全 文 ：、癌缸 、 19 9 2年第 日卷第 l期
荆豆凝集素 (U E A一 I )受体的定位分布
对诊断鼻咽癌前病变的初步观察关
}巫到 戴 奕然 “摊中山医科大学肿瘤中心病理室 候景辉 (广州 · 5 10 0 60 )
【提 要 】 用亲合组织化学技术 , 以 U E A一 I , C on A , P N A三种凝集素对 30 例鼻咽上皮重度不
典型增生 、 化生 (癌前病变 ) , 70 例鼻咽癌及 30 例正常鼻咽粘膜上皮进行观察对比 , 了解其分布定位
及含量的差异 。 结果发现 : 荆豆凝集素 ( U E A一 )I 在正常鳞状上皮多呈膜性分布 ; 鼻咽癌癌细胞多
呈阴性反应 ; 而鼻咽癌前病变的细胞则显示膜性及胞浆性强阳性反应 , 与正常上皮及癌巢对比鲜明 ,
U E A一 I 还能显示间质异常增生的血管 , 说明它是一种协助诊断鼻咽癌前病变很有希望的一种凝集素 。
而 P N A及 C o n A则对鼻咽癌前病变的诊断价值不大 。
关键词 : 鼻咽癌 癌前病变 凝集素亲合组织化学
凝集素是一类能与糖类作特异性结合 , 并能
使细胞凝集的蛋白质或糖蛋白。 利用凝集素作为
分子探针 , 可以根据细胞糖基定位、 分布的变化
或量的增减等作为恶性转化的肿瘤细胞的标记 。
新近 , 部分作者还以之作为癌前病变上皮细胞的
标记 仁卜 “ 」 ,但凝集素对鼻咽癌前病变的诊断价值
国内外均未见报道 。 我们对此进行了研究 。 `
材料和方法
从本院近年来 80 0例鼻咽部活检中选出不同类
型的鼻咽癌共 70 例 (低分化鳞癌 4 6例 ; 泡状核细
胞癌 8 例 ; 低分化腺癌 7例 ; 未分化癌 4例 ; 高
分化及乳头状鳞癌 5 例 ) 。 鼻咽上皮重度不典型
增生— 癌前病变 30例 ; 另 3喇正常或较正常 ( 慢性炎 ) 的鼻咽上皮供对照。
从多种凝集素中选出其受体定位分布与癌前
病变有关的U I e x e ur o详us 人犯 lut i顽卜 I , U -E
A一 I ; P e a n u t A g g l u t i n i n , P N A ; C o n ca r -a
r a l i n esn i f or m i
s , C o A三种凝集素进行观察 。
所用凝集素及 A B C试剂均为美国V e ct or 公
司生产 。 标本作 4 产厚切片后作凝集素亲合组化
染色 , 其步骤与A B C法同 : ( l) 石蜡切片月劝错
至水化 ; ( 2) 3 % H Z 0 2处理 5 分钟以消 除内
源性过氧化物酶 ; ( 3 ) P B S ( p H 7 . 4 ) 浸洗 2
次每次 5 分钟 ; ( 4 ) 10 %正常血清 2伪分钟; ( 5)
各种生物素化的凝集素 ( U E A一 I , C o n A , P N A
工作浓度均为 l : 20 0) 1小时或 4 OC冰箱过夜 ;
、 6 、 P B S ( p H 7 . 4 ) 浸洗 2 次 , 每次 5 分钟 ;
( 7 )A B C (即卵白素一 .生物素复合物 ) 30 分钟至 1小时 ( A : B = 1 . 5 : l ) ; ( 8 ) P B S ( PH
了 . 4 )浸洗 2 次 ,每次 5 分钟 ; ( 9 ) D A B显色
( 0
.
0 5% 3
,
3
’ — 二氨基联苯胺 5伽U加入 3 %
H
Z O : o一 5耐 ) ; ( 10 ) 苏木素复染核 、 脱水 、
透明 、 封片 , 实验的阴性对照组略去凝集素以 P B S
代替 , 阳性对照组用已知阳性片按上述步骤操作 。
亲合组化阳性结果判断 : 无棕色反应物为阴
性 ; 浅棕色为阳性 ; 深棕色为强阳性 。
统计学处理采用卡方检验 。
与三种生物素化凝集素结合的特异性糖基及
凝集素的工作浓度见表 1 。
结 果
三种凝集素 ( U E A一 I , P N A , C o nA ) 在
鼻咽正常上皮 , 癌前病变上皮及癌三者的定位分
布及含量 (反应强度 ) 的观察结果 , 发现与诊断
. 本文为国家教委博士点科研墓金资助课题
9 1
表 1三种生物素化凝集素及其工作浓度 、 与之结合的特异性糖基
握 集 素
U E A一 _ I
特 异 性 橄 基
, 一岩 藻 摘
P N A
工 作 浓 度
I : 刃 0 2
l : 2 0 0
D一 半乳 箱
D一 半乳 摘一 N一 乙 酸
氮基 半乳拾
C o n A
加 0 2 0 0
D一 荀 萄锗
0 一 甘璐 抢
有关的凝集素定位分布有三种类型 : ( l) 胞浆
型 (简称 C ) ; ( 2 ) 膜型 (简称M ) ; ( 3 ) 细胞
间型 (I nt er c el l ua r 简称I C ) 。 不同上皮 , 不同
部位的细胞 , 其定位分布的类型及 反应 强度
各不相同。
三种凝集素在不同上皮其阳性定位的百分比
见表 2 。
表 2 鼻咽瘤正常上皮 、 痛前上皮及鼻咽痛
凝集素阳性定位比较 (吟
正常 幼状 上皮
凝集 双
( 3 0例 )
重度不典型增生上皮
(痛前 ) 产30例 )
鼻咽 庙
( 7 0例 )
. 曰 , . ~ ~ . . . . . . 如~ 一冲
M I C C M I C C M I C
U E A 一 1 6 _ 6
P N A
C o n A
6
.
6
1 3
_
3
9 0
,
0
3 3
.
3
7 3
.
3
6 6
.
6
8 6
.
6
6
.
6
4 0 0
8 6
.
6
5 6
.
6
4 0
.
0
0 0 8
.
5 0
5 6
.
6 0 10
.
0 1 0
0 : 10 0 0
这表明 ( 1) 荆豆凝集素 ( U E A 一 )I 在正
常鳞状上皮多呈膜性阳性反应 `图 1 ) ; 在癌前
上皮 (包括重度薄层不典型化生 ) 则显膜性加胞
浆性强阳性反应 (图 2 、 4 ) ; 而鼻咽癌除少数
分化较高的鳞癌 (鳞癌 l 、 1 级 ) 及梭形细胞低
分化鳞癌外 , 绝大部分均呈阴性反应 (图 3 ) 。
三组上皮比较 , U E A一 I 以癌前上皮细胞有膜加
胞浆性强阳性反应为特征 。 花常鳞状上皮虽有膜
性阳性反应 , 但胞浆性强阳性的极少 ( 6 . 6 % ) .
与癌前上皮占 86 . 6%相比 , 差异有显著意义 (X Z
= 38
.
SP < 0
.
0 5)
。 又由干鼻咽癌时胞浆 及膜性
反应均呈阴性 , 故此 , 显微镜下三组对比鲜明 ,
形态学反差大 , 易于识别 、
附带说明两点 : ( 1 ) 我们所指鼻咽癌前病
变仅指重度不典型增生 、 化生的上皮 , 不包括轻
度不典型增生 、 化生 , 其实在轻度不典型增生 、
化生时亦已开始显示膜加胞浆性的阳性反应 , 但
程度较轻。 ( 2 ) 在鼻咽癌前上皮下方的异常增
生血管亦可被U E A一 ; I 显示 。
( 2 ) 花生凝集素 ( P N A ) : 以出现细胞间
(I C ) 阳性物质幼寺点 。 特别在正常鳞状上皮 ,
形态学上很象棘层细胞的细胞间桥 , 细胞间物质
均只呈弱阳性反应 。 正常与癌前上皮相比 , 祖 C
项的差异无显著意义 ( P > 0 . 05 ) , 只正常与癌
及癌前上皮与癌相比 , 在 I C 项有显著意义 (P <
0
.
0 5)
, 故对协助癌前上皮诊断无特殊价值 。
( 3 ) 刀豆凝集素 ( C优叭 ) : 在正 常 上 皮
浅表层及浅棘层有 7 3 . 3% 显膜性阳性反应 ; 癌前
上皮有40 % 为膜性阳性反应 ; 癌细胞除分化较好
的外 , 多呈阴性反应 。 三组上皮对比不够鲜明 。
讨 论
利用 “ 一种凝集素只对某种特殊的糖基具有
特异性 ” 这一特点 L” ,将凝集素作为分子探针 ,
以了解细胞恶变过程中糖基定位及其分布 、 量的
变化 〔.71 。 , , 作为判别癌前病变的依据 〔卜 “ ’ , 以补
充观察常规染色切片时 , 多少带有主观 标准
来判断痛前病变的不足 。 脚 C h 。 、 V 〔 “ ’用卵 白素
— 生物蔚一过氧化酶亲合组化技术 ,将C o nA ,U E A一 I , R C A等凝集素对宫颈正常上皮 、 不
典型增生 ( yD s口as i a) 上皮及浸润癌作对比研究 ,
发现U E A一 I 在正常宫颈上皮阴性 , 不典型增 生
上皮为中等强度的膜加胞浆性阳性 ; 浸润癌则呈
膜加胞浆性强阳性 , 三种上皮随着细胞的恶变存
在着对比鲜明的定位分布和量的改变 。 B ol a n d
C
、
B 〔” ’爱现从结肠管状腺瘤一 ,绒毛状腺瘤一灶性癌变月郭窟这一系列恶性潜能不断增加的病变 ,亦存
在着 P N A的结合率递增 。 Sh i o d a 、 Y 〔 ` ’ WjI 发现用 、
DM H诱发大鼠结肠癌模型的过程中 , 93 %实验动
物 U E A一 I结合量的阳性程度逐步增强 。 除发现
上述凝集素量的改变外 , iJ n y 、 T 〔 ” ’ 在以D M B A
诱发实验性仑鼠颊袋癌时发现R C A一 I及UE A
一 I 的定位分布由膜性转变为胞浆内区域时意味着
上皮细胞发生了恶变 。 认为此两种凝集素均可作
为诊断恶变的标准 。
本文研究结果表明 : U E A一 I在正常鳞状上
皮多呈膜性分布 , 而癌前病变的上皮细胞则显示
膜性加胞浆性强阳性反应 , 正常与癌前组相比胞
浆性分布的差异有显著意义 ( P < 0 . 00 5) 。 癌前
病变中特别是常见的薄层重度不典型化生在亲合 ·
2 0
免疫组化显示下 , 形态突出 , 与反应阴性的癌巢
又形成鲜明对照 , 极易判断 。 在诊断鼻咽癌前病
变时厂勒寺别强调刁澳醚七生及薄层不典型化生 ,
理由是 : 根据大量形态学材料观察表明 , 单纯性
增生或化生的鼻咽上皮其癌变过程必须经过不典
型增生或刁碘型化生 〔1 〕 这一阶段。 人类鼻咽癌好
发部位在鼻咽顶后壁及侧壁 , 该处披复上皮是假
复层纤毛柱状上皮 (纤往七皮) 而不是鳞状上皮 ,
因而作为癌前病变来说不典型化生 能 t alP as ia) 比不典型增生更为重要 。 这种化 生常见于鼻咽粘膜陷窝口或拐弯处 , 层次只有 3
一 5 层 , 由.薄层不典型化 生发展为原位 癌的
的屡见不鲜。 这或许可解释为 “ 经损伤后修复化生的
上皮细胞更易于接受致癌或促癌因子的作用而发生
癌变” 。
此外 , 在本文观察过程中 , 已注意到有癌前
病变的上皮 , 其下方间质可见被 UE A一 I 显示的
增生血管 。 最近我们曾发表论文 〔 , , ,用免疫组化
A B C法 , 以翁咽引彬翰源作为血管的标记物 ,
经光镜观察 , 并以自动图象分析仪作计量分析 ,
证明约占79 % 的鼻咽癌前病变 , 其间质血管具有
与早期鼻咽癌类似的不典型增生改变 , 认为间质
异型血管的出现可作为鼻咽癌前病变诊断的辅助
指标 。 U E A一 . 1是一种比第八因子相关抗原还要
好的血管标记物 , 〕 ,使用 U E户广一 1既可显示鼻咽
癌前上皮 , 又可显示其下方间质不典型增生的
血管 , 因而 , 这种凝集素是协助诊断奏咽癌前病
变很有希望的一种凝集素。
我们的研究还表明 , 糖基的改变可发生在癌
前阶段 , 即形态学能辨认出属原位癌之前的病变 ,
说明凝集素对诊断癌前病变是有价值的 。 至于糖
基的改变在整个恶 变过程中是否如巧 g n es wa
an 〔幻所说的 `昨为不典型增生的原因” 则尚待进
一步研究 。 (图 l 一 4 见插页 )
参 考 文 献
〔 1 〕 D a m aj n o v l · L e e t i n e y t o e h e m i s r乃 a耐 h is t ·
o e h e m i、 tyr L a b’. In v e s t . 10 5 7` 5 7 ( 1 ) : 5
[ 2 ] B y c h k o v V
.
L e e t in B i n d in g ot n o r m a l
.
D y
·
s p l a s t ic a n d n e o P跳 t ic c e 伪记a l e P i让一e l iu m
A n l
.
J
.
C li n
.
P a th o l
.
1 0 8 6 ; 8 5 : 54 2
仁 3 飞 oB la n d C . B . A e a n e e阅 s 场o c ia化 d m u e in a l叱七-
r a t io n in be
n g in c o lo n i c P o ly P s G a s toe
n t e or l
·
1 9 8 2 ; 8 2 : 6 e 4
〔 4 〕 S h io d a Y . ; S e r ia l o b se r v a t io n o f e o 协 n i e
。 a 邝玩 Og e n e s is in ar t G a s toe n 记 or l . 1 9 8 7 ;
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[ 5 〕 J宝n Y T e t a l . L e e t i n b in d in s p a t记 rn s in
闪 u a m o u s e p i th e liu m in e x醉 r叻 e n t a lly in -
d u e e d h a m
s et r b u c勺 1 P o u e h e a cr in o m a J.
o ar l p a th o l
.
n l e d r g s g ; 15 ( s ) : 4 嫂6 .
[ 6 〕 V 论n e s w a ar n N . e t a l . A L e e t ix一 h i , ot e h e m -
i e a】 s t u d少 i n o r a l le o k o P la k认 5 P a r i l lo m o s
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C e ll T is
u e K in e t 1 9 9 0:
2 3 ( 1 ) : 4 1
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意义探讨 . 中山医科大学学报 19 89 二 10 (4 ) :
[ 8 」 0 川 o n e z N . G . C o m p a r iso n o f u le x e u or
p a e o u s 1 L e e t in a n d f a e ot
r V l l l一 e 扭et d
a n t ig e n I n v e s e u la r L e s io n A r e h P a t h o l
.
L a b
M e d r 9 8 4 1 10 8 : 12 9
〔 9 」冯本橙 , 刘克拉 . 鼻咽痛前病变间质血 管形态
学观察一一光镜 、 免疫组化及图案分析仪计里
分析 第四届全国 肿瘤会议学术论文摘要
19 9() : 2 5 1
〔 一。〕 T i e沁m a n s Y . e t a l . H ist co h e m ie a 、 a n d P o -
l ife ar t iv e e h a n g e吕 P er e d in g th e o n se t o f
s P o n 场 n e o u s 名a s t r i e a d e n o e a r e i n o n l a 盈n m a ·
s t o m y s n a at 犯 n s is v i r e h o w A cr h一 。5 7 ;
4 7 1 : 2 7 5
1门 冯本 没 鼻咽庙前病变的细胞学标准探讨
痛症 一9 5 6 : l : 7 9
2 I
“ 广一东省肿瘤临床诊治
新技术经验交流会 ” 在穗召开
由广东省卫 生厅 主办的 “ 广东省钟瘤临床诊治 新
技 犬经 验 交流会 ” 于 19 9 1年 勺月2 5日至9 月2 8日在穗
召 开 。 该会 由有 卫生厅肿瘤防 治办公 室李特优主任 、
姚毅 、 付才 岗副 主任主持 , 米衍浩副厅长代 表广 东省
卫 : L厅 致开幕词 。
来自全省川 个县 以上医疗单位的 15 3名 代表出席了
会议 。 会 议收 到 27 个单位的交流论文共 74 篇 , 其 中大
会 发言 41 篇 、 书面 和其它方式交流 24 篇 。 它们充分展
示了近年来我省杭肿疮研究的可喜成 果 , 提示肿瘤 的
诊 治进入 一个新时代。 会上分别由郑 国粱 、 曾其祥 、
陈孝岳 、 吴哲凡 、 罗鹤飞 、 管忠震 、 陈效莲 、 陈 国权 、
黄济一群 、 潘 国英 、 李林菲等肿 瘤专家和学者对 关于癌
种早期诊断 、 C T和 B超在肿瘤诊断 的应 用 、 手术 治
疗 、 放射治疗 、 化学治疗 、 中医 中药治疗肿瘤的进展 、
介入疗 法 、 加热疗法 等 1 个方 面 进行了专题报告 。
有 12 个 医疗 器械设备公司和医药公司派代表参加
了会议 , 并在会上对他们 的产品 作 了介绍 和展览 。
闭幕式上 , 张衍浩副厅长 作了重要讲话 , 为我省
肿瘤防 治事业提 出了五点具体要求 : 角增强科技意识 ,
使我省种瘤 专业跟上 新形势 ; ②继续摘好肿瘤专科建
设 ; ③重视科学技术研究 , 实行中西 医结合 , 大力推
广和学习新技术 ; ④搞好肿瘤专业队伍 自身建设 ; ⑤
实行全 行业管理 , . 充分发挥现有的防治手段 , 实施完
善的防治计划 。
(徐 萍 )
T H E V A L U E O F
R E C E P T O R S
D I S T R IB U T E D L O C A T IO N O F L E C T 刃阿 U E A · I
IN T H E D IA G N O S I S O F P R E C A N C E R O U S
L E S OI N O F N A S O P H A R Y N X
D A I Y i一 n X玩 0 Z h e n 刁 1 H O U J in g · h u i
(D e P a
r t . 阴 t of 户at ho loJ 分 , T u m or H 山P i t以 口耐 C伽cer 了世打加 te,,
S u , Y a-t
,阴 U ” ,刃 e r s 1’yt of 对 de ica l 5 o ces , G u a ng 动佣 , P R . C . , 2 0 0 6 0 )
[ A BS T R A C T ) By ht
e u se o f 协 e ti n a f i n i tiv e h is ot c h e m ica l m e ht 喊 th e a f f i n iyt o f
n o
mr
a
L d y sP I助 tic , n e o P】as t le n aso P h a yr n罗 a l e P i t h e il u m ot ht er k in d o f le e t in s (U E A
一
L
C o n ^ an d p N A ) w
e 传 别 , : d ied
.
U E A
一
I (U le x e u or p e a n A邸 Iu t in i几 I) d isP lay e d m e m b ar n e
d is trj 加 t io n i n n o mr a l 闪 u am ous e p iht e l iu m
,
b u t m os t o f n a阳 p h a yt n g ae l e a r e in o m a ce l ls
hs o w e d n e g a t iV e er a e t io n ot U E A
·
L N o ta b l y
,
se
v e re 衡 s p姚 t ic e P iht e liu m (p拍 e a n ce or u s
le s io n )
e x h i b i te d a s t or n g m e m b ar
n o u s a n d c y t o P l a名m io a f f i n i ty , ht a t co n tr as et d hs a中 ly
w it h rh e n o mr
a l e p i th e li u m a n d ca
r c in om
a “ 1.15 T h e s at ist ti c a】ly is n if ica n t d if f e er n e in
t h e 伪n te n t a n d d is t ir b u et d fo e a t io n o f le e ti n U E A · I in ’ t h e se ht 肥 e g or u P气 s u g g e 吕t e d t h a t
I J E A
·
1 m a y be
a u se f u l le c t i n fo
r ht e d ia g n% 15 o f p er e a n e 咖5 le iso n o f n a OS Pha 仃 n x ·
uB t P N A a
n d C o n A h a v e n o d认g n仍 t ic V a l u e .
K e y w o dr 又 N as oP h a yr 雌 e a l e a r c in o m a P化ca n ce or u s le iso n
L e e ti n一 f f i n i tiv e h is ot c h e m is t yr