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毒芹生物碱的提取及对害鼠的毒性试验



全 文 :植保技术与推广 l Pa nt Pr o te e“ o nT e eh no一。盯 n :dE xt e s ni o n, 2 0 0 2 , v o 一2 2 , N o . 6
翌毒芹生物碱” “ “ 及“ 害鼠的毒” “ “施大钊 ’ , 郭喜红 2 , 李安陆 ’
( 1
. 中国农业大学 , 北京 10 0 0 94 ; 2 . 北京市植保站 , 10 0 0 29 ; 3 . 全国农业技术推广服务中
心 , l 0() 0 2 6 )
摘要 :试验提出在实验室用毒芹提取毒芹碱的技术 。 用此提取液毒杀大仓鼠 、 布氏田鼠试验 , 表明毒芹碱
属于急性药物 , 其作用部位为神经系统 ; 对大仓鼠和布氏田 鼠的 DI S。 分别为每公斤体重 7 m g 左右和 9
m g 左右
关键词 : 毒芹 ; 毒芹碱 ; 害鼠 ;毒性试验
中图分类号 : 54 8 2 . 5 ` 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 00 4 一 7 2 5 5 ( 2 0 02 ) 0 6 一 0 0 2 7 一 0 3
毒芹 ( C i c u r a : i or s a IJ . ) 是伞形花科的多年
生有毒草本植物 , 在中国北方分布较为广泛
这种植物含有以毒芹碱 ( c on i n e )为主的多种幽
类生物碱 , 对哺乳动物有较强的毒力 。 有些地
区为了减少家畜误食中毒花费了巨大的人力 、
物力加以清除 。 但此种植物的生活力极强 , 且
与其共同分布的泽芹 ( iS “ m 、 au : 。 ) 的形态非常
相近 ,给识别与清除造成很大困难 。 另一方面 ,
毒芹的药用价值早已被我国人民认识 , 《本 草纲
目》 即有对毒芹的记载 。 安徽等地也有栽培的
历史 。 如何将这种有毒植物开发利用 , 以减少
其危害 ,创造出经济利益 ,是我们所 面临的课题
之一 。 为 了确定毒芹生物碱 的含量及应用前
景 ,在初步分析 了其生物碱含量 的基础 [ ,采用
毒芹碱提取液对大仓鼠和布氏田鼠做 了毒力及
适口性测定 。
1 毒芹生物碱的制备
供试毒芹采自内蒙古锡林郭勒盟恩格尔河
畔 。 材料经干燥粉碎处理后 , 置于实验室 内于
燥后采用蒸馏法制备。 提取工艺如下 :
盐酸中和
蒸干
_
_
_
, , 甲醛 、 。 、 _ 蒸干
~ 蒸卞卿 万下了言 一腮散— 一残 渔过腮加人碳酸钠
乙醚提取
一 乙醚提取液l豆!」冬圣坠 一残余油
状 液体 19 0℃ 下通氢气分馏 ~ 分馏 液
加人盐酸
蒸干
一卜残渣!翌鳖巫一丙酮提取液 (含 1 一 去氢毒
芹碱 : 里鱼鲤 一毒芹碱
在制备中 , 提取的关键是分馏后的蒸干过
程 。 如温度过高 , 可能导致有效成分变性 ,温度
过低 , 由于盐酸不能充分中和 ,则会降低有效含
量 C
试验分别按叶片 、 根颈 、 花序 、 茎制备提取
毒芹碱液 。 然后用沉析法测定不同部位的毒芹
80 。
毒芹 (干燥样品 ) 碳酸钠液水蒸气蒸馏 ~ 蒸馏液
崛 要 60卜 ~如 派 . 1 1 1
俄夏 已 1 1 1
征 : 4 o r } } 一膨 匕 1 l l F- 〕 r - , 1 1
2 0 r { 1 1 1 1 1 1 1
0
’ 二 `
叶片 根颈 花序 茎 平均
图 1 毒芹不 同部位的毒芹碱含 t 比较
收稿 日期 : 2 0 0 2 一 0 2 一 0 6 ;修 回日期 : 20 ( )2 一 0 4 一 0 8
荃金项 目 : 国家自然科学基金项 目 (批准号 : 3 9 9 7 0 4 92 }
作者简介 :施大钊 ( 1 951 一 ) , 男 ,北京市人 , 副教授 , 硕 士生导师 ,从事农田害鼠防治研究 。
· 参加本项测试工作的还有海淑珍 、 李媛 、龚治峰等同志 , 在此一并致谢 。
植保技术与推广 p一 a t n l、 o te e“ o n Te e hno一 o yg a“ Et xe n s lo n, 2 0 0 2 , V o l . 2 2 , N o . 6
碱含量 。 测定结果见图 1。
从图 1 可以看出 , 毒芹植株体的毒芹碱平
均含量达每公斤 3 0 . 358 x 10 一 ’ m g 。其中根颈的
含量最高 ,平均含量达 58 . 78 、 10 一 ’ m g ,是其他
部位的 2 倍以上 。 叶片的含量最低 ,平均含量仅
为 1 1 . s o 7 5 x l o 一 ’ m g 。 而花序与茎的含量相
近 , 前者平均为 25 . 7 7 2 5 x lo 一 ’ m g , 后者平均
为 2 5 . 3 7 1 8 8 x 10 一 ’ m g 。
2 害鼠对毒芹碱的反应测定
试验动物为大仓鼠 ( C ir ce ut lus 廿 it on ) 采自
北京顺义区 ; 布氏田鼠 ( M ic or t us bar n d云i ) 采自
内蒙古正镶白旗 。 实验前经驯养 10 d 后 , 选择
健康 、行动活跃的成体鼠做实验 ,雌 、雄各半 ,均
为 2 0 只 。 大仓 鼠体重 2 0 1 . 8 5 一 2 4 0 9 , 平均
2 2 1
.
4 7 土 1 0
.
8 4 9 ; 布氏田 鼠体重为 3 4 一 5 5 9 ,
平均 47 . 1 2 士 25 9 。试验鼠分别采用强制服用和
选择性取食 2 种方式测定毒芹碱的作用 。 受试
动物对毒芹碱提取液的反应如下 :
l) 毒芹碱对鼠类的急性毒力测定 。 毒芹碱
液置于冰箱内 一 巧℃下保存 。 试验前 ld 取出用
蒸馏水稀释至所测试的浓度 , 分别使用 0 . 0 01
%
。 、
0
.
01 输和 0 . 1%。 3种浓度 口饲大仓鼠 (口饲
量未限制 ) 。 s m in 后 口饲 0 , 1% 。浓度的试鼠死
亡 ;约 s h 后 口饲 0 . 01 知浓度试鼠死亡 ; 1d0 内
口饲 0 . 0 1输浓度试鼠无异常反应 。 由此可知 ,
大仓鼠对毒芹提取液的耐受浓度妻 0 . 0 1%。 , 蕊
0
.
1骗 。 0 . 1骗的浓度将导致该鼠急性死亡 。 对
服用毒芹碱提取液致死的大仓鼠做腹脏解剖 ,
可发现肝脏和肺叶淤血 , 胃容物基本未消化 。
将大仓 鼠和布 氏 田 鼠分别 给予 浓度为
0
.
0 5输 、 0 . 0 7 5输 、 0 . 1 5骗 、 0 . 3 0骗的毒芹碱液
0
.
5 m l 一次性 口服 ,观察其药物的作用 。
衰 1 容以口服不同浓度毒芹碱后平均死亡时间
(单位 : h )
毒芹碱浓度 大仓鼠 布氏田鼠
(输 ) 雌 雄 雌 雄
0
.
0 5 1 1 5
.
2 1 20
.
8 7 8
.
4 7 2
.
5
0
.
07 5 1 5
.
4 1 8
.
2 8
.
5 10
.
6
0
.
1 5 3
.
3 3
.
5 0
.
5 0
.
5
0
.
30 2
.
8 3
.
4 0
.
1 0
.
2
注 :害鼠 口服毒芹碱量 0 . 5 m l/ 头 。
测试结果 (表 l) 可以看出 , 布氏田鼠比大
仓鼠对毒芹碱提取液更为敏感 , 其中毒死亡时
间远快于大仓鼠 。 分析其原因 , 一是布氏田鼠
的体小 ,饲喂量相对大些 ;二是布氏田鼠对不良
环境的耐受能力比大仓鼠弱 。
给药后害鼠陆续出现中毒反应 。 首先表现
为精神萎蔫 , 活动量急剧减少 , 继而蜷缩于窝巢
内似在寒冷环境中的形态— 闭眼 、 震颤 、 厌食 ,直至死亡 。 少数个体服药后的反应不明显 ,
但一段时间后会突然死亡 。 这表明 , 毒芹碱属
于急效药物 , 且药物的作用部位为神经系统 。
因而如果将其毒害成分加以利用 , 必须找到对
其毒害机理具有特效颇顽的药物 , 而且开发前
需要将其药物毒理进一步研究清楚 。
2 )毒芹碱对害鼠致死中量 ( LD S。 )的测定 。
采用 不同剂量的 0 . 05 %。毒芹碱提取液强制 口
服方法 , 测定大仓鼠和布氏田鼠的致死中量 。
结果如表 2 。
表 2 口服毒芹碱对害鼠的致死中 t
鼠 ” 性别 瞥 瞥 死留间 琵骗大仓鼠 雌 1 1 5 2 3 3 : 4
1 5 8 2 5
1 7 2 1
.
5
10 2 3 3
雄 17 7 2 . 5 4 2 : 3
15 8 2
.
5 3
布氏田鼠 雌 0 . 5
0
.
5
3 2
: 4
0
.
5
0
.
5
l
42350一678
注 :毒芹碱浓度均为 0 . 05 %。 。
从表 2 结果 , 根据 iL t hc if el d 的方法计算出
2 种害鼠的致死中量 ( L D。。 ) : 大仓鼠雄性为每公
斤体重 7 . 7 6 9 6 5 m g ,雌性为 6 . 5 2 9 5 5 m g ;布氏
田 鼠雄性为 8 . 5 4 7 0 1 m g , 雌性 为 9 . 5 0 3 9 2
m g
。通常杀鼠剂较为适宜的 LD , 。 范围在 1 一 10 0
m g / k g 体重之间 。 如果毒力过强 , 一旦 出现人
或畜 、 禽误食则来不及采用抢救措施 。 毒芹碱
植保技术与推广 pl a n t proce ti tn oT e e h n o一 og ya nd E x te耐 n o, 2 0 0: 2 , v o一 2 2 , N o . 6
的毒力 比现行市售的普通 急性杀 鼠剂 更
强 。 如果需要利用则必须在投放之前加以稀
释 。 稀释的浓度应在 1 x 10 , 以上 。 而稀释后
生物碱的活性 及其有效 时间均应进一步做
出严格的定量确定 。
3) 鼠类对毒芹碱提取液适 口性的测
定 。 试验在室内进行 , 将试验组笼内投人足
量的毒芹叶片 、 0 . 15%。毒芹碱提取液浸泡 24
h 的胡萝 卜和害鼠均不喜食的牧草— 披碱草
(不含提取液 ) 3种饵料 , 对照组则只投人不含
提取液的胡萝 卜、披碱草 。 投饵后 4 h 内将供试
害鼠在投饵后的行为录像 。 并根据录像分析投
饵 3 h 内的摄食频次 ,其结果如表 3 。 此后的试
验期间则每天对害鼠所食的残余物称重 , 以判
断害鼠对各种食物的采食量 。 每组各有试鼠 4
只 ,雌 、雄各半 。 试验共进行 10 do
从表 3 可 以看出 , 2种害鼠对毒芹廿I一片均
不喜食 , 而且大仓鼠对含有毒芹碱的胡萝 卜的
采食频率明显低于对照组 。 以后 10 d 对食物所
做的摄食量测定亦证实 2 种害鼠基本拒食毒芹
叶片 , 对含毒芹碱提取液的胡萝 卜的采食量也
较低 。在 3 种食物中 ,胡萝 卜是布氏田 鼠和大仓
鼠均喜食的 , 这不仅可从对照组的取食比较中
表 3 害鼠对毒芹碱提取液食物的选择性比较
大仓鼠 布氏田鼠
饵料种类 取食次
数 (次 )
取食次
数 (次 )
取食频
率 (% )
578657一218民到一SU3210一811725一08试验组
对照组
毒芹叶片
含毒芹碱胡萝 卜
披碱草
胡萝 卜
披碱草
取食频
率 (% )
2
.
32
39
.
5 3
5 8
.
14
86
.
2 1
13
.
7 9
看出 , 而且在 日常饲育过程中它也是鼠类的首
选食物之一 。 但加人毒芹碱提取液后 , 采食频
率却明显下降 , 如作为拌种剂或种衣剂的添加
物可能会起到避免害鼠盗食种子的作用 。 由于
毒芹碱的提取比较容易 , 又属于天然的植物产
品 , 对环境无污染 。 而且害鼠对毒芹的味道敏
感 。 目前 ,我国野生毒芹资源丰富 ,如果将其利
用 ,变害为利 , 当有着良好的应用前景 。
参考文献 :
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农业出版社 , 19 98 .
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北京 :人民卫生出版社 , 1 98 .4
【3] 赵桂芝 , 施大钊 . 中国鼠害防治【M I . 北京 : 中国
农业出版社 , 19 95 .
髯 红太阳集团经济在较高位势上高速增长
红太阳集团 2 0 02 年一季度经济开局良好 , 呈现出
在较高位势上高速增长 , 运行质量继续提高的发展态
势 。 据统计 ,一季度实现现价产值 2 . 95 亿元 、 主营业务
收人 2 . 35 亿元 、 利润 863 万元 , 分别比上年同期增长
7 5%

6 0% 和 2 4 % 。
两大传统产业仍居核心地位 , 且后劲足 , 保持了快
速增长 。 农药产业主营业务收人同比上年增长 83 % , 小
包装市场占有率同比上年增长了 69 % ,并已在广西等 5
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漆涂料取得了恢复性快速增长 , 实现主营业务收人
3 52 7 万元 , 完成计划的 105 % , 利润同比去年减亏
24 9
.
5 万元 , 同比上年效益增长 了 969 % 。
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5 2%
, 并在南京等地新建了 6 家零售连销网点 , 使连销
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请获得了国家药监局的正式批准 ,成为麻黄素定点管理
制度改革后全国惟一定点生产麻黄素的生产企业 ;种业
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和 1 30% , 并已形成一支 自行研发高科技高附加值基因
产品的科研队伍 ; 中吴电子商务公司已建成 9 个县市级
连锁店 , 打造出了一套可克隆的成熟的连锁经营模式 ;
高分子材料公司主营业务收人 、销售回款同比上年分别
增长 187 % 和 2 07 % ,从而迈出了实质性的发展步伐 ;海
外事业发展公司在全力开拓国际销售渠道的同时 ,历经
4 个多月时间 , 在澳洲已合资成立了红 (下转第 21 页 )