全 文 ：收稿日期:2007-10-07;　修订日期:2008-01-18
作者简介:陈金月(1957-),女(汉族),广西岑溪人 ,现任广西中医学院第
一附属医院副主任药师 ,主要从事中药药理及临床药学研究工作.
红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生对小鼠的
半数致死量测定
陈金月 1 , 周　芳 2
(1.广西中医学院第一附属医院 ,广西 南宁　530023;
2.广西中医学院 ·药学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 研究红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生对小鼠的半数致死量(LD50)。方法 给小鼠一次性灌胃 , 观察 7 d内小
鼠的毒性反应和死亡情况 ,以小鼠急性死亡率为指标 , 求红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生 3种药物对小鼠 LD50和 LD50的
95%的可信限。结果 红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生的小鼠 LD50分别为 16.78, 91.75 , 129.41g· kg-1。结论 红花夹竹
桃毒性最大 , 其次为红花寄生 ,桑寄生毒性最小。
关键词:红花夹竹桃;　红花寄生;　桑寄生;　小鼠;　半数致死量
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)10-2418-01
LD50 DeterminationofNeriumindicumMil, Scurru-laparasiticaLim andTaxiluschinensis(DC)DanserinMice
CHENJin-yue1 ,ZHOUFang2
(1.TheFirstAfiliatedHospitaltoGuangxiTraditionalChineseMedicineUmiversity, Nanning, Guangxi
530023;2.FacultyofPharmacology, GuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity, Nanning530001, Chi-
na)
Abstract:ObjectiveTodeterminethehalf-lethaldose(LD50)ofthreeChinesecrudedrugs, NeriumindicumMil, Scurru-laparasiticaLimandTaxiluschinensis(DC)Danserinmice.MethodsThedrugsweregiventomiceintragastricaly(ig.)only
once.Thetoxicreactionanddeathofmice7daysafterig.administrationwereobsened, andtheLD50 and95% confidenceinter-valof3drugsweremeasuredwithacutemortalityrateasindex.ResultsTheLD50 ofNeriumindicumMill, Scurru-LaParasitica
LimandTaxilusChinensis(DC)Danserwas16.7, 91.74 and129.41g· kg-1 , respectively.ConclusionNeriumindicumMil
isthemosttoxic, Scurru-LaParasiticaLimtakesthesecondplace, andTaxiluschinensis(DC)Danseristheleasttoxic.
Keywords:NeriumindicumMill;　Scurru-laparasiticaLim;　Taxiluschinensis(DC)Danser;　Mice;　LD50
　　红花夹竹桃 NeriumindicumMill其叶含有夹竹桃苷 、糖苷等
多种物质 , 有较显著的强心作用 , 味苦 , 性寒 , 有毒 , 归心经 [ 1] ,近
代临床用于治疗心力衰竭 、喘息咳嗽 、跌打损伤 、经闭 、斑秃 ,应用
不慎极易发生中毒 [ 1] 。红花寄生 Scurru-laparasiticaLim与桑
寄生 Taxilluschinensis(DC)Danser是同时寄生在红花夹竹桃上
的两种植物 , 但它们的毒性程度不一样。为了阐明 3种药物的毒
性程度不同 , 对其进行 LD50测定 , 为临床安全用药提供依据。
1　材料
1.1　动物 昆明种健康小鼠 , 由广西中医学院实验动物中心提
供 , 合格证号:11004。
1.2　药物 红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生采自广西伊岭岩 ,批
号 2006917, 经广西中医学院中药鉴定教研室廖月葵老师鉴定。
2　方法 [ 2]
2.1　药物制备 分别取红花夹竹桃 、红花寄生及桑寄生 500 g,
用 10倍水浸泡 60 min,武火煮沸 ,改用文火保持沸腾 30min,共 3
次 , 合并滤液 ,浓缩至所需浓度 。
2.2 　LD50测定 取体重 18 ～ 22g的小鼠 120只 ,雌雄各半 , 随机
分为红花夹竹桃组 、红花寄生组 、桑寄生组 , 每组分 4个剂量组
(分别为 1, 2, 3, 4组)按 1∶0.8剂距(桑寄生为 1∶0.9)进行配
药 , 灌胃给药 , 0.2 ml/10g, 药后观察 7 d,记录中毒反应情况及死
亡数 , 按改良寇氏法公式计算各组 LD50及 95%可信限。
3　结果
见表 1 ～ 3。
表 1　红花夹竹桃对小鼠毒性反应情况
组别 剂量C/g· kg-1
对数剂量
(X) 死亡数
死亡率
(p) P2 其他数据
1 24.00 1.3802 10 1.0 1.00 Xm=1.380
2 19.20 1.2833 6 0.6 0.36 i=0.097
3 15.36 1.1864 5 0.5 0.25 ∑P=2.1
4 12.29 1.0896 0 0.0 0.00 ∑P2 =1.61
　　n=10
从表 1可知红花夹竹桃 LD50为 16.78g· kg-1 , 95%可信限
为 15.15 ～ 18.57 g· kg-1。
表 2　红花寄生组小鼠毒性反应情况
组别 剂量C/g· kg-1
对数剂量
(X) 死亡数
死亡率
(p) P2 其他数据
1 120.0 2.079 10 1.0 1.00 Xm=2.079
2 96.00 1.982 4 0.4 0.16 i=0.097
3 76.80 1.885 3 0.3 0.09 ∑P=1.7
4 61.44 1.788 0 0.0 0.00 ∑P2 =1.25
　　n=10
从表 2可知红花寄生 LD50为 91.75g· kg-1 , 95%可信限为
83.23 ～ 101.13 g· kg-1。
表 3　桑寄生组小鼠毒性反应情况
组别 剂量/g· kg-1
对数剂量
(X) 死亡数
死亡率
(p) P2 其他数据
1 144.0 2.158 3 8 0.8 0.64 Xm=2.158
2 129.6 2.112 4 0.4 0.16 i=0.046
3 116.6 2.066 2 0.2 0.04 ∑P=1.5
4 104.9 2.0201 1 0.1 0.01 ∑P2 =0.85
　　n=10
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 10期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.10　
从表 3可知桑寄生 LD
50
为 129.41g· kg-1 , 95%可信限为
115.09 ～ 145.53 g· kg-1。
4　讨论
实验结果表明 , 红花夹竹桃 、红花寄生 、桑寄生 3种药物中 ,
红花夹竹桃毒性最大 , 红花寄生次之 , 桑寄生的毒性最小。根据
有关文献报道 [ 1] , 临床上用夹竹桃叶煎剂口服过量可致死亡 ,服
用有效剂量而发生中毒反应者占 30%左右。红花夹竹桃与红花
寄生的强心作用相同 , 桑寄生强心作用不明显。其强心作用是否
与毒性程度大小有关 ,临床上是否能用红花寄生作为代用品 , 将
有待进一步深入研究。
参考文献:
[ 1 ] 　邢晓娟 .夹竹桃的药理作用与临床应用 [ J] .现代医药卫生 , 2007,
23(16):2466.
[ 2 ] 　陈　奇.中药药理研究方法学 , 第 2版 [ M] .北京:人民卫生出版
社 , 2006:106.
收稿日期:2007-07-18;　修订日期:2008-02-10
作者简介:汤　波(1972-),女(汉族),重庆人 ,现任重庆科技学院化学化
工学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事中药化学和分析化学的研究工作.
竹叶总黄酮提取物的分离纯化方法的研究
汤　波 1 , 刘火安2 , 贾　云 1
(1.重庆科技学院 ·化学化工学院 ,重庆　401331;　2.重庆科技学院 ,重庆　401331)
摘要:目的 优化竹叶总黄酮的分离纯化工艺。方法 采用单因素实验, 以芦丁为标准品 ,用分光光度法测定样品中总黄酮
含量。结果 乙醇浸取浓度 、萃取有机溶剂 、大孔树脂以及乙醇洗脱浓度对竹叶总黄酮的分离纯化有一定影响。结论 竹叶
粉末采用 75%乙醇提取 , 氯仿萃取除杂质, 再经 D101大孔树脂吸附 , 70 %乙醇洗脱 ,可使总黄酮含量达到 85%以上。
关键词:竹叶;　总黄酮;　提取工艺
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)10-2419-02
SeparationandPurificationofTotalFlavonefromBambooLeaves
TANGBo1 , LIUHuo-an2 , JIAYun1
(1.ColegeofChemistryandChem-engineering, ScienceandTechnologyofChongqingUniversity, Chongqing
400042, China;2.DepartmentofBiology, ScienceandTechnologyofChongqingUniversity, Chongqing
400042, China)Abstract:Objective:Tooptimicetheextractiontechnologyoftotalflavoneinbambooleaves.MethodsSinglefactorwasuti-
lizedtooptimizeextractingprocess.Concentrationoftotalflavonewasmeasuredbythespectrophotometer, rutinusedasstandard
sample.ResultsContentofethanol, extractsoforganicsolution, wash-ofsolutionanddifferentkindofresinhadeffectontheex-
tractionoftotalflavonefrombambooleaves.ConclusionWhenpowderofbambooleaveswasextractedwith75% alcohol, chloro-
formisusedtoremoveimpurity, D101resinisusedforadsorption, then70% alcoholisusedtowash-of, thefinalconcentra-
tionoftotalflavonecanexceed85%.
Keywords:Bambooleaves;　Totalflavone;　Extractingtechnology
　　竹叶为禾本科纲竹属植物毛竹 Phyllostachyspubescens的叶
子。竹叶黄酮有抗衰老 、抗应激 、抗疲劳 、调节血脂 、阻断亚硝化
反应 、增强免疫能力 、抗菌 、抑菌等作用 [ 1] 。目前竹叶黄酮被大
量应用于药品 、食品 、化妆品等生产中。
竹叶是在竹材加工过程中的剩余物 , 目前还没有被充分利
用。竹叶主要含有黄酮类化合物 , 用不同溶剂对黄酮类化合物成
分进行提取分离鉴定 , 表明竹叶 Phylostachyspubescens黄酮类化
合物主要成分为碳苷类黄酮化合物 , 如牡荆苷 、异牡荆苷 、荭草
苷 、异荭草苷等。黄酮类成分有明显的抗溃疡 、解痉 、抗菌 、抗炎 、
降血脂 、镇痛和雌性激素等生物活性和生理活性作用。大孔吸附
树脂提取黄酮类化合物已有许多报道 ,如用 DA型大孔吸附树脂
提取四季青总黄酮;应用 D101吸附树脂精制银杏叶提取物
(GBE),制得含黄酮约 38%的 GBE产品;也有用 ZTC澄清剂沉
降 , 在酸性条件下吸附 , 制得 GBE成品的黄酮含量在 26 %
以上 [ 2] 。
大孔吸附树脂是一种多孔性的高分子材料 ,具有多孔性和较
大的比表面积 , 主要通过物理作用从溶液中有选择性地吸附有机
物质 , 从而达到分离纯化的目的 [ 3] 。大孔树脂纯化技术是中药
制药工业中颇具发展前景的实用新技术之一 ,已被成功地应用于
黄酮类 、皂苷类 、生物碱类等药物的提取分离。
本实验采用大孔吸附树脂对竹叶总黄酮进行分离纯化 ,并对
影响提取的一个关键因素进行优化 ,以期找到最佳的制备方法。
1　仪器与试剂
1.1　仪器 日本岛津 UV-1601型紫外可见分光光度计;大孔树脂
分别购于日本三菱公司(SP825, SP207, SP700)、成都晨光化工研
究院 (AB-8, X-5, D101)及天津南开 大学 (HP20, HP2MG,
HP2MGL, NKA-9)。
1.2　试药 竹叶自采于重庆江津 , 晒干后 , 粉碎过筛 , 取过 20 ～
40目的粉末作为浸提实验材料;芦丁对照品(中国生物制品检定
所);其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1 　竹叶总黄酮含量的测定 [ 4] 精密称取于 120℃干燥后的无
水芦丁 20mg,用水溶解 , 定容 100 ml, 得浓度为 0.2 mg/ml的芦
丁标准液。分别精确量取上述标准液 1, 2, 3, 4ml和 5ml置于 10
ml的容量瓶中 ,用 60%的乙醇补充至 5 ml,各加 5%的 NaNO2溶
液 0.3 ml, 摇匀 , 放置 6 min, 再各加 10%的 Al(NO3)3溶液 , 摇
匀 , 放置 6 min,加入 1 mol/L的 NaOH溶液 4 ml,稀释至刻度 , 放
置 20 min, 在 510 nm处测定 , 以吸光度 A对浓度 C进行线性
回归。
C=1.847 5A-1.619 3, r=0.999 9
结果表明 , 芦丁水溶液在 0.02 ～ 0.1 mg/ml范围内与其吸收
度呈良好的线性关系。
移取适量竹叶提取液于 10 ml容量瓶中 ,用 60%的乙醇补充
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.10 时珍国医国药 2008年第 19卷第 10期