全 文 ：＊基金项目:湖北省卫生厅科研基金项目(JX2C42)
　作者单位:湖北民族学院医学院,恩施 445000
　作者简介:李玉山(1969-),男 ,湖北巴东人 ,实验师 , 本科 ,主要从
事基础医学研究。
文章编号:1001-0580(2006)08-0987-02　　中图分类号:R 151.3　　文献标识码:A 【实验研究】
长叶胡颓子对大鼠结肠炎损伤的保护作用＊
李玉山 ,林平 ,谭志鑫 ,肖本见
　　胡颓子属在全球约有 80 余种〔1〕 , 长叶胡颓子(Elaeagnus
bockii Diels)是其中一种 , 属珍贵的药食两用植物 , 根 、叶 、果
皆可入药〔2〕。长叶胡颓子可健胃 , 治疗脾胃虚弱 , 消化不良
等 ,其果实味酸 、涩 , 含鞣质〔3〕, 有涩肠止泻作用〔4〕。为探讨
长叶胡颓子对炎症性肠炎的抗损伤保护作用 , 建立大鼠结肠
炎模型 ,采用长叶胡颓子灌胃给药 , 进行相关研究。
1　材料与方法
1.1　材料　
1.1.1　长叶胡颓子果实水提取物　野生长叶胡颓子果实于
2005 年 4 月采自湖北恩施自治州巴东野三关。长叶胡颓子
果实水提取物:以下简称提取物(生药含量 1 g/ml), 挑选上好
果实用水煎煮 3 次 ,过滤后浓缩成 1 g/ ml的浓度即得。
1.1.2　试剂和仪器　2 , 4 , 6 一三硝基苯磺酸(TNBS)(美国
Sigma公司);5-氨基水杨酸(5-ASA)原料药(国怡药业有限公
司)(批号 0209477);髓过氧化物酶(MPO)、超气化物歧化酶
(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性 , 丙二醛
(MDA)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所), IL-6 、IL-8
放免检测试剂盒(解放军总医院科技开发中心放免所),
AEROSET 09D05-01 全自动生化分析仪;TL-16G 型高速冷
冻离心机(上海实验仪器厂);GC-1200 r 放射免疫计数器(中
国安徽科大创新股份有限公司)。
1.1.3　动物　健康 Wist大鼠 , 雌雄兼用 , 体重 250 ～ 270 g
(湖北省动物实验中心)。
1.2　方法　
1.2.1　动物模型建立及处理　参考文献[ 5] 方法 , 大鼠禁食
24 h 后(饮水照常),将溶于体积分数为 50%乙醇的 TNBS 按
100 mg/(kg·bw),体积 0.25 ml/只 , 用导管(直径 4 mm)经肛
门插人结肠内约 8 cm 灌肠 1次 , 建立大鼠结肠炎模型。实验
设正常组 、模型组 、阳性药物对照组[ 5-ASA , 100 mg/(kg·
bw)] 、胡颓子给药组[ 250 , 500 , 800 mg/(kg·bw)] , 从制备模
型 7 d 后开始灌胃给药 , 每日 1 次 , 共 14 d。正常组与模型组
均给予等量生理盐水灌胃。
1.2.2　指标检测及方法　实验完成后处死动物 , 参照文献
[ 6] 方法及标准评价结肠粘膜损伤指数(CMDI), 评分标准为:
0=无损伤;1=轻度充血 、水肿 ,表面光滑 , 无糜烂或溃疡;2=
充血水肿 ,粘膜粗糙呈颗粒状 , 有糜烂或肠粘连;3=高度充血
水肿 , 粘膜表面有坏死及溃疡形成 , 溃疡最大纵径<1 cm , 肠
壁增厚或表面有坏死及炎症;4=在 3 的基础上溃疡最大纵径
>1 cm ,或全肠壁坏死。 结肠标本常规石蜡包埋 、切片 , 苏木
精-伊红(HE)染色 , 光镜观察。尾动脉采血放免法检测 IL-
6 、IL-8。另取新鲜结肠组织 ,用预冷的生理盐水冲洗除去血
液 ,滤纸吸干称重 , 加 9 倍生理盐水 , 在低温(冰水)中用玻璃
研磨器研磨制成 10%的组织匀浆 , 高速离心取上清液低温(3
℃)保存待测。MPO ,M DA , SOD , GSH-PX 检测操作按试剂盒
说明书进行。
1.3　统计分析　采用 SPSS 10.0软件进行 t检验。
2　结　果
2.1　结肠标本病理组织学观察　模型组大鼠结肠粘膜充血
水肿 , 大量炎性细胞浸润 , 肠壁增厚 , 黏膜表面有明显坏死及
溃疡形成 , 腺体中杯状细胞减少。 而不同剂量的长叶胡颓子
用药组以上病理组织表现明显缓解。
2.2　对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应的影响　CMDI、MPO
活性分别是反映结肠损伤与炎症程度的主要指标, 2 者在模型
组大鼠升高 ,而长叶胡颓子[ 250 , 500 , 800 mg/(kg·bw)] 与 5-
ASA[ 100 mg/(kg·bw)]灌胃不同程度降低 CMDI及 MPO 活
性(P <0.01 , P <0.05), 且长叶胡颓子用药呈现一定量效关
系 , 见表 1。
表 1　长叶胡颓子对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应
的影响( x ±s , n=10)
组　别 剂量[ mg/(kg·bw)] CMDI M PO(U/ g)
正常组 - 0.00±0.0 44.03±7.07
模型组 - 3.15±0.39a 161.69±37.48a
5-ASA 100 1.71±0.28b 103.72±14.19b
长叶胡颓子 250 2.62±0.47c 134.42±28.75c
长叶胡颓子 500 2.06±0.54b 124.68±22.67b
长叶胡颓子 800 1.83±0.43b 104.91±14.20b
　　注:与正常组比较 , a P<0.01;与模型组比较 , b P<0.01 , c P<
0.05
2.3　对结肠炎大鼠氧自由基的影响　与模型组比较 ,长叶胡颓子
提取物[(250 , 500 , 800 mg/(kg·bw)] 与 5-ASA[(100 mg/(kg·bw)]
灌胃均降低结肠组织中 MDA 含量 , 升高 SOD 、GSH-PX 活
性 , 且长叶胡颓子中 、高剂量作用显著(P<0.01), 见表 2。
表 2　长叶胡颓子对结肠炎大鼠氧自由基
的影响( x ±s , n=10)
组　别 剂量[ mg/(kg·bw)] MDA(nmol/mg prot) SOD(U/mg prot)GSH-PX(U/ g prot)
正常组 - 1.73±0.24 270.30±37.45 25.64±6.62
模型组 - 2.66±0.65 a 159.77±36.22a 10.54±1.1 4a
5-ASA 100 1.86±0.49 b 243.994±44.78b 20.50±5.71b
长叶胡颓子 250 2.16±0.41 c 217.04±32.30c 14.52±3.78c
长叶胡颓子 500 1.97±0.35 b 225.37±34.64b 16.36±5.46b
长叶胡颓子 800 1.96±0.30 b 251.80±22.54b 19.09±7.34b
　　注:与正常组比较 , a P<0.01;与模型组比较 , b P<0.01 , c P<
0.05
2.4　对结肠炎大鼠血清中 IL-6 、IL-8 水平的影响　模型组大
鼠血清中 IL-6、IL-8 水平明显升高;经过 2周的灌胃用药 ,血清
中 IL-6、IL-8 水平明显降低(P<0.01 , P<0.05),见表 3。
987中国公共卫生 2006年 8月第 22卷第 8期　　Chin J Publ ic Health A ug 2006 Vol.22 No.8
表 3　长叶胡颓子对结肠炎大鼠血清中 IL-6、IL-8 水平
的影响( x±s , n=10)
组　别 剂量[ mg/(kg·bw)] IL-6(pg/ml) I L-8(ng/ml)
正常组 - 174.06±40.97 0.59±0.17
模型组 - 311.31±69.19a 1.53±0.38a
5-ASA 100 208.10±35.08b 0.83+0.16b
长叶胡颓子 250 234.73±26.85c 1.20±0.33c
长叶胡颓子 500 219.49±30.83b 1.05±0.24b
长叶胡颓子 800 212.97±29.98b 0.92±0.13b
　　注:与正常组比较 , a P<0.01;与模型组比较 , b P<0.01, c P<
0.05
3　讨　论
TNBS 与乙醇诱发大鼠结肠炎的主要机制为乙醇破坏结
肠粘膜屏障 , TNBS 渗人结肠与大分子物质结合 ,形成全抗原
引起肠壁一系列免疫应答与炎症反应 , 其发病机制及病理表
现与人类炎症性肠炎非常相似。本研究显示 ,长叶胡颓子灌
胃可明显减轻模型组大鼠结肠损伤程度 , 缓解炎症反应并呈
一定剂量效应 ,表现出抗炎 、抗损伤的保护作用。长叶胡颓子
灌胃用药能降低模型组大鼠代谢产生的脂质过氧化物 MDA
含量 , 升高 SOD、GSH-PX活性 ,表现出抗氧化特性 ,从而缓解
氧自由基的损伤致炎作用 , 且病理组织学观察到长叶胡颓子
组病理组织损伤程度明显缓解。长叶胡颓子灌胃能明显降低
模型组大鼠 IL-6 、IL-8 水平 , 对其免疫异常有一定调节恢复
作用 , 从而缓解结肠免疫损伤与炎症反应。
参考文献
〔1〕　林来官.福建植物志[ M] .福州:福建科学技术出版社 , 1989:45
-51.
〔2〕　胡丰林.中国胡颓子属植物利用价值的初步分析[ J] .生物学杂
志 , 1996 , 4:30-32.
〔3〕　张贵君.现代中药材商品通鉴[ M ] .北京:中国中医药出版社 ,
2001:1611-1612.
〔4〕　黄泰康 ,丁志遵 ,赵守训 ,等.现代本草纲目[ M] .北京:中国医药
科技出版社 , 2001:1843-1844.
〔5〕　梅俏 ,于皆平 ,许建明 ,等.褪黑素对结肠炎大鼠免疫功能的影响
[ J] .世界华人消化杂志 , 2002 , 10(2):193-196.
〔6〕　Millar AD , Rampton DS , Chander C L , et al.Evaluating the antioxi-
dantant potent ial of new t reatments for inflammatory bow el disease
using a rat model of colit is[ J] .Gut , 1996 , 39(1):93-99.
收稿日期:2005-11-19 (文涛编辑　郑新校对)
作者单位:1.天津市卫生防病中心毒理科 ,300011;2.天津南开大学
作者简介:王静(1956-),女 ,山西人 ,副研究员 ,大学 , 研究方向:农
医药等化学物质毒理学安全性评价。
文章编号:1001-0580(2006)08-0988-02　　中图分类号:R 994.6　　文献标识码:A 【实验研究】
新型除草剂单嘧磺酯亚慢性毒性研究
王静1 ,张静1 ,姜树卿1 ,王晓军1 ,杨友润1 ,姜文玲1 ,李正名2 ,寇俊杰2 ,赵卫光2
　　单嘧磺酯是一种新型除草剂 , 对稗草和苋菜的生长有强
烈的抑制作用 ,其除草活性与氯磺隆相当。主要制剂有 10%
单嘧磺酯可湿性粉剂 , 目前已广泛应用于农业生产。为了解
其使用安全性 ,保护人类健康 , 我们在单嘧磺酯原药进行急性
毒性 、刺激性 、致敏性 、致突变性研究的基础上 , 又进行了亚慢
性经口毒性的实验研究。结果报告如下。
1　材料与方法
1.1　材料　单嘧磺酯原药 , 白色粉末 , 由南开大学研制。二
级Wistar大鼠 , 80 只(军事医学科学院实验动物研究所繁育
场)。生化试剂盒(北京中生生物高技术有限公司);八联尿试
纸(高尔宝生物技术有限公司)。
1.2　方法　(1)按体重将实验动物随机分为 4 组 , 每组 20
只 ,雌雄各半。参考本实验室对单嘧磺酯原药的大鼠急性经
口毒性 、大鼠蓄积毒性试验结果 ,设高 、中 、低 3 个给药组 , 分
别用含 50.00 , 10.00 , 2.00 g/ kg 单嘧磺酯原药的饲料喂饲 3
个月。另设 1 个空白对照组 ,饲以普通饲料。动物单笼饲养 ,
各组动物均自由饮用灭菌自来水 ,其他饲养条件一致。用动
物饲料实际消耗量计算染毒剂量。(2)实验结束时 , 摘眼球取
血 ,用 Vitalab Selectra2 型全自动生化分析仪 , 测定大鼠血清
中天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、
碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白
(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(TBI)、肌酐(CRE)、总胆固醇
(CHO)、胆碱酯酶(ChE);用 BECKMAN COULTER A C·T
DIFF 全自动细胞计数仪测定大鼠全血红细胞计数 、白细胞计
数 、血小板计数和血红蛋白 , 光镜计数白细胞分类。(3)用八
联尿试纸 , 测定大鼠尿潜血 、亚硝酸盐 、pH 、尿胆元 、胆红素 、
蛋白质 、葡萄糖 、酮体。(4)对所有动物进行系统尸解 ,对器官
进行肉眼大体观察;剖解取出心 、肝 、肾 、脾 、肺 、肾上腺 、睾丸 、
脑 , 称重并计算脏器系数;剖解取出心 、肝 、肾 、脾 、肺 、肾上腺 、
甲状腺 、胸腺 、睾丸(和附睾)、卵巢 、子宫 、胃 、十二指肠 、胰腺 、
膀胱 、脑 ,用 4.5%甲醛固定 , 石蜡包埋 、切片 、苏木素-伊红
(HE)染色 , 在光镜下进行病理组织学检查。
1.2　统计分析　采用 SPSS 10.0统计软件进行统计分析。
2　结　果
2.1　一般观察　大鼠连续喂饲染毒单嘧磺酯原药 3 个月 ,
高 、中剂量组于给药 6 周后逐渐出现精神欠佳 、活动减少 、毛
不洁 、光泽差等表现。 9 周后以上表现加重 , 并伴有食量下
降 、口鼻少量血性分泌物 ,体重减轻 , 以高剂量组明显。低剂
量组 、对照组连续口服给药 90 d 对动物的精神 、活动 、体重 、
饮食等均未见明显影响 。
2.2　单嘧磺酯对体重 、进食量及食物利用率的影响　各组动
物体重均呈增长趋势 , 但染毒组动物体重增长较对照组为慢 ,
且呈剂量-反应关系。高剂量组自 9周 、中剂量组自 10 周起
与对照组比较 , 差异有统计学意义(P<0.01 或 P <0.05);给
药组动物总进食量较对照组减少 , 以高剂量组明显(P <0.01
988 中国公共卫生 2006年 8月第 22卷第 8期　　Chin J Public Health Aug 2006 Vol.22 No.8