全 文 ：收稿日期:2009-01-19;　修订日期:2009-08-04
作者简介:唐秀能(1971-),男(壮族),广西都安人 ,现任广西中医学院附
属瑞康医院主管药师 ,硕士学位 ,主要从事生化药理学研究工作.
＊通讯作者简介:王乃平(1953-), 男(汉族),湖南湘潭人 , 现任广西医科
大学教授 ,博士研究生导师 ,博士学位 ,主要从事生化药理学工作.
月光花豆乙醇提取物的镇痛作用及其机制研究
唐秀能1, 2 ,黄仁彬 1 ,黄媛恒1 ,黄纯真 1 ,王乃平1＊
(1.广西医科大学 ,广西 南宁　530021;　2.广西中医学院附属瑞康医院 ,广西 南宁　530011)
摘要:目的 考察月光花豆乙醇提取物的镇痛作用并初步探讨其作用机制。 方法 采用醋酸致小鼠扭体法 ,小鼠热板法
及小鼠温浴法 , 观察月光花豆乙醇提取物的镇痛作用 , 同时检测热板法小鼠的血清和脑组织 PGE2、MDA的含量及 SOD
活性。结果 月光花豆乙醇提取物能显著减少小鼠的扭体次数 , 显著延长小鼠热板反应舔足潜伏期及温浴致小鼠缩尾反
应潜伏期 , 同时能使热板法小鼠血清和脑组织 PGE2 , MDA含量明显降低 , SOD活性明显增强。结论 月光花豆乙醇提取
物具有显著的镇痛作用 ,其作用机制可能与减少 PGE2和 MDA含量 、提高 SOD活性有关。
关键词:月光花豆乙醇提取物;　镇痛;　机制;　前列腺素 E2
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)12-3153-02
StudyontheAnalgesicEffectsanditsMechanismsofEthanolExtractofCalonyctionac-
culeatumBeans
TANGXiu-neng1, 2 , HUANGRen-bin1 , HUANGYuan-heng1 , HUANGChun-zhen1 , WANGNai-ping1＊(1.DepartmentofPharmacology, GuangxiMedicalUniversity, Nanning, Guangxi530021, China;2.TheAfil-
iatedRuikangHospital, TraditionalChineseMedicalUniversity, Nanning, Guangxi530011 China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanalgesiceffectsofethanolextractofCalonyctionacculeatumBeansanditsprimaryanal-
gesicmechanisms.MethodsMousetwistingnumbersinducedbyaceticacid, mousepainthresholdafterheatstimulationonhot
-plateandinhot-watertestswereobservedtoinvestigatetheanalgesiceffects, meanwhile, thecontentsofprostaglandinE
(PGE
2
)andmalondialdehyde(MAD)andtheactivityofsuperoxidedismutase(SOD)inmiceserumandcerebrumweremeas-
uredtoexploreprimaryanalgesicmechanismsofcalonyctionaculeatumbeans.ResultsTheethanolextractsofCalonyctionaculea-
tumBeanscouldremarkablyreducemousetwistingnumbersandprolongpainthresholds, meanwhile, italsoreducedtheelevated
MDAandPGE2 productionsandenhancedSODlevelinmiceserumandcerebrum.ConclusionTheethanolextractsofCalonyc-tionacculeatumBeanshassignificantanalgesiceffects, whichmayberelatedtoreducingtheelevatedMDA, PGE2 productionandenhancingSODlevel.
Keywords:Calonyctionacculeatum;　Analgesia;　Analgesicmechanism;　ProstaglandinE2
　　月光花 Calonyctionaculeatum属于旋花科(Convolvulaceae)植
物 , 原产热带美洲 , 现广泛分布于全热带地区。在国内主要分布
于广东 、广西 、云南等地 , 属一年生缠绕草本植物。月光花豆是月
光花的蒴果 , 有舒筋活络 、消肿止痛 、活血化淤之功效 , 在广西民
间用于腰腿痛 、风湿痛 、月经痛 、软组织损伤等方面的治疗 , 有较
好疗效。笔者未见国内外资料中对其有这方面药理研究的详细
报道。本实验对月光花豆乙醇提取物的镇痛作用进行研究 ,为进
一步开发利用月光花豆并把其开发成为新药提供理论及实验
依据。
1 　材料与方法
1.1 　动物 昆明种小鼠 , 体质量(20±2)g, SPF级 , 广西医科大
学医学实验动物中心提供。 实验动物生产许可证:SCXKG桂
2003-0003, 实验动物使用许可证:SYXK桂 2003-0005。
1.2 　药物及试剂 月光花豆醇提物 , 广西医科大学药理教研室
提供。冰醋酸 , 成都市科龙化工试剂厂产品 , 批号:20070101;阿
司匹林 , 舒泰神(北京)药业有限公司产品 , 批号 070309;盐酸吗
啡(Mor),沈阳第一制药厂产品 ,批号:002747;伊文斯蓝 , 中国医
药上海化学试剂公司产品 , 批号:F20030714。 GJ-8402型热板
测痛仪 ,浙江宁海白石电子医药仪器厂产品。 甲醇 , 成都市科龙
化工试剂厂产品 , AR;氢氧化钾 , 天津化学试剂三厂产品 , AR;盐
酸 , 广东省廉江市爱廉化试剂有限公司产品;SOD试剂盒 、MDA
试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。
2　方法
2.1　对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响 [ 1] 取实验用小鼠 50只 ,
(20±2)g, 雌雄各半 ,随机分为空白对照组 , 阳性阿司匹林组 , 月
光花乙醇提取物高 、中 、低剂量组 ,每组 10只 , 连续灌胃给药 7 d,
末次给药后 1 h,各小鼠腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.2 ml/只 , 记
录自注射醋酸后 15 min内各组小鼠的扭体反应次数(小鼠伸展
后肢 , 腹部内凹和臀部抬高), 并计算药物对小鼠扭体反应的抑
制率。
2.2　对热板法实验的影响 [ 1] 将雌性小鼠置于恒温水浴箱的自
制热板上(55℃), 以小鼠舔后足潜伏期为痛阈值指标。 实验前
筛选痛阈 5 ～ 30 s者为合格鼠 , 给药前测痛 2次 , 间隔 10 min, 取
其平均值作为基础痛阈。将测痛后的小鼠随机分为 5组:空白对
照组 , 阳性对照组(Mor4mg· kg-1于实验前 30 minip一次给
药)、月光花提取物高 、中 、低剂量组 。连续灌胃给药 7 d, 1次 /
d,末次给药后 30, 60, 90, 120 min各重复测定舔足潜伏期 , 疼痛
反应截止期为 60s。实验结束后 , 快速摘小鼠眼球取血 , 3 500 r/
min离心 15 min, 弃下层沉淀 , 留上清液。同时取小鼠前脑组织
称重 , 加入适量的 NS制成 10%的脑组织匀浆液 , 离心 , 留上清
液。将血清和脑组织匀浆液置 -20℃中保存分别待测 PGE2、MDA的含量和 SOD活性。
2.3　对小鼠温浴法实验的影响 [ 1] 将小鼠尾尖渗入 48℃恒温水
浴中 3 cm, 记录缩尾反应潜伏期作痛阈指标。其他方法同 “ 2.2”
项。末次给药后 60 min各重复测定舔足潜伏期 , 疼痛反应截止
期为 60s。
2.4　PGE2和 MDA的含量以及 SOD活性的测定 MDA含量和SOD活性的测定分别按照试剂盒说明书的方法进行操作。小鼠
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.12 时珍国医国药 2009年第 20卷第 12期
血清和脑组织 PGE2含量的测定:分别取离心后血清和脑组织上
清 200 μl, 加 0.5 mol· L-1KOH-甲醇溶液 1 ml, 50℃水浴异构
化 20min后 ,用甲醇稀释至 4 ml,于紫外分光光度计波长 278 nm
处测定其吸光度(OD)值 ,代表 PGE2的生成量 [ 2] 。
2.5　统计学处理 实验所得的数据均以 x±s表示 , 使用
SPSS13.0统计学软件进行方差分析 ,并作组间比较。
3　结 果
3.1　各组小鼠对醋酸致痛的影响比较 结果见表 1。
3.2　热板法对各组小鼠给药后痛阈值的影响比较 结果见表 2。
3.3　温浴法对各组小鼠给药后痛阈值的影响比较 结果见表 3。
表 1　月光花豆乙醇提取物对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响( x±s)
组别 剂量C/g生药· kg-1
15min内
扭体次数
扭体抑制率
(%)
空白对照 - 44.5±11.9 -
阿司匹林 0.21 22.8±10.4＊＊ 48.76
月光花豆醇提物高剂量 5.0 27.6±10.5＊＊ 37.89
月光花豆醇提物中剂量 2.5 29.5±10.2＊＊ 33.71
月光花豆醇提物低剂量 1.25 37.3±12.8 16.18
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01;n=10
表 2　月光花豆乙醇提取物对小鼠热板法反应的影响( x±s)
组别 剂量 舔足潜伏期 /s给药前 给药后 30min 60min 90 min 120min
空白对照 - 20.22±4.24 20.78±6.32 20.78±6.68 21.56±5.50 20.78±6.40
阿司匹林 4.0mg· kg-1 23.38±6.28 41.63±12.66ΔΔ＊＊ 38.87±15.38Δ＊＊ 31.38±12.63 26.13 ±11.05
月光花豆醇提物高剂量 5.0g· kg-1 22.00±6.00 32.40±12.43Δ＊ 38.60±13.50ΔΔ＊＊ 37.40±10.56ΔΔ＊＊ 36.90±9.91ΔΔ＊＊
月光花豆醇提物中剂量 2.5g· kg-1 23.25±4.62 31.50±12.40 34.00±11.14Δ＊ 35.90±13.67Δ＊ 38.40±9.78ΔΔ＊＊
月光花豆醇提物低剂量 1.25g· kg-1 23.22±5.26 25.11±5.48 25.89±5.89 28.22±7.00 31.78±11.01
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01;与药前组比较 , ΔP<0.05 , ΔΔP<0.01;n=10
表 3　月光花豆乙醇提取物对小鼠温浴法反应的影响( x±s)
组别 剂量 舔足潜伏期 /s给药前 给药后 30min 60min 90 min 120min
空白对照 - 21.89±3.65 22.67±5.83 22.56±5.20 22.23±4.52 22.44±5.36
阿司匹林 4.0mg· kg-1 23.50±5.63 41.62±11.83ΔΔ＊＊ 38.75±15.02ΔΔ＊ 31.50±11.90 27.00 ±10.56
月光花豆醇提物高剂量 5.0g· kg-1 22.00±6.36 33.22±8.69Δ＊＊ 33.11±10.52Δ＊ 39.33±12.37ΔΔ ＊＊ 37.28±12.60ΔΔ＊＊
月光花豆醇提物中剂量 2.5g· kg-1 23.25±4.62 32.12±13.47 36.00±14.91Δ＊ 36.25±13.87Δ＊ 37.25±14.72Δ＊
月光花豆醇提物低剂量 1.25g· kg-1 23.22±5.59 23.77±11.17 27.33±10.95 29.56±9.63 27.78±12.89
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01;与药前组比较 , ΔP<0.05 , ΔΔP<0.01;n=10
3.4　热板法中各组小鼠给药后血清 PGE
2
、MDA含量及 SOD活
性的影响比较 结果见表 4。
表 4　对热板法小鼠血清 PGE2 , MDA含量及 SOD活性的影响( x±s)
组别 剂量C/g生药· kg-1
PGE2
(OD)
MDA/
nmol· ml-1
SOD/
U· ml-1
空白对照 - 0.746±0.142 3.42±0.29 25.40±2.03
吗啡 0.005 0.726±0.136 3.14±0.32 25.42±3.12
月光花豆醇提物高剂量 5.0 0.468±0.174＊＊2.08±0.27＊＊ 36.09±2.05＊＊
月光花豆醇提物中剂量 2.5 0.529±0.184＊ 2.26±0.34＊＊ 34.90±2.76＊＊
月光花豆醇提物低剂量 1.25 0.562±0.165＊ 2.87±0.28＊ 31.25±3.83＊
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
3.5　热板法中各组小鼠给药后脑组织 PGE
2
、MDA含量及 SOD
活性的影响比较 结果见表 5。
表 5　对热板法小鼠脑组织 PGE
2
, MDA含量及 SOD活性的影响( x±s)
组别 剂量C/g生药· kg-1
PGE2
(OD)
MDA/
nmol· ml-1
SOD/
U· ml-1
空白对照 - 0.724±0.152 3.02±0.22 24.09±2.06
吗啡 0.005 0.717±0.123 2.86±0.28 26.82±3.02
月光花豆醇提物高剂量 5.0 0.452±0.162＊＊ 2.18±0.22＊＊ 35.40±2.06＊＊
月光花豆醇提物中剂量 2.5 0.495±0.176＊＊ 2.34±0.38＊＊ 32.88±2.78＊＊
月光花豆醇提物低剂量 1.25 0.582±0.169＊＊ 2.87±0.29 29.25±3.76＊
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
4　讨论
小鼠热板法和扭体法镇痛实验结果表明 ,月光花豆乙醇提取
物对物理性 、化学性致痛因子所致疼痛都有明显的镇痛作用 , 镇
痛作用随给药剂量呈一定的正相关。
研究表明 , 大量 PGE2和白三烯等与氧自由基是产生疼痛
症状的主要原因 [ 3] 。 PGE
2
是一种非常重要的疼痛介质之一 ,
PGE
2
的外周致痛作用早已明确 , 近年对 PGE
2
的研究主要涉
及其中枢机制 。 Malinberg等利用鞘内透析法证实福尔马林双
相反应与透析液中 PGE2含量呈正相关 , 鞘内注射消炎痛可以
抑制大鼠福尔马林Ⅱ相反应 , 这些研究均提示 PGE2参与中枢
疼痛的调控 [ 4] 。 本研究表明月光花豆乙醇提取物可降低脑组
织及血清中 PGE
2
含量 , 提示的镇痛作用与抑制 PGE
2
合成也
有一定的关系。
王洁等报道 , 氧自由基在外周和中枢均有致痛作用 , 自由基
清除剂维生素 E和 SOD则可对抗此致痛作用。 从实验中观察
到 ,空白组实验小鼠血清和脑组织中 SOD活性降低 , MDA含量升
高 ,而月光花豆乙醇提取物使 SOD活力和 MDA含量异常改变得
以恢复 ,提示的镇痛作用可能与清除自由基有关 [ 5] 。
综上所述 , 月光花豆乙醇提取物对小鼠的镇痛作用可能与抑
制 PGE2合成有关 、降低 MDA含量和提高 SOD活性有关 ,作用部
位与外周和中枢可能都有关系。
参考文献:
[ 1 ] 　徐叔云 , 卞如濂 , 陈　修.药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生
出版社 , 2003:882.
[ 2 ] 　陈 　奇.中药药理研究方法 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1993:370.
[ 3 ] 　GrishamMS, GrangerDN, LeferBJ· Modulationofleukocyte-endo-
thelialinteraclionsbyteactivemetabolitesofoxygenandnitrogenrele-
vancetoischemicheartdisease[ J] .FreeRadicBiol, 1998, 25:404.
[ 4 ] 　王　洁 , 宋必卫 , 马传庚 , 等.氧自由基与疼痛 [ J] .中国药理学通
报 , 1998, 14(2):107.
[ 5 ] 　张　黎 , 赵春晖 , 陈志武 , 等.银杏叶总黄酮镇痛作用及机制的探
讨 [ J].安徽医科大学学报 , 2001, 36(4):263.
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