全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
表 6 水提工艺验证
No． 盐酸麻黄碱 /mg·g － 1 干膏得率 /%
1 21. 825 18. 92
2 20. 897 18. 29
3 20. 570 19. 46
3 讨论
中药三拗汤制剂采用水提方法进行提取，通过
L9(3
4)正交试验设计及水提工艺比较实验，确定了
该复方制剂水提工艺的最佳条件是加 10 倍量的水
煎煮 1. 5 h，再加 10 倍量的水煎煮 2 次，每次 1 h。
试验结果表明，工艺稳定，重复性好。同时，对药材
提取液中麻黄碱的含量测定的色谱条件进行了反复
摸索，该方法对测定药材提取的浸膏中麻黄碱的含
量简便、准确、可行。
［参考文献］
［1］ 尉小慧，张兆旺，孙秀梅 ． 麻杏石甘汤现代研究概况
［J］． 山东中医药大学学报，2003，27(1):72.
［2］ 毕云生，潘函清，赵普军，等 ． HPLC 测定麻杏石甘汤中
麻黄碱的含量［J］． 中成药，2004，26(9):附 7.
［3］ 中国药典 ．一部［S］． 2000 :附录 VID．
［4］ 梁宏，李文英，陈燕 ． 高效液相色谱法测定清宣颗粒剂
中麻 黄 碱 的 含 量［J］． 药 物 分 析 杂 志，1999，19
(4):276.
［责任编辑 仝燕］
［收稿日期］ 20110220(005)
［第一作者］ 王向军，主管药师，E-mail:gaoxiaoling1985@ 163. com
两头毛中总黄酮提取工艺
王向军
(郑州大学第二附属医院药剂科，郑州 450014)
［摘要］ 目的:用正交试验法优选两头毛中总黄酮的提取工艺。方法:以总黄酮提取量为评价指标。选择提取溶液量、提
取时间、提取次数为考察因素，采用正交试验法确定两头毛中总黄酮的最佳提取工艺，采用分光光度法对干浸膏中总黄酮的含
量进行测定，检测波长 498 nm。结果:最佳提取工艺条件为用 10 倍量 0. 5% 氢氧化钠溶液回流提取 3 次，每次 3 h，芦丁在
8. 72 ～ 52. 32 mg·L － 1呈良好的线性关系。平均回收率 101. 98%，RSD 1. 23%。结论:总黄酮正交提取工艺比较可行，含量测定
方法简便、准确，可用于两头毛干浸膏中总黄酮的含量测定。
［关键词］ 两头毛;总黄酮;正交试验
［中图分类号］ R283. 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)13-0050-03
Study on Extraction Process of Total Flavonoids in Incarvillea arguta
WANG Xiang-jun
(Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450014，China)
［Abstract］ Objective:To study the optimum extraction process of total flavonoids in Incarvillea arguta．
Method:The orthogonal experimental design was used with the extraction yield of total flavonoids as the assessment
index，water extraction volume，extracting time，extraction times as factors． The total flavonoids content extracted
from I． arguta was determined by spectrophotometric method at detection wavelength of 498 nm． Result:The
optimum extracting conditions were as follows:adding 10 fold of 0. 5% NaOH-H2O，three times，heating for 3
hours． Rutin was linear in the range of 8. 72-52. 32 mg·L － 1 and the average recovery was 101. 98% with RSD of
·05·
第 17 卷第 13 期
2011 年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 13
Jul．，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.13.033
1. 23% ． Conclusion:The optimum extraction process of total flavonoids in I． arguta was reliable and the
determination method is easy and accurate which can be used for the extraction of total flavonoids in this herb．
［Key words］ Incarvillea arguta;total flavonoids;orthogonal design
两头毛别名唢呐花、炮胀花、炮胀筒、金鸡豇豆、
麻叶子、羊胡子草、羊奶子、燕山红、岩喇叭花，为彝
医习用药材，来源于紫葳科角蒿属植物毛子草
Incarvillea arguta (Royle)Royle 的带根茎全草，主要
分布于甘肃、四川、贵州、云南、西藏等地，具有祛风
除湿、消炎止痛、活血散瘀的功效［1］。彝族民间称为
“瓦布友”，变称“肝炎草”、两头毛、马桶花、毛子草、
结石草等，主要用于治疗肝炎、菌痢、痈肿、骨折血
肿、风湿劳伤等［2］。两头毛中的黄酮类成分是其神
经营养活性的主要成分［3］。为了提高两头毛总黄酮
的利用率，现以其总黄酮为主要指标，考察其总黄酮
的提取工艺。
1 材料
UV-2490 型紫外分光光度计(日本岛津)，芦丁
对照品(中国药品生物制品检定所，批号 100080-
200707)，两头毛(云南省中医医院药房)，所用试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 提取工艺优选 根据单因素探索性试验所得
结论，选择提取次数、0. 5%的氢氧化钠溶液用量、提
取时间 3 个因素，每个因素选择 3 个水平，设定因素
水平表，见表 1。取两头毛 50 g，按正交表设计方案
进行试验，加 0. 5%的氢氧化钠水溶液煎煮，合并煎
液，滤过，滤液浓缩至小于 50 mL，真空干燥箱(70
℃)至恒重后取出称重。以测定的干浸膏中总黄酮
的含量为指标，结果与方差分析见表 2，3。
表 1 两头毛提取工艺因素水平
水平
A 提取
次数 /次
B 提取溶液
用量 /倍
C 提取
时间 / h
1 1 10 2. 0
2 2 12 2. 5
3 3 15 3. 0
以干浸膏中总黄酮量为指标，确定最佳提取方
案，由方差分析可以看出，以 A3B1C3 为总黄酮含量
最高的提取工艺，即以提取 3 次，加 10 倍量溶剂，提
取 3 h 为最佳方案。
2. 2 工艺验证性试验 为考察上述优选提取工
表 2 两头毛提取工艺正交试验结果
No． A B C D
总黄酮
提出量
/ g
1 1 1 1 1 0. 259
2 1 2 2 2 0. 342
3 1 3 3 3 0. 363
4 2 1 2 3 0. 491
5 2 2 3 1 0. 374
6 2 3 1 2 0. 378
7 3 1 3 2 0. 697
8 3 2 1 3 0. 649
9 3 3 2 1 0. 584
K1 0. 320 0. 483 0. 430 0. 400
K2 0. 413 0. 453 0. 470 0. 473
K3 0. 643 0. 440 0. 477 0. 500
R 0. 323 0. 043 0. 047 0. 100
表 3 总黄酮提出量方差分析
因素 SS f F P
A 0. 166 2 11. 067 ＞ 0. 05
B 0. 003 2 0. 200 ＞ 0. 05
C 0. 004 2 0. 267 ＞ 0. 05
误差 0. 015 2
艺的稳定性，按最佳工艺条件进行重复试验，结果见
表 4。
表 4 验证性试验
No． 浸膏量 / g 出膏率 /%
浸膏中总
黄酮 /%
1 29. 5 59. 0 2. 39
2 30. 2 60. 4 2. 32
3 29. 8 59. 6 2. 37
2. 3 两头毛干浸膏中总黄酮含量的测定
2. 3. 1 对照品溶液的制备 精密称取在 120 ℃干
燥至恒重的芦丁对照品 10. 9 mg，置 50 mL 量瓶中，
加 60%的乙醇适量，超声使溶解，放冷并稀释至刻
度，摇匀，即得。
2. 3. 2 样品溶液的制备 取两头毛干浸膏粗粉约
1. 0 g，研细，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加 60% 的
乙醇适量，超声使溶解，放冷并稀释至刻度，摇匀，滤
过，弃去初滤液，精密吸取续滤液 10 mL，置 50 mL
·15·
王向军:两头毛中总黄酮提取工艺
量瓶中，用 60%的乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2. 3. 3 测定法 精密量取供试品溶液 5 mL，置 50
mL 量瓶中，加入 60%的乙醇 10 mL，摇匀，精密加入
5%的亚硝酸钠溶液 2 mL，摇匀，放置 6 min，加入
10%的硝酸铝溶液 2 mL，摇匀，放置 6 min，加入 4%
的氢氧化钠溶液 10 mL，然后加入 60%的乙醇稀释
至刻度，摇匀，放置 10 min，测定吸光值。
2. 3. 4 检测波长的选择 取芦丁对照品溶液、供试
品溶液及空白溶液 2 mL，照分光光度法，在 200 ～
600 nm 进行光谱扫描，得芦丁的最大吸收波长在
496 ～ 502 nm，供试品最大吸收波长为 498 nm，故选
用 498 nm 为检测波长。
2. 3. 5 线性关系考察 精密量取对照品溶液
(0. 218 g·L － 1)2. 0，4. 0，6. 0，8. 0，10. 0，12. 0 mL 置
50 mL 量瓶中，按测定法中的方法在 498 nm 处测定
吸光度。以质量浓度(C)为横坐标，吸光度(A)值为
纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程
A = 13. 145 5C － 0. 006 5(r = 0. 999 9)。结果表明
芦丁在 8. 72 ～ 52. 32 mg·L － 1呈良好的线性关系。
2. 3. 6 精密度试验 取对照品溶液按 2. 3. 3 项下
方法，连续 5 次测定，结果 RSD 0. 94%。表明仪器
精密度良好。
2. 3. 7 重复性试验 取同一批号的样品 5 份，按
2. 3. 2 项下方法制备，2. 3. 3 项下方法测定，结果
RSD 0. 91%。表明方法重复性良好。
2. 3. 8 稳定性试验 取供试品溶液，每间隔一定时
间，即在 0，0. 5，1，1. 5，2，2. 5，3 h 按 2. 3. 3 项下方法
测定吸光度，结果 RSD 0. 77%，表明 3 h 内基本
稳定。
2. 3. 9 回收率试验 精密称取已知含量的样品 5
份，精密加入芦丁对照品约 24 mg，按 2. 3. 2 项下方
法制备，2. 3. 3 项下方法测定，计算回收率，见表 5。
表 5 回收率测定
No．
取样量
/ g
总黄酮含量
/ g
加入量
/ g
测定量
/ g
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 1． 005 4 0． 002 388 0． 002 398 0． 004 840 102． 27
2 1． 005 8 0． 002 389 0． 002 398 0． 004 878 103． 82
3 1． 002 3 0． 002 380 0． 002 398 0． 004 821 101． 79 101． 98 1． 23
4 1． 000 9 0． 002 377 0． 002 398 0． 004 783 100． 33
5 1． 003 2 0． 002 383 0． 002 398 0． 004 821 101． 70
3 讨论
两头毛中的黄酮类化合物均含有酚羟基，具有
弱酸性，采用弱碱溶液提取，可以提高浸出率。相对
于有机溶剂提取剂，氢氧化钠具有试剂价廉易得，提
取工艺简单易控制，节能，投资小，安全性高的特点，
因此本实验中选用 0. 5% 的氢氧化钠溶液作为提
取液。
正交试验中所得出的最佳提取时间为 3 h，但是
因此因素对结果影响不是很大，因此在实际生产上
可以适当的缩短提取时间。
正交试验所得出的最佳提取溶液倍量为 10 倍
量，虽然该因素对结果影响不是很大，但是实际生产
中不建议再减少倍量。
确定最佳提取方案为提取次数 3 次，提取溶液
倍量为 10 倍量，提取时间为 3 h。
［参考文献］
［1］ 中华本草编委会 ． 中华本草 ． 第 3 卷［M］． 上海:上海
科学技术出版社，1999:641．
［2］ 李耕冬 ． 瓦布友(两头毛)的化学成分［J］． 中草药，
1986，17:32．
［3］ 付建军，沈云亨，金慧子，等 ． 两头毛的化学成分及
药理作用研究进展［J］． 天然产物研究与开发，2007，
19:343．
［责任编辑 仝燕］
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2011 年 7 月
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Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 13
Jul．，2011