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蒙药歪头菜总黄酮含量测定



全 文 :蒙药歪头菜总黄酮含量测定
内蒙古医学院 ( 010059) 高权荣 乔俊缠 渠 弼
提 要: 对歪头菜全草、根、茎、叶和花进行了黄酮定性检测试验 ,结果显示根和茎反应不明显。 以芦丁为标准品 ,利用分光光
度法对其全草、叶和花进行了总黄酮的含量测定。
关键词: 歪头菜 ;分光光度法 ;总黄酮含量测定
中图分类号: R291. 2 文献标识码: B 文章编号: 1006- 6810( 2002) 02- 0035- 01
  歪头菜 ( V icia unijuga R. Br. )又名野豌豆、草豆、三铃
子 ,为豆科野豌豆属植物 ,全草入蒙药 ,主治劳伤、头晕、胃脘
疼痛、体虚浮肿 ;外用治疔疮。 植化研究表明 ,歪头菜全草和
叶含有多种黄酮类化合物及其它化学成分 ,花含多种花色
甙〔1〕 ,药材的总黄酮含量测定尚未见报道。 本实验利用分光
光度法对其全草、叶和花所含的总黄酮进行了含量测定。
1 仪器及实验材料
仪器: UV- 120- 02分光光度计 (日本岛津 )。
材料: 歪头菜采自内蒙古大青山区 ,由笔者鉴定。对照品
芦丁由北京药品生物制品检定所生产。实验所用试剂均为分
析纯。
2 方法与结果
2. 1 黄酮检识试验:在进行含量测定之前 ,对歪头菜各部位
进行了黄酮检识试验 ,结果见表 1。
表 1 样品的黄酮检识反应
根 茎 叶 花 全草
HCl- Mg反应 - - + + +
AlCl3反应 - - + + +
Mg( Ac) 2反应 - - + + +
  注: “+ ”为阳性反应 “- ”为阴性反应
检识试验结果显示: 黄酮类成分主要存在于叶和花中。
2. 2 最大吸收波长的选择: 以甲醇为溶剂 ,亚硝酸钠、硝酸
铝和氢氧化钠为显示剂 ,分别作歪头菜全草、叶和花以及标
准品芦丁的吸收曲线 ,四者均在 500nm处有一强吸收 ,因此
选择 500nm为测定波长。
2. 3 标准曲线的制备:精密称取在 120℃减压干燥至恒重
的芦丁标准品 197. 3mg ,置 100ml容量瓶中 ,加甲醇溶解并
稀释至刻度 ,摇匀。精密量取 10m l,置 100ml容量瓶中 ,用水
稀释至刻度 ,摇匀。吸取上述溶液 0. 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5.
0、 6. 0ml,各置 25ml容量瓶中 ,分别加入 5% NaNO2液 1m l,
摇匀 ,放置 6min,加 10% Al ( NO3 )3溶液 1ml,摇匀 ,放置
6min,加 4% NaO H溶液 10ml,然后用水释至刻度 ,摇匀 ,放
置 15min。以 0号作空白 ,分别在 500nm处测吸收度 ,绘制标
准曲线 ,得回归方程 C= 8. 6621× 10- 2 A- 7. 1597× 10- 5 , r
= 0. 9998。
2. 4 样品含量测定: 取歪头菜全草、叶和花的粗粉 ( 40目 )
各约 1g于 60℃干燥 6h精密称定 ,分别置回流器中 ,各加石
油醚 180ml,回流 2h,弃去石油醚液 ,加甲醇 60ml,回流提取
4h,放冷 ,过滤至 100ml容量瓶中 ,残渣和容器用少量甲醇多
次洗涤 ,洗液加入容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。 精密
量取全草、叶和花的样品液各 2m l,分别置 25ml容量瓶中 ,
按标准曲线制备项下自加 5% NaNO2起 ,依法测定吸收度。
结果歪头菜全草总黄酮平均含量 1. 0% 、叶为 3. 1% 、花为 4.
8%。
2. 5 加样回收率测定: 取在 60℃干燥 6h后的歪头菜全草、
叶和花的粗粉 ( 40目 )各约 1g ,精密称定 ,分别置回流器中 ,
各加入在 120℃减压干燥至恒重的芦丁标准品 19. 7mg、 19.
6mg、 19. 3mg ,按样品含量测定的方法测定加样回收率 ;求得
全草的平均回收率为 102. 28% , RSD= 0. 40% ;叶的平均回
收率为 101. 02% , RSD= 1. 09% ;花的平均回收率为 99.
42% , RSD= 0. 31% ,见表 2
表 2 样品回收率的测定
全草 叶 花
加入量 (mg /ml) 0. 0157 0. 0157 0. 0154
样品量 (mg /ml) 0. 0080 0. 0248 0. 0385
测得量 (mg /ml) 0. 0241 0. 0407 0. 0538
回收率 (% ) 102. 28 101. 02 99. 42
RSD(% ) 0. 40 1. 09 0. 31
  注:表中所列数据为测定 6次的平均值
3 讨 论
对于歪头菜的入药部位 ,各地有所不同。内蒙古、长白山
等北方地区用其全草〔2〕 ,而贵州等南方地区则用其根和嫩
叶〔3〕。通过对歪头菜各部位的黄酮检识试验以及叶、花、全草
所含总黄酮量的测定结果表明 ,该药材的黄酮类化合物主要
存在于叶和花中 ,茎和根中不含或含量甚微 ,可供作进一步
研究和用药时参考。
参考文献
〔 1〕朱亚民主编 .内蒙古植物药志 (二卷 )〔M〕.呼和浩特: 内
蒙古人民出版社 , 1989, 108.
〔 2〕吉林省中医中药研究所等 .长白山植物药志〔M〕.长春:
吉林人民出版社 , 1982, 657.
〔 3〕江苏新医学院 .中药大词典 (上册 )〔M〕.上海: 上海科学
技术出版社 , 1986, 64.
2001年 10月 24日收稿
352002年 4月 (第 8卷 )第 2期         中国民族医药杂志DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2002. 02. 032