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酸藤子脂肪酸类成分的GC-MS研究



全 文 :中国药房 2012年第23卷第11期 China Pharmacy 2012Vol.23No.11
酸藤子Embelia laeta(Linn.)Mez 系紫金牛科酸藤子属植
物,又称信筒子、甜酸叶、鸡母酸、挖不尽、咸酸果、酸果藤,分
布于广东、广西、云南、台湾、江西等省区,其根、叶可散瘀止
痛、收敛止泻,治跌打肿痛、肠炎腹泻、咽喉炎、胃酸少、痛经闭
经等症;叶煎水可作外洗药;果有强壮补血之效;根、叶还可治
牛伤食腹胀、热病口渴[1]。中药酸藤木为酸藤子的枝叶或根,
具有清热解毒、散瘀止血的作用[2]。唐天军等[3]从酸藤子茎叶
醇提物的乙酸乙酯部位分离到醌类、柠檬酸酯类、芳香酸类及
甾醇类等10个已知化合物;而对酸藤子的低极性成分国内外
尚无文献报道。笔者采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术
对酸藤子的脂肪酸类成分进行分析,以为今后深入开发酸藤
子提供一定的科学依据。
1 仪器与试药
HP6890/5973N型GC-MS联用仪(美国Agilent公司)。
酸藤子于2006年11月采于南宁郊区,经广西中医学院中
药研究所刘寿养副教授鉴定为紫金牛科酸藤子属植物酸藤子
E. laeta(Linn.)Mez,将其根部与枝叶部分分别晒干、粉碎,备
用。石油醚、乙醇、甲醇、正己烷、氢氧化钾、无水硫酸钠均为
分析纯。
2 方法
2.1 样品制备
取酸藤子根茎粗粉4kg,用95%乙醇反复浸泡提取3次,
每次5~6d,提取液减压回收乙醇,悬浮于适量水中,然后用适
量石油醚(60~90℃)反复萃取5~6次,减压回收溶剂,得石
油醚部位33g。称取石油醚部位119mg,置于100mL具塞锥
形瓶中,加入20mL 石油醚-正己烷(1∶1)使溶解,再加入0.4
mol·L-1氢氧化钾-甲醇溶液10mL,振摇,40℃水浴加热30
min,再加入蒸馏水20mL,振摇,静置分层,取上清液挥干溶剂
后,加乙醚溶解、过滤、浓缩,再定容至1mL,加无水硫酸钠干
燥过夜,上清液用于根部进样分析。
取酸藤子枝叶10g,用石油醚冷浸3次,提取液减压浓缩
后,用乙醚溶解、过滤、浓缩,再定容至1mL,加无水硫酸钠干
燥过夜,上清液用于枝叶进样分析。
2.2 分析条件
2.2.1 GC 条件 色谱柱:HP-5MS 石英毛细管柱(30m×0.25
mm×0.25μm);载气:高纯氦气;分流比:10∶1;酸藤子根部分
析的程序升温条件:初始温度为70℃,以12℃·min-1速率升
至120℃,维持3min,再以8℃·min-1速率升至180℃,维持3
*讲师,硕士。研究方向:中药活性成分。E-mail:gxlpy@163.
com
# 通讯作者:教授,博士。研究方向:中药活性成分及质量标准。
E-mail:lrm1969@163.com
酸藤子脂肪酸类成分的GC-MS研究
廖彭莹*,李 兵,蔡少芳,苗伟生,卢汝梅 #(广西中医学院,南宁 530001)
中图分类号 R284.1;R927 文献标志码 A 文章编号 1001- 408(2012)11- 027-03
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012.11.26
摘 要 目的:研究酸藤子的脂肪酸类成分。方法:酸藤子根部以95%乙醇提取,用石油醚对提取物进行萃取,所得萃取部位经
甲酯化处理后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行分析鉴定;酸藤子枝叶用石油醚提取,所得提取物也用GC-MS联用技
术进行分析鉴定。再用峰面积归一化法测定各成分的相对含量。结果:酸藤子根部共分离出67个色谱峰,鉴定了其中28个,占流
出峰总面积的73.48%,主要脂肪酸成分为8,11-亚油酸(19.10%)、8-油酸(13.01%)与棕榈酸(12. 9%)。酸藤子枝叶共分离出30
个色谱峰,鉴定了其中12个,占流出峰总面积的91.60%,主要脂肪酸成分为棕榈酸(52.16%)。结论:酸藤子根部和枝叶的脂肪酸
类成分有差异。本试验结果可为酸藤子的深入开发提供一定的科学依据。
关键词 酸藤子;脂肪酸类成分;气相色谱-质谱联用技术;根;枝叶
GC-MS Study of Fatty Acids from Embelia laeta
LIAO Peng-ying,LI Bing,CAI Shao-fang,MIAO Wei-sheng,LU Ru-mei(Guangxi Traditional Medical Univer-
sity,Nanning 530001,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the fatty acids from Embelia laeta. METHODS:The roots of E. laeta were extracted by
95% ethanol,and the residue was extracted with petroleum ether to give the petroleum ether part. The residue was analyzed by
GC-MS. The branches and leaves of E. laeta were extracted with petroleum ether,and the residue was also analyzed by GC-MS.
The relative content of each component was determined by area normalization. RESULTS:Sixty-seven peaks were separated and
twenty-eight of them were identified from the root of E. laeta,representing about 73.48% of the total area of the peaks. The main
fatty acids were 8,11-octadecadienoic acid methyl ester(19.10%),8-octadecenoic acid methyl ester(13.01%)and hexadecanoic ac-
id methyl ester(12. 9%). Thirty peaks were present,and twelve of them were identified from the branches and leaves of E. laeta,
possessing about 91.60% of the total area of the peaks. The main fatty acid was n-hexadecanoic acid(52.16%). CONCLUSION:
The fatty acids of the root and the branches and leaves part of E. laeta are different. The study can provide scientific evidence for
the exploration of E. laeta in depth.
KEY WORDS Embelia laeta;Fatty acids;GC-MS;Root;Branches and leaves
··1027
China Pharmacy 2012Vol.23No.11 中国药房 2012年第23卷第11期
min,然后以5℃·min-1速率升至210℃,维持2min,最后以
8℃·min-1速率升至250℃,维持3min;酸藤子枝叶分析的程
序升温条件:初始温度为70℃,以12℃·min-1速率升至
120℃,维持3min,再以8℃·min-1速率升至180℃,维持3
min,然后以3℃·min-1速率升至210℃,维持2min,最后以
6℃·min-1速率升至250℃,维持3min;进样量:1μL。
2.2.2 MS条件 电离方式:EI;电子能量:70eV;离子源温度:
230℃;接口温度:280℃;质量扫描范围:50~550amu;溶剂
延时:3min。
3 结果
按照上述试验条件对样品进行分析鉴定,得酸藤子根部
与枝叶石油醚萃取部位的总离子流图(分别见图1、图2);再对
总离子流图中的各峰进行 MS 扫描,经计算机检索 NIST98、
WILEY275标准谱库,结合文献对照,采用峰面积归一化法计
算各成分在挥发油中的相对含量,结果分别见表1、表2。
由表1、表2可知,从酸藤子根部石油醚萃取部位(甲酯化
后可得到脂肪酸的甲酯,而样品中原有成分以非甲酯形式存
表1 酸藤子根部石油醚萃取部位甲酯化后的GC-MS分析结果
Tab 1 GC-MS analysis of petroleum ether part from the root of E. laeta after methyl esterification
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
保留时间/min
4.21
4.90
9.15
12.69
12.76
13.02
14.40
14.67
15.59
16.29
16.44
18.50
18.67
20.77
20.96
22.91
23.08
24.36
24.42
24.56
25.03
25.24
27.30
29.11
29.28
30.61
32.09
32.27
化合物名称
桉树脑 Eucalyptol
芳樟醇 3,7-Dimethyl-1,6-octadien-3-ol
癸酸甲酯 Decanoic acid methyl ester
2,4-二叔丁基苯酚 2,4-Bis(1,1-dimethylethyl)-phenol
2,6-二叔丁基对甲酚 Butylated hydroxytoluene
月桂酸甲酯 Dodecanoic acid methyl ester
(E)-5- 十八烯 (E)-5-Octadecene
十三烷酸甲酯 Tridecanoic acid methyl ester
2,6-二叔丁基-4-甲氧基甲基苯酚 2,6-Bis(1,1-dimethylethyl)-4-(methoxymethyl)-pheno
十七烷 Heptadecane
十四烷酸甲酯 Methyl tetradecanoate
十八烷 Octadecane
十五烷酸甲酯 Pentadecanoic acid,methyl ester
十九烷 Nonadecane
棕榈酸甲酯 Hexadecanoic acid methyl ester
二十烷 Eicosane
14-甲基棕榈酸甲酯 14-Methyl-hexadecanoic acid methyl ester
8,11-亚油酸甲酯 8,11-Octadecadienoic acid methyl ester
9,12,15-十八烷三烯酸甲酯 9,12,15-Octadecatrienoic acid,m thyl ester
8-油酸甲酯 8-Octadecenoic acid methyl ester
二十一烷 Heneicosane
硬脂酸甲酯 Octadecanoic acid methyl ester
二十二烷 Docosane
二十三烷 Tricosane
二十酸甲酯 Eicosanoic acid methyl ester
二十四烷 Tetracosane
二十五烷 Pentacosane
二十二烷酸甲酯 Docosanoic acid methyl ester
分子式
C 10H 18O
C 10H 18O
C 11H 22O 2
C 14H 22O
C 15H 24O
C 13H 26O 2
C 18H 36
C 14H 28O 2
C 16H 26O 2
C 17H 36
C 15H 30O 2
C 18H 38O
C 16H 32O 2
C 19H 40
C 17H 34O 2
C 20H 42
C 18H 36O 2
C 19H 34O 2
C 19H 32O 2
C 19H 36O 2
C 21H 44
C 19H 38O 2
C 22H 46
C 23H 48
C 21H 42O 2
C 24H 50
C 25H 52
C 23H 46O 2
相对含量/%
0.10
0.18
0.42
0.76
0.51
2.36
0.12
0.88
0.16
0.21
4.08
0.31
1.97
0.65
12.29
0.75
0.78
19.10
1.79
13.01
0.73
3.07
0.63
1.35
1.73
2.07
1.86
1.61
4 6 8 101214161820222426283032min
图1 酸藤子根部石油醚萃取部位甲酯化后的总离子流图
Fig 1 Total ion chromatogram of petroleum ether part
from the root of E. laeta the after methyl esterification
5 10 15 20 25 30 35min
图2 酸藤子枝叶石油醚萃取部位的总离子流图
Fig 2 Total ion chromatogram of the petroleum ether part
from the branches and leaves of E. laeta
在[4],以下以脂肪酸简称)中共分离出67个峰,鉴定了其中28
个成分,已鉴定成分的相对含量占流出峰总面积的73.48%。
已鉴定成分的主要类型除脂肪酸类(63.09%)外,还包括脂肪
烃类(8.68%)、芳香族类(1.43%)及萜类(0.28%)。在脂肪酸
类成分中,不饱和脂肪酸有3种,即8,11-亚油酸(19.10%)、8-
油酸(13.01%)与9,12,15-十八烷三烯酸(1.79%),相对含量
共占33.90%;饱和脂肪酸有9种,相对含量共占28.77%,以棕
榈酸(12. 9%)、十四烷酸(4.08%)、硬脂酸(3.07%)、月桂酸
(2.36%)为主。
从酸藤子枝叶的石油醚萃取部位共分离出30个峰,鉴定
了其中12个成分,已鉴定成分的相对含量占流出峰总面积的
91.60%。其中相对含量最高的成分是棕榈酸(52.16%),其次
是植酮(27.54%)。其他已鉴定成分的类型除饱和脂肪酸类
外,还有脂肪烃类、芳香族类及萜类。饱和脂肪酸类成分相对
含量共占60.52%,其中主要成分包括棕榈酸(52.16%)、十四
烷酸(3.77%)及月桂酸(3.70%)。
··1028
中国药房 2012年第23卷第11期 China Pharmacy 2012Vol.23No.11
4 讨论
研究结果表明,酸藤子的根部和枝叶的化学组成有差
异。二者均能检测出的成分有萜类成分芳樟醇,饱和脂肪酸
类成分月桂酸、十三烷酸、十四烷酸、棕榈酸及硬脂酸。脂肪
酸类成分在酸藤子根部的相对含量占63.09%,其中不饱和脂
肪酸占33.90%,饱和脂肪酸占28.77%,不饱和脂肪酸类以8,
11-亚油酸(19.10%)、8-油酸(13.01%)为主;而在枝叶部位,脂
肪酸类成分占60.52%,均为饱和脂肪酸,以棕榈酸(52.16%)
为主。酸藤子不同部位的化学组成有所不同,在进行药理作
用评价时应区别对待。
本文首次报道了酸藤子根部和枝叶石油醚萃取部位的化
学成分,并进行了对比分析,可为进一步探讨酸藤子不同部位
的药理作用及合理开发利用该资源提供一定的科学依据。
参考文献
[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志(第
58卷)[M]. 北京:科学出版社,1979:122.
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卷)[M]. 上海:上海科学技术出版社,1999:74-75.
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究与开发,2004,16(2):129.
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酸成分的研究[J]. 天然产物研究与开发,2009,21(2):
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(收稿日期:2011-03-27修回日期:2011-05-10)
表2 酸藤子枝叶石油醚萃取部位的GC-MS分析结果
Tab 2 GC-MS analysis of petroleum ether part from branches and leaves of E. laeta
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
保留时间/min
4.80
4.90
12.69
13.65
15.20
17.14
19.25
21.23
21.38
22.35
27.51
32.42
化合物名称
(E)-6- 甲基-3,5-庚二烯2-酮 (E)-6-Methyl-3,5 heptadien-2-one
芳樟醇 3,7-Dimethyl-1,6-octadien-3-ol
3,5-二叔丁基苯酚 3,5-Bis(1,1-dimethylethyl)-phenol
月桂酸 Dodecanoic acid
十三烷酸 Tridecanoic acid
十四烷酸 Tetradecanoic acid
植酮 6,10,14-Trimethyl-2-pentadecanone
棕榈酸甲酯 Hexadecanoic acid,methyl ester
邻苯二甲酸二丁酯 Dibutyl phthalate
棕榈酸 n-Hexadecanoic acid
硬脂酸 Octadecanoic acid
4,8,12,16-四甲基十七烷-4-氧 4,8,12,16-Tetramethylheptadecan-4-olide
分子式
C 8H 12O
C 10H 18O
C 14H 22O
C 12H 24O 2
C 13H 26O 2
C 14H 28O 2
C 18H 36O
C 17H 34O 2
C 16H 22O 4
C 16H 32O 2
C 18H 36O 2
C 21H 44O
相对含量/%
0.22
0.19
0.28
3.70
0.35
3.77
27.54
0.46
0.74
52.16
0.54
1.67
*副主任药师。研究方向:药物分析。电话:0371-67816504。
E-mail:153zjzx@371.net
RP-HPLC法测定山楂叶中槲皮素的含量
宋晓红*,王 方,郝 哲(解放军第153中心医院药械科,郑州 450042)
中图分类号 R284.1;R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001- 408(2012)11- 029-03
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012. 1.27
摘 要 目的:建立测定山楂叶中槲皮素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil TMC18(250mm×4.6
mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(40∶60),流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为370nm。结果:槲皮素进样量
在0.604~5.436μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999);平均加样回收率为96.39%,RSD=2.45%(n=6)。结
论:本方法专属性强、准确度高、重复性好,可用于山楂叶的质量控制。
关键词 山楂叶;反相高效液相色谱法;槲皮素;含量测定
Content Determination of Quercetin in Crataegus pinnatifida by RP-HPLC
SONG Xiao-hong,WANG Fang,HAO Zhe(Dept. of Pharmacy,No. 153Center Hospital of PLA,Zhengzhou
450042,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a method for the content determination of quercetin in Crataegus pinnatifida. METH-
ODS:RP-HPLC method was adopted. The determination was performed on Diamonsil TMC18(250mm×4.6mm,5μm)column with
mobile phase consisted of methanol-0.2%phosphoric acid(40∶60)at the flow rate of 1.0mL·min-1. The column temperature was
25℃ and the detection wavelength was set at 370nm. RESULTS:The linear range of quercetin was 0.604~5.436μg(r=0.999)
with an average recovery of 96.39%(RSD=2.45%,n=6). CONCLUSION:The method is specific,accurate and reproducible,
and it can be used for quality control of C. pinnatifida.
KEY WORDS Crataegus pinnatifida;RP-HPLC;Quercetin;Content determination
􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐􀤐
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