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,南药学 2 () 0 4 年 6 月第 2 卷第 3 期 ( e n z r : 11致。 u , }: I, }: 、 , r m : ,e y . l u ,1。 2 () () 飞. V ( ) 1. Z N 〔 ) . 3
山苦茶提取物对豚鼠离体胆囊肌条的作用及其机制
王九辉 , 何俘 , 林连波 (海南医学院药理教研室 , 海 日 ” 川川
摘要 : 目的 研究山苦茶提取物对豚鼠离体胆囊肌条的作 用及作用机制 。 方法 将肌条置 于恒温浴槽 , 以 川 一 4 10
生物功能 实验 系统记录肌条张力 变化 。 结果 山苦茶提取物对 离体胆囊肌条具有剂量依赖的收缩作 用 , 最大效应为
乙酞胆碱 门 0 尸nT ol · I尸 ) 的 7 6 % 士 8 % . E蛛 为 。. 14 一。 . 3O m g · m L ’ ()] 一 8 ) , 阻滞药引咪美辛和维拉帕米显
著降低其缩胆囊作用 。 结论 山 苦茶提取物可通过增加前列腺素的释放 以及直接作用 于钙通道对豚鼠 离体胆炎产生
收缩作用 。
关键词 : 山苦茶 ; 胆囊平滑肌 ; 阻滞药
中图分类号 : R 2 8 5 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 6 7 2一 2 9 8 1 ( 2。 ( ) 4 ) ( ) 3一 ( ) 1 3 1一 ( ) 3
E f f e e t o f m a l l o t u s fu
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山苦茶 仙工2 210 2况、 f 二 , z ia n u 、 ) 是大戟科野桐属植物 ,
产于海南各地 , 民间习惯用它的叶子泡制茶饮料 , 具有清热
解毒 、 利胆消食的功效仁’ } 。 山苦茶亦可用于治疗胆道疾病 ,
对胆结石 、 胆囊炎具有良好的临床治疗效果「2 」 。 药理研究表
明 , 山苦茶醇提物可促进麻醉大鼠的胆汁排泄 「川 。 本文研究
山苦茶提取物对豚鼠离体胆囊肌条的直接作用 。
1 材料与方法
1
.
1 药品
山苦茶提取物 : 山苦茶干叶水煎煮提取 2次 , 叶晾千后
再用 6 倍体积的乙醇回流提取 , 减压浓缩得浸膏 , 将所得浸
膏用水分散 、 过滤 , 得母液 , 母液上大孔吸附树脂 , 5 0 %醇
洗 , 减压浓缩成稠膏 , 干燥得山苦茶提取物 , 临用前以蒸馏
水溶解配成 20 m g · n 、 l 一 1溶液 , 并根据实验需要稀释成
6 0
、
4 0
、
2 0
、
1 0
、
5
、
1 rn g
· n : l
一 ’ 的系列溶液 。
六季烃胺和 N 田 一硝基 一卜精氨酸 (卜 N N A ) ( iS g m a ) 、 乙
酞胆碱 (上海化学试剂总厂 ) 、 阿托品 ( 上海第 卜制药厂 ) 、 叫}
噪美辛 (江苏太仓制药厂 ) 、 维拉帕米 ( 兰州制药厂 ) 、 苯海拉
明 (北京双桥制药厂 ) 及雷尼替丁 (常州康达制药有限公司) 。
1
.
2 动物
普通级医学实验动物三色毛豚鼠 ( 西安医科大学实验动
物中心 , 合格证 号 : 陕西医动字 0 8 一 01 9 号 ) 。 体重 4 5() 一
5 5 0 9
, 雌雄不限 。
1
.
3 方 法
1
.
3
.
1 豚鼠胆囊肌条张力的记录 取豚鼠处死 , 迅速取出胆
囊 , 置于 0 OC K r e b 、 液中 (nor
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1 1 1 3
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2
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1 1
.
2
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、
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、
2 5
、 〔 ’ a ( ’ l : 2 . 5 、 葡萄
糖 n . 5 ) , 漂洗干净后制成 2 n lm 火 1 0 m m 的纵向肌条 。 将
肌条置于盛有 10 m l K r山 s 液 3 7 飞 的恒温浴槽中 , 一 端固
定 , 另一端接张力换能器 (J H 一 2 , 北京航天医学 l 程研究
所 ) , 通 9 5 % 0 : 和 5写 C ( ) : 气体 , 以 以 二科 () 生物功能实验
基金项 目 : 国家自然科学基金资助 ( 3 。。 6 0 0 8 8 )
,
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l ( 0 8 9 8 ) 6 68 9 3 79 3
作者简介 : 土九辉 ( 1 9 6 9一 男 , 训二师 , 主要从事药理教学 和研究
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〔` 。 nta rl 应t l )t hl , h a r rn 、1叮 l u n 。 2。 ( )在 , V 〔) 1. 2 N o . 3 中南药学 2 〔)。魂年 6 月第 2 卷第 3 期
系统 (成都泰盟电子有限公司 ) 记录肌条张力 。
1
.
3
.
2 山苦茶提取物对胆囊肌条的作用 调整肌条前负荷为
1 9
. 稳定 6 0 o n , 每 2。 。 n 换液 l 次 。 采用累积给药法观察
山苦茶提取物对离体胆囊肌条的作用 , 给药容量为 0 . 1 nlr .
累积浓 度 为 ( ) . () l 、 0 . 0 6 、 0 . 16 、 0 . 3 6 、 O· 7 6 、 1· 3 6 n 艰 ’
nl
一 ’ · 并于给药前加人终浓度为 1。 拼mo l · I一 ’ 乙酸胆碱以确
定胆囊肌条活性 . 然后 以 K r e b 、 液冲洗 3 次 , 间隔 15 m ln 后
开始给药 。 记录加人乙酞胆碱以及不同浓度山苦茶提取物后
胆囊肌条的最大张力 , 并以乙酞胆碱所致胆囊肌条的最大张力
为 10 % . 求出山苦茶提取物各浓度下的张力百分比 ( % ) 。
1
.
3
.
3 阻滞药对山苦茶提取物效应的影响 按上法记录乙
酞胆碱及山苦茶提取物对胆囊肌条张力的影响后 , 以 K r e b s
液冲洗 3 次 , 并间隔 1 5 m in , 在恒温浴槽中分别加人阻滞药
六季烃胺 (l O 拜m ol · L ’ ) 、 阿托品 (1 拜m ol · L ’ ) 、 叫噪
美辛 ( 5 样m ( )1 · l } ) 、 维 拉 帕 米 ( 0 · 1 ,、 m o l · I 、 ) 、
卜 N N A ( 10 。 拜om 卜 I 一 ’ ) 、 苯海拉明 (l 拜om l · I 一 ` ) 发雷
尼替丁 ( 10 0 ,, m o l · I ’ ) , 孵育 1 5 m in , 再以累积给药法加
人山苦茶提取物 , 比较加入阻滞药前后山苦茶提取物对胆囊
肌条作用的差异 。
山苦茶提取物对豚鼠胆囊肌条具有剂量依赖的收缩作用 ,
胆囊肌条在加人山苦茶提取物后 l 二 n 左右出现张力增加 ,
约 3 、 n 张力达峰值 , 最大张力为乙酞胆碱 ( 10 手八nO I · L ’ )
的 7 6% 士 8% , E C ` 〕为 。 . 14 一 0 . 30 1理 · m L ’ (见表 1 ) 。
表 1 山苦茶提取物对离体胆囊肌条张力的影响
浓度
m g
.
m工 l)
张力 ( % )
1 夕 义 西 叹 6 7 8
2
2
。
4 统计方法
所有数据均以 、 士 、 表示 , 采用 t 检验进行组间比较 。
结果
0
.
0 1 1 3 7 6 12 1 2 7 6 0
0
.
0 6 2 8 10 1 1 2斗 2〔) 1 7 1 5 15
0
.
1 6 4 2 2 5 3 5 通0 3 8 3 5 3 2 2 0
0
.
3 6 6 1 4 1 吐8 5 7 5 9 4 9 4 7 3 7
()
.
7 6 7 5 5 6 6 5 7( ) 7 5 7 6 6 8 65
1
.
3 6 7 9 6 3 72 8 6 7 3 8 8 7 4 8 1
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注 : 以终浓度为 10 拌m ol · L ’ 的 A C h 所致胆囊肌条的最大张
力为 l ( )。% 。
2
.
2 阻滞药对山苦茶提取物效应的影响
环氧酶抑制药叫噪美辛和钙通道阻滞药维拉帕米对山苦
茶提取物的收缩胆囊肌条效应具有显著抑制作用 。 经叫噪美
辛 ( 5 拜n lo 卜 L ` ) 和维拉 帕米 (0 . 1 1,m ol · I 一 ` ) 预处理
后 , 山苦茶提取物的量一效曲线右移 , 最大张力分别由 7 %士
8叭 ( 。 一 6 ) 和 74 % 士 1。% ( 刀 一 8 ) 卜降至 从% 士 7线和
59 % 士 10 % (尸< 0 . 0 1) (见表 2 , 图 l 、 图 2) 。 阻滞药六烃
季胺 、 阿托品 、 L 一 N N A 、 雷尼替丁 以及苯海拉明对山苦茶
山苦茶提取物对豚鼠离体胆囊的作用 提取物的效应没有影响 。
表 2 阻滞药对不同浓度 山苦茶提取物的胆囊收缩效应的影响
张力 ( % )
组别
0
.
()1 m g
`
m l
J
0
.
16 m g
·
m L 0
.
3 6 -fn g
·
m l
一 1 0
.
7 6 m g
·
t l l 1 1
.
3 6 m g
·
m l
阿托品
叫{嵘美辛
维拉帕米
1
一
N N八
雷尼替丁
苯海拉明
8士 7
( 1 1士 5 )
7士 4
( 9士 4 )
汤上 3
( 1( )士 5 )
8士 3
( 9士 1)
13士 3
( l 魂士 5 )
8士 5
( 8士 3 )
0
.
0 6 m g
.
m l
-
2 2士 5
( 2 6士 8 )
1 6士 5
( 2 4士 7 )
1 2士 3
( 2 3士 8 )
1 5士 9
( 1 7士 6 )
2 9士 9
( 3 2士 10 )
2 0士 8
门 9士 6 )
们 士 9
( 4 1/步 } ( 1 )
2 7士 7 `
( 4 1士 弓)
2 3士 印
( 4 1士 , )
2 7士吕
( 3 2士吕 )
吐2士 12
( 4 5士 1又) )
4 2士 g
( 4 3士 ] 通)
5 9士 1 2
( 6 3士 6 )
3 9士 9
( 5 5士 7 )
3 7士 1 2 头 长
( 5 5士 9 )
4 5士 1 1
( 52士 10 )
68士 1 1
( 68士 9 )
6 7士 1 1
( 6 7士 9 )
6 5土 8
( 7 0士 1 2 )
50士 6 长
( 6 6士 7 )
5 0士 1 1
( 6 2士 10 )
6 1土 10
( 6 9士 9 )
7 5士 8
( 7 8士 13 )
72士 l ( )
( 75士 10 )
6 8士 8
( 7 3士 9 )
5 4士 7 关
〔7 7士 8 )
5 9士 10 苍 天
( 7 4士 10 )
6 7士 7
( 7 3士 12 )
8 2士 1 1
( 8 2士 9 )
73士 9
( 78士 8 )
注 : 以终浓度为 10 拟m o l · L `的 A C h 所致胆囊肌条的最大张力为 10 % ; 括号中为加入阻滞药前山苦茶提取物对离体胆囊肌条的作用 ;
` 与加人阻滞药前比较 尸 < _。 . 0 1 ; 关 关 与加人阻滞药前比较 尸 < 。 . 0() }。
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对照组
一 2 一 1 0 l l g m g
·
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·
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州|叫|砰弓nCUné八目0
ǎ巴只淤
图 l 叫噪美辛对山苦茶提取物胆囊收缩效应的影响
巍
( 22一 6 ) 图 2 维拉帕米对山苦茶提取物胆囊收缩效应的影响 ( 。一 8)
中南药学 20 0 4 年 6 月第 2 卷第 3 期 C e n t r a lSo u t hP ha r ma e y . J u n e 2 0 0 4 , v o l . 2 N o .
3 讨论
胆囊收缩功能的降低是胆囊结石形成 的基本 因素之
一川 , 预防和治疗胆囊功能障碍有助于减少和防止胆结石的
产生 , 本研究表明 , 山苦茶提取物对豚鼠离体胆囊具有剂量
依赖的收缩作用 , 这可能是山苦茶临床用于治疗胆石症的机
制之一 。
我们发现 , 山苦茶提取物对胆囊的收缩作用不受六烃季
胺的影响 , 也不被阿托品所阻断 , 说明山苦茶提取物的胆囊
收缩作用与胆碱能 N 、 M 受体无关 ; H : 受体阻滞药雷尼替丁
及 H , 受体阻滞药苯海拉明均不影响山苦茶提取物的效应 ,
说明山苦茶提取物对胆囊的收缩作用不是由组胺受体介导 ;
N( )合成酶抑制药 :I N N A 也不影响山苦茶提取物的效应 , 表
明山苦茶提取物对离体胆囊的作用与 N( ) 的合成没有关系 。
研究发现 , 山苦茶提取物对豚鼠胆囊肌条的收缩作用受
到环氧化酶抑制药叫噪美辛的抑制 , 经叫噪美辛预处理后的
胆囊肌条对山苦茶提取物的反应显著降低 , 表明山苦茶提取
物可能通过增加前列腺素的释放导致胆囊平滑肌收缩 。 钙通
道阻滞药维拉帕米亦可显著降低山苦茶提取物的效应 , 表明
山苦茶提取物的胆囊收缩作用还与促进钙内流 、 增加平滑肌
细胞内的钙浓度有关 。
因此 , 可以认为 , 山苦茶提取物可能通过增加前列腺素
的释放或作用于钙通道对豚鼠离体胆囊产生收缩作用 。
参考文献
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4 10
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一
H P L C 测定射干抗病毒注射液中次野莺尾黄素含量
万月生 , 孙国祥 , 邓湘呈 (沈阳药科大学药学院 , 沈 阳 l l o o x6 )
摘要 : 目的 建 立射干杭病毒注射液中次野鸯尾黄素的反相高效液相 色谱分析方法 。 方法 色谱柱 : K or m as il ( )D S
(5 “ m , 4 . 6 m m 火 20 0 m m ) , 以 水一甲醇 一乙睛一四氢吹喃一冰醋酸 (4 7 . 5 , 40 , 7 , 4 , 1 . 5 , 训 v) 为流 动相 , 流速
0
.
80 m I
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m in 一 ’ , 柱温 (3 。 . 5士 1) ℃ , 于 26 5 n m 测定射干抗病毒注射液中次野鸯尾黄素的含量 。 结果 线性范围
.2 46 一 3 0 8 子艰 · m L一 ’ (r 一 。 . 9 9 9 9 ) , 次野鸯尾黄素对照品的进样精密度 R s D一 。 . 4 3% , 对照品溶液在 24 h 内峰面
积的 RDS 一 0
.
41 %
, 次野鸯尾黄素的检测 限 ( S/ N一 3) 为 。 . 61 m g · I 一 ’ , 定量限 ( S/ N 一 10) 为 1. 2 2 m g · L一 ’ ,
回收率为 9 . 9 % 。 结论 该 方法简便 、 准确 、 无干扰 , 可用于测定射千杭病毒注射液中的次野鸯尾黄素的含量 。
关键词 : 反相高效液相色谱法 ; 射干杭病毒注射液 ; 次野鸯尾黄素
中图分类号 : R 9 2 7 . 2 文献标识码 : A 文章编号 : 1 67 2一 2 9 8 1 ( 2 0 0 4 ) 0 3一 0 13 3一 0 3
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基金项目 : 国家药典委员会中药注射剂指纹图谱项目 作者简介 : 万月生 ( 1 9 7 7~ ) , 男 , 硕士研究生 ; 孙国祥 ( 1 9 6 2~
士 , 硕士生导师 , 主要从事毛细管电泳在药物分析中的应用和中药指纹图谱方法学研究 T e ,a 凡 x : (0 2 4 ) 2 4 5 14 7 6。
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