全 文 ：论著 文章编号:1000-5404(2007)19-1892-02
狼紫草水提物抗皮肤溃疡与镇痛作用的实验研究
孙文晓 1 ,张海港 1 ,李晓辉 1 ,王秀琴 1 ,韦　卓 2　　(1第三军医大学医学检验系药学院药剂学教研室 ,重庆 400038;2华中科
技大学同济医学院附属梨园医院骨科 ,武汉 430077)
　　提　要:目的　研究狼紫草水提物的镇痛作用及其对皮肤溃疡愈合的影响。 方法　采用煎煮法制备狼紫草水提物。
用醋酸扭体实验和热板法观察镇痛作用;用醋酸性腹膜炎模型观察对毛细血管通透性作用;采用醋酸所致小鼠皮肤溃疡
模型研究溃疡愈合以及溃疡组织中前列腺素 E2(prostaglandinE2 , PGE2)含量。结果　狼紫草水提物能明显减少醋酸所
致小鼠扭体次数 ,提高热板实验小鼠痛阈 , 抑制醋酸所致腹腔毛细血管通透性升高 ,促进皮肤溃疡愈合 ,降低溃疡组织中
含量。结论　狼紫草水提物具有明显的镇痛和促进溃疡愈合作用 ,其机制与降低毛细血管通透性 、减少 PGE2生成有关。
　　关键词:狼紫草;疼痛;溃疡;前列腺素 E2
　　中图法分类号:R285.5;R632.105;R971.1　　　 文献标识码:A
AnalgesicandhealingeffectsofaqueousextractfromLycopsisorientalislinnonskin
ulcerinmice
SUNWen-xiao1 , ZHANGHai-gang1 , LIXiao-hui1 , WANGXiu-qin1 , WEIZhuo2(1DepartmentofPharmaceutics, Collegeof
Pharmacy, ThirdMilitaryMedicalUniversity, Chongqing400038;2DepartmentofOrthopaedics, LiyuanHospital, TongjiMedicalCollegeof
HuazhongUniversityofScienceandTechnology, Wuhan430077, China)
　　Abstract:Objective　ToexploretheefectsofaqueousextractfromLycopsisorientalislinn(AELO)on
algaesthesisandhealingofskinulcerinmice.Methods　AELOwaspreparedwithdecoctingmethod.Analge-
sicactionsofAELOweredeterminedusingwrithingresponseinducedbyaceticacidandhotplate.Capilary
permeabilitywasmeasuredwithEvansbluecolorimetricmethodinperitonitismodelinducedbyaceticacid.
Aceticacidwasalsousedtoinduceskinulcerinmice.ThePGE2 contentinulcertissuewasmeasuredcolorim-
etricaly.Results　AELO(10, 20, 40g/kg)inhibitedwrithingresponse, increasedthepainthreshold, and
decreasedthecapilarypermeabilitysignificantly.LocalapplicationofAELOmarkedlypromotedtheulcerheal-
inganddecreasedPGE2 contentinulcertissueincomparisonofcontrolgroup.Conclusion　AELOcanexert
analgesicandhealingefectinskinulcer, themechanismofwhichinvolvescapilarypermeabilitydecreaseand
PGE2 production.
　　Keywords:lycopsisorientalislinn;pain, skinulcer;prostaglandinE2
　　狼紫草(lycopsisorientalislinn)是一种紫草科狼紫
草属一年生或越年生草本植物 ,生长分布于我国西藏 、
西北 、华北 、河南以及中亚 、欧洲等地 。民间常用于解
毒止痛 ,但对其药理作用国内外尚少见系统报道。本
研究拟对狼紫草水提物的镇痛作用进行初步研究 ,旨
在为其临床应用奠定基础 。
1　材料与方法
1.1　主要材料
　　狼紫草全草于 2007年 5月自采于河南西南部野外 , 阴凉
处自然晒干。取生药 300 g, 粉碎后加 1 000 ml蒸馏水浸泡
　　作者简介:孙文晓(1971-),男,河南省唐河县人 ,硕士研究生,主治医师 ,主要从
事骨 、关节创伤方面的研究,现在华中科技大学同济医学院附属梨园
医院骨科。电话:13720399262, E-mail:sunwenxiao000@sohu.com
　　通讯作者:张海港 , 电话:(023)68753397-85
　　收稿日期:2007-09-04;修回日期:2007-09-12
2 h, 文火煮沸 1.5 h,过滤。药渣再加水 500 ml继续煎煮 , 煮沸
30 min, 过滤并加水重复煎煮 1次。合并 3次煎液 , 4层纱布过
滤后浓缩至 2 g/ml, 即为狼紫草水提物(aqueousextractfrom
lycopsisorientalislinn, AELO)。高压蒸汽灭菌后 , 保存于 4 ℃
备用。冰醋酸 , 甲醇(北京化工厂);伊文思蓝(Sigma, 美国)。
UV8500Ⅱ型分光光度计 , 购自上海天美公司。 昆明小鼠 180
只 , 体质量 18 ～ 22 g,由本校实验动物中心提供。
1.2　方法
1.2.1　醋酸致小鼠扭体反应 [ 1]　　小鼠 40只 ,按体质量排序
分为 4组 ,分别灌胃给予 AELO10、20、40g/kg和生理盐水(0.5
ml/只), 给药后 1 h, 分别腹腔注射 0.6%的醋酸溶液 0.2 ml,观
察注射后 20min内出现扭体反应次数。
1.2.2　热板致小鼠疼痛模型 [ 1] 　　取预实验痛阈在 5 ～ 30 s
的雌性小鼠 40只 ,分为 4组 , 给药方式同 1.2.1。 用热板测痛
仪测定给药后 30、 60、90 min痛阈 , 热板温度为(55±0.5)℃。
1.2.3　醋酸致小鼠腹腔渗出模型 [ 2] 　　小鼠 40只 ,雌雄各半 ,
分别灌胃给予 AELO10、20、40 g/kg和生理盐水(0.5ml/只),每
1892
第 29卷第 19期
2007年 10月 　　
第　三　军　医　大　学　学　报
ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　MILITARIS　TERTIAE　　
Vol.29, No.19
Oct.2007
DOI :10.16016/j.1000-5404.2007.19.003
第 19期　 孙文晓 ,等.狼紫草水提物抗皮肤溃疡与镇痛作用的实验研究　
天 2次 , 共 3 d。末次给药后 1 h, 各鼠尾静脉注射 0.5%的伊文
思蓝 0.1 ml,并立即腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.2 ml, 20 min后
迅速处死 , 每只鼠腹腔用 5 ml生理盐水多次冲洗 , 收集全部腹
腔液于刻度试管中 , 最后各管均用生理盐水加至 8 ml,混匀 ,离
心 , 于 590 nm处测定吸光度值 [ D(590)] 。
1.2.4　醋酸所致小鼠皮肤溃疡 [ 3] 　　将 30只小鼠依据文献
[ 3]的方法制备皮肤溃疡模型。自第 2天开始 , 局部涂抹
2 g/mlAELO, 每天 2次 , 给药后第 3、 5、 7天观察溃疡愈合情
况。评分标准:有溃疡渗液 1分;少许渗液 2分;有焦痂 , 基本
愈合 3分;完全愈合 4分。
1.2.5　皮肤溃疡组织 PGE2含量测定 [ 4]　　30只小鼠同样按
文献 [ 3]的方法复制皮肤溃疡模型。局部给药 3、 5、 7 d后 , 处
死动物 , 剪取局部组织 , 称量 , 磷酸盐缓冲液冰浴下匀浆 ,
1 200×g离心 20 min。取上清液 0.5 ml, 加入 0.5 mol/L氢氧
化钾-甲醇溶液 2ml, 在 50℃水浴箱中水浴异构化 20 min,加甲
醇稀释至 20 ml, 于紫外分光光度计 278 nm处测定吸光度值
[ D(278)] ,并按下述公式计算 PGE2含量。
　　PGE2含量(μg/g)={[ D(278)] ×13.13×Vt×D}/W
　　其中, Vt为匀浆液总体积, D为稀释倍数, W为组织质量(g)。
1.3　统计学方法
　　结果以 x±s表示 , 采用 SPSS10.0统计软件进行单因素方
差分析。
2　结果
2.1　AELO对小鼠扭体反应的影响
　　应用 AELO后 ,小鼠扭体反应次数明显减少。与对照组相
比 , 10、20、40 g/kg剂量组扭体次数显著减少(P<0.05,表 1)。
表 1　AELO的镇痛作用及对小鼠毛细血管通透性
的影响(n=10, x±s)
热板痛阈(s)组别 扭体次数 腹腔液D(590)30min 60min 90min
对照组 18.3±5.2 20.6±6.2 21.3±6 21.0±6.8 0.438±0.096
实验组
　10g/kg 13.5±4.1a 25.8±7.0 29.7±8.1a 30.3±7.4a 0.324±0.068b
　20g/kg 11.4±3.3b 27.2±7.5 31.4±7.6b 32.6±8.3b 0.255±0.053b
　40g/kg 9.7±2.6b 28.3±7.9a 33.5±9.8b 34.2±10.2b0.237±0.055b
a:P<0.05, b:P<0.01,与对照组比较
2.2　AELO对小鼠热板痛阈的影响
　　给药后 30 min, 40 g/kg的 AELO能明显提高小鼠痛阈时间
(P<0.05), 给药后 60 ～ 90min, 3个剂量组的 AELO均能显著
提高小鼠痛阈时间(表 1)。
2.3　AELO对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
　　与对照组相比 , 10、20、40 g/kg的 AELO均能明显降低醋酸
所致小鼠腹腔毛细血管通透性升高(P<0.01, 表 1)。
2.4　AELO对小鼠皮肤溃疡愈合的影响
　　局部应用 AELO3d, 小鼠皮肤溃疡愈合程度评分虽有所提
高 , 但与对照组相比 , 差异并无统计学意义(P>0.05);用药
5 d, 溃疡愈合评分显著升高;用药 7 d, 评分进一步提高(P<
0.01,表 2)。
2.5　AELO对小鼠溃疡组织 PGE2含量的影响
　　局部应用 AELO3 ～ 7d,小鼠溃疡组织中 PGE2含量明显降
低;与对照组相比 ,第 3、5、7天显著减少(P<0.01, 表 2)。
表 2　局部应用 AELO对小鼠皮肤溃疡的影响(n=10, x±s)
溃疡愈合评分 PGE2含量(μg/g)组别 第 3天 第 5天 第 7天 第 3天 第 5天 第 7天
对照组 1.0 1.0 1.3±0.5 150.2±50.8 120.7±46.6 105.7±41.9
AELO 1.5±0.5 2.2±0.6a 2.8±0.8a 63.7±34.1a40.5±25.8a25.3±10.6a
a:P<0.01, 与对照组比较
3　讨论
　　紫草类植物中的多种成分都具有抗炎 、镇痛 、抗菌 、
止血等作用[ 5] 。狼紫草资源丰富 ,安全性高 ,虽然目前
尚未被收录入药典作为一种正规药材使用 ,但在民间已
有长期的应用 ,其性温 、辛 ,能消炎止痛 ,用于治疗疮肿。
本研究结果显示 , 10 ～ 40 g/kg狼紫草水提物具有显著
的镇痛作用 ,能明显促进皮肤溃疡组织的愈合。
　　毛细血管通透性增高 、炎细胞浸润趋化与炎性介质
的释放是炎症反应的基本过程 ,是引起炎症部位肿胀 、
疼痛的主要原因。花生四烯酸及其代谢产物前列腺素
类物质是一类重要的炎症介质 ,针对前列腺素代谢的
非甾体抗炎药是临床应用最广泛的抗炎药[ 6] ,但副作
用多且严重 。H+与 PGE2刺激神经末梢是造成炎症组
织疼痛的主要原因 ,降低 PGE2的生成对于减少渗出和
镇痛具有重要意义。本实验结果显示 , 10 ～ 40 g/kg的
AELO能显著减少渗出 ,从而减轻局部肿胀和炎症。
同时 , AELO能明显降低局部组织中的 PGE2含量 ,表
明其镇痛作用与减少渗出以及 PGE2的生成有关 。
　　皮肤溃疡常见于烧伤 、冻伤 、糖尿病血管病变 、皮
肤感染等 ,目前大多数方法使用不便 ,且部分有毒副作
用 [ 7] 。本研究使用 AELO局部用药 5 d即有显著的治
疗效果 ,通过减少局部 PGE2含量 ,减轻局部炎症而促
进溃疡的愈合 ,且使用简便 ,为皮肤溃疡的治疗提供了
一种新的选择 ,具有良好的应用前景 。
参考文献:
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(编辑　王小寒)
1893