全 文 :藏南粉报春(Primula jaffreyana King)
的组织培养与快速繁殖
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周国兴 欧珠朗杰 扎西次仁 钟扬**
(西藏大学理学院,西藏 拉萨 850000)
摘 要:实验选取藏南粉报春种子萌发的无菌苗上胚轴为材料,接种于 MS+NAA(0.1~1.0mg/L,单
位下同)+6-BA(0.1~2.0)培养基中诱导丛生芽,其中 MS+NAA(0.1~0.5)+6-BA(0.1~0.5),
30~45d可诱导出健壮的丛生芽,并可作为丛生芽增殖培养基,繁殖系数达5.0。生根培养基采用1/
2MS+IBA1.0,生根率达100%。
关键词:报春花 藏南粉报春 组织培养 快速繁殖
1 植物来源
藏南粉报春(Primula jaffreyana King),2013年8
月采集于拉鲁湿地北部向阳山地。
2 材料类别
种子萌发的无菌苗上胚轴。
3 培养条件
培养基中均附加7.5%琼脂、3%蔗糖,121℃高压
灭菌20min。培养温度为18℃,光照时间12h/d。在
丛生芽诱导培养基中选择生长良好的配方作为丛生芽
增殖培养基。
3.1 种子萌发培养基
不添加任何激素的 MS培养基。
3.2 丛生芽诱导培养基
XA:MS+NAA0.1(mg/L,单位下同)+6-
BA0.1
XB:MS+NAA0.1+6-BA0.5
XC:MS+NAA0.1+6-BA1.0
XD:MS+NAA0.1+6-BA2.0
YA:MS+NAA0.5+6-BA0.1
YB:MS+NAA0.5+6-BA0.5
YC:MS+NAA0.5+6-BA1.0
YD:MS+NAA0.5+6-BA2.0
ZA:MS+NAA1.0+6-BA0.1
ZB:MS+NAA1.0+6-BA0.5
ZC:MS+NAA1.0+6-BA1.0
ZD:MS+NAA1.0+6-BA2.0
3.3 丛生芽增殖培养基
XA:MS+NAA0.1+6-BA0.1
XB:MS+NAA0.1+6-BA0.5
YA:MS+NAA0.5+6-BA0.1
YB:MS+NAA0.5+6-BA0.5
3.4 生根培养基
1/2MS+IBA1.0
4 生长与分化情况
4.1 无菌外植体的获得
将藏南粉报春植株上蒴果取出,用洗洁精液清洗
10min,清水清洗5次至无泡,再转移至超净工作台操
作,75%酒精处理 1min,无菌水清洗 3 次,0.1%
HgCl2 溶液消毒2min,无菌水清洗8次。将蒴果转移
至无菌滤纸上,用解剖针划开子房壁,露出绿色种子(6
成成熟),将带种子的胎座转移至装有无菌水的离心管
中,振荡制成种子悬浮液。吸取150uL种子悬浮液接
种至种子萌发培养基中培养藏南粉报春无菌苗。
7d后种子萌发,15d后部分幼苗子叶展开,45d后
全部幼苗子叶展开(图1),统计发芽率为13.0%。
4.2 丛生芽的诱导
取出无菌苗,去除大叶片,每棵无菌苗3~4片叶,
去除根部,接种至丛生芽诱导培养基中,30~45d诱导
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《西藏科技》2015年6期(总第267期) 动植物研究
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西藏大学研究生创新人才培养基金
通讯作者
出丛生芽(图2)。XA、XB、YA、YB培养基中,叶片形
态正常,生长量适中,植株健壮,选取作为丛生芽增殖
培养基。
4.3 丛生芽的增殖
将诱导出的丛生芽取出,去除衰老叶片,切割分成
数丛,每丛3~4片叶,接种至丛生芽增殖培养基中,继
代培养45d(图3),繁殖系数可达5.0。
4.4 生根培养
将增殖的丛生芽取出,去除衰老叶片,切割分成数
丛,每丛4~5片叶,接种至生根培养基中,培养30d,
生根率达100%(图4)。
图1 无菌苗培养
图2 丛生芽诱导
图3 丛生芽增殖
图4 生根培养
5 意义与进展
报春花是西藏自治区的区花,与龙胆、杜鹃并称为
“世界三大高山花卉”,同时也是中国三大天然名花之
一。藏南粉报春是报春花科报春花属多年生草本植
物。伞形花序顶生,具3~13花;花冠粉红色至淡蓝紫
色;花期7~9月,果期8~10月。产于我国西藏,自亚
东、拉萨沿雅鲁藏布江河谷分布至米林、林芝等地,较
常见。生长于山坡草地、岩石缝隙和高山松林下,海拔
2700~5300米。藏南粉报春种质资源丰富、花色艳
丽、花期较长、株型紧凑,适用于园艺品种育种和改良。
在培育藏南粉报春时,存在种子小、发芽率低、生长周
期长等问题。通过组织培养和快速繁殖的方式,可周
年批量生产藏南粉报春无性系,繁殖速度快、生产成本
小。目前已见组织培养的报春花属植物有翠南报春
(P.sieboldi)、报春花(P.malacoides)、小报春(P.
forbesi)、鄂报春(P.obconica)等20余种,但藏南粉报
春的组织培养和快速繁殖尚未报道。
参考文献
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快速繁殖[J].植物生理学通讯,2007,43(2):323-323.
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-78.
〔6〕 陈封怀.中国植物志.北京:科学出版社,1990.
编校 洛桑次仁
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动植物研究 《西藏科技》2015年6期(总第267期)