全 文 ：谱条件 ,分别进样 10μl , 以对照品浓度(μg/μl)为横坐标(X),
主峰面积为纵坐标(Y)作图 , 回归方程为:Y=4457032X +
980.7812 , r=0.9999 , 线性范围 0.36 ～ 1.80μg。
2.3　精密度实验　取样品测定项下对照品溶液 ,重复进样 5
次 ,每次 10μl , 测定峰面积。 RSD=1.5%。
2.4　稳定性实验　取同一供试品 , 在 0 , 3 , 6 和 12h , 分别进
样 10μl测定峰面积。 RSD=0.32%。
2.5　重复性实验　取批号为 980620 的同一批样品 , 按样品
测定法测定 6次 , 计算大黄素的含量。 RSD=2.12%。
2.6　加样回收率　取已知含量的本品(批号为 980620)内容
物 5份 , 精密称定 ,各加入对照品溶液(0.32mg/ml)2 ml ,按样
品测定法测定 , 分别计算回收率 , 平均回收率为 99.14%,
RSD=0.81% 。结果见表 1。
表 1　大黄素加样回收率
样品中大黄
素的量/μg
大黄素加
入量/μg
测定结果
/μg
回收率
/ %
平均回
收率/ %
RSD
/ %
6.23 6.40 12.66 100.4
5.89 6.40 12.23 99.0
6.53 6.40 12.82 98.2 99.14 0.81
7.00 6.40 13.35 99.2
5.96 6.40 12.29 98.9
2.7　样品测定　精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10μl ,
分别注入液相色谱仪。测定峰面积 , 计算即得。每批样品各
测定 3次 , 结果见表 2。
3　讨　论
3.1　本法测定大黄素简便 , 准确 ,快速 , 重现性很好。
3.2　目前 , 排毒养颜胶囊的质量控制仅仅限于定性 , 而该药
表 2　样品测定结果
批　号 测定结果/mg·g-1 平均含量/mg·g -1
980620 6.45　6.44　6.46 6.45
980517 6.29　6.39　6.26 6.28
980621 6.22　6.24　6.23 6.23
的主要成分大黄素起主要功效 ,因此测定大黄素的含量就成
为控制其内在质量的重要指标。
3.3　样品提取方法及条件考察　分别对样品氯仿提取次数
进行考察 ,比较峰面积的大小 , 结果见表 3。可见选择二次是
合理 、经济和节约时间的。
表 3　提取方法对大黄素含量的影响
提取次数 峰面积积分值 提取次数 峰面积积分值
1 838230 2 868130
3 868230 4 868191
5 868222
参考文献
1 刘伟 ,梁生旺.薄层扫描法测定淋结消中总大黄素的含量.中国药
学杂志 , 1999 , 34(10)∶689.
2 许韦 ,魏尊喜 ,朱建永.HPLC法测定黄连上清中大黄素含量.首都
医药 , 1999, 6(6)∶28.
3 唐刚 ,罗国安 ,王义明.高效液相法测定结脉冲剂中大黄素 、大黄
酚 、大黄素甲醚的含量.药物分析杂志 , 1999 ,19(5)∶340.
4 杨光 ,林跃.苏灵感冒颗粒中的葛根素含量测定.中国现代应用药
学 , 1999, 16(2)∶22.
收稿日期:1999-12-23
分光光度法测定颠茄片中莨菪类生物碱的含量
祝　明　胡梅素(杭州 310004 浙江省药品检验所)
摘要　目的:建立用分光光度法测定颠茄片中莨菪类生物碱的含量。方法:采用在一定的 pH 溶液中 , 莨菪类生物碱与酸性染
料溴甲酚绿定量地结合成有色离子对 , 用有机溶剂提取后比色测定 , 测定波长为 415nm , 硫酸阿托品为对照品 。结果:在 0 ～
17.5μg/ ml浓度范围内线性良好 ,平均回收率为 101.1%。结论:本方法操作简便 、准确 、实用 , 可作为颠茄片的含量测定方法。
关键词　莨菪类生物碱;硫酸阿托品;分光光度法;含量测定
Determination of hyoscymine alkaloides in belladonne tablet by spectrophotometry
Zhu Ming(Zhu M),Hu Meisu(Hu MS)(Zhejiang Institute for Drug Inspection , Hangzhou 310004)
ABSTRACT　OBJECTIVE:To set up a method to determine the content of hyoscymine alkaloides in belladonne tablet by spectrophotometry.
METHOD:Hyoscymine alkaloides reacts with bromomethyl phenol to produce a colorful ionic couple at a certain pH solution.Product is
extracted using CHCl3 solvent and determined by spectrophotmetry.The detection wavelength is 415nm.Atropine sulfuric acid is used as
reference standard.RESULTS:The calibration curve is linear within the range of 0 ～ 17.5μg/ml for hyoscymine alkaloides.The average
·51·中国现代应用药学杂志 2001年 2月第 18卷第 1期　　　　　　　　　　　　　　　　　Chin JMAP , 2001 February , Val.18 No.1
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2001.01.027
recovery is 101.1% and the related standard deviation is 1.0%.CONCLUSION:The method is simple , accurate and practical for the
determination of hyoscymine alkaloides in belladonne tablet.
KEY WORDS　hyoscymine alkaloides , atropine sulfuric acid , spectrophotometry , content determination
　　中国药典一部收载颠茄草 、颠茄酊 、颠茄流浸膏 、颠茄浸
膏及颠茄片 ,除片剂外 , 其余四种均收有含量测定项 , 均为酸
碱滴定法。若颠茄片采用同样方法 , 取样量很大 , 每批含量
测定至少要 600片以上(一式二份), 为此各版中国药典均没
有收载含量测定项。为了有效地控制颠茄片的质量 , 有必要
寻找更好的含量测定方法。颠茄片由颠茄草制成 , 颠茄草主
含莨菪类生物碱 , 如 l-莨菪碱(l-hyoscyamine)、dl-阿托品(dl-
hyoscyamine)及少量的东莨菪碱[ 1] 。对于颠茄草中莨菪类生
物碱含量测定的方法有容量法 、比色法和高效液相色谱
法[ 2] ,但未见有对颠茄片中含量测定的报道。阿托品为 l-莨
菪碱外消旋体 ,其物理化学性质极为相似 , 并且莨菪碱在贮
藏 、加工和提取过程中逐渐转化为外消旋体阿托品[ 2] 。故本
文用目前可获得硫酸阿托品对照品作为本文的对照品 ,在一
定的 pH 溶液中 , 颠茄片中的莨菪类生物碱与酸性染料溴甲
酚绿定量地结合成有色离子对 ,用一定的溶剂萃取后进行比
色测定 ,折算求出颠茄片中莨菪类生物碱的含量。该方法样
品用量少 , 操作简便 , 准确 , 实用 , 可作为颠茄片的含量测定
方法。
1　仪器与试药
岛津 UV-260紫外分光光度仪 ,硫酸阿托品(中国药品生
物制品检定所),溴甲酚绿 、氯仿 、邻苯二甲酸氢钾 、氢氧化钠
等均为分析纯试剂。颠茄片样品(浙江温州制药厂 , 河南开
封制药厂和石家庄制药集团有限公司)。
2　方法与结果
2.1　供试品溶液制备条件的选择
考虑到颠茄片中以莨菪碱为代表的生物碱不一定以盐
的状态存在 ,为此用加一定量 0.0125mol/ L硫酸来溶解 ,使生
物碱成盐 ,溶解于水中。与直接用水溶解比较 , 过滤容易 , 且
溶液澄清 ,含量也较高 , 同批样品测定结果 ,加硫酸的平均每
片含0.084mg , 不加酸的每片平均含 0.080mg ,因此 , 提取时需
要加 0.0125mol/L的硫酸溶液。
对超声提取的时间亦作了比较 , 结果超声提取 20min 最
好。
2.2　试验方法
2.2.1　对照品溶液制备　精密称取在 120℃干燥至恒重的
硫酸阿托品对照品 25mg , 置 50ml 量瓶中 , 加水稀释至刻度 ,
摇匀 ,即得(每 1ml含硫酸阿托品 50μg)。
2.2.2　供试品溶液的制备　取本品 30 片 ,精密称定 , 求出平
均片量 ,研细 , 过 5号筛 , 精密取适量(约 12 片量), 置具塞三
角烧瓶中 ,精密加 0.0125mol/ L硫酸溶液 5ml , 摇匀 ,再精密加
水 20ml , 超声处理 20min ,用干燥滤纸滤过 , 即得。
2.2.3　测定法　精密量取对照品与供试品溶液各 2ml ,分别
置预先精密加入氯仿 10ml 和溴甲酚绿溶液(取溴甲酚绿
50mg 与邻苯二甲酸氢钾 1.021g ,加 0.2mol/ L氢氧化钠 6.0ml
使溶解 , 再加水稀释至 100ml 摇匀 , 必要时滤过)2.0ml的分
液漏斗中 ,加 2 滴 0.2mol/ L氢氧化钠溶液 , 剧烈振摇约 1min ,
静置使分层 ,分取澄清的氯仿液 , 照分光光度法在 415min 波
长处分别测定吸收度 ,计算 , 并将结果乘以 0.8552。
2.3　吸收波长的选择与空白试验
经对硫酸阿托品对照品和颠茄片供试品溶液测定 ,二者
的最大吸收波长均在 415nm , 空白样品 415nm 处无吸收 ,故本
文选择 415nm 为测定波长。
2.4　标准曲线绘制
本方法以硫酸阿托品为对照品 ,制成每1ml含 0.05mg 的
溶液作为对照品溶液 ,精密量取 0 , 0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 , 2.5 , 3.0
和 3.5ml分别置预先精密加入氯仿 10ml和溴甲酚绿溶液2.0
ml的分液漏斗中 , 并分别以水补足对照溶液至 4.0ml的量。
按法操作 ,以吸收度(A)为纵坐标 , 浓度(C)为横坐标作标准
曲线 ,回归得到线性方程为:A=0.00233+0.312C , r=0.9995
(n=8)。实验证明本品在 0 ～ 17.5μg/ml之间呈良好的线性
关系。
2.5　稳定性试验
本方法显色比较稳定 , 在 5 个小时内吸光度几乎无变
化。
2.6　重复性试验
取某药厂生产的颠茄片 , 批号为 970101 按 2.2 项下方
法 ,测定 7 次 ,测定的相对标准偏差为 0.7%, 说明本方法有
较好的重现性。
2.7　回收率试验
取同批样品进行加样回收试验(按硫酸阿托品算),结果
见表 1。本方法的平均回收率为 101.1%, 相对标准偏差为
1.0%。
表 1　回收率试验结果
称样量
/ g
样品中含
量/mg
加入硫酸阿
托品量/mg
测得总含
量/mg
回收率
/ %
1 0.4229 0.0584 0.1016 0.1627 102.7
2 0.4227 0.0584 0.1016 0.1602 100.2
3 0.4231 0.0585 0.1016 0.1613 101.2
4 0.4227 0.0584 0.1016 0.1608 100.8
5 0.4232 0.0585 0.1016 0.1604 100.4
2.8　样品测试
本文测定了国内 3 家药厂生产的 11 批颠茄片样品 , 结
果见表 2。
3　讨　论
3.1　采用的对照品为硫酸阿托品 , 而测定的是莨菪类生物
碱以阿托品计算 ,因此最后计算要乘以 0.8552 的换算因数系
1g 硫酸阿托品相当于阿托品的量(g),换算因数由下式求得:
·52· Chin JMAP , 2001 February ,Val.18 No.1　　　　　　　　　　　　　　　　　中国现代应用药学杂志 2001年 2月第 18卷第 1期
表 2　11批样品总生物碱测定的结果
批　号 平均含量每片按(C17H23NO3)计算/mg 相对偏差/ %
911201a 0.093 0.2
950602a 0.079 1.0
960801a 0.084 0.1
961102a 0.088 0.8
961201a 0.086 1.6
970101a 0.083 1.0
970604b 0.077 0.3
971101c 0.095 0.6
971102c 0.099 0.2
971103c 0.092 1.4
960802a 0.078 1.7
a-浙江温州制药厂;b-河南省开封制药厂;c-石家庄制药厂
C17H23NO3
C17H23NO3· 12 H2SO4
=289.42
338.42=0.8552
3.2　如果按每片标示量为 10mg(浸膏)和药典规定浸膏含莨
菪类生物碱的量为 0.95%～ 1.05%计算 , 每片含莨菪类生物
碱按阿托品(C17H23NO3)计算应为 0.095 ～ 0.105mg。 但从样
品测定的结果(表 2)看 ,大多数批号含量偏低 ,因此有必要建
立含量测定方法 ,以控制药品的质量。
3.3　本文介绍的方法曾与中国药典现有的颠茄叶及其制剂
的含量测定方法酸碱滴定法进行比较 , 见表3。
表 3　二种测定颠茄片中生物碱含量的方法比较
方　　　　法　　 平均值(911201)
平均值
(950602)
平均值
(960801)
酸碱滴定法每片含生物碱/mg 0.083 0.079 0.077
本方法每片含生物碱/mg 0.093 0.079 0.085
　　从上表可以看出 ,本文介绍的方法测定值比酸碱滴定法
要略高 ,取样量大大减少。酸碱滴定法对于片剂来说 , 每份
至少 600 片以上 , 操作相当繁琐。本文介绍的方法具有简
便 、准确 、实用 ,可用于颠茄叶及其制剂中莨菪生物碱的含量
测定。
参考文献
1 陈发奎主编.常用中草药有效成分含量测定.北京:人民卫生出版
社 , 1997.
2 王慕邹.常用中草药高效液相色谱分析.北京:科学出版社 , 1999∶
392.
收稿日期:1999-07-26
高效液相色谱法测定醋氯芬酸缓释片的含量
王槐武　黄　励1　梅之南2(黄石 435000湖北黄石市国药有限公司;1大冶有色金属公司职工医院;2湖北医科大学附一院药学部)
摘要　目的:建立了高效液相色谱法测定醋氯芬酸缓释片的含量。方法:采用 Zorbax SB-C18色谱柱 ,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸
(25∶25∶50 , 用 1.0mol/L的 NaOH 调 pH 3.5)为流动相 ,流速为 1.0ml/ min ,以对羟基联苯为内标物 , 检测波长为 275nm。结果:醋
氯芬酸在 10.2 ～ 50.1μg/ ml范围内呈良好线性(r=0.9993),平均回收率为 100.3%, RSD 为 0.45%。结论:本法可用于该片剂
的测定 ,操作简便 , 结果准确。
关键词　高效液相色谱法;醋氯芬酸;缓释片
Determination of aceclofenac in extended-released tablets by HPLC
Wang Huaiwu(Wang HW),Huang Li(Huang L),Mei Zhinan(Mei ZN)(Huangshi Traditional Pharmacy Co.LTD , Huangshi
435000)
ABSTRACT　OBJECTIVE:To establish a HPLC method for the determine of aceclofenac extended tablets.METHODS:A Zorbax SB-C18
column was used.The mobile phase was acetonitrile-tetrahydrofuran-glacial acetic acid(25∶25∶50 , adjusted to pH 3.5 with 1.0 mol/ L NaOH)
and the flow rate was 1.0ml/ min , intertal standard was para-hydroxybiphenyl.The UV detection wavelength was 275nm.RESULTS:The
calibration curve was linear in the range from 10.2μg/ml to 50.1μg/ml(r=0.9993)and the average recovey was 100.3%(RSD=0.45%).
CONCLUSION:The method is selective , simple and accurate.
KEY WORDS　HPLC , aceclofenac , extended-released tablets
　　醋氯芬酸(accelofenac),化学名为[ 邻-(2 , 6二氯苯胺)] 乙 酰乙酸 ,是一种具有镇痛作用的非甾体抗炎药。实验证明 ,
·53·中国现代应用药学杂志 2001年 2月第 18卷第 1期　　　　　　　　　　　　　　　　　Chin JMAP , 2001 February , Val.18 No.1