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毒芹诱导分化培养基筛选



全 文 :第 2 期
收稿日期:2009-09-09
基金项目:吉林省教育厅科研项目(吉教科合字[2006]167 号)
作者简介:王艳玲(1965-),女,吉林永吉人,副教授,硕士,从事药用植物组织培养方面研究,(电话)13596382100(电子信箱)zyxyxgs@126.com。
第 49 卷第 2期
2010 年 2月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 49 No.2
Feb.,2010
毒芹(Cicuta virosa L.)为伞形科多年生有毒草
本植物,主要分布在我国东北、华北、西北以及四川
等地,江苏也有栽培的历史。 在世界范围内,朝鲜、
日本、 俄罗斯西伯利亚地区及蒙古等地区也有分
布。 生长在 400~2 900 m 的沼泽地里、水沟边、湿地
中[1,2]。 医学上常用于治疗骨髓炎;欧洲民间还用此
植物做成软膏或浸剂,外用治疗某些皮肤病、痛风、
风湿,或作为神经痛的止痛剂[3]。 毒芹乃剧毒植物,
全株有毒,根部含毒最多且有甜的味道,动物喜欢
采食而引起中毒,其毒性成分为生物碱毒芹素[4],根
茎切开后流出淡黄色毒液。 有些地方为了减少家畜
误食花费了巨大的人力 [5],但其药用价值早已被人
们所认识,如何将这种有毒植物开发利用,以减少
其危害,创造出经济价值,是我们所面临的课题之
一。 利用毒芹碱生产生物农药目前正在研究当中,
生物农药与化学农药相比有选择性强和不易产生
抗药性等优势 [6],它的研究与开发对促进农业生产
和维护生态环境有积极意义[7]。 毒芹对分月扇舟蛾
的胃毒作用要好于其他有毒植物 [8],且对布氏田鼠
有很强的毒性[9]。 如果利用组织培养方法人工繁殖
毒芹的根茎,可在短时间内获得大量药源 [10]。 本试
验初步筛选出适宜毒芹诱导分化的培养基,从而为
解决毒芹生物农药的药源问题提供一定的帮助。
1 材料与方法
1.1 材料
2008 年 4 月 28 日在吉林农业科技学院院外采
集的野生毒芹。
1.2 方法
1.2.1 试验设计 试验设 8 个处理,10 次重复,采
用随机区组排列,试验设计见表 1。
1.2.2 材料处理 选取无污染、 生长健壮的较幼
嫩、生长力强的毒芹短缩嫩茎,用自来水冲洗 10~15
min, 洗干净后在超净工作台上用 70%酒精和 0.1%
毒芹诱导分化培养基筛选
王艳玲,李云霄
(吉林农业科技学院,吉林 吉林 132100)
摘要:通过 8 种添加不同种类和不同浓度植物激素的培养基,对毒芹进行组织培养试验,研究了不同种
类和不同浓度植物激素对毒芹诱导成活数的影响, 筛选出较适合诱导毒芹分化的培养基。 结果表明,
MS+6-BA 2 mg / L+NAA 0.3 mg / L+2,4-D 0.5 mg / L+GA3 0.7 mg / L、MS+6-BA 2 mg / L+NAA 0.3 mg / L+
2,4-D 0.7 mg / L 和 MS+6-BA 2 mg / L+NAA 0.5 mg / L+2,4-D 0.5 mg / L 培养基对毒芹的诱导成活率较
高。 是适合毒芹诱导分化的培养基。
关键词:毒芹;组织培养;NAA;2,4-D;GA3
中图分类号:Q949.763.3;Q813.1+2 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2010)02-0283-02
Selection of Differential Medium for Cicuta virosa
WANG Yan-ling, LI Yun-xiao
(Jilin Agricultural Science and Technology College, Jilin 132100,Jilin,China)
Abstract: The survival techniques of induction of Cicuta virosa was studied by using tissue culture methods and adopting
MS basic medium,adding the different types and different concentrations of plant hormones, choosing non-polluting dedicate
stem Cicuta virosa, then carrying out random trial of tissue culture. According to the trial results, E (MS+NAA0.3+2,4-
D0.5mg/L+GA3 0.7mg/L),F(MS+NAA0.3 mg/L+2,4-D0.7mg/L),G(MS+NAA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L)had higher survival rate of
induction. Key words: Cicuta virosa; tissue culture; NAA; 2,4-D; GA3
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.02.029
湖 北 农 业 科 学 2010 年
表 1 培养基配方
培养基编号
A
B
C
D
E
F
G
H
蔗糖//g/L
30
30
30
30
30
30
30
30
琼脂//g/L
9
9
9
9
9
9
9
9
6-BA
2
2
2
2
2
2
2
2
调节因子//mg/L
NAA
0.3
0.3
0.3
0.3
0.3
0.3
0.5
0.7
2,4-D
0.3
0.5
0.5
0.5
0.5
0.7
0.5
0.5
GA3
-
-
0.1
0.5
0.7
-
-
-
升汞溶液分别处理 30 s 和 5 min, 用无菌水各洗 3
次后用无菌滤纸吸干水分,然后在超净工作台中将
带根茎的外植体切成 0.5 cm×1.0 cm的小段根茎,每
瓶接种 3个外植体。
1.2.3 培养条件 培养温度:(25±2)℃, 光照时间:
12 h / d,相对湿度:70%~80%。
2 结果与分析
2.1 不同配方培养基与毒芹成活数的关系
接种后进行组培苗成活数调查,调查结果详见
表 2。由表 2可知,培养基 E、F的诱导成活率明显高
于其他配方, 其中培养基 E 的诱导成活率最高达
83.3%,培养基 A的诱导成活率最低,为 26.7%。
2.2 方差分析及差异显著性检验
方差分析结果表明,F=5.026>F0.01, 处理间存在
极显著差异,表明不同配方培养基对毒芹成活数的
影响存在极显著的差异。
多重比较结果表明(表 2),培养基 E 对毒芹诱
导成活数与培养基 D、H、B、C、A 差异达极显著水
平; 培养基 F、G对毒芹诱导成活数与培养基 D、H、
B、C、A差异达显著水平,与培养基 C、A差异达极显
著水平;培养基 E、F、G 之间差异不显著,培养基 D、
H、B、C 之间差异也不显著。 因此筛选出培养基 E、
F、G为毒芹诱导分化的适宜培养基。
3 小结与讨论
通过以上分析可知, 培养基 E (MS+NAA 0.3
mg / L+2,4-D 0.5 mg / L+GA3 0.7 mg / L+6-BA 2 mg / L)
诱导成活率最高, 培养基 F (MS+NAA 0.3 mg / L+
2,4-D 0.7 mg / L +6-BA 2 mg / L)、G(MS+NAA 0.5
mg / L+2,4-D 0.5 mg / L+6-BA 2 mg / L) 与培养基 E
之间差异不显著,为节约成本,也可以采用培养基
F、G作为毒芹诱导分化的培养基。
笔者此前曾做过大量单因素试验,其中也做过
空白试验,在空白试验中发现也有诱导成活的外植
体。 将在此研究的基础上,对毒芹的继代和生根做
进一步的研究。
参考文献:
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社,1998.357.
[2] 李雅茹, 荆淑英. 河南伞形科植物研究 (一)[J]. 河南科学,
1991,9(4):31-61.
[3] 杨春澍.药用植物学[M].上海:上海科学技术出版社,2002.300.
[4] 国家医药管理局中草药情报中心站. 植物药有效成分手册[M].
北京:人民卫生出版社,1986.125.
[5] PANTER K E,邸怀忠 .家畜毒芹中毒[J].动物医学进展,1990
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[6] 张 兴,马志卿,李广泽,等.生物农药评论[J].西北农林科技大学
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[7] 徐江虹,安玉兴.生物农药的发展动态与趋势展望[J].农药科学
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测定[D].哈尔滨:东北林业大学,2005.
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北京:中国农业大学,2004.
[10] 梁一池,杨 华.植物组织培养技术的研究进展[J].福建林学院
学报,2002(1):94-97.
表 2 不同配方培养基对毒芹成活数的影响
培养基
编号
A
B
C
D
E
F
G
H
平均诱导成活数

0.8
1.3
1.1
1.9
2.5
2.4
2.3
1.8
0.05
c
bc
bc
b
a
a
a
b
0.01
C
BC
C
BC
A
AB
AB
BC
平均诱导成活率
%
26.7
43.3
36.7
63.3
83.3
80.0
76.7
60.0
差异显著性
284