全 文 ：荧光分光光度法测定木香花中的总黄酮含量
刘玉芬，夏海涛，陈 亮，吕国军 (淮海工学院化学工程学院，江苏连云港 222005)
摘要 ［目的］测定木香花中的总黄酮含量。［方法］通过正交试验选择最佳提取条件，以芦丁为标样，用荧光分光光度法测定木香花中
总黄酮的含量。［结果］在激发波长和发射波长为 430和 497 nm下，芦丁浓度与荧光强度呈良好的线性关系，标准曲线的相关系数为
0． 997 8，平均回收率为 98． 7%，RSD为 0． 19%。木香花中总黄酮的含量为 1． 09%。［结论］该方法简便、快速、准确，可用于植物及其制
品中总黄酮含量的定量测定。
关键词 木香花;总黄酮;荧光分光光度法
中图分类号 O657． 3 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)11 －06384 －02
Determination of Total Flavonoids in Rosa banksiae Ait by Fluorescence Spectrophotometry
LIU Yu-fen et al (Dept． of Chemical Engineering，Huaihai Institute of Technology，Lianyungang，Jiangsu 222005)
Abstract ［Objective］The aim was to study the determination total flavonoids in Rosa banksiae Ait． ［Method］Through the orthogonal exper-
iment design the optimum extraction condition was selected，the content of total flavonoids were determined by fluorescence spectrophotometry
method using rutin as the standard sample．［Result］There was a linear relationship between the concentration of the rutin solution and the fluo-
rescence intensity，was of the range 1． 27 － 20． 7 μg /ml with correlation coefficient of 0． 998 7 under the emission wavelength (347 nm)and
excitation wavelength (285 nm)． The average recovery of this method was 98． 7%，the relative standard deviation was 0． 19%，and the total
flavanone content was 1． 09% in the Rosa banksiae Ait． ［Conclusion］This analysis method was simple，rapid and accurate． It has been ap-
plied to the determination of total flavanone in the plants and their products．
Key words Rosa banksiae Ait;Total flavonoids;Fluorescence spectrophotometry
基金项目 淮海工学院自科学基金项目。
作者简介 刘玉芬(1961 －) ，女，黑龙江绥滨人，副研究员，从事应用化
学及仪器分析应用技术研究。
收稿日期 2011-01-07
木香花(Rosa banksiae Ait)也称木香藤、锦棚花，为蔷薇
科蔷薇属常绿或半常绿攀援藤本植物，小枝绿色，无刺或有
少量的刺;花白色或淡黄色，单瓣或重瓣，春季开花，果实为
红色球状，秋季成熟。其花朵香味醇正，民间常在半开时摘
下用白糖腌渍后制成木香花糖糕，还可熏茶和提取芳香油，
果实可酿酒，根可入药。已知黄酮类化合物广泛存在于植物
的花、叶、根中［1］，具有重要的生理和药理功能［2 －3］。对于黄
酮类化合物的分离以及单一黄酮成分的定量分析已有报
道［4 －11］，但对木香花中黄酮含量的测定国内尚未见报道。为
深入研究木香花的药理、保健作用，进一步开发利用资源，笔
者采用荧光分光光度法对其总黄酮含量进行了测定，并将其
测定结果与紫外分光光度法测定结果进行了比较，结果
满意。
1 材料与方法
1． 1 材料 木香花:采自淮海工学院校园内，由淮海工学院
化工学院制药教研室鉴定。
1． 2 仪器与试剂 RF-5301型荧光分光光度计(日本岛津公
司);UV-2550型紫外分光光度计(日本岛津公司);SCS1200型
超声仪(上海超声波仪器有限公司);DHG-9240A型电热恒温
鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)。甲醇(分析纯):上海
国药集团;芦丁标准品:中国药品生物制品鉴定所。
1． 3 样品制备 准确称取 60 ℃下粉碎干燥的木香花 0． 25
g，用 15 ml甲醇浸泡 16 h，超声振荡 20 min，过滤，超声振荡
重复萃取 2次，合并滤液，用甲醇定容至 50 ml。
1． 4 标准溶液配制 准确称取 20 mg芦丁标准品，用甲醇
溶解并定容至 50 ml，得到浓度为 400 μg /ml的标准溶液。
2 结果与分析
2． 1 芦丁和样品的荧光光谱 将芦丁标准品和木香花样
品分别配制成一定浓度的甲醇溶液，在荧光光度计上进行扫
描，所得荧光光谱见图 1。由图 1可知，芦丁和木香花提取液
在激发波长为 430 nm时有较强峰，发射峰在 497 nm处。
图 1 芦丁和木香花提取液的荧光光谱
F ig． 1 Fluorescence spectrum of rutin and Rosa banksiae Ait extracts
2． 2 工作曲线 以甲醇为空白，将配制的系列芦丁标准溶
液在 RF-5301荧光分光光度计上于 λex /λem = 430 nm/497 nm
处测定荧光强度，狭缝宽度 λex = λem = 5 nm。以荧光强度
(F)对芦丁浓度(c)作图(图 2) ，得线性回归方程为:F =
0． 613 8c + 1． 802 3，r = 0． 997 9，浓度范围为 1． 27 ～ 20． 7
μg /ml。以空白的 3倍标准偏差计算，检出限为 0． 55 μg /ml。
2． 3 样品提取条件的选择 选择 3因素 3水平正交试验，
考察了甲醇用量(10、15、20 ml)、浸泡时间(8、16、24 h)和超
声时间(20、40、60 min)对提取效果的影响。结果表明，当甲
醇用量为 15 ml，浸泡时间为 16 h，超声时间为 20 min时，木
香花提取液的总黄酮含量最大，因此选择该条件为样品的提
取条件。将重复提取后的滤渣按样品提取条件超声提取 20
min，滤液在紫外光谱仪上进行扫描，结果在 360 nm 处无吸
收峰，说明木香花中黄酮已基本提取完全。
2． 4 回收率测定 在已知含量的样品中加入一定量的各
组分标准品，按上述试验方法提取和测定，结果见表 1。由表
1可知，样品回收率为 97． 8% ～99． 5%。
责任编辑 李占东 责任校对 卢瑶安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(11):6384 － 6385
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.11.166
图 2 芦丁的标准工作曲线
Fig． 2 Standard curve of rutin
表 1 样品的回收率测定结果
Table 1 Measured results for the recovery rate of Rosa banksiae Ait
samples
测定次数
Times of
measurement
样品量
μg /ml
Sample
amount
加标量
μg /ml
Addition
amount
测得量
μg /ml
Measured
amount
回收
率∥%
Recovery
rate
1 1． 09 4． 00 3． 95 98． 8
2 1． 09 4． 00 3． 98 99． 5
3 1． 09 4． 00 3． 91 97． 8
2． 5 样品测定结果 精密吸取木香花提取液 0． 2 ml于 10
ml容量瓶中，用甲醇稀至刻度，在 λnm /λnm = 430 nm/497 nm
波长下重复 5次，测定荧光强度，计算总黄酮含量为 1． 09%，
RSD为 0． 19%;同时以 360 nm为测定波长，进行紫外光谱法
测定，其含量为 1． 08%，两者的相对误差为 0． 46%，证明用荧
光分光光度法测定木香花中总黄酮含量是可行的。
3 结论
该试验采用超声提取和荧光光谱法对木香花中总黄酮
含量进行了测定，该方法操作简便、样品前处理简单、提取效
率高、分析速度快，可用于植物及其制品中总黄酮含量的定
量测定。笔者将进一步确定木香花中黄酮的种类和含量，以
期为开发利用提供依据。
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
812 －818．
(上接第 6348 页)
3 讨论
壳聚糖因其良好的成膜性和生化特性及无毒、价廉、高
效的优点，应用领域十分广阔，具有极大的发展潜力。
利用壳聚糖代谢途径中形成的一些寡聚糖调节植物生
长，可增加禾谷类作物的分蘖力，调节根、茎、叶和花的生长
发育，影响生殖器官的大小，同时增加作物的免疫力，最终达
到增产的目的［7］。壳聚糖也可以增加黄瓜的产量，改善品
质［8］。
该研究表明，在长豆角现蕾前对植株喷洒适当浓度的壳
聚糖溶液，可以有效减少蚜虫及豆角蝽蟓等虫害的发生，增
加豆荚蛋白含量、可溶性糖含量和维 C 含量，降低粗纤维含
量，从而改善长豆角的营养品质，并提高长豆角的产量。
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583639 卷 11 期 刘玉芬等 荧光分光光度法测定木香花中的总黄酮含量