全 文 ：［收稿日期］ 20111031(007)
［基金项目］ 北京中医药大学创新团队项目(中药先导化合物
发现与开发)
［第一作者］ 柳芳，在读博士研究生，E-mail:liufang117117 @
126． com
［通讯作者］ * 高增平，博士，教授，硕士生导师，从事中药有效
物 质 基 础 及 质 量 研 究，E-mail:gzp6560 @
hotmail． com
HPLC法测定不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量
柳芳，戴闻韬，高增平 *
(北京中医药大学，北京 100102)
［摘要］ 目的:建立去甲氧基荚果蕨素的含量测定方法，并测定不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量。方法:
HPLC 法，YWG-C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，10 μm) ，流动相甲醇-水(78∶ 22)等度洗脱，流速 1. 0 mL·min
－ 1，检测波长为 298
nm，柱温 25 ℃。结果:去甲氧基荚果蕨素进样量在 0. 188 0 ～ 1. 316 μg 时线性关系良好，r = 0. 999 7，平均回收率为 99. 38%，
RSD 2. 40%。对不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量测定结果表明，河北石家庄的绵马贯众中去甲氧基荚果蕨素
的含量最高，为 0. 35%，北京西城的绵马贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量最低，为 0. 17%。结论:该方法操作简单，快速，准
确，重复性好，可用于商品贯众及其相关药材中去甲氧基荚果蕨素的含量分析。
［关键词］ 贯众;去甲氧基荚果蕨素;高效液相色谱;含量测定
［中图分类号］ R284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)10-0130-03
The Quantitative Analysis of Desmethoxymatteucinol
in Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis from Different Areas by HPLC
LIU Fang，DAI Wen-tao，GAO Zeng-ping*
(Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)
［Abstract］ Objective: To establish a method to determine the content of desmethoxymatteucinol in
Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis from different areas of China． Method:The analysis was performed on a
column of YWG-C18 (4. 6 mm × 250 mm，10 μm) ，using methanol and water (78∶ 22)as mobile phase and the
flow rate was at 1. 0 mL·min － 1 and detected at 298 nm under 25 ℃ ． Result:The linearity of calibration curve
was in the range of 0. 188 0-1. 316 μg (r = 0. 999 7)． The average recovery was 99. 38%，RSD 2. 40% ． The
highest content of desmethoxymatteucinol in Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis from Shijiazhuang is 0. 35% ．
The lowest content of desmethoxymatteucinol in Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis from Xicheng district of
Beijing is 0. 17% ． Conclusion:This method is accurate，repatable and can be applied to determine the content of
desmethoxymatteucinol in crude drug Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis ．
［ Key words ］ Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis; desmethoxymatteucinol; HPLC;
quantitative analysis
贯众为传统中药，始载于《神农本草经》，列为
下品，味苦，性微寒，有小毒，主要具有清热解毒、驱
虫之功效，临床用于治疗流感、肺炎、乙型肝炎、肠道
寄生虫病、妇产科出血、带状疱疹等。现代研究表明
其具有抗菌、抗病毒、驱虫、止血等药理活性［1-4］，主
要含有间苯三酚、黄酮、甾萜等化学成分［5-7］。Ji Suk
Lee 等［2］从绵马贯众 80%甲醇提取物中首次分离得
到黄酮类成分去甲氧基荚果蕨素，并有研究表明去
甲氧基荚果蕨素具有抗 HIV 和抗疟活性［2，8-9］。本
文选择贯众中的有效成分之一———去甲氧基荚果蕨
素为测定目标成分，首次建立了药材贯众中去甲氧
基荚果蕨素的 HPLC 含量测定方法，并测定了不同
地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量，为临床
应用时如何选择不同品种贯众提供了参考。
·031·
第 18 卷第 10 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 10
May，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.10.044
1 仪器与试药
FW100 型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器
有限责任公司) ，KQ-400KDE 型高功率数控超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ，AE240 型电子
分析天平(METTLER 公司) ，安捷伦 1100 系列高效液
相色谱仪(G1311A 四元泵、G1316A 柱温箱、D1315B
二极管阵列检测器，HPCORE chemstation)。
蛾眉蕨贯众是蹄盖蕨科蛾眉蕨 Lunathyrium
acrostichoides (sw．)Ching 带叶柄残基的干燥根茎，
购于甘肃兰州;绵马贯众是鳞毛蕨科粗茎鳞毛蕨
Dryopteris Crassirhizomae Nakai 带叶柄残基的干燥根
茎，购于 10 个不同地区，分别是黑龙江双鸭山、北京
西城、北京房山、北京密云、北京顺义、北京石景山、
辽宁沈阳、辽宁大连、河北天津、河北石家庄，以上药
材均由北京中医药大学中药学院生药系阎玉凝教授
协助鉴定，标本保存在北京中医药大学中药学院中
药化学系。去甲氧基荚果蕨素对照品(自制，经
HPLC 面积归一化法测定纯度为 98. 6%) ，甲醇(色
谱纯，美国 FISHER 公司) ，水(娃哈哈纯净水) ，其
他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取去甲氧基荚果
蕨素对照品适量，加甲醇溶解，制成每 1 mL 含 37. 6
μg 的去甲氧基荚果蕨素的对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 通过超声提取与回流提
取方法的考察，以及回流提取时间(1，1. 5，2 h)的考
察，根据测定的去甲氧基荚果蕨素含量，确定采用回
流提取 1. 5 h 作为提取条件。
取蛾眉蕨贯众药材粉末(40 目筛)1 g，精密称
定，置于 100 mL 锥形瓶中，精密加入 50 mL 甲醇，称
重，水浴加热回流提取 1. 5 h，放冷至室温，补重，摇
匀，滤过，精密量取 15 mL 续滤液置 25 mL 量瓶中，
加甲醇定容至刻度，摇匀，经微孔滤膜(0. 45 μm)滤
过，取续滤液，过微孔滤膜，即得。
2. 3 色谱条件及系统适应性 YWG-C18 HPLC 色谱
柱(4. 6 mm × 250 mm，10 μm) ，流动相甲醇-水(78 ∶
22)等度洗脱，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长 298
nm，柱温 25 ℃。依上述色谱条件，分别精密吸取对
照品溶液和供试品溶液，进样，供试品溶液色谱图中
在与对照品相应位置上，具有相同保留时间的色谱
峰，且供试品色谱中对照品的色谱峰与其他成分色
谱峰分离良好，无干扰。见图 1。
2. 4 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液 5，
10，15，25，30，35 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱
A. 对照品;B. 供试品;1. 去甲氧基荚果蕨素
图 1 对照品及供试品溶液的 HPLC
条件测定去甲氧基荚果蕨素峰面积，以峰面积为纵
坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线并进行线性回
归，回归方程 Y = 2 909. 8X － 135. 4(r = 0. 999 7) ，结
果表明，去甲氧基荚果蕨素进样量在 0. 188 0 ～
1. 316 μg 时，与其色谱峰面积呈良好的线性关系。
2. 5 精密度考察 取 2. 2 项下制得的蛾眉蕨贯众
供试品溶液 1 份，连续进样 6 次，每次进样 15 μL，
按照上述确定的色谱条件测定峰面积，去甲氧基荚
果蕨素的峰面积 RSD 2. 00%，表明精密度良好。
2. 6 稳定性考察 取 2. 2 项下制得的蛾眉蕨贯众
供试品溶液 1 份，分别在供试品溶液制备后 0，2，4，
6，8，10 h 进样，进样量均为 15 μL，按照上述确定的
色谱条件测定峰面积，去甲氧基荚果蕨素的峰面积
RSD 2. 90%，表明供试品溶液在 10 h 内基本稳定。
2. 7 重复性考察 按照 2. 2 项下供试品溶液的制
备方法，平行操作制得蛾眉蕨贯众供试品溶液 6 份，
按照上述确定的色谱条件，进样 15 μL，测定去甲氧
基荚果蕨素峰面积，并随行对照品溶液，外标一点法
计算去甲氧基荚果蕨 素的含量，平 均 含 量 为
0. 31%，RSD 2. 60%，表明该法重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 分别精密称取上述已知含
量的蛾眉蕨贯众粉末 6 份，每份约 1 g，分别精密加
入 1 mL 去甲氧基荚果蕨素对照品溶液(3. 76 g·
L － 1) ，精密加入 100 mL 甲醇，按照 2. 2 项下供试品
溶液的制备方法，回流提取，补重摇匀滤过后，精密
量取 3 mL 续滤液置 25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度摇匀，进样 20 μL 测定去甲氧基荚果蕨素峰面积，
并随行对照品溶液，计算加样回收率，结果去甲氧基
荚果 蕨 素 的 平 均 加 样 回 收 率 为 99. 38%，RSD
2. 40%。见表 1。
2. 9 不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含
量测定 取不同地区绵马贯众药材粉末，精密称定，
按照 2. 2 项下供试品溶液制备方法制备供试品溶
·131·
柳芳，等:HPLC 法测定不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量
液，按上述确定的色谱条件，测定去甲氧基荚果蕨素
峰面积，并随行对照品溶液，外标一点法计算去甲氧
基荚果蕨素含量，结果见表 2。
表 1 贯众中去甲氧基荚果蕨素的加样回收率试验(n = 6)
称样量
/ g
样品
含量
/mg
加入量
/mg
测得
总量
/mg
回收率
/%
平均
回收率
/%
RSD
/%
1. 000 1 3. 07 3. 76 6. 81 99. 47
1. 000 3 3. 07 3. 76 6. 77 98. 40
1. 000 1 3. 07 3. 76 6. 81 99. 47
99. 38 2. 40
1. 000 0 3. 07 3. 76 6. 97 103. 72
1. 000 1 3. 07 3. 76 6. 70 96. 54
1. 000 2 3. 07 3. 76 6. 78 98. 67
表 2 不同地区商品贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量(n = 3)%
种类 来源 去甲氧基荚果蕨素
蛾眉蕨贯众 甘肃兰州 0. 31
绵马贯众
黑龙江双鸭山 0. 22
北京石景山 0. 32
北京顺义 0. 34
河北石家庄 0. 35
北京密云 0. 35
辽宁大连 0. 33
北京房山 0. 35
辽宁沈阳 0. 29
北京西城 0. 17
河北天津 0. 20
3 小结与讨论
历代本草所记载的贯众形态、生长环境、产地及
附图特征表明，贯众的植物来源甚多，而目前市场上
的商品贯众主要有 7 种植物来源［10］，而 2010 年版
《中国药典》仅收载了绵马贯众和紫萁贯众［11］，其
余品种的贯众多为自产自销的地方用药。本文在方
法学考察的基础上，对不同地区商品贯众中去甲氧
基荚果蕨素的含量进行了测定，结果表明，甘肃兰州
蛾眉蕨贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量与不同地区
绵马贯众中去甲氧基荚果蕨素的平均含量相近;不
同地区绵马贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量存在一
定差异，河北石家庄绵马贯众含量最高(0. 35%) ，
北京西城的含量最低(0. 17%) ，推测该成分的含量
高低可能与药材的产地、采收时间以及储存时间等
因素有关。另外，本试验还对其他商品贯众，如辽东
鳞毛蕨贯众、狗脊蕨贯众、单芽狗脊蕨贯众、荚果蕨
贯众和乌毛蕨贯众，进行了去甲氧基荚果蕨素的含
量测定，结果显示含量较低，均在 0. 001%左右。根
据结果可见，不同品种商品贯众以及不同地区绵马
贯众中去甲氧基荚果蕨素的含量存在很大差异，文
献报道去甲氧基荚果蕨素具有抗 HIV 和抗疟活
性［8-10］，故建议在临床选用时应考虑贯众的品种和
产地，并建议将去甲氧基荚果蕨素的含量纳入绵马
贯众药材及饮片的质量控制指标。
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［责任编辑 蔡仲德］
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第 18 卷第 10 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 10
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