全 文 ：反相离子对高效液相色谱法
测定颠茄合剂中阿托品的含量＊
林观样1 ,徐晓卫1 ,潘柔和2
(1.浙江省温州医学院附属第一医院药剂科 , 325000;2.浙江省温州市药品检验所 , 325000)
[ 摘　要] 　目的　建立反相离子对高效液相色谱法测定颠茄合剂中阿托品含量的方法.方法　固定相:Alltima-
C18色谱柱(4.6 mm×250 mm , 5μm);流动相:0.05 mol·mL-1庚烷磺酸钠水溶液-乙腈(65 ∶35);检测波长:210 nm。 结
果　阿托品在 8 ～ 120 μg·mL-1范围内 , 峰面积与浓度呈良好的线性关系 , 回归方程为 A =15 308.163 9C -
72 915.407 3 , r=0.999 5 ,平均回收率 99.87%, RSD =1.75%。结论　该方法简便 、快速 、准确 , 可用于测定颠茄合剂
中阿托品的含量。
[ 关键词] 　颠茄合剂;阿托品;含量测定;反相离子对高效液相色谱法
[ 中图分类号] 　R971.9;R927.2　　　[文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2005)02-0150-02
Determination of Atropine in Mistura Belladonnae with Reversed Phase Ion-
pair HPLC
LIN Guan-yang 1 , XU Xiao-wei1 , PAN Rou-he2(1.Department of Pharmacy , The First Hospital
A f f i liated with the Wenzhou Medical College , Zhej iang Province , Wenzhou 　325000 , China;2.
Wenzhou Insti tute for Drug Control , Zhej iang Province , Wenzhou　325000 , China)
ABSTRACT　Objective　To se t up a reversed phase ion-pair HPLC method fo r the determination of a tropine in mistura
belladonnae.　Methods　An Alltima- C18(4.6 mm×250 mm , 5 μm)column served as the stationary phase.and the mobile
phase w as 0.05 mol·mL-1sodium heptane sulfonate-acetonitrile(65 ∶35).The detection waveleng th was 210 nm.　Results　
A good linear relationship was show n betw een the peak area and concentration of atropine when the concentration of the drug
w as in the range of 8-120 μg·mL-1 , The regression equation was A =15 308.163 9C-72 915.407 3 , r=0.999 5.The
average recovery rate w as 99.87%, RSD =1.75%.　Conclusion　The method w as shown to be simple , rapid , accurate and
may be used for the determination of a tropine in mistura belladonnae.
KEY WORDS　Mistura belladonnae;Atropine;Determination;Reversed phase ion-pair HPLC
　　颠茄合剂是我院常用制剂 ,临床上主要用于治疗
胃肠道痉挛引起的疼痛。笔者在参考薄层扫描法[ 1] 、
高效液相色谱法[ 2]的基础上 ,经过对多种色谱条件的
筛选 ,采用反相离子对高效液相色谱法 ,可以快速 、准
确地测定样品中阿托品含量。
1　仪器与试药　
Waters515高效液相色谱仪 , Waters2487 紫外检
测器 , TU-1901紫外分光光度计 ,HS 色谱数据处理软
件 ,硫酸阿托品对照品(中国药品生物制品检定所 ,供
含量测定用 ,批号 715-200010),颠茄合剂(温州医学
院附属第一医院制剂室 , 批号:040206 , 031230 ,
031022), 庚烷磺酸钠(山东禹王实业总公司化学试剂
厂),甲醇和乙腈(色谱纯),纯化水 ,其他试剂分析纯。
2　方法与结果　
2.1　色谱条件　色谱柱为Alltima-C18(4.6 mm×250
[ 收稿日期] 　2004-04-27　　　[ 修回日期] 　2004-06-01
[ 基金项目] 　＊温洲医学院科研发展基金项目(基金编号
2003Y04)
[ 作者简介] 　林观样(1968-), 男 , 浙江苍南人 , 主管药
师 ,学士 , 从事医院药学 、天然药物研究。电话:0577-88069552。
mm ,5 μm);流动相:0.05 mol·mL-1庚烷磺酸钠水溶液
-乙腈(65 ∶35);流速:1.5 mL·min-1;检测波长:210
nm;柱温:40 ℃,理论板数≥1 600。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取 120℃干燥至恒
重的硫酸阿托品对照品 10 mg ,置于25 mL容量瓶中 ,
加流动相适量 ,使溶解 ,用流动相定容 ,作为储备液 。
2.3　样品及阴性对照液的制备　取尼泊金乙酯 0.3 g
溶于 200 mL 热的纯化水 ,氯仿 3 mL 溶于纯化水中 ,
合并两种溶液 ,加入颠茄酊 50 mL , 并稀释至 1 000
mL ,作为样品溶液。另按此法配制不含颠茄酊的溶液
作为阴性对照液 。
2.4　系统适应性试验　分别取对照品溶液 、样品溶
液 、阴性对照液各 20 μL 注入色谱仪 ,记录色谱图 ,详
见图 1。由图 1 可见 ,阿托品的保留时间为 5.2 min ,
阴性对照色谱图在阿托品峰位置无假阳性峰 ,即本试
验条件下阿托品与其他组分分离完全 ,表明其他组分
对测定无干扰。阿托品与其他组分峰的分离度>1.5 ,
理论塔板数为 2 188。
2.5　线性关系考察　分别精密量取储备液 1.0 , 2.0 ,
5.0 ,10.0 , 15.0 mL 置于 50 mL 容量瓶中 ,用流动相
·150· Herald of Medicine Vol.24 No.2 February 2005
稀释至刻度 ,摇匀。用孔径为 0.45 μm 的微孔滤膜滤
过 ,进样 20 μL ,以峰面积(以吸光度 A 表示)为纵坐
标 ,硫酸阿托品浓度(C)为横坐标进行线形回归。得
回归方程为 A =15 308.163 9C-72 915.407 3 , r =
0.999(n=5),结果表明阿托品在 8 ～ 120 μg·mL-1范
围内呈良好的线性关系。
A 对照品溶液　　B 样品溶液　　C 阴性对照
1.东莨菪碱　　2.山莨菪碱　　3.阿托品　
图 1　3 种溶液的高效液相色谱图　
2.6　精密度试验　依上述方法对同一对照品溶液
(0.040 mg·mL-1)连续进样 5次 ,每次进样 20 μL ,并
进行测定 ,测定结果得 RSD =0.68%。可见本方法具
有较好的精密性 ,所选定的色谱条件系统稳定 。
2.7　重现性试验　取同一批号(040206)颠茄合剂 ,直
接进样 ,分别依法测定 。结果 ,阿托品含量 21.12 μg·
mL-1 , RSD =0.66%。表明本方法重现性好 。
2.8　稳定性试验　按照含量测定条件 ,对同一批样品
(040206)在 0 ,2 , 4 , 8 ,12 ,24 ,36 h分别进样 20 μL ,测
定阿托品峰面积 ,计算阿托品含量 , RSD =0.11%。
说明样品稳定性好。
2.9　回收率试验　参照样品测定项 ,精密称取 8份样
品 ,其中 4份加入标准贮备液适量 ,测定加样回收率 ,
得阿托品平均回收率为 99.87%, RSD =1.75%.
2.10　样品的含量测定　精确吸取样品溶液 5份 ,用
孔径为 0.45 μm的微孔滤膜滤过 ,各进样 20 μL ,按外
标法测定其含量。 3 批样品批号分别为 040206 ,
031230 ,031022 ,测得含量分别为 21.12 , 20.41 ,21.23
μg·mL-1 , RSD 分别为 0.40%,1.11%,1.23%。
3　讨论　
颠茄合剂中含有阿托品 、山莨菪碱 、东莨菪碱 3种
生物碱 ,经过对不同磷酸盐 、不同浓度(0.02 , 0.01 ,
0.005 mol·L-1)缓冲溶液与甲醇或乙腈以不同配比(65
∶35 , 70 ∶30 , 75 ∶25)筛选 ,并加入不同离子对试剂
(己烷磺酸钠及辛烷磺酸钠), 比较其不同浓度
(0.08%,0.05%, 0.04%),不同 pH 值条件(pH 值=
3.0 , 3.5)下阿托品与另两种生物碱分离的情况。最终
确定 0.05%庚烷磺酸钠溶液与乙腈(65 ∶35)组成的
流动相为最佳条件 ,使得阿托品与另两种生物碱完全
分离 。实验中流动相流速 1.5 mL·min-1 ,阿托品的保
留时间以 5.2 min为宜 ,如保留时间太短 , 3种生物碱
难以完全分离。
[ 参考文献]
[ 1] 　朱若华 , 苏文斌 ,叶能胜 , 等.薄层扫描法测定洋金花中 3
种莨菪生物碱的研究[ J] .分析试验室 , 2003 , 22(4):
59-61.
[ 2] 　李惠芬 张庆伟 张晓梅 , 等.应用离子对色谱技术同时测
定天仙子中的三种生物碱[ J] .中草药 , 1999 , 30(3):
184-185.
妇科一号方中氯霉素的含量测定
李肖玲 ,陆国红 ,蒋贤武 ,祝德秋 , 崔　岚
(上海第二医科大学附属仁济医院临床药学实验室 ,200001)
[ 摘　要] 　目的　建立妇科一号方中氯霉素的含量测定方法。方法　采用紫外分光光度法测定妇科一号方中氯霉
素的含量 ,以(278±1)nm 为测定波长。结果　氯霉素浓度在 5 ～ 30 μg·mL-1范围内与吸收度呈线性关系(r=0.999), 处
方量的平均回收率为 101.2%, RSD =0.90%。结论　该方法简便 、准确 , 适合于对医院制剂进行质量控制。
[ 关键词] 　氯霉素;妇科一号;紫外分光光度法
[ 中图分类号] 　 R927.2;R984　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2004)02-0151-02
Determination the Content of Chloramphenicol in Fuke No.1 Prescription
LI Xiao-ling , LU Guo-hong , JIANG Xian-wu , ZHU De-qiu , CUI Lan(Department of Clinical
Pharmacy , Renj i Hospital Af f il iated wi th the Shanghai Second Medical University , Shanghai 　
200001 , China)
ABSTRACT　Objective　To set up a method fo r the determination of chloramphenicol in Fu ke No.1 prescription.　
Method　The content of chloramphenicol w as measured by ultraviolet spectrophotometry at a w avelength o f(278 ±1)nm.
·151·医药导报 2005年 2月第 24卷第 2期