全 文 ：第21卷 第18期
Vol.21 No.18
2015年 9月
September.2015Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
*基金项目：中山市科技攻关项目：凉茶常用药材鸡蛋花活性
成分及质量标准研究（20123A371）
通讯作者：赵斌，E-mail：zhaobin3226794@163.com
鸡蛋花，又名缅栀子，蛋黄花，擂捶花，是夹竹桃科鸡蛋
花属植物鸡蛋花Plumeria rubra L.的干燥花朵。它原产于热
带美洲，现广泛栽种于全球热带地区，在我国则主产于广东、
福建、广西、海南等地。其味甘、淡，性凉，具有清热利湿止痢，
润肺止咳解毒之功效，临床上可用于湿热下痢，里急后重，肺
热咳嗽等症，疗效确切[1]。它是岭南地区习用草药，也是广东
凉茶的主要原料药材之一，如市场销售的著名品牌凉茶“王
老吉凉茶”、“五花茶”等都是以鸡蛋花为主要组成原料。随着
凉茶产业的发展，对鸡蛋花的需求量也越来越大，同时其质
量问题也日益突出。鸡蛋花中的环烯醚萜类物质具有很强的
抗真菌、抑制HIV病毒和肿瘤活性作用[2]，但从已报道的文献
中看，主要是对其挥发油进行研究，尚不见有对其环烯醚萜
类物质的含量进行测定[3-5]。15-去甲基鸡蛋花苷是鸡蛋花中
含有的环烯醚萜苷类成分之一，且其含量比较高。本文首次
采用HPLC法测定鸡蛋花中15-去甲基鸡蛋花苷的含量，为鸡
蛋花的质量控制提供科学依据。
1 仪器与材料
安捷伦1200型高效液相色谱仪（四元泵、柱温箱、VWD检
测器，美国安捷伦科技）；TU-1810型紫外-可见分光光度计
（北京普析通用仪器）；Sartorius BP124S型电子天平(感量：0.1mg，
德国 )；Sartorius BP211D型电子天平 (感量：0.01mg，德国 )；
KQ250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；LSF-
80型高速粉碎机（常德市中药机械厂）。
HPLC法测定鸡蛋花中15-去甲基鸡蛋花苷的含量*
刘 敬1，2，邓仙梅2，3，赵 斌1，4，杨雪怡1
（1.中山火炬职业技术学院生物医药系，广东 中山 528436；2.中山市中医院，广东 中山 528400；3.广东
药学院中药学院，广东 广州 510006；4.国家中药现代化工程技术研究中心中山健康产品分中心，广东
中山 528436）
[摘要] 目的：对鸡蛋花中15-去甲基鸡蛋花苷进行含量测定。方法：采用HPLC，使用Kromasil-C18柱（250×4.6 mm，5 μm），流
动相为乙腈-0.5%磷酸水(8∶92)，流速1.0 mL/min，柱温：30℃，检测波长：210 nm。结果：15-去甲基鸡蛋花苷进样量在0.257~2.575
μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997，n=6)，高、中、低浓度组的平均加样回收率分别为104.02%，103.93%，102.01%，RSD%
分别为0.72%、0.56%、1.71%。结论：该方法能准确测定鸡蛋花中15-去甲基鸡蛋花苷的含量。
[关键词] 鸡蛋花；15-去甲基鸡蛋花苷；高效液相色谱法
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2015）18-0038-03
Determination of 15-to Methyl Frangipani Glycosides in Plumeria Rubra with HPLC
LIU Jing1,2，DENG Xian-mei2,3，ZHAO Bin1,4，YANG Xue-yi1
(1.Department of Biomedicine，Zhongshan Torch Polytechnic，Guangdong Zhongshan 528436, China；2.Hospital of Traditional
Chinese Medicine of Zhongshan，Guangdong Zhongshan 528400，China；3.Guangdong Pharmaceutical University，Guangdong
Guangzhou 510006，China；4.Zhongshan Health Products Center, National Engineering Research Center for Modernization of
Traditional Chinese Medicine，Guangdong Zhongshan 528436，China)
[Abstract] Objective: To determinate the content of 15-to methyl frangipani glycosides in Plumeria rubra. Method: The
HPLC separation was carried out on an Agilent C18 column（250×4.6 mm，5 μm）with a mobile phase of acetonitrile and water
containing 0.5% phosphoric acid (8∶92). The flow rate was 1.0 mL/min at 30℃, and the detection wavelength was 210 nm. Re－
sults: 15-to methyl frangipani glycosides in the range of 0.257~2.575 μg showed a good linear relationship with its peak area
(r=0.9997, n=6); the average recovery of 15-to methyl frangipani glycosides was 104.02%, 103.93%, 102.01% with RSD% of 0.
72%, 0.56%, 1.71%. Conclusion: The method can accurately determine the content of 15-to methyl frangipani glycosides in
Plumeria rubra.
[Key words] Plumeria Rubra；15-to Methyl Frangipani Glycosides；HPLC；Content Determination
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2015.18.012
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September.2015
购买市售鸡蛋花药材（产于广东、广西、云南、湖北共11批），
经国家中药现代化工程技术研究中心曹晖研究员鉴定为夹
竹桃科鸡蛋花属植物鸡蛋花Plumeria rubra L的干燥花朵。
15-去甲基鸡蛋花苷 (自制，纯度为98.7%）。乙腈为色谱纯
（Product of Tedia，United States of America），磷酸为分析
纯（广东光华化学厂有限公司），水为重蒸馏水，其余所用试
剂均为分析纯。
2 色谱条件及系统适应性
Agilent1200高效液相色谱仪(VWD检测器)，Kromasil C18
色谱柱（250×4.6 mm，5μm）；流动相为乙腈-0.5%磷酸水(8：92)，
流速：1.0 mL/min，等度洗脱：15 min；柱温：30 ℃，检测波长：
210 nm，进样量：10 μL。
在该色谱条件下，精密吸取对照品溶液、供试品溶液各
10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图1：15-去甲基
鸡蛋花苷在11.1 min出峰，峰形对称；供试品色谱中，在与之
相应的位置上有相应的峰出现，分离度大于1.5，理论塔板数
按15-去甲基鸡蛋花苷峰计算应不低于6000。
1 15-去甲基鸡蛋花苷
图 1 对照品(A)及样品(B)色谱图
3 方法学考察[6]
3.1 线性关系考察 精密称取15-去甲基鸡蛋花苷对照品
5.0 mg，置于10.0 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻
度，摇匀备用。准确吸取此储备液分别配置成浓度为
0 .0257 mg·mL-1、0.0515mg·mL-1、0.103mg·mL-1、0.1545 mg·mL-1、
0.206 mg·mL-1、0.2575 mg·mL-1的对照品溶液。精密吸取各浓
度对照品溶液10μL注入液相色谱仪，按拟定的色谱条件进行
测定，记录峰面积。以进样量X（μg）为横坐标，峰面积Y为纵
坐标作图，绘制标准曲线，得回归方程为：Y=933.01X＋11.352
（r=0.9997）。结果表明，15-去甲基鸡蛋花苷进样量在0.257～
2.575 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系。
3.2 精密度试验 精密吸取同一对照品液10 μL注入液相色
谱仪，连续进样6次，测定15-去甲基鸡蛋花苷峰面积，RSD%
为1.43%，表明仪器精密度好。
3.3 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液10 μL，分别于
0、2、4、6、8、12，24 h进样测定，记录峰面积，计算15-去甲基鸡
蛋花苷含量，RSD%为1.26%，表明样品供试液在24 h内稳定。
3.4 重复性试验 称取同一批次药材粗粉6份，每份0.2 g，按
供试品制备方法平行制备6份供试品溶液，分别精密吸取10μL
注入液相色谱仪，记录峰面积，计算15-去甲基鸡蛋花苷含
量，RSD%为0.62%，表明采用该方法提取和检测的重复性良
好。
3.5 加样回收率试验 称取已知含量（7.399 mg/g）的药材粗
粉9份，每份约0.1 g，精密称定，分成3组，每组分别精密加入
浓度为1.03 mg/mL对照品溶液0.35 mL，0.70 mL，1.05 mL，再
加50%甲醇至25 mL，称重，超声提取30分钟，冷却，再称定重
量，加50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液再以0.45
μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。精密吸取10 μL进样，测定
峰面积，计算回收率，结果见表1。高、中、低浓度组的平均加
样回收率分别为104.02%，103.93%，102.01%，RSD%分别为0.
72%，0.56%，1.71%，表明该方法准确度高。
表 1 加样回收率试验 （n=9）
组别 取样量(g) 药材含量(mg) 加入对照品量(mg) 测得量(mg) 回收率(%)
1 0.1015 0.7510 0.36051.1287 104.78
1 0.1011 0.7480 0.36051.1204 103.29
1 0.1010 0.7473 0.36051.1222 103.99
2 0.1022 0.7562 0.72101.5080 104.27
2 0.1021 0.7554 0.72101.5071 104.25
2 0.1013 0.7495 0.72101.4940 103.26
3 0.1012 0.7488 1.08151. 322 100.18
3 0.1021 0.7554 1.08151. 764 103.65
3 0.1017 0.7525 1.08151. 576 102.19
注：回收率=100×（测得量-药材含量）/加入对照品量
4 含量测定
4.1 对照品溶液的制备 取15-去甲基鸡蛋花苷对照品适
量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含0.103 mg的溶液，即
得。
4.2 供试品溶液的制备 取药材粗粉约0.2 g，精密称定，置
具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25 mL，称定重量，超声提取
（100 W，40 kHz）30分钟，冷却，再称定重量，加50%甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，滤液再以0.45 μm微孔滤膜滤过，取
续滤液，即得。
4.3 样品的测定 分别称取不同来源的鸡蛋花药材，按供试
品制备方法制备样品溶液，在上述色谱条件下进行测定，采
用外标一点法计算15-去甲基鸡蛋花苷的含量，按照干品算，
测定结果见表2：广东产的鸡蛋花中15-去甲基鸡蛋花苷的含
量均很高，广西产的含量次之，而云南、湖北产的含量很低。
（见表2）
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（收稿日期：2015-03-16 编辑：朱民）
表 2 不同来源鸡蛋花中 15-去甲基鸡蛋花苷的含量
（单位：mg/g，n=2）
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
含量 9.89 16.22 11.88 7.18 4.26 16.59 7.78 8.40 5.05 0.55 0.33
注：S1-S6产于广东；S7-S9产于广西；S10产于云南；S11产
于湖北。
图 2 样品含量均值图
5 讨 论
5.1 测定波长的选择 取15-去甲基鸡蛋花苷加入50%甲醇
配成适当浓度的溶液，于190～400 nm进行波长扫描，其在
210 nm处有最大吸收，故选定210 nm作为本方法的测定波长。
5.2 色谱条件的选择 本试验比较了乙腈-水、乙腈-0.5%
磷酸水、乙腈-1.0%醋酸水三个流动相系统以及不同柱温、不
同流速的测定情况，结果表明采用乙腈-0.5%磷酸水（8：92）
为流动相，柱温度为30 ℃以及1.0 mL/min的流速下测定的色
谱峰分离度好、峰形对称。
5.3 供试品制备方法的选择 本试验比较了不同提取溶剂
（甲醇、50%甲醇、乙醇、和50%乙醇），不同提取方法（超声提
取、回流提取）及不同提取时间（15 min，30 min，45 min，
60 min）对样品的提取效率的影响。结果表明：用50%甲醇超
声提取30 min可将鸡蛋花中的15-去甲基鸡蛋花苷基本提取
完全。
本实验测定了11批鸡蛋花药材中15-去甲基鸡蛋花苷的
含量，结果显示，相同产地但来自不同厂家的鸡蛋花药材中
15-去甲基鸡蛋花苷的含量有一定的差异，这可能与药材的
采收时间、炮制加工方法以及储存保管有关。不同产地产的
鸡蛋花药材之间15-去甲基鸡蛋花苷的含量存在较大差异。
从含量均值图可知，不同产地鸡蛋花药材中含量高低的顺序
为：广东，广西，云南，湖北。这可能与药材产地的土壤条件、
肥料、气候、温度等因素有关。鉴于本次研究结果的特点，为
了对鸡蛋花药材制定比较合理的含量测定标准，尚需要增加
样本量进一步实验分析，并希望可以优化一下鸡蛋花的炮制
工艺，为保证药材质量提供保障。
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（收稿日期：2014-12-07 编辑：李海洋）
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