全 文 ：半边莲黄酮苷提取工艺优化
黄秀香，赖红芳，梁树君 (河池学院化学与生命科学系，广西宜州 546300)
摘要 ［目的］研究超声辅助提取半边莲黄酮苷的最佳工艺条件。［方法］以乙醇溶液为提取剂，采用正交试验法对半边莲黄酮苷提取
过程中的乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比 4个因素进行优选。［结果］最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为 50%，提取时间为 35
min，提取温度 50 ℃，料液比为 1∶50。在此条件下，黄酮苷的含量可达 4． 209 2 mg /g。［结论］该法提取率高、稳定性好，适合半边莲黄酮
苷的测定。
关键词 半边莲 ;黄酮苷;超声波;提取工艺
中图分类号 R284． 2 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)20 －12098 －02
Optimization of Extraction Process of Flavonoid Glycosides from HERBA LOBELIAE CHINENSIS
HUANG Xiu-xiang et al (Department of Chemistry and Life Sciences，Hechi University，Yizhou，Guangxi 546300)
Abstract ［Objective］To study the optimal extraction technical parameters of flavonoids g1ycosides from HERBA LOBELIAE CHINENSIS．
by ultrasonic-assisted extraction．［Method］With ethanol as the extracting solvent，the orthogonal design was employed to test the effects of four
factors like ethanol concentration，extraction time，temperature and ratio of solid to liquid．［Result］The optimum extraction conditions were as
follows:ethanol concentration of 50%，extraction duration of 35 min，extraction temperature of 50 ℃ and solid to liquid ratio of 1∶50． The con-
tent of falconoid glycosides can reach 4． 209 2 mg /g under the optimal conditions．［Conclusion］High in extraction rate and good in stability，
the method favored the determination of flavonoids g1ycosides from HERBA LOBELIAE CHINENSIS．
Key words HERBA LOBELIAE CHINENSIS;Flavonoid glycosides;Ultrasonic wave;Extraction process
基金项目 广西教育厅科研立项项目(201010LX457)。
作者简介 黄秀香(1969 －) ，女，广西都安人，副教授，从事天然有机化
学的研究。
收稿日期 2011-04-06
半边莲(HERBA LOBELIAE CHINENSIS)又名急解索、
细米草、蛇舌草等，是一味常用中药，为桔梗科植物半边莲
(Lobelia chinensis Lour．)的干燥全草。半边莲含生物碱、黄酮
苷、皂苷、氨基酸、果聚糖等成分，具有利水、消肿、解毒等功
效，可治疗黄疸、水肿、臌胀、泄泻、痢疾、蛇伤、疔疮、肿毒、湿
疹、癣疾、跌打扭伤等症［1］。
目前，有关半边莲的药效研究主要集中在半边莲生物碱
方面，而对半边莲中黄酮类物质的研究鲜见报道。黄酮类化
合物具有抗癌、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗心脑血管
疾病、抗心律失常、降血压、降血脂、增强机体免疫力等多种
生理功能及药理作用，是一类具有广阔开发前景的天然抗氧
化剂［2］。因此，笔者对半边莲中的黄酮苷进行提取、测定，并
优化其提取条件，旨在为半边莲的进一步深入开发研究提供
科学依据。
1材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。半边莲，采自宜州市郊区。
1． 1． 2 主要试剂。芦丁对照品，购自中国生物制品检定
所;无水乙醇、甲醇、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠，均为市售
分析纯。
1． 1． 3 主要仪器。FZ102型微型植物粉碎机(天津市泰斯特
仪器有限公司) ;UV-2501紫外分光光度计(日本岛津公司) ;
AE240S 型电子分析天平(扬州东方集团有限公司) ;
KQ2200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司) ;SHB-3循环水式真空泵抽滤装置(郑州杜甫仪器厂) ;
RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
1． 2 方法
1． 2． 1 黄酮苷的提取［3］。称取半边莲粉末 2． 000 g，加入
250 ml的碘量瓶中，加入一定浓度的乙醇水溶液，在一定温
度下超声波辅助提取一定时间，抽滤，滤液减压浓缩近干，加
入 30． 0 ml热水溶解，用石油醚萃取 6 ～ 8 次，用 60%乙醇定
容至 50 ml容量瓶中，备用。
1． 2． 2 半边莲黄酮苷提取条件优化。选择乙醇浓度(A)、料
液比(B)、提取时间(C)、提取温度(D)作为考察因素，每个
因素取 3个水平进行 L9(3
4)正交试验(表 1) ，确定半边莲黄
酮苷提取的最佳工艺。
表 1 L9(3
4)正交试验因素水平表
Table 1 Factors and levels of L9(3
4)orthogonal test
水 平
Level
因素 Factor
乙醇浓度
Ethanol con-
centration
(A)∥%
料液比
Solid to
liquid
ratio(B)
提取时间
Extraction
duration
(C)∥min
提取温度(D)
Extraction
tempera-
ture∥℃
1 50 1∶30 25 40
2 60 1∶40 30 50
3 70 1∶50 35 60
1． 2． 3 最佳条件验证。称取 3份半边莲干燥粗粉各 2． 000 0
g在最佳提取工艺条件下分别提取，计算黄酮苷含量。
1． 2． 4 黄酮苷含量测定。
1． 2． 4． 1 对照品溶液的制备。精确称取 0． 005 0 g芦丁对照
品，置于烧杯中完全溶解，冷却，转移至 50 ml 容量瓶中，用
60%乙醇定容，即得对照品溶液 (0． 100 0 mg /ml)。
1． 2． 4． 2 芦丁标准曲线的绘制［4］。精确吸取芦丁标准液
1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0 ml，分别置于 5支试管中，加入浓度为
60%的乙醇至 10． 0 ml，然后加入 0． 3 ml 5%的亚硝酸钠，摇
匀，静置 6 min，加入 0． 3 ml 10%的硝酸铝，静置 6 min，再加
入 2． 0 ml氢氧化钠，用60%乙醇定容，摇匀，静置10 min。以
芦丁空白为对照，在波长 510 nm处测定吸光度值，以吸光度
值对芦丁对照品质量浓度作标准曲线。
1． 2． 4． 3 样品中黄酮苷含量测定。精确吸取待测样液 1． 0
ml于比色管中，以空白对照液调零，在波长 510 nm处测定吸
责任编辑 刘群燕 责任校对 傅真治安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(20):12098 － 12099
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.20.127
光度值，然后代人回归方程计算黄酮苷质量浓度，再按下列
公式计算其含量:
黄酮苷得率(%)=(Cl ×50 /1 000 W)×100
式中 C1 为样品液中黄酮苷的质量浓度(mg /ml) ;W 为半边
莲的质量(g)。
1． 2． 4． 4 回收率试验。按常规化学分析方法进行回收率试
验，计算样品回收率及 RSD值。
1． 3 数据统计分析［5］ 采用 SAS(Statistical Analysis Sys-
tem)8． 0统计软件对数据进行处理。
2 结果与分析
2． 1 提取条件优化 由表 2 可知，各因素对黄酮苷提取效
果影响的主次顺序为乙醇浓度 ＞浸提时间 ＞料液比 ＞浸提
温度。最佳提取条件为 A1B3C3D2，即乙醇浓度为 50%，料液
比 1∶50，提取温度为 50 ℃，超声提取时间为 35 min。
表 2 正交试验结果分析
Table 2 Results and analysis of orthogonal experiment
试验号
No．
因素 Factor
A B C D
黄酮苷含量
Content of flav-
onoid glyco-
side∥mg /g
1 1 1 1 1 3． 930 0
2 1 2 2 2 3． 798 0
3 1 3 3 3 4． 107 0
4 2 1 2 3 2． 610 0
5 2 2 3 1 3． 138 0
6 2 3 1 2 3． 094 0
7 3 1 3 2 3． 138 0
8 3 2 1 3 3． 138 0
9 3 3 2 1 2． 918 0
k1 3． 945 3． 226 3． 387 3． 329
k2 2． 947 3． 358 3． 109 3． 343
k3 3． 065 3． 373 3． 461 3． 285
R 0． 998 0． 147 0． 352 0． 058
2． 2 最佳工艺验证 由表 3 可知，在最佳工艺条件下，半边
莲提取液中黄酮苷含量平均为 4． 209 2 mg /g，表明最佳工艺
条件稳定。
表 3 最佳工艺验证试验
Table 3 Proving test of optimum extraction conditions
试验号
No．
黄酮苷含量
Content of flavonoid
glycoside∥mg /g
平均含量
Average cont-
ent∥mg /g
RSD∥%
1 4． 150 5 4． 209 2 1． 22
2 4． 238 6
3 4． 238 6
2． 3 黄酮苷含量测定
2． 3． 1 标准曲线绘制。计算得芦丁对照品回归方程为 A =
0． 568 0C +0． 000 7，R2 = 0． 999 0，芦丁标准曲线如图 1所示。
2． 3． 2 加样回收率试验。由表 4可知，加入芦丁量为 0． 1000
mg，黄酮苷量为 0． 148 4 mg 时，样品回收率为96． 80% ～
98． 60%，平均回收率为 97． 69%，RSD值为1． 15%，说明分光光
度法用于半边莲黄酮苷的测定回收率较好。
图 1 芦丁标准曲线
Fig． 1 The standard curve of rutin
2． 3． 3 样品测定结果。在最佳工艺条件下，测得半边莲提
取液中黄酮苷含量为 4． 209 2 mg /g。
表 4 加样回收率试验结果(n =4)
Table 4 Results of the recovery test for flavonoid glycosides (n =4)
试验号
No．
测得值
Measured
Valve∥mg
回收率
Recov-
ery∥%
平均回收率
Average
recovery∥%
RSD
%
1 0． 245 2 96． 80 97． 69 1． 15
2 0． 247 0 98． 60
3 0． 247 0 98． 60
4 0． 148 3 0． 100 0 0． 245 2 96． 80
3 结论
超声波醇提法提取半边莲中黄酮苷的提取工艺简单，操
作容易，经济实惠，值得推广应用。通过正交试验得出在超
声波辅助作用下用乙醇浸提半边莲中黄酮苷的最佳工艺条
件为:A1B3C3D2，即按料液比 1∶50，提取溶剂为为 50%乙醇，
提取温度为 50 ℃，提取时间为 35 min。在最佳工艺条件下
测得黄酮苷含量为 4． 209 2 mg /g。
通过加样回收率试验计算得样品平均回收率为
97． 69%，RSD值为 1． 15%，表明该方法具有良好的加样回收
率，具有广阔的应用前景。
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9902139 卷 20 期 黄秀香等 半边莲黄酮苷提取工艺优化