全 文 ：第 1 2卷 第 1期 西 南 科 技 大 学 学 报 vol .1 2o N .1
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维 U颠茄铝胶囊中硫酸阿托品和
氢嗅酸东蓑若碱含量测定
李 凤 , 左承学 2
( 1
. 西南科技大学生命科学与工程学院 四川绵阳 621 01 0 ; 2 . 绵阳市药品检验所 四川绵阳 62 1(众 ) )
摘要 :硫酸阿托品和氮澳酸东蓑若碱为维 U 颠茄铝胶囊中重要活性成分 ,其含量的测定有利于产品的质量监控。
采用甲醉一超声波提取活性成分 ,高效液相色谱法 ( H P L C )测定含量 。 结果表明 : 超声波一甲醇提取效果好 ; H P扰
分析结果显示硫酸阿托品 ( 。 . 02 16 ~ 0 . 24 192 m了mL )和氢澳酸东蓑若碱 ( 0 . 01 06 2 一 0 . 127 36 m『m )L 均呈良好的线
性相关 ,相关系数分别为 0 . 供珍3 和 0 . 99 8 ;精确度高 ,硫酸阿托品平均加样回收率 96 . 43 % , SR D 为 1 . 。% ( n 二 5 ) ,
氮澳酸东蓑若平均加样回收率 95 . 10 % , SR D为 1 . 0% ( n 二 5 ) ;试验的分离性 、 重复性和稳定性良好 。 本方法快速 、
可靠 ,同时为其他中药制剂中硫酸阿托品和氢澳酸东食若碱含量测定奠定了基础 。
关键词 :维 U颠茄铝胶囊 硫酸阿托品 氢滨酸东食若碱 H P L C 含量测定
中圈分类号 : 2R 84 . 1 文献标识码 : A 文章编号 : 167 1 一 875 5 ( 2 X( 巧 ) 0 1 一 0 119 一 04
C o n t e n t D e et r n止n iat o n o f S c OP ul a m i n e H y d r ob o m i d e a n d A tr o iP n e S ul fa et
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维 U 颠茄铝胶囊是近年来新兴的一种治疗胃酸过多 、 胃溃疡 、保护胃戮膜的新型胃药 ,其中硫酸阿托品
收稿日期 : 2 0( 巧 一 01 一 14
作者简介 :李 风 ( 197 1 一 ) ,女 ,讲师 ,研究方向为食品生物技术。
1 2 0西 南 科 技 大 学 学 报 2 0 (沁
和氢澳酸东食若碱是维 u颠茄钻胶囊的重要活性成分川 。 故研究硫酸阿托品和氢澳酸东蓑若碱含量测定
对产品质量监控有极其重要的意义 。
对颠茄提取物及含颠茄提取物制剂的含量及含量均匀度测定 , 中国药典采用酸碱滴定法 ,该法操作繁
琐 ,结果有偏差〔2 一 ’ ] 。 目前有关高效液相色谱法 ( Hp LC )测硫酸阿托品和氢澳酸东蓑若碱含量的研究主要集
中在单一成分测定 ,本实验对用高效液相色谱法同时测定样品中氢澳酸东蓑若碱和硫酸阿托品的含量方面
进行了探索 。 结果表明该法可方便 、可靠地同时测定两种主要活性成分。
1 仪器 、 试药及方法
1
.
1 仪器与试药
主要仪器 :超声发生器 (上海 B R ANS ON ) , SP ETR A 一 P HYS IC S 碳 18 柱 , wa et o 24 87 紫外检测仪 、 Em -
p o w er 积分仪 。
试药 :硫酸阿托品对照品 (供含量测定用 , 中国药品生物制品检定所提供 ,批号 :以抖 0 一 91 09 ) ;氢澳酸东
蓖若碱对照品 (供含量测定用 , 中国药品生物制品检定所提供 ,批号月欠抖 9 一 2田3 08 ) ;维 U 颠茄铝胶囊由山
西晋城新双鹤药业责任有限公司生产 (批号 : 20 5 0 104 ) ;阴性对照品 : 自制 ;甲醇为色谱纯 ,其余试剂如醋酸
钠 、 四氢吠喃、 醋酸均为分析纯 。
1
.
2 试验方法
1
.
2
.
1 供试品及对照品溶液制备 ( l) 将胶囊内容物研细 ,取 3 9左右粉末精密称定置 50 rnL 容量瓶中 ,加
甲醇 4 0 fnL ,超声 60 m in ,放冷 ,定容 ,过滤 ,精密量取 25 m L 续滤液 ,蒸干 ,残渣加 0 . s m心 L 醋酸溶液 10 m L
溶解 ,置分液漏斗中 ,用氛仿萃取 2 次 ,每次 10 rnL ,弃去抓仿层 ,水层用 0 . 5 m 0 F L 的 N a o H 调 p H 值至 9 -
10
,用氯仿萃取 6 次 ( 30 , 30 , 20 , 20 , 10 , 10 mL ) ,合并抓仿液 ,水浴蒸干 ,残渣加甲醇溶解并转移至 5 m L 容量
瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 , 用微孔滤膜 ( 0 . 45 ~ )滤过收集续滤液作为供试品溶液 。 ( 2 )取阴性对照
品重复以上操作制备阴性对照品溶液 。 ( 3 )精密称取 0 . 05 9 硫酸阿托品对照品于 25 m L 容量瓶 , 甲醇溶解 ,
定容得硫酸阿托品对照品溶液 ;精密称取 0 . 02 9氢澳酸东蓖若碱对照品于 25 mL 容量瓶 , 甲醇溶解 ,定容得
氢澳酸东蓑若碱对照品溶液 。
1
.
2
.
2 色谱条件 S P ET R A 一 PH Y S IC S 碳 15 柱 ( 20 mrn x 5
.
s mrn )
;流动相 : 甲醇 一 0 . 02 m o F L 的醋酸钠
溶液 (含 0 . 02 % 三 乙胺 、 0 . 3 % 四氢吠喃 , 用醋酸调 p H 至 6 . 86 ) ( 60 : 40 ) ;检测波长 2 15 n m ; 流速
1 m L / m i n ;柱温 2 5 ℃ 。
1
.
2
.
3 线性关系考察 精密吸取硫酸阿托品对照品溶液 ,分别制成浓度为 0 . 02 0 16 、 0 . 04 0 32 、 0 . 0 604 8 、
0
.
12 0 6
、
0
,
24 19 2 m g/ m L
, 进样测定 。 精密吸取氢澳酸东蓑若碱标准品溶液 , 分别制成浓度为 0 . 01 0 62 、
.0 02 12 4
、
.10 03 18 4
、
.0 06 36 8
、
.0 12 73 6 m酬 m L 进样测定 。 各进样 20 林L 检测 。 以硫酸阿托品 ,氢澳酸东蓑若
碱浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标绘制标准曲线 。 得到硫酸阿托品的回归方程为 : Y = 10 7x + 48 . 558 ,
r = 0
.
9 93 ; 氢澳酸东莫若碱的回归方程为 : Y 二 or 7X 一 4 274 , 3 , ; 二 0 . 9 998 。线性相关性良好 。
1
.
2
.
4 稳定性实验 精密吸取同一批供试品溶液每隔 0 , 1 , 2 , 12 , 24 h 各进样 20 卜L 检测 。 结果表明 : 24 h
内峰面积值无太大变化 ,方法稳定性良好 ,硫酸阿托品的 R s D 为 1 . 0 % ,氢澳酸东食若碱的 RsD 为 1 . 0% 。
1
.
2
.
5 精密度实验 精密吸取同一批供试品溶液 ,重复进样 5 次 , 每次 20 林L 进行检测 。 结果表明仪器精
密度良好 。 硫酸阿托品的 R SD 值为 1 , 1% ,氢澳酸东蓑若碱的 R s D 为 1 . 4% 。
1
.
2
.
6 重现性考察 取同一批号样品平行提取 5 份 ,测定硫酸阿托品平均含量和氢澳酸东蓑若碱平均含
量 。 5 次测定得到硫酸阿托品平均含量为 0 . 04 10 m岁 g , RSD 为 1 . 1% ;氢澳酸东蓑若碱平均含量为 0 . 01 21
m岁g 。 R SD 为 1 . 5% 。说明实验的重现性良好 。
1
.
2
.
7 回收率实验 取已知含量的同一批号样品 2 9 ,精密称定 ,精密加人硫酸阿托品和氢澳酸东蓑着碱对
照品溶液各 2 m L (硫酸阿托品浓度为 0 . 04 032 m岁m L ,氢澳酸东蓑若碱浓度为 0 . 0 1062 m岁 m )L ;照供试品
溶液制备项下操作制备样品溶液后测定硫酸阿托品和氢澳酸东蓑若碱的平均含量 ,并分别计算回收率 。
第 1期 李 凤 ,等 :维 U 颠茄铝胶囊中硫酸阿托品和氢澳酸东食若碱含量测定 12 1
2 结果及讨论
2
.
1 提取结果
根据分析和试验确定甲醇做溶剂 ,超声处理提取 l h ,氯仿萃取精制制备样品溶液 。 由于硫酸阿托品和
氢澳酸东蓑若碱已经是两种生物碱与无机酸相结合的化合物了 ,有较强极性 , 因此采用 甲醇提取 ,该方法较
简便 ,但提出物含杂质较多 ,需进一步精制 ,因此采用氯仿萃取 [’, ,〕 。 对比超声处理 30 、 40 、印 、 80 m in 的情况
表明 60 m in 和 80 m in 处理结果基本相同 (具体数据未列出 ) , 因此本实验选择超声提取 l h 。
2
.
2 样品测定结果
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液及阴性对照各 20 泌 ,进样分析 。 在所选色谱条件下 ,对照品图
谱表明 :氢滨酸东食若碱的保留时间为 9 . 14 而 n ,硫酸阿托品的保留时间为 20 . 16 而n ,两峰能很好地分离 ,
结果见图 1和 2 ;供试品图谱 (见图 3) 表明特征峰能与杂质峰分离 ;阴性对照的图谱表明在特征峰附近没有
明显的干扰峰 ,结果见图 4 ;5 次平行测定结果显示 :样品 ( 20 501 04 ) 中硫酸阿托品的平均含量为 0 . 04 or
m岁g ,氢澳酸东蓑若碱的平均含量为 0 . 0 1l2 m扩g 。 见表 1 和表 2 。
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图 1 氮澳酸东首若碱标准品图谱
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硫酸阿托品标准图谱
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图 3 供样品图谱
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.
0 14
.
0 1.6 0 18
.
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图 4 阴性对照品图谱
表 1 硫酸阿托品的含-
编 号 1 2 3 4 5 平均
含蜜m , · : 一 ’ 伽闭 5 04 13 以 15 以肠 04 10
氮澳酸东苗奢碱的含 l
编 号 1 2 3 4 5 平均
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2
.
3 回收率实验
结果表明 :试验精确性良好 ,硫酸阿托品平均回收率为% . 43 % , R sD 为 1 . 3% ( n = 5 ) ;氢澳酸东食若碱
平均回收率为 95 . 10 % , R sD 为 1 . 6% , ( n 二 5 ) ;结果见表 3 。 回收率的结果也显示实验样品处理方法可以较
完全地提取药物中的目的组分 ,测定结果可以真实反应组分的实际含量 。
1 2 2 西 南 科 技 大 学 学 报 2以巧
表 3 回收率实验结果
目 本底值 /m g· g一 ` 加标量 /m 测定值 /回收率 /% 平均回收率 /% 月S 刀 ( n二 ) s
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硫酸阿托品
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96
.
43
2
.
4 问题及分析
一种测定方法能否用于高通量的检测 ,非常重要的一点就是是否可以方便地实现自动化 ,其中供试品溶
液的制备是否方便显得尤其突出 。 因此方法的优化改进可以在这方面进行进一步的工作 , 尽可能提高回收
率 , 以使测定结果更加真实反应实际含量 , 同时尽可能简化处理程序以方便自动化处理 。 另外 ,一种测定方
法的建立通常注重重要活性成分的研究 ,但是对潜在的降解产物所带来的影响缺乏足够的重视。 阿托品与
东蓑若碱为蓑若碱外消旋体 ,其物理化学性质极为相似 ,并且食若碱在贮藏 、加工和提取过程中逐渐转化为
外消旋体阿托品 ,因此为了更好控制药品质量 ,完善测定方法 ,有必要在降解产物可能带来的影响方面进行
深人的研究 〔` 一 ’ J。
3 结论
本研究初步探索了维 U 颠茄铝胶囊中硫酸阿托品和氢澳酸东蓑若碱提取与含量测定 ,结果显示 : 用超
声波一甲醇提取比较完全 ,得到了良好效果 ; H p Lc 分析结果显示 : 硫酸阿托品 ( 0 . 02 0 16 一 0 . 24 19 2 m梦 m L )
和氢澳酸东蓑若碱 ( 0 . 01 06 2 一 0 . 1 27 36 m岁 m )L 均呈良好的线性 ,相关系数 r 分别为 O , 9993 和 0 . 9998 ;试验
精确度较好 ,硫酸阿托品平均加样回收率% . 4 % , RSD 为 1 . 3% ( n 二 5 ) ,氢澳酸东蓑若碱平均加样回收率为
95
.
10 %
,
R SD 为 1 . 3% , ( n 二 5 ) ; 试验的分离性 、重复性和稳定性良好 。 本方法是一种方便 、 可靠的同时测
定维 U 颠茄铝胶囊中硫酸阿托品和氢澳酸东食若碱含量的方法 。 同时为其他制剂中硫酸阿托品和氢澳酸
东蓑若碱含量测定及其质量控制奠定了基础 ,具有一定的理论和实践意义 。
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会 . 化学药品地方标准上升国家标准 ,第六册〔M 〕. 北京 :化学工业出版社 , 2X() 2 . 224 ~ 225
2 中华人民共和国卫生部药典编委会 . 中华人民共和国药典注释二部〔M 〕 北京 :化学工业出版社 , 2X( X) . 103 一 1巧
3 安登魁 . 药物分析【M 〕. 山东 : 济南出版社 , 19 2 : 102 一 13 0
4 汪茂田 ,谢培山 ,王忠东 ,等 . 天然有机化合物提取分离与结构鉴定【M ] . 北京 :化学工业出版社 , 2以” . 1 12 一 140
5 张晓峰 ,王环 . 山蓖营植物体内四种蓑若烷类生物碱含量的变化〔J」. 西北植物学报 , 2加 2 , 2 2 ( 3 ) : 6 30 一 634
6 otZ ou
,
A
,
Saln 耐 do u , V . 助d eG 。铭哪 k月i , M . olS id 一 ph留 e xE tacr it on a n d RP 一 IP 扰 nA a ly s i o of A t m Pine s ul p h at e a dn cs -o
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