全 文 ：现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.7
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山苦茶多糖结构表征及抗氧化活性研究

赵谋明 1，2，刘敏 1，2，林恋竹 1，2，罗维 3，王祝年 4
（1.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640）（2.广东省食品绿色加工与营养调控工程技术研究中心，
广东广州 511400）（3.华南理工大学分析测试中心，广东广州 510640）（4.中国热带农业科学院热带作物品种资
源研究所，海南儋州 571737）
摘要：本文从山苦茶中提取得到两个多糖组分水溶性多糖（MOWP）和碱溶性多糖（MOAP），得率分别为 6.00%和 3.07%。采
用高效凝胶渗透色谱法（GPC）分别测定了 MOWP 和 MOAP 的分子量分布；采用 PMP 柱前衍生-高效液相色谱法（HPLC）分别测
定了 MOWP 和 MOAP 的单糖组成；采用甲基化-气相色谱质谱法（GC/MS）研究了 MOWP 和 MOAP 的糖苷键连接方式。此外，采
用 DPPH·清除法、还原力法以及氧自由基吸收（ORAC）法，评价了 MOWP 和 MOAP 的体外抗氧化活性。结果表明：MOWP 分子
量分别为 906 kDa 和 49 kDa，MOAP 的分子量为 95 kDa。木糖、半乳糖及葡萄糖构成了酸性多糖 MOWP 的骨架结构，而酸性多糖
MOAP 由甘露糖、木糖及半乳糖构成骨架。MOWP 和 MOAP 中→3)-Xylf-(1→、→3)-Galp-(1→以及→3)-Glcp-(1→残基含量均较高。
MOWP 和 MOAP 均有一定的抗氧化能力，MOWP 清除 DPPH·的能力较强，MOAP 具有较强的还原能力和氧自由基吸收能力。
关键词：山苦茶；多糖；单糖组成；糖苷键连接方式；抗氧化
文章篇号：1673-9078(2015)7-61-66 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.7.011
Structural Characteristics and Antioxidant Activity of Polysaccharides from
Mallotus oblongifolius
ZHAO Mou-ming1,2, LIU Min1,2, LIN Lian-zhu1,2, LUO Wei3, WANG Zhu-nian4
(1.College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)
(2.Guangdong Food Green Processing and Nutrition Regulation Technologies Research Center, Guangzhou 511400, China)
(3.Analytical and Testing Center, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) (4.Tropical Cropos
Genetic Resources Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou 571737, China)
Abstract: A water-soluble polysaccharide (MOWP) and an alkali-soluble polysaccharide (MOAP) were isolated from Mallotus
oblongifolius. The MOWP and MOAP yields were 6.00% and 3.07%, respectively. The molecular weights of the MOWP and MOAP were
determined by a high performance gel permeation chromatography assay. The molecular weights of the MOWPs were 906 kDa and 49 kDa, and
the molecular weight of the MOAP was 95 kDa. The monosaccharide composition was determined by a pre-column derivatization assay. Based
on the monosaccharide composition analysis, the MOWP was mainly comprised of glucose, galactose, and xylose. MOAP was mainly
comprised of mannose, galactose, and xylose. The glycosidic bonds of MOWPs and MOAPs were determined by a methylation assay. The
branched MOWPs and MOAPs were composed mainly of →3)-Xylf-(1→, →3)-Galp-(1→ and →3)-Glcp-(1→ in different ratios. MOWPs and
MOAPs exhibited moderate antioxidant capacities. MOWPs showed better DPPH scavenging activity than did MOAPs. MOAPs showed better
reducing power and oxygen radical absorbance capacity than did MOWPs.
Key words: Mallotus oblongifolius; polysaccharide; monosaccharide composition; glycosidic bond; antioxidant activity

山苦茶[Mallotus oblongifolius (Miq.)Muell. Arg.]，
大戟科(Euphorbiaceae)野桐属(Mallotus)植物，又名鹧
鸪茶、禾姑茶、毛茶。山苦茶的分布范围较窄，主要
分布在我国海南岛、中印半岛和苏门答腊岛，在我国
收稿日期：2014-07-25
基金项目：国家自然科学基金资助项目（31101221）；“十二五”国家科技支
撑计划项目（2012BAD37B08-01）
作者简介：赵谋明（1964-），男，博士，教授，研究方向：食品生物技术
仅分布在海南岛以及广东南部少数几个县市[1]。因其
叶泡出的茶香气浓郁，又兼具有清热解毒、利胆消食
的功效，山苦茶在海南民间是一种颇具影响的代茶饮
料，并已开发成为具有浓郁地方特色的旅游产品。山
苦茶中含有约 14%的灰分，6.8%的水分，0.45%的蛋
白质，0.2%的氨基酸，还含有有机酸类，萜类，苯丙
素类，以及钙、镁、锌、锶等矿质元素[2]，山苦茶多
糖是山苦茶中主要活性成分之一。目前，山苦茶醇提
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取物的部分化学成分以及其利胆、镇痛、抗菌、抗病
毒、抗氧化等活性已有研究报道[3~6]，而对山苦茶多糖
的研究仅限于提取分离工艺及简单的抗氧化研究，例
如苏冰霞等采用超声辅助—水提法提取山苦茶水溶
性多糖，其多糖得率为 9.98%，并评价了其抗氧化能
力[6]。但关于山苦茶多糖结构表征的研究鲜有报道。
为了深入了解山苦茶多糖的结构，本文采用水提
法提取山苦茶水溶性多糖，继而采用碱法提取山苦茶
碱溶性多糖。采用高效凝胶渗透色谱法（GPC）测定
了两种多糖的分子量分布；采用 PMP 柱前衍生-高效
液相色谱法（HPLC）、甲基化-气相色谱质谱（GC/MS）
法对两种多糖的一级结构进行了研究，为山苦茶多糖
的结构表征提供指导。山苦茶多糖是山苦茶中重要活
性成分，对其抗氧化活性的研究有利于山苦茶生理功
能研究。因此，本文采用 DPPH 自由基清除法、还原
力法和氧自由基吸收（ORAC）法，研究山苦茶多糖
的体外抗氧化能力。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.1.1 材料与试剂
原料山苦茶购于海南省海口市农贸市场，经中国
热带农业科学院热带作物品种资源研究所王祝年所长
鉴定为大戟科野桐属山苦茶。
95%乙醇、浓硫酸、苯酚、葡萄糖、盐酸、氢氧
化钠、甲醇、冰乙酸、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸酐、
无水硫酸钠、碘甲烷、二甲基亚砜、硼氢化钠、氯化
钠、溴化钾、吡啶、三氯乙酸、铁氰化钾、十二水合
磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、氯化亚铁、三氯化
铁、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）均为分析纯；
乙腈、甲醇均为色谱级，购于德国 Merck 公司；1,1-
二苯基-三硝基苯肼（DPPH）、水溶性维生素 E
（Trolox）、2,2’-偶氮二（2-甲基丙基咪）二盐酸盐
（AAPH）、D-木糖（Xyl）、D-半乳糖醛酸（GalUA）、
D-葡萄糖（Glu）、D-阿拉伯糖（Ara）、D-葡萄糖醛酸
（GlcUA）、D-半乳糖（Gal）、甘露糖（Man）、L-岩
藻糖（Fuc）、L-鼠李糖（Rha）均为标准品，购于美
国 Sigma 公司。
1.1.2 仪器
DFY-500 摇摆式中药粉碎机：温岭市林大机械有
限公司；高功率数控超声波清洗器：昆山市超声仪器
有限公司；旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂；循环
水式真空泵：巩义市予华仪器有限责任公司；电子天
平：梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；UV-2100 紫
外可见分光光度计：广州广一科学仪器有限公司；
GPC-凝胶渗透色谱仪 Waters -1525：美国 Waters 公
司；高效液相色谱仪 Waters -600：美国 Waters 公司；
气相色谱-质谱联用仪 Trace DSQ-II：美国 Thermo 公
司；冷冻干燥器：德国 Christ 公司；TR-5MS 弹性毛
细管柱：美国 Thermo 公司；Venusil MP-C18：天津
博纳艾杰尔科技有限公司；酶标仪：美国 Thermo 公
司；自动定氮仪 KDN-103F：上海纤检仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 山苦茶多糖提取方法
取山苦茶 200 g，烘干粉碎过 60 目筛，80%乙醇
（料液比 1:10）回流提取 2 h，去除醇溶性物质，重
复 3 次，过滤后将滤渣干燥。在滤渣中加入蒸馏水浸
提（120 ℃，料液比 1:10），重复提取 3 次，过滤后
将滤渣干燥，合并滤液浓缩，醇沉 12 h 后离心，沉淀
干燥后过 HP-20 大孔树脂除色素、富集，洗脱液浓缩，
醇沉 12 h 后离心，离心后沉淀用少量水复溶后冷冻干
燥，得山苦茶水溶性多糖（MOWP）。
在滤渣中加入碱液（0.1 mol/L NaOH 溶液）浸提
（120 ℃，料液比 1:10），重复 3 次，合并滤液浓缩，
浓缩液调 pH 值至 7.0，透析三天除去盐，醇沉 12 h
后离心，沉淀干燥后过 HP-20 大孔树脂除色素、富集，
洗脱液浓缩，醇沉 12 h 后离心，离心后沉淀用少量水
复溶后冷冻干燥，得山苦茶碱溶性多糖（MOAP）。
MOWP 和 MOAP 的得率按以下公式进行计算：
%100% ×= 原料重量
干燥后样品重量）得率（
1.2.2 山苦茶多糖总糖、总酚、蛋白质含量的
测定
依照苯酚-硫酸法[8]测定总糖含量。以葡萄糖为标
准品，分别配制 0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/mL
的葡萄糖溶液。分别吸取 1 mL 不同浓度的葡萄糖溶
液加入 10 mL 试管中，加入 6%苯酚溶液 0.5 mL，迅
速加入浓硫酸2.5 mL，振荡使之混匀，静置反应20 min
后，在 490 nm 波长处测定其吸光值。根据不同浓度
葡萄糖溶液的吸光值建立标准曲线。MOWP和MOAP
用蒸馏水复溶后，稀释一定倍数，按照标准曲线测定
方法进行测定，根据标准曲线及稀释倍数可计算样品
中总糖含量。按下列公式进行计算：
%100% ××= ρ
DC）总糖含量（
其中：C 为样品液相当于葡萄糖溶液的浓度（mg/mL），
D 为稀释倍数，ρ为样品溶液的质量浓度（mg/mL）。
采用 Folin-Ciocalteu 法[7]测定样品中总酚含量。
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以没食子酸为标准品，配置成 0.1 mg/mL 的没食子酸
溶液。分别取 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL 没食子
酸溶液置于 10 mL 容量瓶中，加水至 6 mL，摇匀，
各加 Folin-Ciocalteu 试剂 0.5 mL，摇匀，在 1~8 min
内加 20%碳酸钠溶液（m/V）1.5 mL，用蒸馏水稀释
至刻度，摇匀，40 ℃保温 2 h，迅速冷却，立即在 760
nm 处测定吸光度。按照标准曲线的绘制方法测定样
品中总酚含量。按下列公式进行计算：
%100% ××= ρ
DC）总酚含量（
其中：C 为样品液相当于没食子酸溶液的浓度（mg/mL），
D 为稀释倍数，ρ为样品液的质量浓度（mg/mL）。
采用凯氏定氮法测定样品中蛋白质含量。按下列
公式进行计算：
%10025.60140.0)(%100 21 ××××−=
m
CVV）蛋白质含量（
其中：V1 为滴定样品时消耗盐酸的量（mL），V2 为空白
实验消耗盐酸的量（mL），C 为盐酸标准液的浓度（mol/L），
m 为样品质量（g）。
1.2.3 山苦茶多糖的分子量分布测定[8]
分别精密称取葡聚糖标准品，分子量分别为 5.2、
11.6、23.8、48.6、148、273、410、668 及 1400 kDa，
溶于 0.02 mol/L 磷酸二氢钾溶液中，配制成 1 mg/mL
的葡聚糖标准溶液，过 0.22 μm 滤膜，待 GPC 进样分
析。按照如下色谱分离条件测定分子量分布：色谱柱：
G5000PWXL 与 G3000PWXL 凝胶柱串联使用；柱温：
35 ℃；流动相：0.02 mol/L 的磷酸二氢钾溶液；检测
器：示差折光检测器；流速：0.6 mL/min；进样量：
20 μL。
用标准葡聚糖分子量的对数值（logMw）对淋洗
时间作淋洗曲线，获得葡聚糖分子量分布的标准曲线。
样品的测定则是：分别称取 2.0 mg MOWP、MOAP，
溶于 0.02 mol/L 的磷酸氢二钾溶液，配成 2 mg/mL 的
样品溶液，过 0.22 μm 滤膜，进样后，依照上述色谱
分离条件得到各样品的色谱图，依照标准曲线得出样
品分子量分布。
1.2.4 山苦茶多糖的单糖组成分析
山苦茶多糖单糖组成分析方法根据戴军[9]等人的
方法改进。分别配制 1 mg/mL 的各单糖标品（D-木糖、
D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-阿拉伯糖、D-葡萄糖醛
酸、D-半乳糖、甘露糖、L-岩藻糖、L-鼠李糖），分别
加入 100 μm 0.5 mol/L 的 PMP 甲醇溶液，在 70 ℃的
烘箱中衍生化反应 100 min；冷却后用 0.3 mol/L 盐酸
中和；加水到 2 mL 后，加入相同体积的氯仿重复萃
取三次，取水相过 0.22 μm 微孔滤膜，待 HPLC 进样
分析。配制各单糖浓度均为 1 mg/mL 的混合标品，按
照单标的测定方法进行处理，并过 0.22 μm 微孔滤膜，
待 HPLC 进样分析。取 MOWP、MOAP 样品，配制
成 10 mg/mL 的溶液，加入 200 μL 4 mol/L 三氟乙酸
（TFA），121 ℃下水解 120 min；冷却后加入甲醇溶
解，减压旋蒸，重复三次去除 TFA；然后按单标和混
标衍生方法衍生、中和、萃取，并过 0.22 μm 微孔滤
膜，待 HPLC 进样分析。
色谱条件：色谱柱为：Venusil MP-C18，2.1×30
mm，5 μm；流动相：0.02 mol/L 磷酸盐缓冲液（pH 6.7）
-乙腈（V:V，83:17）；柱温：30 ℃；检测波长：250 nm；
流动相流速：1 mL/min；进样体积：20 μL。
1.2.5 山苦茶多糖的糖苷键连接方式测定
本文选用甲基化法[8]研究山苦茶多糖的糖苷键连
接方式。MOWP 和 MOAP 样品分别超声溶解于
DMSO，加入碘甲烷避光甲基化反应 12 h，然后甲基
化衍生物经 4 mol/L 三氟乙酸 110 ℃水解反应 2 h，再
经硼氢化钠还原、吡啶乙酰化，最终得到部分甲基化
的糖醇乙酰衍生物，过 0.22 μm 微孔滤膜后待气质联
用分析。
GC-MS 分析条件：色谱柱：TR-5MS 弹性毛细管
柱；载气为：99.99%高纯度氮气；升温程序：初始柱
温为 150 ℃，保持 2 min，以 10 ℃ /min 的升温速度
将柱温升至 180 ℃，保持 2 min，再用 15 ℃ /min 升
温速度升至 260 ℃，保持 5 min；流速：1 mL/min；
进样量：1 μL；分流比：10:1；进样口温度：250 ℃；
质谱条件：传输线温度为 280 ℃；离子源温度为
250 ℃；电子能量为 70 eV；质量扫描范围为 m/z
33~500 u。
1.2.6 山苦茶多糖 DPPH 自由基清除能力测定
[10]
Trolox 标准曲线的绘制。Trolox 的浓度梯度设置
为 0、1、5、10、12、15、18、20 μg/mL。分别取 2 mL
不同浓度的 Trolox 溶液与 2 mL 0.2 mmol/L 的 DPPH
乙醇溶液混匀，置于暗处避光反应 30 min 后，在 517
nm 波长处测吸光值。以 2 mL 水和 2 mL 无水乙醇作
为基准调零。
样品的测定。将 MOWP 和 MOAP 配制成 0.5
mg/mL 的水溶液，按标准曲线测定方法进行测定。将
样品的吸光值带入标准曲线，换算得到 DPPH 值，即：
每 100 克样品相当于 Trolox 的量（g Trolox equivalents
/100 g）。
1.2.7 山苦茶多糖还原力测定[11]
标准曲线的绘制。配置100 mg/mL的Trolox溶液，
并将其按照 0、10、20、40、60、80 μg/mL 的浓度梯
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度进行稀释处理。各取 1 mL 稀释液，加入 1 mL pH 6.6
的磷酸盐缓冲液和 1 mL1%（m/V）铁氰化钾溶液，漩
涡混匀于 50 ℃的水浴锅中保温 20 min 后，加入 10%
（m/V）的三氯乙酸（TCA）溶液 1 mL，在 3000 g 离
心 10 min 使沉淀完全，吸取上清液 1 mL，加入 1 mL
蒸馏水和 0.1%（m/V）氯化铁溶液 0.2 mL，混匀，静
置 10 min 后，在 700 nm 处测其吸光值。
样品的的测定。将 MOWP 和 MOAP 配制成 0.5
mg/mL 的水溶液，按标准曲线测定方法进行测定。将
样品的吸光值带入标准曲线，换算得到还原力值，即：
每 100 克样品相当于Trolox 的量（g Trolox equivalents/
100g）。
1.2.8 山苦茶多糖 ORAC 值测定
ORAC 的评价方法参考 Lin 等[8]的方法，并加以
改进。以 Trolox 为标准品，建立标准曲线，Trolox 的
浓度梯度为 0、20、40、60、80、100、200 μmol/L。
在洁净的 96 孔板的微孔中分别加入一定浓度的山苦
茶多糖样品20 μL，加入pH 7.4的磷酸盐缓冲液20 μL，
以及浓度为 7 nmol/L 的荧光素溶液 20 μL，将 96 孔板
放在酶标仪中，37 ℃下保温 15 min，加入 140 μL
AAPH 后，开始计时反应并读数（f0），设定激发波长
为 485 nm、发射波长为 538 nm，每 1 min 读一次数(f1，
f2，…，f100)，共读 101 次数（测定 100 min）。将每次
读数连成曲线。AUC 表示曲线下的面积。
AUC=0.5（f0+ f100）+（f1+f2+…+f99）
Net AUC=AUCsample-AUCblank
Trolox 浓度与其 Net AUC 成正比，将样品 Net
AUC 代入，换算得到 ORAC 值，即：每 g 样品相当
于 Trolox 的量（μmol Trolox equivalents/g）。
1.2.9 数据分析
每个实验重复三次，所有数据均使用均数±标准
偏差（S.D.）来表示。使用 SPSS 19.0 软件对数据进行
分析处理，使用方差分析进行显著性分析，p<0.05 认
为差异具有显著性。
2 结果与讨论
2.1 山苦茶多糖得率及组成成分分析
山苦茶多糖MOWP 和MOAP 的得率分别为 6.00
± 0.32%和3.07 ± 0.53%，山苦茶多糖MOWP和MOAP
的总糖含量分别为 30.95 ±1.49%和 35.03±1.60%，而蛋
白质和总酚含量均较低。可知，多糖提取前进行醇提，
再经大孔树脂纯化及多次醇沉，能除去样品中大部分
酚类物质。山苦茶多糖是山苦茶中一个重要组成成分，
其活性对山苦茶的生理功能可能存在重要作用。
表1 山苦茶多糖得率及组成成分分析
Table 1 Yield and chemical composition of two polysaccharide
fractions from M. oblongifolius
多糖样
品
得率
/%
总糖
/%
蛋白质
/%
总酚
/%
MOWP 6.00±0.32 30.95±1.49 1.24±0.01 3.36±0.05
MOAP 3.07±0.53 35.03±1.60 1.87±0.02 4.54±0.16
2.2 山苦茶多糖分子量分布的研究
本文通过高效凝胶渗透色谱法测定了 MOWP 和
MOAP 的分子量分布，分别如图 1a 及 1b 所示。计算
分子量大小的标准曲线方程为：
9992.0,69.141.842.136.8log 23221 =−+−= −− RVeVeeVeMw
其中，Mw 代表样品分子量，V 代表淋洗体积。


图 1 山苦茶多糖组分的分子量分布
Fig.1 The molecular weight distribution of polysaccharides from M.
oblongifolius
注：a：MOWP 的分子量分布；b：MOAP 的分子量分布。
结果表明：MOWP 含有两个分子量分布不同的多
糖，它们的平均分子量分别为 906 kDa 及 49 kDa；
MOAP 的分子量分布比较集中，平均分子量为 95
kDa。多糖分子量分布中的单峰代表分子量分布均一
的一类多糖，不代表一种多糖。多糖的活性与聚合度
与分子量大小有关，这可能与多糖形成的高级构型有
关。多糖分子量大小对多糖活性具有重要影响，适宜
的分子量大小有利于多糖活性的发挥。据 Sun 等[12]
报道，分子量 100~200 kDa 的多糖具有很强的抗肿瘤
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活性，而相同来源的分子量为 5~10 kDa 的多糖则没有
活性，但有些分子量为 10 kDa 的多糖则具有很强的抗
HIV 的活性。而分子量在 6.55~256 kDa 的多糖均表现
出较强的抗氧化活性。同时，多糖的活性还取决于其
他结构因素，例如单糖组成和糖苷键连接方式。
2.3 山苦茶多糖单糖组成研究
本文采用 PMP 柱前衍生-高效液相色谱法分别测
定了山苦茶水提和碱提多糖的单糖组成，如表 2 所示。
根据混合单糖标准品 PMP 衍生物在液相中的保留时
间（图 2），可以分别确定 MOWP 和 MOAP 的单糖组
成。结果表明：MOWP 和 MOAP 中都含有 5 种单糖
和 2 种糖醛酸，包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳
糖和木糖以及葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。根据这 5 种
单糖和 2 种糖醛酸的摩尔比，可知木糖、半乳糖、葡
萄糖是构成 MOWP 最主要的单糖，而 MOAP 则主要
由甘露糖、木糖和半乳糖构成。由于 MOWP 和 MOAP
的单糖组成中都含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸，说明
这两种多糖都是酸性杂多糖。据报道[11]，鱼腥草水溶
性多糖也是一种酸性杂多糖，单糖组成同样主要由甘
露糖、木糖、半乳糖、葡萄糖和鼠李糖组成，其体外
抗氧化实验表明该水溶性多糖比其他溶剂提取的多糖
具有更好的自由基清除能力和还原能力。
表2 山苦茶多糖组分的单糖化学组成分析
Table 2 Chemical composition of two polysaccharide fraction from
M. oblongifolius
多糖
样品
单糖组成/(mol%)
Man Rha GlcUA GalUA Glu Gal Xyl
MOWP 12.38 8.31 7.20 11.84 17.88 18.78 23.60
MOAP 27.99 5.51 9.35 8.31 6.51 18.47 23.86

图2 衍生化后的混合单糖标准品的液相色谱图
Fig.2 Liquid chromatogram of mixed monosaccharide standards
after derivatization
注：1-甘露糖（RT：11.917）；2-鼠李糖（RT：15.735）；
3-葡萄糖醛酸（RT：20.817）；4-半乳糖醛酸（RT：22.025）；
5-葡萄糖（RT：25.639）；6-半乳糖（RT：34.690）；7-木糖（RT：
40.464）；8-阿拉伯糖（RT：43.456）；9-岩藻糖（RT：48.386）。
2.4 山苦茶粗糖苷键连接方式研究
为进一步研究山苦茶多糖的结构，通过碘甲烷甲
基化多糖，水解后，经硼氢化钠还原，乙酸酐衍生化，
经气相色谱-质谱法分析山苦茶多糖样品中糖苷键的
连接方式，结果如表 3 所示。结果表明：山苦茶多糖
中存在 13 种不同类型的糖苷键，但这 13 种糖苷键在
MOWP 和 MOAP 中的摩尔比不同。
MOWP 主要由→3)-Xylf-(1→、→3)-Galp-(1→以
及→3)-Glcp-(1→残基按 10.24:8.07:7.74 的摩尔比构
成，说明 MOWP 主要由木糖残基、半乳糖残基以及
葡萄糖残基组成。MOAP 主要由→3)-Xylf-(1→、
→3)-Galp-(1→以及→3)-Glcp-(1→残基按 9.51:6.27:
4.37 的摩尔比构成，说明 MOAP 主要由木糖残基、半
乳糖残基以及葡萄糖残基组成。→3,6)-Manp-(1→残基
的出现，说明 MOWP 和 MOAP 这两种多糖为带有支
链结构的多糖。
多糖主链上糖苷键的类型也是决定多糖活性的
重要因素。构成山苦茶多糖的→3)-Glcp-(1→残基是具
有抗氧化活性的剑麻多糖的重要组成成分 [10]，苦艾活
性多糖主要由→3)-Galp-(1→残基组成[13]，五味子活性
多糖中含有→3,6)-Manp-(1→残基[14]。
表3 山苦茶多糖组分糖苷键连接方式
Table 3 Glycosidic linkage of two polysaccharide fractions from M.
oblongifolius
连接方式 MOWP/mol% MOAP/mol%
→3)-Xylf-(1→ 10.24 9.51
→3)-Rhap-(1→ 3.57 2.28
Manp-(1→ 1.62 1.83
→6)-Manp-(2→ 2.99 3.38
→3,6)-Manp-(1→ 1.78 4.22
Glcp-(1→ 1.60 1.00
→3)-Glcp-(1→ 7.74 4.37
GlcUAp-(1→ 1.00 1.54
→3)-GlcUAp-(1→ 1.43 2.17
Galp-(1→ 2.64 2.22
→3)-Galp-(1→ 8.07 6.27
GalUAp-(1→ 1.82 1.36
→3)-GalUAp-(1→ 2.43 1.68
2.5 山苦茶多糖抗氧化活性研究
根据山苦茶多糖体外抗氧化方法 DPPH·法、还原
力法及 ORAC 法的结果均表明，MOWP 和 MOAP 均
有一定的抗氧化能力，但抗氧化能力不及 Vc，且对不
1
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同自由基的清除能力不同。从表 4 我们可以发现，
MOWP 的清除 DPPH·的能力大于 MOAP，而 MOAP
的还原能力和 ORAC 的能力强于 MOWP。DPPH·法
和 ORAC 法的测定结果表明：MOWP 和 MOAP 的抗
氧化活性存在显著性差异（P>0.05）。根据还原力法的
测定结果，MOWP 和 MOAP 的抗氧化活性没有显著
性差异（P<0.05）。DPPH·法基于电子转移，反映样品
的还原能力；还原力法是基于氧化还原反应，即铁离
子还原能力；ORAC法是基于质子转移的抗氧化方法，
反映样品对氧自由基的清除能力。因此，不同反应机
制的抗氧化方法导致不同评价结果。同时，分子量、
单糖组成以及糖苷键连接方式等结构上的差异，均是
导致 MOWP 和 MOAP 抗氧化活性差异的原因。
表4 山苦茶多糖抗氧化能力
Table 4 Antioxidant ability of two polysaccharide fractions from M.
oblongifolius
多糖
组分
DPPH 值
/(g Trolox
equivalents /100 g)
还原力值
/(g Trolox
equivalents /100 g)
ORAC 值
/(μmol Trolox
equivalents/g)
MOWP 14.72 ± 0.50a 8.98 ± 0.21a 271.67 ± 11.23a
MOAP 5.40 ± 0.17b 10.13 ± 0.44a 323.16 ± 17.34b
Vc 513.38±5.14c 258.00±3.72b 1734.80±17.15c
注：数据来自三次实验的平行值；对于同种测定指标，同
列中标注不同角标者具有显著性差异（p＜0.05）。
山苦茶多糖是酸性多糖，含有较多的葡萄糖醛酸
和半乳糖醛酸，糖醛酸上的羧基对供氢和电子转移具
有重要作用。同时，山苦茶多糖分子上含有半缩醛活
性羟基，它们发生氧化还原反应、失去 H 质子后，形
成相对稳定的自由基，最后分解成对人体无害的产物，
因此可以作为天然抗氧化剂。
3 结论
3.1 本文从山苦茶中分别水提、碱提得到两个多糖组
分，经大孔树脂除色，得到 MOWP 和 MOAP，提取
率分别为 6.00%和 3.07%。MOWP 分子量为 906 及 49
kDa，主要由木糖、半乳糖、葡萄糖构成，糖苷键组
成 主 要 由 →3)-Xylf-(1→ 、 →3)-Galp-(1→ 以 及
→3)-Glcp-(1→残基构成。MOAP 分子量为 95 kDa，
主要由甘露糖、木糖和半乳糖构成，糖苷键组成主要
由→3)-Xylf-(1→、→3)-Galp-(1→以及→3)-Glcp-(1→
残基构成。
3.2 山苦茶多糖MOWP和MOAP具有一定的抗氧化
能力，但能力均不及 Vc。两者之间的抗氧化能力的差
异在于 MOWP 具有较强的清除 DPPH·的能力，而
MOAP 具有较强的还原能力和氧自由基吸收能力。分
子量的差异和单糖组成、糖苷键连接方式等结构上的
不同都是造成其活性不同的原因。而要完整阐述山苦
茶多糖分子结构与功能的关系，则需要进一步研究多
糖的结构。多糖的结构，特别是高级结构的研究对揭
示多糖的生理功能及构效关系十分重要。
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