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腌制对鹅绒藤中活性成分含量的影响



全 文 :中 国 酿 造
2015年 第 34卷 第 4期
总第 278期
腌制对鹅绒藤中活性成分含量的影响
王文华1,丁 娜1,汪荷澄2
(1.塔里木大学 生命科学学院 南疆特色农产品深加工兵团重点实验室,新疆 阿拉尔 843300;
2.阿拉尔质量技术监督局综合检测检验所,新疆 阿拉尔 843300)
摘 要:鹅绒藤具有良好的抗肿瘤、调节免疫、抗氧化等作用,这些作用与鹅绒藤中富含的C21甾体类化合物、生物碱、黄酮等活性成
分有关。实验采用干腌法处理鹅绒藤嫩茎,测定腌制前后C21甾体类化合物、生物碱、黄酮等物质的含量,实验结果显示,通过干腌,鹅
绒藤嫩茎中黄酮、生物碱、C21甾体类化合物的保存率分别为75.7%、71.4%、67.4%,作为一种保藏食品的方式,干腌既能在延长鹅绒藤
嫩茎食用时间,又能对其中主要的活性成分有较好的保留率。
关键词:鹅绒藤;腌制;C21甾体类化合物;生物碱;黄酮
中图分类号:R284,Q946.91 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2015)04-0137-04
doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2015.04.031
WANGWenhua1, DING Na1, WANG Hecheng2
(1.Xinjiang Production & Construction Group Key Laboratory of Agricultural Products Processing in South Xinjiang,
College of Life Science, Tarim University, Alar 843300, China; 2.The Alar Bureau of Quality and
Technical Supervision Comprehensive Testing Institute, Alar 843300, China)
Cynanchum chinense has good anti-tumor, immune regulation and antioxidant effect, and these effects were related to the C21 steroidal com-
pounds, alkaloids, flavonoids and other active ingredients contained in C. chinense. Using the dry salt method dealing with the tender stem of C. chi-
nense, the C21 steroidal compounds, alkaloids, flavonoids and other substances were detected before and after pickling. Results showed that the pre-
serving rate of flavonoids, alkaloids, C21 steroidal compounds were 75.7%, 71.4% and 67.4% respectively. As a way of food preservation, pickling not
only can extend the shelf-life of C. chinense tender stem, but also can maintain good preserving rate of main active ingredients.
Cynanchum chinense; pickling; C2l steroidal compounds; alkaloids; flavonoids
收稿日期:2015-02-22
基金项目:塔里木大学校长基金资助项目(TDZKSS201314)
作者简介:王文华(1979-),女,讲师,硕士,研究方向为农产品加工及贮藏工程。
鹅绒藤(Cynanchum chinense)为萝摩科鹅绒藤植物,
异名羊奶角角或牛皮消[1]。其味苦性寒,具有祛风解毒、健
胃止痛之功效[2],生于灌木丛、路边、河畔或田埂上。该属植
物遍布我国各个省份[3],野生于内蒙古、宁夏各地,资源极
为丰富,夏、秋间可随用随采 [4],所含化学成分种类也较
多,生物活性多种多样[5]。目前发现鹅绒藤属植物具有增
强免疫功能、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗癫痫,抑菌、保肝、降
压、镇痛等作用[6]。
陈叶等[7]研究了甘肃河西地区盐碱地野生药用植物
资源,其中鹅绒藤生于沙地、旷地、荒地,全草药用,可止
咳平喘,幼果可食。鹅绒藤全草含有甾体、生物碱、黄酮、
氨基酸、蛋白质及糖和糖苷等[7]。鹅绒藤及其乳汁对心肌、
免疫功能、降血压和抗惊厥等方面具有明显的药理活性,
同时具有阻断亚硝胺合成和清除亚硝酸盐[8]的防癌活性。
目前,从鹅绒藤属植物的根、全草及种子中分离得到
的活性成分包括:C21甾体类化合物、生物碱、黄酮类、萜类、
苯类衍生物及其他成分,其中C21甾体类化合物是最主要
的一类[9]。C21甾体类化合物是迄今为止从本属植物中发现
数量最多的一类化学成分,己经分离鉴定了200多个化合
物。C21甾体苷是苷元为孕甾烷衍生物和2-去氧糖结合形成
的化合物[10],单糖除了常见的葡萄糖(Glc),还包括毛地黄
毒糖(Dig)、地芰糖(Dgn)、夹竹桃糖(Ole)、加拿大麻糖
(Cym)和黄花夹竹桃糖(The)等,糖多与C3-OH结合成苷,
可多至7个单元,以直链连接。娄红祥等[11]从华北白前的
根中分离鉴定了6个C21甾体类化合物,其中华北白前苷元
B和华北白前苷A为新化合物。邱声祥等[12]从蔓生白薇的
根中分得白薇新苷Ⅰ,从合掌消中得到芫花叶白前苷元B,
从雀瓢中分离得到柽柳黄素。彭军鹏等[13]从华北白前中分
离到7-脱甲氧基娃儿藤碱。LEE D U等[14]从牛皮消的根中
分离得到新的甾体类生物碱加加明和已知的萝藦米宁。
陈冀胜等[15]从催吐白前中分离出催吐白前碱和娃儿藤碱。
方圣鼎等[16]从老瓜头中分离出新的生物碱。马艳[17]分离鉴
定了鹅绒藤中低极性成分。
对于鹅绒藤嫩茎,民间食用时一般采用干腌,能消除
部分苦味同时产生风味物质,食用时作为面食调料,本实
验采用干腌法处理鹅绒藤嫩茎,测定腌制前后鹅绒藤嫩茎
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中C21甾体类化合物、生物碱、黄酮的含量,以确定鹅绒藤
嫩茎中这些活性物质保留率和腌制后亚硝酸含量在安全
范围之内,为野菜资源的利用和野菜资源的开发利用从群
众自采自食逐渐向商品生产方面转型奠定理论基础,为今
后开发和利用鹅绒藤作为食品资源进行工业化生产提供
理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
鹅绒藤嫩茎:采自塔里木大学枣园附近;硝酸铝(分
析纯):徐州市精科试剂仪器有限公司;对氨基苯磺酸(分
析纯):天津市致远化学试剂有限公司;盐酸萘乙二胺(分
析纯)、氯仿(分析纯):上海山浦化工有限公司;乙酸锌(分
析纯)、薯蓣皂甙元(标准品):天津市风船化学试剂科技有
限公司;芦丁标准品:森倍伽生物科技有限公司;亚硝酸
钠(分析纯):天津市光复科技发展有限公司;乙醇(分析
纯):洛阳昊华化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
FA2104N电子天平、752紫外可见分光光度计:上海箐
华科技仪器有限公司;LD-500粉粹机:郑州长城科工贸有
限公司;HH-4型数显电热恒温水浴锅:北京市永光明医疗
仪器厂。
1.3 方法
1.3.1 总黄酮含量测定
精密称取105℃干燥至质量恒定的芦丁对照品20 mg,
用体积分数为60%的乙醇溶解,摇匀,定容至100 mL。分别
吸取上述芦丁标准液0、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、
10.0 mL于100 mL容量瓶中,加体积分数为60%的乙醇溶液
至10 mL,分别加入5% NaNO2溶液1 mL,摇匀,静置5 min,
再加10% Al(NO3)3溶液1 mL,摇匀,静置5 min,再加4%
NaOH溶液10 mL,再以体积分数为60%的乙醇溶液定容至
刻度,摇匀,放置15 min,于波长508 nm处测定吸光度值。
以芦丁标准曲线回归方程计算鹅绒藤中总黄酮的含量。
1.3.2 生物碱含量测定
用粉碎机将鹅绒藤粉碎,准确称取10 g样品,用体积分
数为70%的乙醇,在提取温度为70℃条件下,25 kHz、400W
超声处理3 h进行提取,加活性炭,过滤,水浴蒸干,加5 mL
的乙醇溶解,加入过量1 mol/L盐酸,滴加1滴甲基红-亚甲基
蓝指示剂溶液显橙红色,使生物碱完全被中和,用0.1 mol/L
的氢氧化钠进行滴定,使颜色转变为黄绿色记录消耗氢氧
化钠的体积,计算生物碱含量。生物碱含量计算公式如下:
生物碱含量= C×(V空白-VNaOH)×M
1 000W
×100%
式中:C为滴定用NaOH浓度,mol/L;VNaOH为滴定加入过量盐
酸的生物碱所用NaOH体积,mL;V空白为滴定相同浓度
相同体积盐酸所用NaOH体积,mL;M为生物碱的相对
生物分子质量,654.74;W为样品的质量,g。
1.3.3 C21甾体化合物含量测定
准确称取薯蓣皂甙元标准品5mg,溶于10mL氯仿,配成
0.5 mg/mL溶液,倍比稀释成0.250 0 mg/mL、0.125 0 mg/mL、
0.062 5 mg/mL和0.031 25 mg/mL系列质量浓度。各质量浓
度标准溶液分别取3mL,加入2mL显色剂,50℃水浴40min,
冷却至室温,6 h内测定波长460 nm处的吸光度值。以薯
蓣皂甙元标准回归曲线方程,计算鹅绒藤中C21甾体化合物
的含量。
1.3.4 亚硝酸盐含量测定
准确称取0.100 0 g亚硝酸钠,加水移入1 000 mL容量
瓶,加水稀释至刻度,混匀。吸取上述10 mL亚硝酸钠标
准溶液,置于100 mL容量瓶,加水稀释至刻度。然后取
0、0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.40 mL、0.50mL亚硝酸钠
标准使用液,分别置于50 mL的带塞比色管中。于标准管中
分别加入2 mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,放置3~5 min,加
入1 mL盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15 min,
于波长538 nm处测定吸光度值。以亚硝酸钠标准曲线回归
方程,计算干腌后鹅绒藤中亚硝酸盐含量。
1.3.5 鹅绒藤腌制方法的选择
鹅绒藤中的生物活性成分会随着腌制时间的延长而
不断减少,所以在鹅绒藤腌制方法上选择干腌法,在减少
腌制处理时间的同时减少活性成分的损失。盐5%,白砂糖
2%,干红辣椒 1%,五香粉1%均匀撒于新鲜鹅绒藤嫩茎上,
置于室温条件下,放置坛子中密封腌制15 d。
1.3.6 微生物的测定
细菌总数、大肠菌群、致病菌测定按照GB 4789—2010
《食品微生物学检验》[18]中的方法进行。
2 结果与分析
2.1 芦丁标准曲线
以芦丁质量浓度(x)为横坐标,吸光度值(y)为纵坐标,
绘制芦丁标准曲线见图1。标准曲线回归方程:y=0.107 1x-
0.001 6,相关系数R2=0.997 8,表明二者线性关系良好。
2.2 薯蓣皂甙元标准曲线
以薯蓣皂甙元质量浓度(x)为横坐标,吸光度值(y)
图1 芦丁标准曲线
Fig. 1 The standard curve of rutin
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为纵坐标,绘制薯蓣皂甙元标准曲线见图2。标准曲线线性
回归方程:y=3.490 2x-0.090 3,相关系数R2=0.995 9,表明
二者线性关系良好。
2.3 腌制前后鹅绒藤嫩茎中黄酮、生物碱、C21甾体类化合
物含量变化
由图3可知,质量相等的鹅绒藤中,新鲜的鹅绒藤黄
酮含量为0.304 mg/mL,室温干腌15 d腌制后的鹅绒藤黄
酮含量为0.230 mg/mL,保存率为75.7%;新鲜的鹅绒藤生
物碱含量为0.210 mg/mL,腌制后的鹅绒藤生物碱含量
为0.15 mg/mL,保存率为71.4%;新鲜鹅绒藤中C21甾体类
化合物含量为0.482 mg/mL,腌制后的鹅绒藤C21甾体类化
合物含量为0.325 mg/mL,保存率为67.4%。
通过腌制,鹅绒藤中主要活性成分含量均下降,新鲜
原料经加工处理后活性成分普遍降低,降低的幅度与处理
方式有很大关系,本实验采用干腌能较大程度上保留鹅绒
藤嫩茎中的活性成分,经初步实验表明干腌能对鹅绒藤
嫩茎起到增加保藏时间同时能较大程度上保留活性成分
的方法。
2.4 腌制后鹅绒藤嫩茎中亚硝酸盐含量测定结果
以亚硝酸钠质量浓度(x)为横坐标,吸光度值(y)为纵
坐标,绘制亚硝酸钠标准曲线见图4。标准曲线线性回归
方程:y=1.555 7x+0.001 0,相关系数R2=0.999 2,表明二
者线性关系良好。
由图4可知,加入调料的新鲜鹅绒藤嫩茎放置坛子中
密封,于室温条件下放置15 d后鹅绒藤嫩茎中亚硝酸盐含
量为2.3 mg/kg(国标≤20 mg/kg)。新鲜鹅绒藤嫩茎经过干
腌15 d后,腌制品中会产生一定量亚硝酸盐,但含量在安
全范围以内。
2.5 微生物指标
细菌总数≤100 CFU/g;大肠菌群≤30 MPN/g,致病
菌未检出,符合GB 2714—2003《酱腌菜卫生标准》[19]。
3 结论
鹅绒藤嫩茎在腌制后黄酮、生物碱、C21甾体类化合物
等生物活性成分的含量有所下降,保存率分别为75.7%、
71.4%、67.4%。腌制后鹅绒藤中亚硝酸盐的含量为2.3mg/kg,
低于国标酱腌菜中亚硝酸盐限量卫生标准20 mg/kg,表示
腌制后的鹅绒藤中亚硝酸盐含量符合国标。鹅绒藤嫩茎
腌制后微生物指标符合相关标准。腌制后,鹅绒藤本来的
苦味变淡,产生了独特的风味,并且延长了保质期。
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图2 薯蓣皂甙元标准曲线
Fig. 2 The standard curve of diosgenin
图3 腌制前后鹅绒藤嫩茎中活性成分含量
Fig. 3 The content of active ingredients in tender stem of
Cynanchum chinense%before and after pickling
图4 亚硝酸钠标准曲线
Fig. 4 The standard curve of sodium nitrite
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《中国酿造》杂志征稿启事
《中国酿造》创刊于1982年,是由中国商业联合会主管,中国调味品协会及北京食品科学研究院主办的综合性科技期刊。并历次
被评为全国中文核心期刊、中国科技核心期刊、《中国知网》重点收录期刊、《万方数据库》全文收录期刊、《中文科技期刊数据库》来
源期刊、中国学术期刊网络出版总库收录期刊、美国《乌利希期刊指南》(UPD)收录期刊、英国《食品科学文摘》(FSTA)收录期刊、英
国《国际农业与生物科学研究中心》(CABI)收录期刊、美国《化学文摘》(CA)收录期刊、俄罗斯《文摘杂志》(AJ)收录期刊、中国科学
评价研究中心(RCCSE)数据库收录期刊,也是学位与研究生教育的中文重要期刊。
本刊主要面向全国各大高等院校、科研院所、各级党政机关、相关企事业单位的广大专家学者、工程技术人员、本科生、硕士博
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