex LH － 20、ODS柱色谱以及反相制备
型高效液相色谱法等现代分离方法进行了分离纯化，利用现代波谱学方法对分离得到的化合物的结构进行了鉴定。结
果 从翠云草中分离得到 4 个黄酮及酚性化合物，分别为( 2S) 2，3 －二氢 － 7＇＇－甲氧基扁柏双黄酮 ( I) 、芹菜素 ( Ⅱ) 、3，5
－二甲氧基 － 4 －羟基 －苯乙酮 ( Ⅲ) 及阿魏酸 ( Ⅳ) 。结论 化合物 III、IV为首次从本属植物分离得到，化合物 I、II为首
次从该种植物分离得到。
关键词:翠云草; 黄酮; 酚性成分
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 12． 025
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2012) 12-3006-02
Isolation and Identification of Flavonoids and Phenolic Constituents from Selaginella unci-
nata ( Desv． ) Spring
ZHENG Jun-xia，ZHENG Yang，ZHANG Lei，ZHAO Su-qing，FANG Yan-xiong，ZHANG Kun*
( School of Chemical Engineering and Light Industry，Guangzhou，Guangdong，510006，China)
Abstract: Objective To study the flavonoids and phenolic constituents from Selaginella uncinata ( Desv． ) Spring．
Methods 60% ethanol extract of the Selaginella uncinata ( Desv． ) Spring was extracted by the ethyl acetate and n － butanol． The
compounds were isolated by means of chromatography on silica gel，Sephadex LH － 20 column，ODS column，and preparative RP －
HPLC from the ethyl acetate extract． The structures of the compounds were identified by spectroscopic analysis． Results Four phe-
nolic compounds were isolated as ( 2S) 2，3 － dihydroisocryptomerin ( I) ，apigenin ( II) ，3，5 － dimethoxy － 4 － hydroxypropiophe-
none ( III) and ferulic acid ( IV) ． Conclusion Compounds III and IV were obtained from the genus for the first time，and com-
pounds I and II were isolated from this plant for the first time．
Key words: Selaginella uncinata ( Desv． ) Spring; Flavonoids; Phenolic constituents
翠云草为卷柏属植物翠云草 Selaginella uncinata (Desv．)
Spring的全草，主要分布于广西、广东、福建、浙江、安徽及西南各
地。《中药大辞典》记载其味微苦，性寒，具有清热利湿、解毒、消
瘀、止血的功效［1］。郑俊霞等［2，3］已从翠云草中分离鉴定了多个
黄酮类化合物，其中以双黄酮为主。研究发现翠云草乙醇提取物
具有良好的抗缺氧活性，其中黄酮类化合物［4 ～ 6］为主要活性成
分。为了进一步研究翠云草活性部位的化学基础，本课题组又对
翠云草化学成分做了进一步研究，从中分离得到 4 个黄酮及酚性
化合物:(2S)2，3 －二氢 － 7＇＇－甲氧基扁柏双黄酮 (I)、芹菜素
(Ⅱ)、3，5 －二甲氧基 － 4 －羟基 －苯乙酮(Ⅲ)及阿魏酸(Ⅳ)。
其中化合物Ⅲ、Ⅳ为首次从本属植物分离得到，化合物 I、Ⅱ为首
次从该种植物分离得到。
1 仪器与材料
翠云草干燥全草，2010 年 4 月购于广西南宁市，经广西中医
药研究所赖茂祥教授鉴定为翠云草 Selaginella uncinata (Desv．)
Spring的全草。N － 1100 型旋转蒸发仪(EYELA) ;A － 1000S 循
环水真空泵(EYELA) ;FA2004 型电子天平(上海舜宇恒平科学
仪器有限公司) ;紫外光谱仪为岛津 UV2401PC型;红外光谱仪为
FTIR8900 型;旋光度采用 Jasco 公司的 P － 1020 旋光仪测定;
Bruker AV － 400 型核磁共振仪(TMS 为内标) ;高效液相色谱仪
(日本岛津株式会社) ;分析型色谱柱:Shim － pack VP － ODS
(φ250 mm ×4． 6 mm，5 μm) (SHIMADZU) ，制备型色谱柱:Shim
－ pack PREP － ODS(φ250 mm × 20 mm，5 μm) (SHIMADZU) ;
Sephadex LH － 20 填料(Amersham Biosciences 公司) ;反相 ODS
填料(Merck公司) ;薄层色谱及柱色谱用硅胶(青岛海洋化工) ;
液相色谱用甲醇为色谱纯;水为双蒸水，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 提取与分离 翠云草干燥全草 4． 2 kg，用 60%乙醇(料液比
1∶ 30)回流提取 3 次，每次 2h。合并提取液浓缩成浸膏，将浸膏
以 1∶ 10 的比例混匀与水中，依次用乙酸乙酯、正丁醇等体积萃
取 3 次，浓缩后，得乙酸乙酯层部分 (160 g)、正丁醇层部分
(90． 4 g)及水层部分 (600 g)。借助硅胶柱色谱(氯仿 －甲醇体
系)对乙酸乙酯萃取部分进行梯度洗脱，得 15 个流份;Fr． G 经
Sephadex LH － 20 柱色谱，氯仿 －甲醇 (体积比 9∶ 1)洗脱，得到
两个流份。Fr． G － 2 经反相 ODS柱色谱(甲醇 －水体系)进行梯
度洗脱后得到 8 个流份。Fr． G － 2 － 8 经反相制备型 HPLC 分离
(甲醇∶ 水∶ 乙酸 = 85∶ 15∶ 0． 1) ，得到化合物 I (15 mg)。Fr． G
－ 2 － 3 经 Sephadex LH － 20 柱色谱，甲醇 －水 (体积比 70∶ 30)
洗脱，得到 9 个流份。Fr． G － 2 － 3 － 7 经反相制备型 HPLC 分离
(甲醇∶ 水∶ 乙酸 = 65∶ 35∶ 0． 1) ，得到化合物Ⅱ (5mg)。Fr． C
(17g)经硅胶柱色谱(环己烷 －醋酸乙酯体系)梯度洗脱得 11 个
流份，Fr． C － 6 经 Sephadex LH － 20 柱色谱，氯仿 －甲醇 (体积比
9∶ 1)洗脱，得到两个流份。Fr． C － 6 － 2 经反相 ODS 柱色谱(甲
醇 －水体系)以及反相制备型 HPLC 分离(甲醇∶ 水∶ 乙酸 = 40
∶ 60∶ 0． 1) ，得到化合物Ⅲ(11 mg)及 IV (20 mg)。
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL． 23 NO． 12
书2． 2 结构鉴定
2． 2． 1 化合物 I 黄色无定型粉末，［α］D
29 + 5． 02° (c 1． 0，DM-
SO)。盐酸 －镁粉反应阳性。UV 图谱(CH3OH)显示 λmax nm:
332 (logε4． 39) (带 I) ，279 (logε4． 41) (带Ⅱ) ，为黄酮类化合
物的紫外特征吸收。IR中，λKBrmax 3082 cm
－1提示结构中有羟基存
在，1 655 cm －1强吸收带提示结构中有羧基存在，1609 和 1497
cm －1提示结构中有苯环存在。ESI － MS(positive and negative)给
出 m/z 577［M + Na］+和 553［M － H］－，推出化合物的分子量为
554。结合1 H － NMR、13 C － NMR 图谱，确定其分子式为
C31H22O10，计算其不饱和度为 21。可以初步推测该化合物为双
黄酮类化合物。1H － NMR (400 MHz，in DMSO － d6)δ:13． 00
(1H，br s，H － 5) ，12． 12 (1H，br s，H － 5) ，8． 00 (2H，d，J =
8． 4 Hz，H －2，－ 6) ，7． 43 (4H，d，J = 8． 6 Hz，H －2，－ 6 ) ，
7． 08 (1H，s，H －8) ，6． 95 (2H，d，J = 8． 4 Hz，H －3，－ 5) ，
6． 90 (1H，s，H －3) ，6． 89 (2H，d，J = 8． 6 Hz，H － 3，－ 5) ，5．
88 (1H，d，J = 2． 0 Hz，H －8) ，5． 87 (1H，d，J = 2． 0 Hz，H － 6) ，
5． 50 (1H，dd，J = 12． 7，2，9 Hz，H2) ，3． 88 (3H，s，4 － OMe) ，3．
25 (1H，dd，J = 17． 2，12． 7 Hz，H －3) ，2． 73 (1H，dd，J = 17． 2，2．
9 Hz，H －3) ;13C － NMR (100 MHz，in DMSO － d6)δ:196． 1 (C －
4) ，182． 2 (C － 4) ，166． 9 (C － 7) ，164． 5 (C － 2) ，163． 5 (C －
5) ，162． 8 (C － 9) ，161． 5 (C － 4) ，158． 5 (C － 7) ，157． 9 (C
－ 4＇) ，154． 0 (C － 9) ，152． 5 (C － 5) ，132． 1 (C － 1) ，128． 7
(C － 2，－ 6) ，128． 4 (2C，C － 2，6) ，125． 5 (H －6) ，121． 0
(C － 1) ，116． 1 (C － 3，－ 5) ，114． 5 (2C，C － 3，5) ，105． 3
(C － 10) ，102． 9 (C － 3) ，101． 7 (C － 10) ，96． 0 (C － 6) ，95． 1
(C － 8) ，92． 1 (C － 8) ，78． 1 (C － 2) ，56． 8 (C － 4 － OMe) ，
42． 0 (C － 3)。与文献［7］报道的数据基本一致，因此将其鉴定
为(2S)－ 2，3 －二氢 － 7 －甲氧基扁柏双黄酮，该化合物首次从
该种植物中分离得到。
2． 2． 2 化合物Ⅱ 黄色无定型粉末，盐酸 －镁粉反应阳性。ESI
－ MS(negative)给出 m/z 269［M － H］－，推出化合物的分子量为
270。结合1H － NMR、13C － NMR图谱，确定其分子式为C15H10O5，
计算其不饱和度为 11。1H － NMR (400 MHz，in DMSO － d6)δ:
7． 88 (2H，d，J = 8． 8 Hz，H －2，－ 6) ，6． 90 (2H，d，J = 8．
8 Hz，H －3，－ 5) ，6． 68(1H，s，H － 3) ，6． 36(1H，d，J = 2． 0Hz，H
－8) ，6． 08(1H，d，J = 2． 0Hz，H － 6) ;13 C － NMR(100MHz，inDM-
SO － d6)δ:181． 3(C － 4) ，166． 8(C － 7) ，161． 5(2C，C － 5，4) ，
157． 5(C － 9) ，121． 0(C － 1) ，102． 7(C － 10) ，128． 3(2C，C － 2，
6) ，116． 0(2C，C － 3，5) ，102． 5(C － 2) ，99． 5(C － 6) ，94． 3(C －
8) ，以上数据与文献［8］数据一致，故确定化合物 II为芹菜素，该
化合物为首次从该种植物中分离得到。
2． 2． 3 化合物Ⅲ 白色无定形粉末，与 FeCl3 试剂反应显蓝黑
色，提示该化合物为酚酸类化合物。1H － NMR (400 MHz，in DM-
SO － d6)δ:7． 23 (2H，s，H － 2，6) ，3． 80 (6H，s，H － 3，5 －
OCH3) ，2． 97 (2H，q，J = 7． 2Hz，H －8) ，1． 06 (3H，t，J = 7． 2Hz，
H －9) ;13C － NMR (100 MHz，in DMSO － d6)δ:199． 2 (COOH) ，
147． 7 (2C，C － 3，5) ，140． 9 (C － 4) ，127． 2 (C － 1) ，106． 0(2C，C
－ 2，6) ，56． 3(2C，C － 3，5 － OCH3) ，30． 8(C － 8) ，8． 7(C － 9)。
上述数据与文献［9］数据基本一致，故将该化合物鉴定为 3，5 －
二甲氧基 － 4 －羟基 －苯丙酮。该化合物为首次从本属植物中分
离得到。
2． 2． 4 化合物 IV 白色无定形粉末，与 FeCl3 试剂反应显蓝黑
色，提示该化合物为酚酸类化合物。1H － NMR (400 MHz，in DM-
SO － d6)δ:7． 48 (1H，d，J = 15． 9 Hz，H － 7) ，6． 36 (1H，d，J =
15． 9Hz，H －8) ，7． 26 (1H，d，J = 1． 9Hz，H － 5) ，7． 08 (1H，dd，J
= 8． 2，1． 9Hz，H － 6) ，6． 79 (1H，d，J = 8． 1Hz，H － 5) ，δ 3． 78
(3H，s，H － 3 － OCH3) ;
13 C － NMR (100 MHz，in DMSO － d6)δ:
168． 0 (COOH) ，149． 0 (C － 4) ，147． 9 (C － 3) ，144． 3 (C － 7) ，
115． 7 (C － 8) ，125． 8 (C － 1) ，122，7 (C － 6) ，115． 5 (C － 5) ，
111． 2 (C － 6) ，55． 7 (C － 3 － OCH3)与文献［10］中的阿魏酸核
磁数据基本一致，故将化合物 IV 鉴定为阿魏酸。该成分为首次
从本属植物中分离得到。
3 讨论
目前，从翠云草中分离得到的双黄酮类化合物大多数为罗波
斯塔型双黄酮［两个黄酮单元的连接方式为 (C3 － C6) ］和穗
花杉型双黄酮［两个黄酮单元的连接方式为 (C3 － C8) ］，本
文首次从翠云草中发现扁柏型双黄酮(2S)2，3 －二氢 － 7＇＇－甲
氧基扁柏双黄酮 (I) ［两个黄酮单元的连接方式为 (C3 － O －
C7) ］。文献报道从翠云草中分离得到的均为双黄酮类化合物，
尚未发现单黄酮类化合物，而本文首次从翠云草中发现了单黄酮
类化合物芹菜素 (Ⅱ)。另外，还首次从翠云草中分离得到两个
酚性化合物:3，5 －二甲氧基 － 4 －羟基 －苯乙酮(Ⅲ)及阿魏酸
(IV) ，这两个化合物亦为首次从卷柏属中分离得到。这些化合
物的发现，为该植物进一步的研究与开发奠定了化学基础。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL ． 23 NO． 12 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期