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海南山苦茶提取方法的研究



全 文 :艾朝辉 林连波 刘明生
(海南医学院植物化学研究室) 海口 !##$#
摘要 目的:优化山苦茶的提取方法。方法:采用薄层层析法,以所得浸膏的量及其有效成分为考
查指标,对山苦茶提取方法进行研究。结果:% 种不同提取方式对山苦茶的有效成分的提取效率有
明显影响。结论:山苦茶的最佳提取方法为:将山苦茶用工业乙醇浸渍 &% ’后,以每千克每分钟 #(
) *+的流速缓缓渗漉,收集 #$倍量的渗漉液回收即得。
关键词 薄层层析;山苦茶;海南
分类号 ,-%./))
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海 南 山 苦 茶 V93++4B5; C5>95<++/0>:W系大戟科野生桐属植物V#W,海南盛产,香
味浓郁,民间用作解油腻、助消化的保健饮料。药
理研究表明该植物具有消炎、止痛、利胆消食之功
效V&W。本文为了制定科学合理的提取方案,保证有
效成分的提取效率,对海南山苦茶进行提取方法
的研究。
K 材料与方法
KLK 试剂
工业乙醇。
KLM 材料
本实验所用材料采自海南省万宁市东山岭。
海南师范学院钟义教授鉴定。
KLN 提取方法
将新鲜山苦茶于 !!(.$ X温度下烘干、粉碎
(&$(%$ 目),选择乙醇和水作为提取溶剂,采用以
Y 国 家自然科学基金资助项目(Z[N)$$.$$\\)
海南医学院学报 &$$#,(%):#-(#-]45>73+ 4C G31737 9DOI:10.13210/j.cnki.jhmu.2001.04.003
(下转第 !#页)
$ 卷
下 %种提取方法。
#&’&# 醇浸渍法 依次用 #,(,) 倍量工业乙
醇室温下分别浸渍 * +,过滤,回收溶剂,得干膏。
#&’&! 醇渗漉法 用工业乙醇浸渍 !% +,以每
千克每分钟 #,’ -. 的流速缓缓渗漉,收集 # 倍
量的滤液,回收溶剂,得干膏。
#&’&’ 醇回流法 先用少量工业乙醇将其浸渍
过夜,然后依次用 # 倍量的工业乙醇分别加热回
流 #&* + !次,回收溶剂,得干膏。
#&’&% 水煎煮法 用 # 倍量的水煎煮 ’ -/0,
保持微沸,过滤,将溶剂蒸干后,得干膏。
!# 薄层层析法
将醇浸渍法、醇渗漉法、水煎煮法及醇回流法
所得干膏配制成同浓度的溶液,分别取 # !.,点
在聚酰胺薄层板上,以甲醇1水(%1#)为展开剂,展
距为 ( 2-,取出,晾干。
!以 #3氢氧化钾溶液为显色剂,于
’)* 0-荧光灯下观察,见图 #。
在薄层上先喷过碘酸钠溶液,室温放置
# -/0,再喷对硝基苯胺试液,于 ’)* 0- 荧光灯
下观察,见图 !。
#以 * 3三氯化铝溶液为显色剂,于 ’)* 0-
荧光灯下观察4见图 ’。
$以 # 3磷钼酸溶液为显色剂进行其有效
成分的鉴别,见图 %。
方 法 溶 媒
时间
(+)
得率
(3)
醇浸啧法 工业乙醇 #* !&
醇渗漉法 工业乙醇 !5&!
水煎煮法 水 &* ’%&
醇回流法 工业乙醇 ’ !’&)
表 ! 不同方法提取海南山苦茶浸膏得率比较
#—水煎煮法提取液
6—橙黄色荧光
图 ! 蒽醌类化合物的鉴别
!—醇渗漉法提取液
7—黄色荧光
图 $ 甾类化合物的鉴别
’—醇浸渍法提取液
8—兰绿色荧光
图 % 多酚类化合物的鉴别
%—醇回流法提取液
图 # 山苦茶有效成分的鉴别
$ 结 果
山苦茶提取方法比较见表 #。
% 讨 论
薄层层析表明,山苦茶主要化学成分为多酚
类、蒽醌类和甾类化合物。经前人研究野生桐属植
物的有效成分主要为多酚类化合物、强心甙、三萜
类化合物9’:,因此初步推测山苦茶的有效成分应为
多酚类、蒽醌类和甾类化合物。而山苦茶 %种不同
的提取方法中,以渗漉法最浓,浸渍法各斑点最
淡。
多酚类、蒽醌类和甾类化合物易溶于乙醇、甲
醇等有机溶剂中,相比其它有机溶剂而言,乙醇具
有毒副性小等优点,因此采用乙醇来提取山苦茶
的有效成分。
民间通常用水煎煮中药材,所以在本提取方
法中也进行了水煎煮法试验。虽然水煎煮 ’ -/0
所得浸膏得率最高,但有效成分含量较低,且水提
液中杂质较多,给进一步分离带来许多困难。
由此确定山苦茶提取方法如下:将新鲜山苦
茶于 **,) ;温度下烘干、粉碎(!,% 目),照流
浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典 ! 年
版)4 再用工业乙醇浸渍 !% +,以每千克每分钟 #,
’ -.的流速缓缓渗漉,收集 # 倍量的滤液回收溶
海南医学院学报#5(
魏小斌等!脑瘤患者围术期血清中一氧化氮检测的临床意义
剂即得。
参 考 文 献
陈焕镛 ! 海南植物志(#)! 北京:科学出版社,
$%#!#%
& 华运群! 山苦茶利胆作用及毒性! 中国药理学通报,
$$&,’(#):(()
( 张国文! 野桐属植物化学成分研究概况! 药学通报,
$’’,&((%):(((
(&**+*#+, 收稿)
高于术前及正常对照组(- . *!*,- . *!**)。自
/(、/)、/# 时与 -01 相应时间比较也呈显著性升高
(- . *!*#,- . *!*,- . *!**)。
!! 血清 #$%含量
由表 可知,两组术前(/*)234 含量均较正
常对照组有显著性升高(均 - . *!*#)。-01 组:自
始至终呈下降趋势,自 /&起至 /#,234 较 /*相比
呈显著性降低(/& - . *!*,/( - . *!*,/) - .
*!**,/# - . *!**)。/)、/#时显著低于正常对照
值(- . *!*,- . *!**)。对照组 /较 /*有所降
低,但无显著性差异。自 /&5/#与 -01 相应时间点
比较有显著性差异(/& - . *!*,/( - . *!*,
/) - . *!**,/# - . *!**)。
& 讨 论
一氧化氮(23)是 6+精氨酸在一氧化氮合酶
(234)作用下氧化生成一种极不稳定的气体,半
衰期约 # 7;234根据激活机制和功能不同,可分
为结构型 234(8234)和诱导型 234(9234)。
8234 主要表达于神经元、血管内皮细胞和平滑肌
细胞:(;,该酶属 <=&>及 <=? 的依赖性,8234 激活后
合成、释放的 23 主要起信使调控作用,9234 主要
存在于小脑胶质细胞、星型胶质细胞、中性粒细胞
和巨噬细胞内,该酶属非 <=&>依赖性,生理状况下
该酶活性很低,可忽略不计。9234 的诱导激活需
要 )5% @,该酶一旦被激活,则可大量产生 23,且
持续时间长:);。目前研究提示 9234 的表达和其产
生的 23与细胞毒性有关:#;。颅内肿瘤由于神经组
织受压及颅内压增高,引起脑血流循环改变,出现
脑缺血状态,在脑缺血过程中,23 起的作用是非
常复杂的,具有潜在的有益和有害作用,前者包括
维持脑血流量,抑制血小板或白细胞聚集和粘附;
因 23 可阻断 2?AB 受体,故缺血期产生 23 具
有细胞保护作用;但高浓度 23具有细胞毒性可产
生有害作用。目前研究提示 23产生的缺血最初几
小时内具有有益作用,随后则具有神经毒性作用。
因此,调控颅脑手术患者血中 23、234 含量对脑
保护有重要意义。本研究中,于手术开始前应用异
丙酚静脉持续点滴可显著降低体内 23、234,提
示临床麻醉剂量的异丙酚确有脑保护作用;但是,
异丙酚抑制 23、234 的机制如何和其量效关系,
尚有待进一步研究。
参 考 文 献
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& 帅杰,董为伟! 脑缺血再灌注期 23 的变化及 234 抑
制剂的作用研究!神经生化通讯,$$,,*():#
( 郁毅刚! 急性颅脑外伤患者血中一氧化氮浓度变化及
临床意义!中国急救医学,$$$,$(&):$#5$%
) X9G YZ!, 2=M@=D S=M@V=HW 01CG =DO 0GKQC=M91D! U 6GQE F91C,$$),#%W
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