全 文 :药物研究
作者简介:李晓艳,女,本科,助教,主要从事药物质量控制及药理作用研究。E - mail:179268883@ qq. com
通信作者:李香,女,硕士,副教授,主要从事中药质量控制及成分研究。
不同产地八月瓜总黄酮的含量比较
李晓艳 刘 杰 刘义伟 严 锐 许义红 李 香*
贵州省黔南民族医学高等专科学校,贵州 都匀 558000
【摘 要】 目的:紫外分光光度法测定不同产地八月瓜中总黄酮的含量。方法:以 70%乙醇、80℃水浴回流 1h,料液比 1∶25,测定
波长 510nm。结果:总黄酮回归方程为 C = 9. 452 × 10 -2A - 4. 362 × 10 -3 (R = 0. 9992),在 0. 0154 ~ 0. 0769mg 范围内有良好的线性关系,
平均加样回收率为 98. 90% (RSD为 1. 91%)。结论:不同产地八月瓜总黄酮含量存在一定差异。
【关键词】 八月瓜;不同产地;总黄酮;紫外分光光度法
【中图分类号】R284. 1 【文献标志码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2016)07 - 0013 - 02
the Total Flavonoids Content Comparisonof Holboellia latifolia in Different Regions
LI Xiaoyan LIU Jie LIU Yiwei YAN Rui XU Yihong LI Xiang*
Qiannan Medical College for Nationalities,Duyun 558000,China
Abstract:Objective To establish a method of determining the total flavonoids content of Holboellia latifolia in different regions by
Uv - spectrophotometry. Methods With 70% ethanol,water circumfluence for an hour in 80℃,ratio of solid to liquid 1∶25,and de-
tection wavelength 510nm. Result The total flavonoids has a good linear relationship in 0. 0154 - 0. 0769mg. The regression equation
is C = 9. 452 × 10 -2A - 4. 362 × 10 -3 (R = 0. 9992). And the average sample recovery rate is 98. 90% (RSD = 1. 91%). Conclu-
sion The total flavonoids content of Holboellia latifolia has some differences in different regions.
Key words:Holboellia latifolia;different regions;total flavonoids;Uv - spectrophotometry
八月瓜为三叶木通 Akebia trifoliate (Thunb. )Koidz 的
果实,具有消肿、镇痛、通乳、抗癌的作用。其主要化学
成分为齐墩果酸、黄酮、多糖等成分[1 - 2]。实验采用紫外
分光光度法测定 5 个不同产地八月瓜中总黄酮含量,为不
同产地八月瓜的质量研究提供依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 紫外可见分光光度计 (GBC cintra 20 澳大利
亚);WS205 十万分之一电子天平 (瑞士梅特公司);DZG
- 6000 电热恒温鼓风干燥箱 (上海森信实验仪器有限公
司);HA - 4 恒温水浴锅 (常州澳华仪器有限公司);
HS10260D超声波清洗机。
1. 2 材料 葡萄糖 (批号:20141110,天津市科密欧
化学试剂开发中心);芦丁对照品 (批号:0080 - 9705,
中国药品生物制品检定所);所用试剂均为分析纯。八
月瓜药材采于贵州云顶、大定、云雾、王司、都匀,由
黔南民族医学高等专科学校李香副教授鉴定为木通科木
通属落叶木质藤本植物 Akebia trifoliate (Thunb. ) Koidz
的果实。
2 方法与结果
2. 1 波长的确定 取芦丁对照品及八月瓜样品的铝配合物
测定液,以相应试剂为空白对照,在波长 200 ~ 600nm 扫
描,扫描结果显示两者在 510nm 处有最大吸收,故实验选
取 510nm作为测定波长。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称量芦丁对照品 25. 64mg,
置 50ml容量瓶中,加入 60%的乙醇定容至刻度,摇匀,即
配制成浓度为 0. 5128mg /ml的对照品溶液。
2. 3 供试液的制备[3] 称取干燥至恒重、过四号筛的八月
瓜药材约 0. 1 g,加入 2. 5ml 的 70%的乙醇 80℃回流 1h。
过滤,水浴浓缩挥干溶剂。加入 60%乙醇微热溶解转移至
25ml容量瓶中,定容至刻度即得供试液。取 0. 5ml 的各样
品溶液至 10ml的试管中,加入 1ml 的 5% NaNO2 溶液,摇
匀,放置 5min,加入 1ml 的 10% Al (N03)3 溶液,摇匀,
放置 5min,加入 5ml的 6%NaOH溶液,用 60%乙醇定容至
刻度,摇匀,放置 5min,作为待测液。
2. 4 方法学考察[4]
2. 4. 1 标准曲线的制备 精密吸取标准品母液 0. 3、0. 5、
0. 7、0. 9、1. 1、1. 3、1. 5ml 置 10ml 试 管 中。加 5%
NaNO21. 0ml,摇匀放置 5min;加 10% Al (N03)3 1. 0ml,
摇匀放置 5min;加 6%NaOH溶液 5. 0ml,加 60%乙醇至刻
度,摇匀放置 5min,得浓度为 0. 0154、0. 0256、0. 0359、
0. 0462、0. 0564、0. 0667、0. 0769mg /ml 的对照品溶液。以
相应试剂作空白对照,于 510nm 处测定吸光值。得回归方
程为:C = 9. 452 × 10 -2 A - 4. 362 × 10 -3 (R = 0. 9992) (C
为浓度,A为吸光度)其。表明吸光度与浓度在 0. 0154 ~
0. 0769mg范围内有良好的线性关系。
2. 4. 2 精密度实验精密 称取八月瓜药材粉末约 0. 1 g,
按“2. 3”项制备供试液及显色。以相应试剂作空白对照,
在 510nm波长处测定吸光值,重复测定 6 次,记录吸光值,
总黄酮质量分数的 RSD为 0. 71%。
2. 4. 3 稳定性实验 精密称取八月瓜粉末约 0. 1g,同
“2. 3”项操作,以相应试剂作空白对照,在 510nm 波长处
测定吸光度,每 0. 5h测定一次吸光值,共测定 7 次。记录
·31·中国民族民间医药 2016年 4月第 25卷第 7期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 7
吸光度,总黄酮质量分数的 RSD 为 1. 78%,表明在 3h 内
样品溶液基本无变化。
2. 4. 4 重复性实验 按“2. 3”项操作,制备供试液 6 份。
进行显色。以相应试剂作空白对照,于 510nm 处测定吸光
值,记录吸光度,总黄酮质量分数的 RSD 为 1. 54%,结果
表明本方法重复性良好。
2. 4. 5 回收率实验 精密称取八月瓜粉末 9 份,每份约为
0. 1g,按 80%、100%、120%比例量加入已配制好芦丁对
照品溶液。按“2. 3”项制备供试液并显色。以相应试剂作
空白对照,于 510nm 处测定吸光值,记录吸光度,平均回
收率为 98. 90%,总黄酮质量分数的 RSD 为 1. 91%,表明
试验方法可行。见表 1。
表 1 回收率实验 (n = 9)
试验号 样品含量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /% 总平均回收率 /% 平均 RSD /%
1 7. 42 5. 94 13. 24 97. 98
2 7. 43 5. 94 13. 28 98. 48 99. 27 1. 83
3 7. 42 5. 94 13. 44 101. 35
4 7. 44 7. 44 14. 70 97. 58
5 7. 43 7. 44 14. 89 100. 27 99. 15 1. 41 98. 9 1. 91
6 7. 44 7. 44 14. 85 99. 6
7 7. 44 8. 93 16. 02 96. 08 98. 28 2. 48
8 7. 43 8. 93 16. 17 97. 87
9 7. 42 8. 93 16. 43 100. 89
注:回收率% = (测得总量 -样品含量) /加样量 × 100%。
2. 5 样品含量测定 取 5 种不同产地八月瓜,每个产地采
集不同 3 个区域,各 1. 0g,据“2. 3”项制备供试液,测定
吸光度,计算各产地总黄酮含量。结果见表 2。
表 2 样品总黄酮含量测定 (n = 5)
产地 云顶 大定 云雾 都匀 王司
总黄酮 /% 3. 81 2. 16 2. 05 1. 89 2. 86
3 讨论
八月瓜作为药食两用的一种野生中药,具有抗菌、抗
肿瘤作用,实验以黄酮成分作为测定指标,采用分光光度
法测定贵州不同产地八月瓜总黄酮含量,为八月瓜更好的
开发研究提供一定依据。
实验中,云顶与王司两个产地的总黄酮含量相对高,
不同产地的含量存在一定差异。
参考文献
[1] 刘桂艳,王晔. 木通属植物木通化学成分及药理活性研究概况 [J].
中国药学杂志,2004,39 (5):330 - 332.
[2] 李金光,孪嘉瑞. 三叶术通果实生物学特征盈营养成分的研究 [J].
广西植物,1991,11 (2):189 - 192.
[3] 李香,孙济平,彭小冰. 三叶木通中总黄酮的提取工艺研究 [J]. 辽
宁中医药大学学报,2008,10 (12):152 - 153.
[4] 赵虹桥,唐克华. 小血藤总黄酮的提取研究 [J]. 食品科学,2007,27
(7):158 - 161.
(收稿日期:2016. 01. 22
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)
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3 讨论
小儿腹泻是多种因素引起的疾病,是儿童发病率最高
的疾病之一。西医治疗主要以抗生素治疗为主,但长期使
用会造成肠道菌群失调,功能紊乱会加重腹泻。蒙医药在
治疗小儿腹泻方面积累了丰富的经验,采用蒙西医结合的
方法治疗可以取长补短,优势互补,起到标本兼治的效果。
蒙医认为小儿脏腑发育未成熟,形气未充,小儿脾常不足,
脾胃运化功能薄弱,加之感受外邪,饮食内伤,湿热蕴郁
等因素而致腹泻。蒙医治疗是依据患儿各方面的反应,辨
证施治,既重视病因,又注意疾病发展的阶段性,既重视
病症,又注意体质的差异性。蒙药七雄丸主治黏热、肠刺
痛、瘟疫、脑刺痛等疾病均有疗效;蒙药四味止泻散主治
腑热、肠刺痛、热泻、聚合疫等有特效;蒙药清浊五味主
治胃火衰退、巴达干黏液阻于脉道、精华不消等均有疗效。
本次研究中,治疗组总有效率明显高于对照组,两组差异
有统计学意义 (P < 0. 05)。
综上所述,蒙西医结合治疗运用于临床,尤其是对小
儿腹泻病的治疗的确具有单纯应用蒙药或西药所不及的
优势。
参考文献
[1] 朱艳屏. 中医治疗小儿腹泻 113 例临床体会 [J]. 中医临床研究,
2011,3 (24):12 - 13.
[2] 中华人民共和国. 中国腹泻病诊断治疗方案 [J]. 中国实用儿科杂志,
1998,13 (6):381.
[3] 乌兰. 蒙医病证诊断疗效标准 [M]. 北京:民族出版社,2007:152.
[4] 中华人民共和国卫生部. 中药新药临床研究指导原则 (试行)[M]. 3
版. 北京:中国医药科技出版社,2002:272 - 276.
(收稿日期:2016. 01. 22)
·41· 中国民族民间医药 2016年 4月第 25卷第 7期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 7