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蛾眉蕨贯众的化学成分研究



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·中药化学·
蛾眉蕨贯众的化学成分研究*
柳芳1 马秉智2 高增平1#
柳芳,女,在读博士生
# 通信作者:高增平,女,博士,教授,硕士生导师,研究方向:中药有效物质基础及质量研究;E-mail:gzp6560@ hotmail. com
* 北京中医药大学创新团队项目
(1 北京中医药大学 北京 100029;2 中日友好医院药学部)
摘要:目的 研究蛾眉蕨贯众的化学成分,以期阐明蛾眉蕨贯众发挥药效的物质基础。方法 采用
乙醇提取,溶剂萃取,反复硅胶柱色谱法及重结晶法进行分离纯化,根据理化性质和波谱特征对分
离得到的化合物进行结构鉴定。结果 首次从蛾眉蕨贯众 95%乙醇提取物中分离并鉴定了 4 个
化合物:去甲氧基荚果蕨素(1)、5,7,3-三羟基-6,8-二甲基-4-甲氧基二氢黄酮(2)、豆甾-4-烯-3,6-
二酮(3)、坡那甾酮 A(4)。结论 化合物 1、2、3、4 均为首次从蛾眉蕨贯众中分离得到。
关键词:峨眉蕨;贯众;化学成分
中图分类号:R284. 2
Chemical constituents of Emeijue Guanzhong (Lunathyrium acrostichoides
Ching)*
LIU Fang1,MA Bing-zhi2,GAO Zeng-ping1#
(1 Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029;2 Pharmacy Department,China-Japan
Friendship Hospital)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of Emeijue Guanzhong (Lunathyrium
acrostichoides Ching) for elucidating its material foundation of medical actions. Methods Emeijue
Guanzhong was extracted with 95% ethanol,abstracted with organic solvent,and isolated and purified
with repeat column chromatography of silica gel and recrystallization. The obtained compounds were
identified in structure according to their physicochemical features and wave spectrum characteristics.
Results There were 4 compounds isolated and identified for the first time from the ethanol extract of
Emeijue Guanzhong,including desmethoxymatteucinol (1) ,3-hydroxy-matteucinol (2) ,Stigmast-4-
en-3,6-dione (3) ,ponasterone A (4). Conclusion Compounds 1,2,3 and 4 are all isolated for the
first time from Emeijue Guanzhong.
Key words:Emeijue Guanzhong (Lunathyrium acrostichoides Ching) ;chemical constituents
贯众为常用中药,始载于《神农本草经》,列为
下品,味苦,微寒,有小毒,主要具有清热解毒、驱虫、
止血之功效。现代研究表明贯众具有抗菌、抗病毒、
抗癌等药理活性[1-3],临床多用于治疗流行性感冒、
肺炎、乙型肝炎、肠道寄生虫病、妇产科出血、带状疱
疹等。历代本草所记载的贯众形态、生境、产地及附
图特征表明,贯众的植物来源甚多,文献报道目前市
场上作为贯众使用的原植物有 7 种植物来源[4],而
2010 版《中国药典》仅收载了绵马贯众和紫萁贯
众[5],其中蛾眉蕨贯众是蹄盖蕨科蛾眉蕨属植物蛾
眉蕨(Lunathyrium acrostichoides Ching)带叶柄残基
的干燥根茎,迄今为止未见有关蛾眉蕨贯众的化学
成分和药理活性研究报道。本课题组在绵马贯众研
究的基础上,对蛾眉蕨贯众进行了化学成分研究,从
891
北京中医药大学学报
Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine
第 35 卷第 3 期 2012 年 3 月
Vol. 35 No. 3 Mar. 2012
蛾眉蕨贯众 95%乙醇提取物中分离鉴定了 4 个化
合物:去甲氧基荚果蕨素(1) ,5 7,3-三羟基-6,8-二
甲基-4-甲氧基二氢黄酮(2) ,豆甾-4-烯-3,6-二酮
(3) ,坡那甾酮 A(4) ,均为首次从该植物中分离
得到。
1 仪器与试药
核磁共振仪(Bruker AM-500) ;色谱用硅胶(青
岛海洋化工厂) ;药材购于甘肃兰州,经北京中医药
大学生药系阎玉凝教授鉴定为蛾眉蕨(Lunathyrium
acrostichoides Ching)贯众,即蛾眉蕨带叶柄残基的干
燥根茎,标本保存在北京中医药大学中药学院中药
化学系;提取分离用有机溶剂均为北京化工厂生产
(分析纯)。
2 方法与结果
2. 1 提取分离
蛾眉蕨贯众 4 kg 粉碎(60 目) ,95%乙醇浸渍
提取 5 次,过滤,提取液减压浓缩,浸膏水分散,依次
用石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别
减压回收溶剂。石油醚(60 ~ 90 ℃)部分经反复硅
胶柱色谱,氯仿-甲醇梯度洗脱得化合物 1 和 2,石油
醚-乙酸乙酯梯度洗脱得化合物 3。乙酸乙酯部分
经反复硅胶柱色谱,氯仿-甲醇梯度洗脱得化合
物 4。
2. 2 结构鉴定
化合物 1 黄色针状结晶(氯仿) ,1%三氯化铝
乙醇液显色,紫外灯下亮黄色。1H-NMR(400 MHz,
CDCl3)δ:5. 39(1H,d,J = 12. 8 Hz) ,3. 04(1H,dd,J
= 17. 2,13. 2 Hz) ,2. 81(1H,dd,J = 2. 8,17. 2 Hz) ,
7. 41(5H,m) ,2. 03(6H,s,2 × CH3)。
13 C-NMR(100
MHz,CDCl3)δ:78. 5(C-2) ,43. 1(C-3) ,196. 4(C-
4) ,158. 8(C-5) ,103. 9(C-6) ,162. 5(C-7) ,103. 2
(C-8)157. 6(C-9) ,102. 1(C-10) ,139. 0(C-1) ,
125. 7(C-2) ,128. 5(C-3) ,128. 3(C-4) ,128. 5(C-
5) ,125. 7(C-6) ,7. 5(6-CH3) ,6. 7(8-CH3)。以上
数据与文献[6-7]报道一致,因此确定化合物 1 为去
甲氧基荚果蕨素(desmethoxymatteucinol)。
化合物 2 黄色粉末(甲醇) ,1%三氯化铝乙醇
液显色,紫外灯下亮黄色。[α]23D -0. 035°(MeOH ,c
1. 0) ,1 H-NMR(400 MHz,CD3OD)δ :在 δ5. 63 和
δ2. 91 有 2 个双二重峰,在 δ2. 02 和 δ2. 06 处有两
个芳香甲基质子信号,在 δ3. 83 处有甲氧基质子信
号。13C-NMR(100 MHz,CD3OD)δ :74. 3(C-2) ,41. 7
(C-3) ,197. 2(C-4) ,158. 0(C-5) ,103. 4(C-6) ,162.
8(C-7) ,101. 8(C-8) ,158. 9(C-9) ,102. 8(C-10) ,
126. 7(C-1) ,113. 7(C-2) ,147. 5(C-3) ,153. 1(C-
4) ,111. 5(C-5) ,115. 5(C-6) ,6. 8(6-CH3) ,6. 1
(8-CH3) ,54. 8(4-OCH3)。以上数据与文献[8]报
道一致,因此确定化合物 2 为 5,7,3-三羟基-6,8-二
甲基-4-甲氧基二氢黄酮(3-hydroxy-matteucinol)。
化合物 3 白色针状结晶(氯仿) ,3%香草醛乙
醇液显粉色。13 C-NMR(100 MHz ,CDCl3)δ:11. 88
(C-18) ,11. 97(C-29) ,17. 50(C-19) ,18. 71 (C-
21) ,19. 0 (C-27) ,19. 8 (C-11) ,20. 8(C-26) ,23. 1
(C-23) ,24. 0(C-15) ,26. 1(C-28) ,28. 0(C-25) ,
29. 2(C-16) ,33. 8(C-2) ,34. 0(C-8) ,34. 2(C-20) ,
35. 5(C-1) ,36. 0(C-22) ,39. 1(C-24) ,39. 8(C-10) ,
42. 5(C-12) ,45. 8(C-7) ,46. 8(C-13) ,50. 9(C-14) ,
55. 9(C-17) ,56. 6(C-9) ,125. 4(C-4) ,161. 1(C-5) ,
199. 5 (C-3) ,202. 3 (C-6)。以上13 C-NMR 数据与
文献[9]报道一致,因此确定化合物 3 为豆甾-4-烯-
3,6-二酮(Stigmast-4-en-3,6-dione)。
化合物 4 白色粉末(氯仿-甲醇) ,3%香草醛
乙醇液显粉色。经与对照品坡那甾酮 A 薄层对
照,在 3 种溶剂系统(氯仿-甲醇;石油醚-丙酮;氯
仿-丙酮)下 Rf 值一致,确定化合物 4 为坡那甾
酮A(ponasterone A)。
3 讨论
本次实验从蛾眉蕨贯众中分离鉴定了 4 个化合
物,分别为去甲氧基荚果蕨素、5,7,3-三羟基-6,8-
二甲基-4-甲氧基二氢黄酮、豆甾-4-烯-3,6-二酮、坡
那甾酮 A,均为首次从该植物中分离得到。其中去
甲氧基荚果蕨素含量较多,在荚果蕨贯众、绵马贯众
中亦分离得到了该单体[2,10]。现代药理研究发现,
去甲氧基荚果蕨素具有抗 HIV 和抗疟活性[2,11-12],
表明去甲氧基荚果蕨素可能为贯众清热解毒和驱虫
功效的有效物质基础之一。同时,从蛾眉蕨贯众中
还分离得到少量间苯三酚类化合物的混合物,LC-
MS分析结果显示该混合物主要由间苯三酚二聚体
组成。由此可见,不同品种的贯众中可能具有类似
的物质基础,故需分析其分布的规律性,并进一步研
究其在不同品种贯众中的含量变化,从而为临床合
理应用贯众提供理论依据。
参考文献:
[1] SHCHERBANOVSKII LR. Phloroglucides of ferns of the
Dryopteris. Adana genus,inhibitors of lactic acid acteria
[J]. RastitResur,1978,14 (4) :584.
(下转第 204 页)
991第 3 期 柳芳等 蛾眉蕨贯众的化学成分研究
结果表明,按 A2B1C3 进行 3 次试验,工艺稳定
可行,对照品含量较高,结果均优于正交表中最佳工
艺 A3B1C3。故确定工艺为 A2B1C3,即采用的 AB-8
大孔树脂最佳纯化工艺为径高比为 1∶6 的树脂柱,
上样浓度为 0. 2 g /mL,洗脱流速为 4 BV /h。
3 讨论
本实验考察了 6 种树脂对 11-ethoxyviburtinal的
比吸附率和解吸率,最终选择了 AB-8 大孔树脂,进
而考察了 AB-8 大孔树脂的径高比、上样量、上样浓
度、除杂溶剂、洗脱溶剂浓度、洗脱剂用量及流速等
因素对环烯醚萜类成分富集纯化的影响。试验过程
中用减压干燥方法制备干浸膏,但在试验时发现干
燥时 11-ethoxyviburtinal有损失,浸膏的干燥条件有
待进一步研究。通过本试验得到蜘蛛香中环烯醚萜
类成分 AB-8 大孔树脂纯化最佳工艺条件为:树脂
柱径高比为 1∶6,上样量为 2 g /mL,上样浓度为 0.
2 g /mL,上样流速为 2 BV /h,除杂溶剂为 30%乙
醇,除杂溶剂用量 2 BV,洗脱溶剂为 90%乙醇,洗脱
剂用量为 5 BV,洗脱流速为 4 BV /h。最佳工艺条件
通过小试进行了验证,结果表明本工艺稳定可行,重
现性好,为蜘蛛香的药理及剂型研究提供了依据。
参考文献:
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中国人民共和国药
典:一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:346.
[2]闫兴丽,石晋丽,洪缨,等.蜘蛛香环烯醚萜对肠易激综
合征模型大鼠胃肠敏感性和胃肠激素的影响[J].北京
中医药大学学报,2009,32(8) :546 - 549.
[3]狄宏晔,石晋丽,闫兴丽,等. HPLC 法测定蜘蛛香中缬
草素、乙酰缬草素及其分解产物 baldrinal[J]. 中草药,
2007(12) :1892 - 1894.
[4]伍丹,王宝华,闫兴丽,等. 正交设计研究蜘蛛香中缬草
醚醛的提取工艺[J]. 北京中医药大学学报,2009,32
(7) :481 - 483.
[5]周忻.大孔吸附树脂分离纯化中药有效成分的影响因素
[J]. 中国药物应用与监测,2006,3(2) :50 - 53.
[6]龙继红. 大孔吸附树脂纯化天然药物有效成分的影响
因素[J]. 华西药学杂志,2007,22(2) :237 - 238.
[7]范伟赢,王伯章. 大孔吸附树脂分离法对提纯中药有效
成分的影响因素[J]. 广东医学院学报,2008,26(5) :
544 - 546.
[8]肖婷,闫智勇,左长英,等. 蜘蛛香总黄酮大孔树脂纯化
工艺[J]. 中国实验方剂学杂志,2010,16(17) :36 - 39.
(收稿日期:2011-07-02
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
)
(上接第 199 页)
[2]JI SL,HIROTSUGU M,NORIO N,et al. Two New Triter-
penes from the Rhizome of Dryopteris crassirhizoma,and in-
hibitory Activity of its constituents on Human immunodefi-
ciency Virus - 1 Protease[J]. Chem. Pharm. Bull,2008,
56(5) :711 - 714.
[3]李德华. 贯众有效部分的抗肿瘤作用[J]. 中草药,
1986,17 (6) :14.
[4]高增平,王宝华,江海龙,等. 商品贯众的品种调查
[J]. 中医药学刊,2003,21(5) :824 - 826.
[5]中华人民共和国国家药典委员会. 中华人民共和国药
典:一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:10.
[6] LIN B. Determination of lansoprazole in the raw material
and its tablets by RP - HPLC[J]. Acad J Guangdong Coll
Pharm,1998,14(4) :247 - 249.
[7]郑晓珂,董三丽,冯卫生. 浅裂鳞毛蕨地上部分二氢黄酮
类化学成分研究[J]. 中国药学杂志,2006,41(7) :
500-501.
[8]FENG WS,CAO XW,KUANG HX,et al. Isolation and
structure identification of a new flavanone from Dryopteris
sublaeta[J]. Chin J Nat Med,2005,3(6) :336 - 339.
[9]杨岚,赵玉英,图呦呦.荚果蕨贯众化学成分的研究[J].
中国中药杂志,2003,28(3) :278 - 279.
[10]张东,杨岚,傅梅红,等. 荚果蕨贯众化学成分的研究
(Ⅲ) [J]. 中国中药杂志,2008,33 (14) :1703
- 1704.
[11]顾琼,马云保,张雪梅,等. 藤三七中一个新黄烷醇和
抗 HIV活性成分[J]. 高等学校化学学报,2007,28
(8) :1508 - 1511.
[12] SURAT B,PAKAWAN P,APIWAT B,et al. Bioactive
compounds from Bauhinia purpurea Possessing Antimalari-
al, Antimycobacterial, Antifungal, Anti-inflammatory,
and Cytotoxic Activities[J]. Journal of Natural Products,
2007,70(5) :795 - 800.
(收稿日期:2011-09-01)
402 北京中医药大学学报 第 35 卷