全 文 ：收稿日期:2004-10-20
作者简介:罗勤(1980-)女 , 四川大学生命科学学院 2002 级硕士研究生.
＊通讯作者
文章编号:　0490-6756(2005)02-0400-03
鸡蛋花愈伤组织诱导和植株再生的研究
罗 勤 ,王健美 ,郭经宇 ,祁星华 ,王 轶 ,杨毅 ,李旭锋＊
(四川大学生命科学学院 , 成都 610064)
摘要:对以鸡蛋花叶片作为外植体进行愈伤组织诱导和植株再生研究 ,发现 MS +NAA 0.1
mg/ L+6-BA 1mg/L 对愈伤诱导效果最好 ,出愈率达 96%;愈伤组织分化为芽时 ,MS +NAA
0.1 mg/L+6-BA 2mg/ L 效果最好 ,分化率达 98%.生根培养基为 1/2 MS+NAA 0.1 mg/L .
关键词:鸡蛋花;组织培养;植株再生
中图分类号:Q943　　　　　文献标识码:A
鸡蛋花(Solanum Melougena L.),又名蛋茄子 ,为茄科的一年生植物.花序单生 ,花开紫色 ,结紫色 、白
色 、黄色小果实 ,形如鸡蛋大小 ,盆栽效果好 ,可以先观花后观果 ,有较高的经济价值 ,属于茄子中观赏性的
品种.原产于欧洲 ,是欧洲常见的观赏植物 ,引进我国的历史不长 ,栽培很少 ,目前其离体培养研究未见报
道.本研究选用“863”航天花卉鸡蛋花为材料.研究表明:植物种子经宇宙飞行后 ,受太空高真空 、微重力 、
高能粒子辐射 、超净 、无昼夜变化的影响 ,其植株形态 、生理 、遗传特性等均会发生不同程度的变化[ 1] .鸡
蛋花种子经太空搭载后 ,花及果实颜色 、大小会出现变化 ,观赏价值有所提高.我们以鸡蛋花叶片为材料进
行了愈伤组织诱导和植株分化的条件研究 ,获得了再生苗 ,并探讨了种子萌发条件和不同因素对芽的诱
导 、增殖及生根的影响 ,为以后进一步的研究其遗传变异等特性提供了试验材料.
1　材料和方法
1.1　试验材料
“863”航天花卉鸡蛋花种子 ,由西南交通大学洪时明教授赠送.
1.2　实验方法
1.2.1　种子萌发　种子用 75%的乙醇表面灭菌 15s ,用无菌水冲洗 2 次;再用 0.1% HgCl2 溶液消毒
8min ,无菌水冲洗 34次 ,分别在 MS 基本培养基 ,MS基本培养基+1mg/L GA3 ,MS 基本培养基+1mg/L
GA3+1×10-3g/mL 6-BA 培养基上接种 20粒种子 25℃避光萌发.
1.2.2　愈伤组织的诱导　选取 3 ～ 10d苗龄的无菌苗为外植体 ,将叶片切为长 、宽各 5mm 的小块置于附
加不同浓度激素的 MS 培养基上进行愈伤组织诱导[ 2] .
1.2.3　分化诱导　选择质地适中的愈伤组织切成5 mm3的小方块 ,转入附加NAA ,6-BA和 2 ,4-D的MS
培养基中诱导丛生芽的生成.
1.2.4　芽的快繁和生根培养　将分化形成的芽芽转入含 NAA 、6-BA的 MS 培养基上快繁.取 3cm 高的
生长旺盛的再生植株转入生根培养基中进行生根培养 ,20d后统计结果.
1.2.5　炼苗和移栽　当再生苗基部分化形成根系后 ,培养室炼苗 1d ,室外炼苗 2d.然后从瓶中取出植株 ,
小心洗去附着的琼脂培养基 ,在室温条件下进行营养土培养.植株成活率达 90%以上.
2005年 4月
第 42卷第 2期
四川大学学报(自然科学版)
Journal of Sichuan University (Natural Science Edi tion)
Apr.2005
Vol.42　No.2
2　结果和分析
2.1　各种因素对种子萌发的影响
由于种子难于萌发 ,因此在加入激素的培养基中 ,种子萌发率比未加激素的培养基中高且萌发时间较
短 ,接种 20d后种子开始萌发 ,其中在添加 1 mg/ L GA3的培养基上种子萌发率较高 ,达 25%.
2.2　不同激素浓度对诱导愈伤组织的影响
实验结果(表 1)表明 ,在添加 NAA 、6-BA和 2 , 4-D不同浓度组合的培养基上均可诱导鸡蛋花愈伤组
织的形成 ,说明鸡蛋花脱分化能力较强 ,但是不同培养基愈伤组织的诱导率明显不同 ,在 0.1mg/ L NAA ,
1mg/L 6-BA的培养基中叶片愈伤组织生长状况最好 ,接种 15d后 ,切口处开始膨大 ,有愈伤组织出现 ,呈
淡绿色 ,较致密 ,出愈率高达 96%.NAA的浓度对愈伤的诱导影响不大.随着 6-BA浓度的增加 ,愈伤组织
的诱导率有所增加 ,但是当浓度较高时愈伤组织较致密 ,生长慢 ,且易褐化 ,有的直接长出须根.在加入
2 ,4-D的培养基上愈伤组织生长较快 ,质地致密 ,较硬(附图).
表 1　植物激素对诱导愈伤组织的影响
Table 1　Effect of auxin on induce callus from leaves
NAA(mg/ L) 6-BA(mg/ L) 2 , 4-D 叶片块数 出愈数 诱导率(%)
0 0 0 50 3 6
0.1 0.5 0 50 12 24
0.1 0.5 0.5 50 29 58
0.1 1.0 0 50 48 96
0.1 3.0 0 50 32 64
0.5 0.5 0 50 21 42
0.5 1.0 1.0 50 29 58
0.5 1.0 2.0 50 32 64
0.5 1.5 1.0 50 34 68
0.5 2.0 0 50 43 86
1 3.0 0 50 30 60
2.3　不同激素浓度对芽分化的影响
选取质地疏松的愈伤组织接种到分化培养 , 20 d 后有芽长出 ,结果如表 2.其中在 MS + 0.1mg/L
NAA +2mg/L 6-BA的培养基中愈伤分化率最高 ,可达98%,每个愈伤组织分化的丛生芽平均可达 10个
左右.较高浓度的 NAA 对鸡蛋花芽的诱导有抑制作用 ,易直接诱导根的生成.高浓度的 6-BA有利于芽的
诱导 ,但随着 6-BA浓度增至 3.0 mg/L 时 ,分化率降低 ,苗易玻璃化 ,还出现了畸形苗.
表 2　植物激素对愈伤组织分化的影响
Table 2　Effect of auxin on differentiation of adventition buds from callus
NAA(mg/ L) (6-BA mg/ L) 接种的愈伤数 出芽数 分化率(%)
0.1 1.0 50 39 78
0.1 1.5 50 45 90
0.1 2.0 50 49 98
0.1 3.0 50 26 52
0.5 1.0 50 25 50
0.5 1.5 50 21 42
0.5 2.0 50 29 58
0.5 3.0 50 13 26
2.4　不同激素浓度对快速繁殖和生根的影响
MS+NAA 0.1mg/ L+6-BA 1mg/L 为鸡蛋花最佳快繁培养基.为减少快繁过程中芽基底愈伤组织的
401第 2期 罗勤等:鸡蛋花愈伤组织诱导和植株再生的研究
形成 ,我们将蔗糖浓度降低到 1 %,此浓度可有效降低愈伤的生成 ,但是植株生长较慢 ,缩短继代时间能加
快其生长.鸡蛋花在低浓度的 NAA 诱导下13 d左右芽基部有白色的根长出 ,生根率高达 100%,且根系发
达.加入 IAA , IBA和高浓度的 NAA的培养基中植株生根率均较低 ,多数芽基部有愈伤组织形成(表 3).
表 3　植物激素对生根的影响
Table 3　Effect of auxin on root grow ing
IAA(mg/ L) IBA(mg/ L) NAA(mg/ L) 接种数 生根数 生根率(%)
0 0 0.01 10 5 50
0 0 0.02 10 10 100
0 0 0.1 10 4 40
0 0 1 10 2 20
0.01 0 0 10 2 20
0.02 0 0 10 4 40
0.1 0 0 10 1 10
0 0.01 0 10 1 10
0 0.02 0 10 2 20
0 0.03 0 10 1 10
0 0 0 10 2 20
附图说明(Account for F ig .)
1.鸡蛋花无菌苗;2.鸡蛋花愈伤组织;3.鸡蛋花分化培养;4.鸡蛋花生根培养
参考文献:
[ 1] 　薛淮 , 刘敏.植物空间诱变的生物学效应及其育种研究进展.生物学通报 , 2002 , 37(11):7 ～ 9
[ 2] 　韩德元.植物生长调节剂———原理与应用[ M] .北京:北京科学技术出版社 , 1997.142～ 147
[ 3] 　吴耀武 , 马彩萍.茄子茎愈伤组织的产生愈植株再生.西北植物研究 , 1981 , (10):52～ 54
[ 4] 　索长江.茄子离体培养研究进展和展望.长江蔬菜 , 1997 ,(9):1 ～ 4
Study of Callus Induction and Plant Regeneration from SolanumMelougena L.
LUO Qin , WANG Jian-mei , GUO J ing-yu , QI Xing-hua , WANG Y i , Y ANG Yi , LI X u-feng
(College of Life Science , Sichuan Universi ty , Chengdu 610064 , China)
Abstract:Regenerable callus and plantlets were obtained from leaf segments of Solanum melougena L.The
result showed that medium of M S+NAA 0.1mg/L +6-BA 1mg/L , was the best to induce callus f rom leaf
segments , the rate of callus is 96%;and the dif ferentiation medium , was the best to induce buds f rom callus ,
and the rate is 98%;and the best roo ting medium was 1/2 MS+NAA 0.02mg/L.
Key words:Solanum melougena L;t issue culture;plant regeneration
402 四川大学学报(自然科学版) 第 42卷