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高效液相色谱法测定紫红獐牙菜中獐牙菜苦甙的含量



全 文 :药物体 内过程 .
3讨 论
3
.
1盐酸环丙沙星 片剂体外累积溶出百
分量与体内药动学参数之间有着一定的相关关
系 , 根据体内外相关方程 , 应用体外溶出数
据 , 可以对盐酸环丙沙星的体内动力学过程进
行预测 , 进而可以对盐酸环丙沙星片剂的质量
进行恰当的评价 。
3
.
2 根据本文实验结果 , 建议盐酸环丙
沙星片剂的溶出度可采用转篮法 , 转速 10 0r /
m i n
, 以 s o om一0 . l m o l / L H e 一作为溶出介质 , 每
片溶出量在 6m in 内不得少于 80 % 。
3
.
3 用紫外分光光度法测定环丙沙星浓
度 , 方法简便 , 稳定性和重现性好 , 易于推广
应用 。
. 专 文 献
1 孙忠民 , 孙 涛 , 张朴等 . 国产环丙沙星体内抗菌作用研
究 . 中国临床药理学杂志 , 1 9 9 0 , 6 (2 ) , 1 0
2 J acr BD
. 药物化学方面的最新进展 , 刁一唆诺酮类杀菌剂 .
国外医学 , 药学分册 , 一9 8 7 , 1 4 ( 5 ) , 2 7 3
3 张华安 , 张秋谊 , 阁正华等 . 环丙沙星片的紫外分光光度
法含量洲定 . 西北药学杂志 , 19 91 , 6 ( 4 ) , 12
寸 奚念珠 , 顾学裘主编 . 药剂学 . 第二版 . 北京 : 人 民卫生
出版社 , 19 8 9 , 4 2 3 ~ 4 2 9
5 郭建兰 , 陈庆才 , 粗天莉等 . 碳酸怪缓释片的生物利用度
研究 . 药学通报 , 1 9 8 7 , 2 2 ( 9 ) , 5 3 7
( l , , 3 年 7 月 1 1 日收稿 )
高效液相色谱法测定紫红掉牙菜中掉牙菜苦试的含里
陈家吞 程改平 乔 明 (湖北中医学院 武汉 月3。。 6 1)
胡军林 (湖北省药品检验所 )
摘典 本文报道 了用反相 高效液相 色讲法分离并浏定常红 捧牙莱侣 w e rt 运 uP in cae H e lsn l . )中捧牙莱苦
武含 1 的方法 . 生药的 甲醉提取液直接进样 , 来用 s 的e r is o r b C , . 5林m 柱 , 以甲醉一水 ( l : 4) 为流动相 , 流
速 0 . 8而 /~ , 检测波长 25 4n m 。 用外标法定黄 , 浏定 了不同产地常红律牙莱药材 和植株不 同部位中律
牙莱苦武的含黄 . 平均回 收率为 10 0 . 1% , 变异 系数 (sR o ) 为 1 . 2 % .
关镇词 萦红律牙莱 , 律牙莱苦武 , 高效液相 色讲法
紫红璋牙菜 ( s w e川 a p u n i e ae eH m sl . )隶属
于龙胆科璋牙菜属植物 , 药用其全草 , 具有清
肝利胆 , 清热除湿之功 lj[ 。 璋牙菜苦贰 (S w er iat -
m ar in )是其中的主要有效成分 , 也是本属药用
植物的主要成分之一 2[] , 但目前还没有理想的
含量测定方法 。 为了指导该药物的合理开发利
用 , 为临床用药提供质量控制的客观依据 , 本
文采用反相高效液相色谱法 , 测定了紫红璋牙
菜中璋牙菜苦贰的含量 , 具有快速 、 方便 、 稳
定 、 准确的特点 . 本方法亦适用于同类药材的
含量测定 。
1 实验材料
1
.
1 仪器 岛津 CL 一 SA 高效液相色谱
仪 ; 岛津 s P D 一 Z A 紫外检测器 , 灵敏度 0 . 08 ,
检测波长 2 5 4n m ; 岛津 R 一 1 12 记录仪 , 纸速 2 . 5
mm / m m

·
3 5 6
·
1
.
2 色谱柱 s hP e r妇。 r b e , . 5林m , 理论塔
板数不得低于 3OO0( 用璋牙菜苦贰测得 ) , 柱前
加保护柱 , 柱温 35 ℃ 。
1
.
3 流动相 甲醇 一水 ( 1 : 4) , 流速 0 . 8
m l / m i n

1
.
4 标准溶液 取璋牙菜苦贰对照品 (中
国药品生物制品检定所购置 ) 约 s m g , 精密称
定 , 置 10 m l 量瓶中 , 加 甲醇溶解并稀释至刻
度 , 摇匀 , 即得 。
1
.
5 样 品溶液 紫红璋牙菜系作 者 自
采 、 晒干的药材 ( 1 9 9 1年 ) 。 其原植物 由中国科
学院西北生物技术研究所何廷农研究员协助鉴
定学名 。 取本品细粉约 2 5 Om g , 精密称定 , 置
25 ml 量瓶中 , 加 甲醇 2 0ml , 超声处理 (功率
2 5 ow
, 频率 3 3k比 ) 4 o m i n , 取出 ,放冷至室温 ,
用甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 弃去初滤液 ,
中国医院药学杂志 19 9刁年第 14 卷第 8 期
收集续滤液作为供试品溶液 .
2 测定方法的选择及方法学观察
2
.
1 液相色谱条件的选择 经试验不同
浓度的 甲醇和不同的柱温条件 , 表明 甲醉 一水
( 1
,
4) 作流动相 , 35 ℃柱温时 , 能很好地将璋
牙菜苦贰同其它各组分分离 , 与最邻近峰的分
离度约 为 1 . 7 , 大 于 1 . 5 , 璋 牙菜苦 贰约 在
1 3m in 出峰 。 高效液相色谱图如下 :
2
.
3 提取方法及提取时间的选择 对生
药含量测定的提取方法及提取时间分别进行了
考察 , 结果见表 2 。 根据实验结果 , 我们采用
以超声提取 4 Om in 作为含量测定的提取方法 .
所用超声波的功率为 2 5 Ow , 频率 3 k3 ZH 。
农 2 提取方法及提取时间结果
方 法 时 间 含量 (% )
0

7 13
一甘2山.1,ó,10`9ù0.…IJù.1,立门胜盆
索氏提取器
超声波
4 h
2 0 m in
4 0 m in
6 0 m in
8 0 m in
图 1 对照 品色谱图
a
. 璋牙菜苦贰
2
.
4 重现性考察 取同一批样 品 5 份 ,
每份约 2 5Om g , 精密称定 , 按生药测定项下所
述方法测定 , 结果见表 3 。
衰 3 方法的 , 现性考案
编 号 取样 t ( g) 峰面积 含量 (% )
叫02300。 2 6 8 1
0
.
2 6 7 8
0

25 6 5
0
.
2 6 4 0
0
.
25 5 4
4 0 6 6
4 0 7 8
3 8 2 7
4 0 1 3
38 0 4
R S D (% )
图 2 样品 色谱图
a
. 璋牙菜苦贰
2
.
2 标准曲线的制备 用微量注射器分
别吸取 l 、 2 、 3 、 4 、 5日的标准溶液进样 , 进行分
析测定 , 由数据处理机给出峰面积值 , 见表 1 。
裹 1 标准曲线
进样体积 (” l ) 进样量 ( 协g ) 峰面积 ^ X 1 0 3
1 0
.
5 1 1 4
.
3 0 1
2 1
.
0 2 2 8
.
5 7 9
3 1
.
5 3 3 1 2
.
8 4 1
4 2
.
0 4 4 1 7
.
1 5 0
5 2
.
5 5 5 2 1
.
4 0 6
以标准品的重量为横座标 , 峰面积值为纵
座标作图 , 得到一条经过原点的直线 y 一 .8 37 2
x
+ 0
.
0 2
, 相关系数 r = 0 . 9 9 9 9 。
中国医院药学杂志 1 9 9刁年第 l月卷第 8 期
2
.
5 加样回收试验 精密称取本品细粉
约 25 o m g , 共 7 份 , 其中 5 份分别加入璋牙菜
苦贰标准品 , 按样品测定项下所述方法进行测
定 , 结果见表 4 。
农 4 加样回收率
编号 生药量
( g )
0
.
2 7 0 9
0
.
2 6 2 9
0
.
2 3 8 3
0
.
2 4 7 4
0
.
2 3 3 3
样品
含量
( % )
0
.
9 8 1
0
.
9 8 1
0
.
9 8 1
0
.
9 8 1
0

9 8 1
加入对
照品量
( m g )
0
.
2 7 6
0
.
2 7 6
0
.
2 7 6
0
.
2 7 6
0

2 7 6
峰面积
( A X 1 0s )
回收率
(% )
4

5 4 6
4
.
4 2 0
4

0 3 9
4
.
1 8 7
3

9 7 8
测得对
照 品量
( m g )
0
.
2 7 8
0

2 7 5
0
.
2 7 1
0

2 77
0

2 8 0
1 0 0
.
7
9 9
.
6
9 8

2
10 0
.
4
10 1
.
4
10 0
.
1
R S D (% ) 1
.
2
测得加入量 = ( ^ x 2 5 / 7 7 4 2 . 6 x 5 ) 一 w x o . 9 8 1% x l 0 0 0
测每 阳 对照品相当于峰面积 77犯 . 6 /阳
3 样品测定
分别取不同产地的药材和植株不同部位的
细粉提取制成样 品溶液 , 用微量注射器吸取
·
3 5 7
·
5以 进样 。 由于标准 曲线为通过原点的一条直
线 , 因此 , 采用外标一点法测定 , 结果见表 5 。
表 5 不同产地和不同部位抹牙菜苦试的含 t (n = 3)
产 地 药用部位 含量 ( % )
湖北鹤峰 全草 1 . 15
湖北建始 全草 0 . 7 76
湖北 巴东 全草 2 . 2月
湖北巴东 花 4 . 村
湖北 巴东 叶 1 . 0 4
湖北巴东 茎 0 . 8 7 3
湖北巴东 根 痕量
湖北巴东 种子 无
4 讨 论
4
.
1 璋牙菜苦贰是广泛存在于璋牙菜属
植物中的一种活性成分图 , 过去曾用紫外分光
光度法测定其含量 , 用 H P L c 法测定其在本属
植物中的含量国内尚未见报道 。 本方法用生药
的甲醇提取液直接进样 , 用 甲醇 一水 ( 1 : 4) 作
流动相 , 分析时间只需 13 m in 左右 , 杂质干扰
少 , 方法简便 、 快速 、 灵敏 、 重现性 亦较好 , 本
法还可以作为青叶胆等同属药材的含量测定 。
4
.
2 通过对不 同提取方法的比较 , 选用
以超声 波提取 40 m in 作为含量 测定的提取方
法 , 既可避免因长时间加热提取而使璋牙菜苦
贰发生结构改变 , 同时也缩短了提取时间 , 并
能提取完全 。
4
.
3 璋牙菜苦贰在结构上属于裂环环烯
醚菇贰 , 对酸 、 碱 、 热不稳定 。 选用该成分作
为 定量成分 , 更能有效地控制本类 药材 的质
量 。
4
.
4 由表 5 可以看 出 , 璋牙菜苦贰以花
中含量最高 , 根和种子中几乎不含 , 提示本类
药材以花期采收为佳 。
参 考 文 献
1 陈家春 , 黄先石 , 詹亚华 . 湖北璋牙菜属药用植物资源调
查 . 中药材 , 19 9 0 , 1 3 ( 4 ) , 19
2 陈家春 , 黄先石 . 湖北璋牙菜属植物的化学成分分析 . 中
药材 , 19 9 0 , 1 3 ( 2 ) , 2 9
( 19 9 3 年 1 2 月 2魂 日收稿 )
不同厂家蛇胆川贝液中贝母碱含量考察
丁青龙 (中国人民解放军 10 2 医院 常州 2 13 0 03) 赵益华 (南京中医学院 )
摘要 本 文根据贝母碱和酸性染 料澳添香革酚蓝 在酸性缓冲溶 液 中形成的配合物可溶 于氛仿 . 并 在
4 12
n
m 波 长处有最大吸收 , 故在此波长测定 不 同厂 家贝母城的含蚤 , 建立 了准确 、 简便 、 灵敏度较高的
检 浏方法 , 回 收率 1 0 . 朽% , 变异系数 1 . 招% 。
关扭词 蛇胆川 贝液 , 贝母城 , 比色法 , 含圣测定
蛇胆川贝液是 由蛇胆汁 、 川贝母 、 杏仁水
等组成的复方中成药 口服液 。 目前全国有数十
个厂家生产 , 但其临床疗效却有差异 , 这可能
与蛇胆川贝液中主要成分的含量有关 。 本文采
用比色法对不 同厂家蛇胆川贝液中贝母碱的含
量进行了考察 , 报告如下 。
1 仪器与试剂
1
.
1 仪器 日立 一 3 2 0 0 ( 日本 ) , 7 5 2一紫外
分光光度计 (上海第三分析仪器厂 ) , 电子天平
(瑞士 M E竹L服 ) 。
1
.
2 试剂 贝母碱标准品 (中国药品生物
·
3 5 8
·
制品检定所 ) ; p H S 邻苯二甲酸氢钾缓冲液 : 取
邻苯二 甲酸氢钾 8 . 2 9 , 加 水溶解并稀 释 至
2 0 0 m l
, 加 0 · Zm o l / L N a o H 液 9 5m 一, 摇匀即得 。
澳察香草酚蓝试液 : 取澳寮香草酚蓝 0 . 39 , 溶
于 l m o l / L N a o H 5m l 中 , 加水 稀释至 1 0 0 0 m l ,
摇匀 即得 。 氯仿 为分析纯 ; 蛇胆 川 贝液 : (江
苏 、 江西 , 广州等厂 )
2 实验部分
2
.
1 标准液制备 精密称取 贝母碱标准
品 1 . 7 8m g , 置 5 0m l 容量瓶中 , 加少量 7 5%乙
醇溶解后 , 加水至刻度 , 摇匀备用 。
中国医院药学杂志 1 99 4 年第 1凌卷第 8 期
AB S TRAC S O TFOI RGI N AL A R TC I L E S
E f f e ct Sf o
a邵 o n Ph n a” c ao klL n et cf On ab u们 e .t o n e e a讲 ul e
H u a
n gL in 一q n i g
, X u C h u a n 一 f u
,
Z h a n g Z h a o
, e t a l
( S沈 O n d H os iP因 , Th ir d M ilj atr y M侧红a 目 C o l e乎 , hC on g q in g 63 00 3 7 )
N a bu me
t o n e w as a no ve l
n o n 一就 e r o l山al an it 一 in f l别 nr m a otr y dr u g ( N S A DI ) w ih e h ids P la y de an e x et 丽ve an d l o n g- et r m an -
i-t in f laJ 旧 r 以 t o r y a比vi yt w iht l已沼 ids e e f f eC st . 1 油 p. pe r h a d s tU d l曰 山 e e f f曰比 o f a ge o n P h ar am co ik n e it cs of n a bu m e ot n e ca P -
s
ul
e 、 v a 日 s ut id de
,
ht e r es ul st in id ca t曰 山 a t n o s igr 以犯a 刀 t d计f e r e n ce 、 v a 月 f o u n d be t w e n y o u n g an d 而d dl e - a g de s u b神 st a f t e r o -
r ia s in gl e d o ` a g e Of an b ur
n e t o n e ca 声 u le 1 0 00m g .
K e y w份山 n a b u m e t o n e , ph a r 叮以 c o k in e t 1CS , a ge , e f f e c t
(Or igj
n a l 刊rt lc le o n aP ge 3 3 9 )
M
e t h o d f o r 而c or M ul o gl c a l a . . y ot l别昭 e n u 遗n加 r of bl o 】侧梦。 目 n ul d ~ P l eS
Z h o u eS n

l in
,
T a n M in g
(决侧” 。” e n t of Ph a rma cy , H OS P Ialt o f B记 la tr i cs , S h a n砂姆 I M侧肚侧 U U ul v e r s i yt 2 00 03 2 )
l 刁了罗 目哪 p la est we r e u s曰 f o r th is m od l f l ed a g a r 一 w e l d if f us i on a s s a y t o 们。` ” u r e s P让am y创的 c o n eC n tr a石on in 拙 r u m an d
朋 Uv a . hT e me ht od s bo w ed i t w a s p 渭 s l bl e t o est t恤 ge n u m be r o f ib o lo硕cal fl u id s a r n P冶 by s加p l e wa y w i ht an a c c u r a e y be t -
et r th a n 1 0%
.
K e y w or ds a n t i ib o it e a s s a y
,
lar ge gl as P l
a t e , ib o lo口ca l f lu i d as m P le , s irP am y e in
(Ot i颐n al ar it e le on Pa g e 3 4 1 )
H P L C d e t e r m i n a t i o n o f f e n at n y l e i t r a et i n je e it on
C a o Q u a n
一 s h e n g
,
S u i N in g

h a i
,
L u H a n g
( H u be i 价 o v in e iln I sn t i t u t e f or rD u g C o n f r o l , W u h an 4 3 0 0 6 4 )
A n e w M e ht do f
o r
ht
e
de t
e r r n l n a it o n of f
e n at n y l e i tr a t e in je c t i o n 15 r e po
r tde
,
7 v of u m o f m e廿砚 n o l sol u t 1O n (me th a n ol
4 0 0而 , a ce t o n i tr il e 2 0 0而 a n d gl a e i ia a ce it e a e i d 0 . 6ml ) an d 3 v ol u m o f 0 . 2% an h y dr o u s s o d i u m s u lPha et in
amo
in u m ac
-
e切 t e so lu it on ( 1 ~ 1 0 0 ) w as u s de as m iob le p h别沈 d e cet it o n w a ve l e n g ht w as 2 3 0 n m
, r ec o v e r y w as 9 9
.
9% ( RS D = 1
.
5% )
.
T h e m e ht od w as m沉 e e o n v e n ie n t , P r a e it ca l , se cle t iv e e om 阳 r de ot o ht e r m e t hdo s r e po r t de
.
K e y w or ds H P LC
,
in cje t i
o n ,
fe
n at n y l e i tr a et
(Or lgj
n al ar t ie l e o n 阵ge 3 4 3 )
S tU d y o n t he d触扣 l u it o n t es t Of e i rP of lo x a e l n h y dr oc 川 o ir de at bl e st
Z h a n g H u a

an
,
Z h an g Q i
u 一 x i a
,
F e n g W
e i

y i
(】尧脚引朔 e n t o f P七ar lr 以 c y , Tb e F妇落 t fA f ila t曰 HOS P ialt , X』a n M侧五口 1 U in ve r s i yt 7 1 00 61 )
T七e dj so lu iot n ar et of e i讲。 f l o X a d n h y dr oc hl or id e at bl e st an d ht e e i P r o f lox a c i n o u tP u t in ur in e o f s议 h ea 】ht y e h加已记 v ol -
un t
e e r af t e r gj v e n or ial y w iht d rP
o fl o xa
e in h y dr oc 川 or id e at bl e st by s in川e d oe w e r e d e et r n u n ed by t】V 一 s pe c tr o P h o t o m e t r ie
me ht od
.
T七e r es u lst s h o w ed hat r
r e场。on 比 t w e n het d议泊 lu it o n r a et of ht e at bl e t an d i st 悦oa v a il a ibl yt
.
w as s l g n if iaC n t ( p <
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.
0 1 )
.
It w as de m
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a t ht e d 1S o l u it on
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o f e i P r o f lox
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in h y dr oc 川 o r i d e at b le st in ht i s 因pe r co u ld be a P P led t o ist
s at n da
r d f or q u a il yt c o n tr ol
·
eK y w or ds
e i拼Of 1O xa e in h y由 oc h lo r ide at bl et , U V 一 s pe c tr o hP o t o m e tr ie m e th do , d i , 幻 lu t io n , 肠 ao v ia la b i llyt
(伪1口n al ar t i e l e o n Pa g e 3 5 4 )
H P L C 】死et r m in a tion o f s w e rt lam a d n i n sw e币 a Pu n l c e a he ms l
C h e n J i a 一 e h u n
,
Ch e n G a i

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,
Q ia o M i n g
, e t al
( H u be i C
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o f T r a d i t ion al C h i
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曰面 e in e 4 3 00 6 0 )
T h e d e et r 〔 n l n a it 帕 o f s w e r t laJ 旧 a r in in s w e r t i a uP n i c e a h e m s l by R P 一H P L C 15 r e P O r ted . T七 e e hr o ma t o gr a hP c o n s is ted o f a
·
3 8 2
· 中国医院药学杂志 19 9 4 年第 14 卷第 8 期
s ch 吐 n a Z du L C一A SPu mP , S P压 Z A U V 一 d e t e c t e r , a cs h i m a id 川 R 一 1 1 2 da at tP o O巴粥 o r a n d a s hP e r i so r b C , 。 5协m e o】U m n . 0 . 2 5 g of
t h e po wd
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a e e u r a t e ly w e返自ed a n d uxn ed w iht 2 0耐 o f m e th an of
, r e fl u x 曰 f o r 4 0nu in an
u l tr a s o n ic g e n e r a t o r
.
M
e th a n o l w a习 ad d de ot 2 5而 , 山 e n ifl 妞 r de , 5林1 o f ht e f il et r a et w as in ej c t ed an d e lu ted iw ht me th a n ul 一 w a et r ( 1 : 4 ) at a fl o w
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.
8耐 /而 n . T七e 详ak s ~ e d e t曰比ed at 2 5 4 n m
,
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c
on et nt w as ica cu af det au ot aln it aC l y by het da at rP
~
.
Tb e
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, v a` s加川e an d a c c u宝 a et .
K e y w or 山 S w e rt 达 p u m cea he lr . 1
, s w e r t ia m a r in
,
H P L C de et
r
m i
n a t io n
(Ot i创的 ia 侧 rt ic le on 阵罗 35 6 )
Ik t emr i an it
o n
of 衅万m in e c o n et n t I n S h e 〔恤 n C h u an 氏1 o r a 】 l q ul d f r o m d i f f e r e n t m a n u f a e ut er sr
D in Q i
n g 一 l o n g , Z h a o Y i一h u a
( N o
.
1 0 2 P L A ,s H份 Pi回 , hC an s Zh o u 2 1 3 0 0 3 )
eP i扣」n e a n d bt o m o ht y m ul bl u e , an a c id s at in , c a n f o r m a e om P l e x in an a e id b u f fe r
.
T h e e o m P le
x 15 e hi
o r of or n蓝旧 lu b le
an d h as a
. n a , J r n u n a饮泊 r Pit o n a t 4 1 Zn m . B曲别刃 On t h e P r ic i P le an ac
u r a et
, s如P le a n d q u i et se n s l it v e me ht do w as 业 v e lo 侧刃 .
eP i ln 」n e e on et n t in hS e E冶 n C h u an eB i o r a l l i q u id f r o m d if f e r e n t m an u af c tU r eS 、 v a习 de rt e r m in de by ht e me ht do
. 丁b e r e c o v e yr
w as 1 00
.
2 %
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中国医院药学杂志 19 9 4 年第 l ` 卷第 8 期 · 3 8 3 ·