全 文 ：2015 年 04 月(上)
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质，本试验为抗菌肽的开发利用提供了参考，为抗菌
肽饲料添加剂、抗菌肽微生态制剂研制提供了强有力
的数据支持。
参考文献:
［1］ 谭淑樱．鸡、鸭肠道抗菌肽的提取及部分生物学活性研究［D］．
合肥:安徽农业大学，2009．
［2］ 陈琛．微生物源抗菌肽研究概况［J］．生物技术通报，2010(7) :
59 － 63．
［3］ 胡胜兰，李卫芬，孙建栋，等． 蜜蜂肽 Apidaecin 突变体的体外稳
定性［J］．中国兽医学报，2013，33 (8) :1259 － 1262．
［4］ 郑文官，张捷，杨刚齐，等．抗菌肽［L6，K11］－ IsCT 抑菌性能及
其稳定性研究［J］．中国畜牧兽医，2013，40 (4) :153 － 158．
(011)
收稿日期:2014 － 06 － 04;修回日期:2015 － 01 － 16
作者简介:袁华根(1981 －)，男，讲师，硕士，研究方向为畜禽
疾病防治技术，yuanhuagen@ 163． com．
通信作者:周广生(1953 －)，男，教授，硕士，研究方向为畜禽
传染病防治．
寄生藤注射液对接种新城疫病毒
鸡胚的体外抑制试验
袁华根，桂文龙，周广生
(江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300)
中图分类号:S852． 65;S853． 76 文献标识码:B 文章编号:1004 － 7034(2015)04 － 0191 － 03
鸡新城疫是由副黏病毒Ⅰ型引起的一种高度接
触性传染病，对鸡、鹅、鸽等多种禽类有致病性，死亡
率高，给养禽业造成巨大的经济损失，是鸡病中危害
最严重的传染病之一［1］，几十年来，该病主要以预防
接种来控制流行，免疫效果也比较好，但由于有时免
疫程序不正确、疫苗保管不当等多种因素的影响，往
往导致免疫失败而发病［2］。自新城疫发生后，抗生
素、磺胺类药物无治疗作用，利巴韦林对新城疫病毒
有一定作用，但效果不太理想，这些都严重制约了养
禽业的发展［3］。
寄生藤是檀香科植物寄生藤的全株，生于山坡灌
丛中［4］，分布于福建、广东、海南、广西、云南等地。
现代药学研究表明，寄生藤有疏风清热、活血止痛、抗
菌、抗病毒等作用。本试验应用寄生藤注射液对人工
接种新城疫病毒的鸡胚进行体外抑制试验，旨在为今
后临床应用提供理论依据。
1 材料
1． 1 试验动物
SPF鸡胚，购自山东省农业科学院家禽研究所。
1． 2 新城疫毒株
国内标准强毒株 F48 E9，由哈尔病兽医研究所
提供。
1． 3 药品
寄生藤注射液，由江苏农牧科技职业学院研制;
利巴韦林注射剂，由济南利民制药有限公司生产;生
理盐水注射液，由安徽双鹤药业有限责任公司生产。
1． 4 1%鸡红细胞悬液的制备
无菌采集鸡血，加抗凝剂，离心去血浆，沉淀用生
理盐水洗涤 3 次，每次 2 000 r /min离心 10 min，然后
弃掉上清液，用生理盐水配制成浓度为 1%的鸡红细
胞悬液。
2 方法
2． 1 半数致死量的测定
将病毒尿囊液稀释不同倍数，接种 SPF 鸡胚，测
定胚胎半数致死量。
2． 2 药物毒性试验
本试验分为 5 小组，每小组 4 枚 10 日龄鸡胚。
用生理盐水对中药注射液作 2 倍、3 倍、5 倍稀释，将
中药注射液原液及不同浓度的药液分别接种于 4 枚
10 日龄鸡胚的尿囊液中，0． 2 mL /枚，置 37． 8 ℃恒温
箱中孵育 72 h，每天观察鸡胚的存活情况，以鸡胚全
部存活的最高药物浓度为正式试验的起始浓度。同
时设生理盐水对照组。
2． 3 寄生藤注射液对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用
用筛选的寄生藤注射液与西药利巴韦林利进行
对比试验，设 4 组，每组 15 枚 10 日龄鸡胚，观察寄生
藤注射液的临床效果。试验鸡胚分组情况与处理见
表 1。
各组鸡胚均在 37． 8 ℃恒温箱中孵育，每天照蛋
2 ～ 3 次，弃去 24 h 内死胚。收取 24 ～ 72 h 死胚和
72 h活胚尿囊液，低温保存，备用。采用血凝(HA)试
验检测每组鸡胚尿囊液的病毒效价。
191《黑龙江畜牧兽医》科技版
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2015.0545
表 1 试验鸡胚的分组情况与处理
组别
鸡胚数
量 /枚
处理
第Ⅰ组 15 病毒尿囊液 0． 1 mL，寄生藤注射液 0． 2 mL
第Ⅱ组 15 病毒尿囊液 0． 1 mL，西药利巴韦林 0． 2 mL
第Ⅲ组 15 病毒尿囊液 0． 1 mL，生理盐水 0． 2 mL
空白对照组 15 不接种病毒尿囊液，不给药
3 结果与分析
3． 1 新城疫病毒的毒性试验结果
经测定，鸡胚病毒尿囊液半数致死量的稀释度为
1∶15 000 000，正式试验接种稀释度为 1 ∶30 000 000
的尿囊液。
3． 2 寄生藤注射液的毒性试验结果
试验结果显示，接种各浓度寄生藤注射液的鸡胚
在 24，48，72 小时后均无死亡，故以原液作为正式试
验的起始浓度。
3． 3 寄生藤注射液对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用
(结果见表 2)
表 2 寄生藤注射液对鸡新疫病毒增殖抑制作用
的测定结果
组别
24 ～ 72 h
死胚数 /枚
72 h活
胚数 /枚
HA效
价 / lb
第Ⅰ组 3 12 0
第Ⅱ组 4 11 4
第Ⅲ组 7 8 7
空白对照组 0 15 0
由表 2 可知，第Ⅰ组鸡胚在 24 ～ 72 h 死亡 3 枚，
至 72 h存活 12 枚，鸡胚发育正常，无出血，见 251 页
彩图 1A。收集 3 枚死胚与 12 枚活胚的尿囊液，HA
效价为 0。第Ⅱ组鸡胚在 24 ～ 72 h死亡 4 枚，至 72 h
存活 11 枚，鸡胚发育不良，全身弥漫性出血，见 251
页彩图 1B。收集 4 枚死胚与 11 枚活胚尿囊液，HA
效价为 4 lb。第Ⅲ组鸡胚在 24 ～ 72 h内死亡 7 枚，鸡
胚发育不良，全身弥漫性出血，见 251 页彩图 1C。收
集7 枚死胚和 8 枚活胚尿囊液，HA 效价为 8 lb。空
白对照组在 72 h内无鸡胚死亡，鸡胚发育正常，无出
血，见 251 页彩图 1D。收集所有活胚尿囊液，HA 效
价为 0。
4 结论与讨论
第Ⅰ组鸡胚在 24 ～ 72 h 死亡 3 枚，至 72 h 存活
12 枚，鸡胚发育正常，无出血现象，这说明寄生藤注
射液与鸡新城疫病毒同时接种鸡胚时，寄生藤注射液
有保护鸡胚作用，对鸡胚无毒性作用，并能完全抑制
鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。
第Ⅰ组、第Ⅱ组的寄生藤注射液和西药利巴韦林
分别与鸡新城疫病毒同时接种鸡胚，均能抑制鸡新城
疫病毒在鸡胚中的增殖，在临床上对鸡新城疫的预防
和治疗均有一定作用，第Ⅰ组的寄生藤注射液对鸡新
城疫病毒的抑制作用高于第Ⅱ组的西药利巴韦林。
鸡新城疫是由新城疫病毒感染引起的重要传染
病。近年来，由于疫苗的广泛应用，使该病多以慢性
或散发为特点，新城疫病毒感染致病的宿主范围有扩
大趋势，水禽、猪感染新城疫病毒的报道不断增多，新
城疫发病后还无较好的有效疗法，用中药治疗畜禽病
毒性传染病已有很多成功经验，但用中药寄生藤注射
液治疗鸡新城疫未见报道。因此，本试验为今后临床
应用探索提供了一定的理论依据。
参考文献:
［1］ 岳华，徐世军，刘群，等．“双黄杀毒退烧颗粒”对鸡新城疫的防
治效果［J］．畜牧与兽医，2005，37(12) :48 － 49．
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毒后血液生理生化指标及抗体效价的影响［J］． 畜牧与兽医，
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［4］ 宋立人，吴贻谷，胡烈，等． 中华本草［M］． 上海:科学技术出版
社，1999． (011)
291
Heilongjiang Animal Science
and Veterinary Medicine № 04 2015
2015 年 04 月(上)
·动物保健品·
牛心朴子生物碱对小鼠急性毒性试验的病理组织学观察
(作者张永康 等，正文见第 183 ～ 184 页)
图 1 心脏病理组织学变化 图 2 肺脏病理组织学变化
图 3 肝脏病理组织学变化 图 4 肾脏病理组织学变化
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·动物保健品·
寄生藤注射液对接种新城疫病毒鸡胚的体外抑制试验
(作者袁华根 等，正文见第 191 ～ 192 页)
A 第Ⅰ组 B 第Ⅱ组
C 第Ⅲ组 D 空白对照组
图 1 各组鸡胚发育情况
152《黑龙江畜牧兽医》科技版