全 文 ：论 著·临 床 辅 助 检 查 论著·临床辅助检查
CHINESE OCMMUNITY DOCTORS
中国社区医师·医学专业 2011 年第 10 期(第 13 卷总第 271 期) 245
普洱茶对胃癌前病变大鼠 p53 基因表达的影响
江海东
621606 四川盐亭县肿瘤医院
摘 要 目的:荧光定量 PCR 检测普洱
茶对胃癌前病变大鼠 p53 基因的表达。
方法:建立大鼠胃癌前病变模型，给予普
洱茶灌胃 1 个月后，采用荧光定量 PCR
检测 p53 基因的表达情况。结果:普洱茶
处理组 1 个月后，p53 mRNA 的表达显著
高于未用普洱茶处理组(t = 3. 256，P =
0. 006)。结论:普洱茶可以稳定抑癌基因
p53 的表达。由此推测普洱茶通过抑制
p53 的突变或稳定 p53 基因来抑制大鼠
胃癌前病变向胃癌的转化。
关键词 胃癌 癌前病变 普洱茶 p53
基因
doi:10． 3969 / j． issn． 1007 － 614x． 2011．
10． 263
Abstract Objective:to measure the p53
gene expression in gastric precancerous le-
sions of rats after Pu＇er tea treatment by real
－ time PCR． Methods:We established the
gastric precancerous lesions model in rats
and treated rats with Pu＇er tea for 1 month．
In the end，we used real － time PCR to
measure the p53 gene expression． Results:
treatment with Pu＇er tea for 1 month，the p53
gene expression in these rats was significan-
ly higher than this in the rats without Pu＇er
tea treatment． Conclusion:Pu＇er tea can sta-
bilized p53 tumor suppressor gene expres-
sion，which indicated that Pu ＇er tea sup-
pressing p53 gene mutation or stability of
p53 to inhibit the transformation of rat gas-
tric precancerous lesions to gastric cancer．
Key Word Gastric carcinoma;Precanceros-
is;Pu＇er tea;P53 gene
胃癌是世界上多数国家常见的消化
道肿瘤，死亡率高，严重威胁着人们的生
命和健康。胃癌的高发年龄为 50 ～ 59
岁，其次为 40 ～ 49 岁，男性多于女性。按
Lauren分型，胃癌可分为肠型和弥漫型两
大类，前者多见于高发区，以老年人为主，
恶性程度较低，术后预后较好;后者在高、
低发区基本一致，患病年龄前移，恶性程
度较高，预后不良。因此，胃癌的预防成
为目前广大科研工作者研究的热点。
饮茶是我国人们的传统习惯。早在
神农时，就有饮茶解七十二毒之说。目前
研究发现饮茶可以使胃癌发生的危险度
降低 29%。《梵天卢丛录》(柴萼，著于公
元 1925 年)云:“普洱茶，性温味香，治百
病，蒸制以竹篛成团裹，价等兼金。”普洱
茶作为传统饮料，除能止渴生津和提神
外，还有特殊的药用功效。现代医学研究
发现普洱茶中的茶多酚类物、茶色素、咖
啡碱及多酚糖都是生物化学抗癌成分，能
起到防癌、抗癌的作用。基于此，本文通过
建立大鼠胃癌前病变模型，探讨普洱茶饮对
胃癌前病变大鼠抑癌基因 p53的表达。
资料与方法
实验动物:选用健康雄性 SD大鼠 36
只，体重 210 ± 20g(由四川大学华西医学
中心实验动物中心提供)。大鼠常规分
笼饲养，进食标准饲料，自由饮水。室温
保持 20 ～ 22℃，相对湿度 45% ～ 50%，光
照时间为每天 12 小时。大鼠按体重分
层，参照随机数字表分为 3 组，进行为期
1 个月的实验研究:对照组(C 组，n = 10)
自由饮水进食不受任何干预;模型组(M
组，n = 10)参照陈大权［1］等人的方法建
立大鼠胃癌前病变慢性萎缩性胃炎的模
型，不加任何干预;实验组(E 组，n = 10)
参照陈大权［1］等人的方法建立大鼠胃癌
前病变慢性萎缩性胃炎的模型，按每只大
鼠每日相当于成人体重给药量 20 倍计算
进行灌胃。
取材:大鼠断头处死后，取胃，沿胃大
弯剖开，暴露正高前胃和腺胃，PBS 冲洗
干净，均沿腺胃的小弯侧取材，取材大小
为 0． 5cm3，范围从贲门到幽门部。所取
材迅速置液氮中备用。
检测方法:染料法荧光定量 PCR 反
应(real － time PCR) ，采用 RNA抽提试剂
Trizol(Invitrogen) ，提取组织总 RNA 并经
紫外检测含量。所有操作步骤均按试剂
盒说明书进行。反转录按照 TaKaRa Pri-
meScriptTM RT reagent Kit perfect Real
Time试剂盒(TaKaRa Biotech Co，Dalian，
China)说明书进行，具体方法同上。各组
提取的总 RNA 用于检测相关因子的表
达，以 GAPDH 为参照。P53:sense:5 ＇
GTACCGTATGAGCCACCTGAG － 3 ＇，anti-
sense:5 ＇ CGTCCCAGAAGATTCCC － 3;
GAPDH － actin:sense:5＇－ ATGTATCCGT-
TGTGGATCTGAC － 3＇;antisense:5＇－ CCTG
CTTCACCACCTTCTTG － 3 ＇。PCR 反应
(TaKaRa SYBR Premix Ex TaqTM code:
DRR041A)参照试剂盒说明。
统计学方法:实验数据用 mean ± SD
表示，样本均数做 t检验检测，P ＜ 0. 05 认
为差 异 有 显 著 性。数 据 处 理 采 用
SPSS13. 0。
结 果
real － time PCR 实验结果:荧光定量
PCR的结果:由溶解曲线可以看出，所有检
测目的基因均为单峰，说明产物特异性好，
避免非特异产物对结果的影响。见图 1、2。
将各组胃 p53 mRNA水平经过 GAP-
DH标准化后进行比较，结果提示，与 C
组相比，M组在 1 个月后 p53 mRNA的表
达显著下降(t = 2. 636，P = 0. 014) ;而 E
组 p53 mRNA的表达略高于 C组，但差异
无显著性(t = 1. 781，P = 0. 459) ;E组 p53
mRNA的表达显著高于 M 组(t = 3. 256，
P = 0. 006)。p53 mRNA 的表达变化，见
表 1。
讨 论
据统计，全世界每年约有 90 万人新
诊断为胃癌，1990 年胃癌发病率仅次于
肺癌而居世界第 2 位，其中以日本、中国、
南非、和东欧的发病率较高。在中国，恶
性肿瘤死亡居全死因的第 2 位，其中胃癌
所占份额很大。萎缩性胃炎被广泛地认
为是胃癌的先兆，其更进一步的发展和广
泛的肠化生及严重的异型增生可导致癌
症的发生［2］。一项为期 6 年的队列研究
指出，萎缩性胃炎使胃癌发生的危险增加
了 2. 91 倍，并随萎缩程度的加重而增加。
国外萎缩性胃炎的癌变率为 8. 6% ～
13. 8%，国内为 1. 2% ～ 7. 1%。另有报
道，患胃癌风险大的人萎缩性胃炎的发病
率也高［3］。因此本文采用了诱导萎缩性
胃炎作为大鼠胃癌前病变的模型。
大多数肿瘤与癌基因的激活和抑癌
基因的失活有关。p53 基因结构及表达
的异常是人类最常见的基因改变之一，约
50%的人类肿瘤有 P53 基因的改变，且此
改变在胃肠道肿瘤中比较常见，成为近年
来肿瘤基础理论及临床研究的重点。p53
基因的缺失和突变不仅可见于早期胃癌，
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在肠化生及腺瘤中也可检测到［4］。p53
基因的突变率随胃黏膜病变程度的加深
而增加(分别为胃癌 60. 1%、异型增生
31. 3%、肠化生 11. 8%)［5］。还有学者认
为 p53 表达变化和胃癌转移密切相关，可
作为胃癌恶性表型的指标。此推论被蔡
嵘等人［6］研究 p53 基因在胃癌发生机制
中的作用中证实。因此本文选用 p53 基
因作为检测指标。
清人赵学敏《本草纲目拾遣》云:“普
洱茶性温味香，产攸乐、革登……六茶山，
以倚邦、蛮砖茶味较盛。味苦性刻，解油
腻牛羊毒，虚人禁用。苦涩逐痰下气，刮
肠通泄。普洱茶膏黑如漆，醒酒第一，绿
色者更佳。消食化痰，清胃生津，功力尤
大也。”近年来，国内外对普洱茶的生理、
药理功能进行了更加深入的研究，普洱茶
的功能也进一步的得到了开发。研究发
现，普洱茶可以显著抑制体外培养人胃癌
细胞的增殖;饮茶可以显著降低胃癌和慢
性胃炎危险度达 54%［7］。本实验研究发
现，普洱茶通过维持 p53 基因的稳定性，
抑制 p53 基因的突变来抑制胃癌前病变
大鼠向胃癌演变。其机理可能为，普洱茶
中富含的茶多酚类物、茶色素、咖啡碱及
多酚糖等生物化学抗癌成分，通过抑制致
原癌基因表达和维持抑癌基因的稳定性，
抑制其突变来降低癌症发生率。所以喝
普洱茶可以帮助人们防癌、抗癌，非常有
益于人体健康。
参考文献
1 王少明，林才经，杨春波，等． 胃炎 1 号对胃
黏膜癌前病变大鼠 p53 蛋白表达的影响．
福建中医药，2006:3755 － 3758．
2 Shen SW，Yuwen Y，Zhang ZL，et al． Effect of
Jinguo Weikang Capsule on proto － oncogene
expression of gastric mucosa in rats with gastric
precancerous lesions． Chin J Integr Med，
2008，14(3) :212 － 216．
3 Vukobrat － Bijedic Z，Radovi?S，et al． Tumor
suppresser gene p53 expression in premalig-
nant lesions and gastric carcinoma － prognostic
value． Bosn J Basic Med Sci，2007，7(1) :7 －
10．
4 Zhang Z，Yuan Y，Gao H，et al． Apoptosis，pro-
liferation and p53 gene expression of H． pylori
associated gastric epithelial lesions． World J
Gastroenterol，2001，7(6) :779 － 782．
5 Kim SH，Lee SH，Choi YL． Extensive altera-
tion in the expression profiles of TGFB path-
way signaling components and TP53 is ob-
served along the gastric dysplasia － carcinoma
sequence． Histol Histopathol，2008，23(12) :
1439 － 1452．
6 Tahara E． Genetic pathways of two types of
gastric cancer． IARC Sci Publ，2004，157(1) :
327 － 349．
7 俞顺章，张作风，俞国培，等． 饮绿茶对胃
癌、慢性胃炎发病影响的流行病学调查． 中
国癌症杂志，2001，11(1) :41 － 47．
图 1 GAPDH溶解曲线
图 2 p53 溶解曲线
表 1 各组大鼠体重及 p53 mRNA表达比较
组别(n =10) p53 mRNA表达 t P
对照组 vs模型组 0． 23 ± 0． 09vs． 0． 15 ± 0． 06* 2． 636 0． 014
对照组 vs处理组 0． 23 ± 0． 09vs0． 25 ± 0． 07 1． 781 0． 459
模型组 vs处理组 0． 15 ± 0． 06vs0． 25 ± 0． 07＊＊ 3． 256 0． 006
注:* (P ＜0. 05) ，＊＊(P ＜0. 01)。
北京启动“十百千”社区医务人才培养计划
北京社区卫生将有首席专家
本刊讯(记者 王天鹅)广告行业有“名
人”效应，医疗行业也有“名医”效应。目前，
三甲医院的名医效应已经发挥到极致 － －
只要有名医的地方，就有看不完的患者。但
是，相对于大医院，社区卫生服务机构却鲜
有叫得响的名医。为了改变这一现状，吸引
更多患者到社区卫生服务机构就医，北京市
卫生局启动的新一轮培训计划提出，将培养
10 名社区卫生首席专家，100 名社区卫生学
科带头人，1000 名社区卫生业务骨干。
据介绍，人才问题一直是阻挡社区卫生
服务发展的一大障碍，为了跨越这个障碍，
社区卫生服务机构采取了很多方式，如吸引
退休专家到社区、邀请三甲医院专家到社区
义诊等，但这些方式缺乏持久性，并不能从
根本上解决问题。为此，北京市卫生局提出
要培养社区卫生首席专家，来吸引更多患者
到社区就诊。
“现在有的社区卫生服务机构很受欢
迎，就是因为他们有拿得出手的专家，例如，
北京市牛街街道春风社区卫生服务站的中
医科就很受欢迎，专家号要提前预约，名医
效应起了很大作用。”北京市牛街社区卫生
服务中心主任赵红亮如是说。
北京市卫生局基层卫生处工作人员透
露，该项培训计划的主要目的是培养不同于
大医院但适合社区卫生服务机构的全科专
家，“在未来，社区卫生服务机构将担负起首
诊的责任，患者也会越来越多，如果没有社
区卫生服务机构自己的专家，就不能很好地
完成这项任务，所以必须培养更多全科医学
专家，培训计划也会持续下去。”
该工作人员告诉记者，此项培训计划的
具体细则还在制定中，估计今年上半年能够
成形，并开始实施。“可能采取单位推荐的
方式报名，名额有限，请社区卫生服务机构
多关注北京市卫生局发布的信息。”
据了解，北京市卫生局每年还将邀请国
(境)外有关全科医学的专家来京进行交流
和指导，举办学术讲座和交流活动。同时，
从事社区卫生服务的专业技术人员每年必
须完成规定的 20 学时的社区卫生继续教育
必修课程的学习。