全 文 ：马　敏 ,叶　菊 ,王如峰 ,等.柴达木地区大叶白麻总黄酮含量研究 [ J].江苏农业科学 , 2010(1):272-273.
柴达木地区大叶白麻总黄酮含量研究
马　敏 1 , 叶　菊1 , 王如峰 2 , 韩金兰 3
(1.青海民族大学化学与生命科学学院 ,青海西宁 810007;2.武汉工业学院生物与制药工程学院 ,湖北武汉 430023;
3.青海省卫生厅 ,青海西宁 810001)
　　摘要:对柴达木地区大叶白麻不同器官及不同月份叶和茎中总黄酮含量进行了比较分析。结果表明:这一地区
大叶白麻不同器官总黄酮含量各不相同 , 不同月份叶和茎中总黄酮含量变化也比较明显。
　　关键词:大叶白麻;总黄酮;紫外分光光度法
　　中图分类号:S567.23+9.01　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2010)01-0272-02
收稿日期:2009-11-03
基金项目:青海省重点攻关科技项目(编号:2007-N-130)。
作者简介:马　敏(1984—),女 ,青海西宁人 ,硕士研究生 , 从事药用
植物开发与利用工作。
通信作者:叶　菊(1978—),女 ,青海西宁人 ,硕士 ,讲师 ,从事药用植
物开发与利用工作。 Tel:(0971)6136715;E-mail:yeju8145@ya-
hoo.com.cn。
　　大叶白麻 [ Poacynumhendersonii(Hook.f.)Woodson]为
夹竹桃科白麻属多年生半灌木 ,别名野麻、白麻 、大花罗布麻
等 。它是一种优质的药用植物和纺织材料 [ 1-2] ,具有延缓衰
老 、降压 、降脂 、抗感冒 、镇静安神等功效 ,其主要药效成分为
黄酮类化合物 ,目前作为同科植物罗布麻(Apocynumvenetum
L.)的代用品而广泛应用于药用保健业 [3 -8] 。对大叶白麻总
黄酮动态累积规律的研究未见报道 。本试验对柴达木地区大
叶白麻不同器官及不同月份茎和叶中总黄酮的含量进行了比
较研究 ,可为其今后的应用研究提供一定的理论依据 。
1　材料与方法
1.1　试验材料 、试剂与仪器
大叶白麻样品:2007年各月中旬采自柴达木地区 ,阴干 ,
待用 。对照品:芦丁(中国药品生物制品检定所 )。试剂:乙
醇 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠等 ,以上试剂均为国产分析纯
试剂 。仪器:JH-722型紫外可见分光光度计 、FZ102型粉碎
机 、RE-52CS型旋转蒸发仪 、DZKW-C电子恒温水浴锅等 。
1.2　试验方法
以芦丁为标准品 ,利用紫外可见分光光度法测定待测样
品总黄酮含量 [ 9 -10] 。
1.2.1　对照品溶液制备　精密称取 120 ℃干燥至恒重的芦
丁 10.0 mg,置于 100 mL量瓶 , 30%乙醇适量水浴溶解 ,冷却
后稀释至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1mL含芦丁对照品 0.1 mg)。
1.2.2　供试品溶液制备　取不同月份大叶白麻各部位样品
若干 ,粉碎 ,过 40目筛 。称取粉碎样 3.0 g,分别置于 100 mL
平底烧瓶 ,采用热回流法提取(提取溶剂为 60%乙醇 ,料液比
为 1 ∶10,提取温度为 70℃,提取时间为 2 h,提取 2次)。提
取液过滤 、合并 ,转至 100 mL容量瓶 ,定容 ,摇匀 ,待测 。
1.2.3　比色原理及最大吸收波长的选择　大叶白麻含有多
种黄酮类化合物 [ 11 ] ,其黄酮母核所含的游离羟基在适当的介
质条件下能与金属铝离子形成络合物而显色 。用相应浓度的
NaNO2溶液 、Al(NO)3溶液 、NaOH溶液显色 ,于 300 ～ 700 nm
间扫描 ,对照品和供试品溶液的吸收光谱均在 510 nm处有最
大吸收 ,因此测定波长选择 510nm。
1.2.4　标准曲线的制备　精密量取对照液 1.0、2.0、3.0、
4.0、5.0mL分别置于 10 mL容量瓶 ,加 5%亚硝酸钠溶液
0.5mL摇匀 ,放置 6min;加 10%硝酸铝溶液 0.5 mL摇匀 ,放
置 6min;加 4%氢氧化钠溶液 4mL,加水稀释至 10 mL摇匀 ,
放置 20 min;置比色皿中 ,以试剂同法做空白 ,在 510 nm处测
定吸收度 ,并以吸光度对浓度进行回归分析 。
1.2.5　精密度试验　精密吸取供试品溶液 1 mL,按标准曲
线项下操作显色 ,重复测定吸光度 5次 ,计算吸光度相对标准
偏差 RSD=0.048%(n=5),表明精密度良好 。
1.2.6　稳定性试验　精密吸取供试品溶液 1 mL,按标准曲
线项下操作显色 ,分别在 5、10、15、20、30 min测定吸光度 ,计
算吸光度相对标准偏差 RSD=0.57%(n=5),表明样品在室
温下 30 min内稳定 。
1.2.7　重复性试验　取同一大叶白麻样品 5份 ,按照供试品
溶液的制备项下操作进行试验 ,按标准曲线项下操作显色 ,计
算每份样品中总黄酮的含量 , 5次测得的平均含量为 3.69%,
RSD=0.143%(n=5),表明本测定法的重复性良好 。
1.2.8　回收率试验　精密量取不同浓度的供试品液 10 mL
(5份 ,已知浓度),加入适当浓度的芦丁对照品液 1 mL,摇
匀 ,取 1 mL于 10mL容量瓶中 ,按标准曲线项下操作显色 ,测
定吸收度;按回归方程求得总黄酮含量 ,计算得平均回收率为
100.61%,表明该方法测得的结果准确 。测定结果见表 1。
表 1　加样回收率测定结果
试验号 加样量(μg)
加标量
(μg)
实测黄酮量
(μg)
回收率
(%)
1 19.662 28.396 48.686 102.21
2 24.974 32.967 58.234 100.89
3 31.341 34.410 65.631 99.65
4 37.417 33.294 71.051 101.02
5 44.183 34.107 78.044 99.28
平均 100.61
1.2.9　供试液总黄酮含量的测定　分别量取待测液 1 mL,
置 10mL的容量瓶 ,按标准曲线项下操作显色 ,测定吸收度 ,
利用吸光度及回归方程计算各样品总黄酮百分含量(T)。计
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算公式为:T=C×10×N×V/m×100%,式中 , C为样品浓度
(mg/mL), N为样品稀释倍数 , m为样品质量(mg), V为提取
液定容体积(mL)。
2　试验结果
2.1　标准曲线试验结果
以芦丁为标样 ,紫外分光光度法测其吸光度 ,结果见表
2。根据表 2所测数据 , 以吸光度为横坐标 , 芦丁浓度
(mg/mL)为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,如图 1所示 。以吸光度
D510 nm对浓度进行回归分析 ,得到回归方程为:C=0.078 8 ×
D510 nm +0.005 3(r=0.999 8)。
表 2　标准曲线实验数据
芦丁浓度(mg/mL) 吸光度 D510 nm
0.01 0.057
0.02 0.192
0.03 0.312
0.04 0.443
0.05 0.566
2.2　总黄酮含量测定结果
2.2.1　不同月份茎 、叶中总黄酮含量测定结果　取各月中旬
采集的茎及叶粉碎样 3.0 g,按照供试品溶液的制备项下操作
进行试验 ,按标准曲线项下操作显色 ,测量 ,计算每份样品中
总黄酮的含量 ,结果如图 2所示 。
2.2.2　不同器官总黄酮含量测定结果　取 7月中旬采集的
根 、茎 、花茎 、叶 、花和 8月中旬采集的果实粉碎样 3.0 g,按照
供试品溶液的制备项下操作进行试验 ,按标准曲线项下操作
显色 ,测量 ,计算每份样品中总黄酮的含量 ,结果如图 3所示 。
3　结论与讨论
从本研究结果看 ,柴达木地区大叶白麻茎和叶中总黄酮
含量 7月份的为最高 ,且 5至 7月份呈上升趋势 ,从 7月开始
下降 。由于柴达木地区地处高寒气候 ,至 10月中旬叶片全部
干枯掉落 ,当年生茎大部分干枯失水 ,故其所表现的植物学特
性与其他地区的有一定的区别 。柴达木地区大叶白麻不同部
位中 ,叶中的总黄酮含量最高 ,茎中最低 ,不同部位含量从高
到低的顺序为:叶 >根 >果实 >花 >花茎 >茎 。
本研究测定过程中 ,供试样品液显色后 ,有絮状沉淀产
生 ,且随着时间的增加而增加 ,所得数据为少量沉淀过滤后的
测定结果 ,由于沉淀的吸附作用 ,可能对测试结果造成了细微
的影响 。另外 ,不同的含量测定方法所得的试验数据有一些
差异 [ 12] 。本次试验采用了紫外可见分光光度法 ,方法简单易
行 ,结果准确可靠 [ 13] 。
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