全 文 :收稿日期: 2003-01-18; 修订日期: 2003-02-10
基金项目:广西科技厅基础研究项目 ( No. 9819094)
作者简介:覃俊佳 ( 1936-) ,男 (汉族 ) ,广西容县人 ,现任广西中医学院教
授 ,硕导 ,主要从事中药药理研究 .
药理药化
褐苞薯蓣对小鼠脾虚证的影响
覃俊佳 , 周 芳 , 方 红 , 林海生 , 梁东艳 , 何报作
(广西中医学院 ,广西 南宁 530001)
摘要: 目的:观察褐苞薯蓣对小鼠脾虚证的影响。 方法: 用利血平致小鼠脾虚模型 ,以其体重、体温 、胸腺及脾重、血清刚
果红与木糖含量为指标 ,观察实验结果。结果:褐苞薯蓣能使体重、体温、胸腺重、脾重、血清木糖含量增加 ,对血清刚果红
含量减少不显著。怀山药的结果与褐苞薯蓣相似 ,但对后 3个指标影响不明显。结论:褐苞薯蓣有补脾作用和特异性免疫
作用 ,怀山药与其相似 ,但略逊。
关键词: 褐苞薯蓣 ; 怀山药 ; 脾虚证 ; 小鼠 ; 利血平
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1008-0805( 2003) 03-封 3-02
Effect of DioscoreaPers imilis on Syndrome of Splenasthenia in Mice
QIN Jun-jia, ZHOU Fang , FAN G Hong, L IN Hai-sheng , LAING Dong-yan, HE Bao-zuo
(Guangx i College of TCM , Nanning , Guangx i , 530001, China)
Abstract: Objective: The effect o f Dio sco rea persimilis on syndrome of splenasthenia in mice were observ ed. Methods:
A splenasthenia model in mice were made by r ese rpine. Its w eigh t o f body, tempe ratur e o f body, w eight of thymus
g lands and spleen, lev el of congo r ed and xy lo se in the serum w ere determined. Results: Th e weight o f body, the tem-
pe rat rue of body , the weight of thymus glands and spleen and the lev el o f x ylose in th e serum w ere increased remarkably
by Dioscor ea persimilis but the lev el o f congo red were mo t reduced rema rkably. Result o f Dioscor eaoppersita we re simi-
la r w ith the Dio sco r ea persimilis but the thr ee t rial ta rg ets at the back w ere no t affected remarkably. Conclusion:
Dio sco r ea persimilis has th e effect to enrich the spleen and the special immunity. The pharmaco logical effect of Dio sco rea
oppersita is similar with dio scor ea persimilis but the fo rme r is w eak a little.
Key words: Dio sco rea persimilis; Dio sco rea opposita; Splenasthnia; Reserpine; Mice
褐苞薯蓣 ( Diosco rea persimilis Prainet Burk )为薯蓣科多年
生蔓生草本植物的干燥块根 ,又名广山药、“山药”“淮山” ,具补脾
养胃、生津益肺、补肾涩精之功效 [1]。 我们已经研究发现 ,它有降
血糖作用、补肾作用 (论文待发表 )。现根据它补脾养胃之功效 ,推
测它可能有补脾作用和免疫作用。此作用国内外未见有报道。现
将其研究结果报道如下。
1 材料
1. 1 药物与试剂 ( 1) 5个产地的 300%褐苞薯蓣隔水煎醇沉液
(已挥去乙醇 ) , 5个产地为广西的桂平、北流、容县、博白、邕宁等
县市 ,均为人工栽培品。 由何报作教授采集、鉴定原植物 ,并按中
国药典熏硫、干燥备用。 ( 2) 300%怀山药隔水煎醇沉液 (已挥去乙
醇 ,药材委托广西壮族自治区药材公司采集 ,其拉丁学名为
Dio scor ea opposita Thunb)。 ( 3)利血平注射液:上海医科大学红
旗制药厂 ,批号 981003。 ( 4)刚果红 ,津专实验厂 ,批号 910420。
( 5) D-木糖 ,中国玉环红星生化制品厂 (浙江 ) ,批号 970710。 ( 6)
间苯三酚 ,英国 B. D. H进口分装 ,上海化学试剂采购供应站 ,批
号 860611。
1. 2 仪器 722型分光光度计 ,上海第三分析仪器厂 ;电子分析
天平 , AEU-ZW型 ,日本岛津。
1. 3 动物 昆明种杂交健康小鼠 ,普通级 ,由本院实验动物中心
提供。 合格证桂医动字 1104号。
2 方法与结果
2. 1 利血平致脾虚法 [2] 小鼠 120只 ,按体重、性别随机分 8组:
( 1)脾虚组:利血平 ( 0. 3 mg /kg )× 14 d, ih。第 8~ 14天以生理盐
水 ( NS) 0. 2 ml /10 g , ig。 ( 2)正常组: N S( 0. 2 m l /10 g )× 14 d, ih。
第 8~ 14天以 N S0. 2 ml /10 g , ig。 ( 3)至 ( 8)组为怀山药及广西
各地山药组: 造模方法同 ( 1)组。 在第 8~ 14天 ,每天各地山药均
以 25 g /kg , ig。 第 15天称体重 ,量体温并测血清刚果红含量 [3] ,
然后脱颈椎处死小鼠 ,剖腹取其脾、胸腺 ,用分析天平称重 ,将其
重量 ( mg )除以体重 ( g )再乘以 100,所得数值就是脾 (胸腺 )指数。
统计学处理用两组均数比较的 t测验。 多组均数比较用对比限
法。 这是实验 1。 实验 2与实验 1不同点是: ( 1)利血平剂量改为
( 0. 2 mg /kg )× 30 d, ( 1)组 ( 3)组至 ( 8)组均 ih利血平。 ( 2)各地
山药剂量增到 ( 50 g /kg )× 22 d。 实验结果见表 1。
由表 1实验 1可见 ,脾虚组小鼠的体温体重比正常组明显降
低 ,提示脾虚造模成功。 25 g /kg的剂量 ,怀山药及广西五产地褐
苞薯蓣对脾虚小鼠的体温 、体重、胸腺重、脾重及血清剩余刚果红
含量都无明显影响。由实验 2可见 , 50 g /kg的剂量 ,使体重明显
增加的山药是怀山药、容县和桂产的褐苞薯蓣 ,后两药与怀山药
比较无明显差异 ;使体温明显恢复的山药是怀山药和容县、北流、
博白、桂平产的褐苞薯蓣 ,后四药与怀山药比较无明显差异 ;使脾
指数明显恢复的只有桂平的褐苞薯蓣 ,它与怀山药比较差异显
著 ,怀山药和容县、北流、博白和邕宁的褐苞薯蓣无明显恢复作
用 ;使胸腺指数明显恢复的有怀山药、北流和桂平的褐苞薯蓣 ,后
两药和怀山药比较无明显差异 ;五个产地的褐苞薯蓣和怀山药对
脾虚小鼠血清剩余刚果红含量都无明显降低 ,提示对非特异性和
特异性免疫力都无提高作用。
表 1 各地山药对脾虚小鼠的影响 (x-± s )
实验次序 组别 动物数 体重 / g 体温 /℃ 脾指数 胸腺指数 刚果红 /mg· L- 1
实验 1 脾虚 11 18. 86± 3. 68* * * 36. 15± 1. 50* * 10. 32± 4. 18* 2. 28± 1. 20* * 7. 37± 7. 55*
正常 15 23. 67± 2. 26 37. 15± 0. 36 12. 47± 3. 51 3. 34± 1. 03 4. 05± 6. 65
怀山 15 18. 06± 3. 07* * * △ 36. 50± 0. 70* * * △ 8. 62± 3. 05* * * △ 2. 57± 1. 29* △ 6. 86± 5. 56* △
容县 14 17. 46± 3. 34* * * △ 36. 22± 1. 67* * △ 8. 98± 4. 69* * △ 2. 34± 1. 54* * △△ 8. 78± 3. 12* * △
北流 10 17. 85± 4. 59* * * △ 36. 26± 1. 98* △ 11. 12± 3. 42* △ 3. 56± 1. 18* △ 7. 30± 5. 28* △
博白 9 16. 50± 4. 14* * * △ 36. 13± 1. 40* * △ 9. 72± 3. 60* △ 2. 53± 0. 64* △ 6. 46± 5. 63* △
桂平 14 15. 65± 3. 15* * △△① 36. 30± 1. 08* * * △ 9. 12± 3. 44* △ 2. 02± 1. 03* * * △ 8. 11± 4. 15* △
邕宁 10 17. 73± 3. 36* * * △ 36. 52± 0. 68* * * △ 8. 66± 2. 16* * * △ 2. 59± 1. 13* △ 8. 00± 5. 90* △
实验 2 脾虚 12 20. 93± 2. 76* * * 35. 48± 0. 63* * * 6. 50± 2. 84* * 1. 56± 0. 93* 8. 32± 1. 81* *
正常 13 29. 45± 4. 35 37. 22± 0. 54 10. 32± 4. 84 2. 16± 0. 60 9. 59± 1. 19
怀山 9 23. 94± 3. 62* * * △△ 36. 66± 0. 76△△△ 6. 73± 2. 64* △ 2. 64± 0. 66* △△△ 8. 84± 1. 40* △
容县 12 23. 83± 2. 72* * * △△① 36. 39± 0. 49* * * △△△① 6. 20± 1. 58* * * △ 2. 33± 1. 08* △ 8. 79± 0. 92* △
北流 13 21. 90± 2. 14* * * △① 36. 21± 0. 64* * * △△△① 8. 81± 2. 88* △ 2. 29± 0. 57* △△① 8. 99± 1. 50* △
博白 12 21. 72± 3. 68* * * △① 36. 13± 0. 55* * * △△ 8. 51± 3. 17* △ 2. 19± 0. 79* △ 8. 22± 2. 72* △
桂平 11 23. 33± 2. 69* * * △△① 36. 31± 0. 40* * * △△△① 9. 67± 2. 81* △△② 2. 82± 0. 75* * △△△① 8. 40± 1. 47* * △
邕宁 13 22. 81± 3. 87* * * △① 36. 08± 0. 62* * * △① 7. 71± 2. 50* △ 2. 13± 0. 77* △ 8. 91± 1. 32* △
注:与正常组比 ,* P> 0. 05,* * P < 0. 05, * * * P < 0. 01。与脾虚组比 ,△P> 0. 05,△△ P < 0. 05,△△△P < 0. 01。与怀山药比 ,①P > 0. 05,②
P < 0. 05
2. 2 血清木糖含量的测定 脾虚小鼠造模同 2. 1实验 1。同时监
测体温、体重等脾虚指标。 6种山药给药的剂量、次数、途径和统
计方法均同 2. 1实验 1。这是实验 1。实验 2与实验 1不同点是:
( 1)各山药剂量改为 ( 60 g /kg )× 14 d。 ( 2)利血平剂量改为 ( 0. 1
mg /kg )× 14 d。第 15 d6个用药组小鼠脾虚后停止注射利血平并
开始分别给各地山药灌胃。末次给药后 24 h,空腹灌胃 10% D-木
糖溶液 0. 2 ml /10 g ,禁食 1 h后 ,眼球后静脉丛毛细玻管取血 ,离
心分离血清 ,用间苯三酚法 [4]测血清木糖含量 ,结果见表 2。
表 2 血清木糖的含量测定结果 ( x-± s )
实验次序 组别 动物数 木糖水平 /mmol· L- 1
实验 1 脾虚 8 21. 93± 7. 20
怀山 11 17. 67± 8. 53*
容县 10 20. 00± 11. 60*
北流 8 25. 13± 8. 67*
博白 7 20. 47± 3. 87*
桂平 12 18. 07± 4. 27*
邕宁 11 21. 07± 7. 87*
实验 2 脾虚 8 2. 32± 1. 08
怀山 9 2. 59± 0. 75*
容县 7 2. 72± 1. 10*
北流 7 2. 46± 1. 33*
博白 9 3. 42± 0. 86* *
桂平 8 2. 71± 1. 11*
邕宁 7 2. 80± 1. 12*
注:与脾虚相比 , * P> 0. 05,* * P < 0. 05
由表 2实验 1可见 , 25 g /kg的剂量 , 6种山药对脾虚小鼠血
清木糖水平无明显影响。由实验 2可见 , 60 g /kg的剂量只有博白
产的褐苞薯蓣能明显提高脾虚小鼠血清木糖水平 ,提示博白山药
能明显提高小肠的吸收功能。
3 讨论
利用适量利血平可在多种动物中制成脾虚模型 ,其表现症状
与人类最常见的以消化机能紊乱为主或伴有某些植物神经功能
障碍的脾虚证型很相似。此方法可靠性和重复性强 ,简单易行。脾
虚证所表现的胃肠功能紊乱 ,其发病机制至少有相当一部分与植
物神经功能紊乱 ,胆碱能神经功能亢进有关 [5]。 利血平可以耗褐
动物体内的单胺类递质 (主要包括去甲肾上腺素和 5-羟色胺 ) ,降
低脑内和外周神经中单胺类递质的含量 ,使副交感神经功能相对
亢进。 脾虚动物均程度不同地出现体重减轻 ,食量减少 ,毛枯槁 ,
失去光泽 ,行动迟缓无力 ,嗜卧 ,体温降低 ,耐寒力差 ,溏便及脱肛
等 [2]。
全国中西医结合虚证与老年病研究专业委员会 1982年制订
1986年修订的中医虚证辨证参考标准 [6]附录第 4条是: 脾气虚
患者常有尿中木糖排泄量 (尿定量法 )减少 ,并常有唾液淀粉酶活
性酸负荷试验反而下降。这说明木糖泄量这一客观的实验室指标
已被引入中医脾虚证辨证参考标准在全国应用。
黄熙、任平 [7 ]受 “脾主运化”的启发 ,提出 “脾主药物动力学
( PK)”的假说 ,这个学说得到动物实验的支持 [7]。 按照 PK学说 ,
可以解释为什么只有博白产的褐苞薯蓣能明显提高血清木糖水
平 ,这可能是它促进小肠对木糖的吸收或延缓泌尿道对木糖的排
泄比较明显而使血清木糖水平明显升高 ,其它产地的褐苞薯蓣则
可能对这些过程影响不显著而使血清木糖水平升高不明显 ,不同
产地的褐苞薯蓣其体内 PK可能有差别 ,从而使它们的药效也有
所不同。
褐苞薯蓣能使脾虚小鼠体重增加 ,体温及血清木糖水平提
高 ,故有补脾作用 ;能使免疫器官重量增加 ,故有提高特异性免疫
力作用。
致谢:怀山药由广西壮族自治区药材公司陆小红主管药师采
集。
参考文献:
[ 1] 广西卫生厅 .广西药材标准 ,第 2册 [S ]. 1996: 26-27.
[ 2] 陈 奇 .中药药理实验方法 ,第 1版 [ M ] .北京: 人民卫生出版社 ,
1994: 185-186.
[ 3] 严宣左 ,赵 琳 ,杨燕玲 .小鼠刚果红吞噬试验法一方 [ J] .北京中医
学院学报 , 1982, ( 1): 40-42.
[ 4 ] 朱忠勇 .实用医学检验学 [M ] .北京:人民军医出版社 , 1992: 435-
435.
[ 5 ] 刘学松 ,黄树明 ,李 炽 ,等 .利血平致动物脾虚模型机制的研究
[ J ].中国医药学报 , 1989, 4( 5): 68-70.
[ 6 ] 沈自尹 ,王文健 .中医脾虚证辨证参考标准 [ J ].中西医结合杂志 ,
1986, 6( 10): 598-598.
[ 7 ] 黄 熙 ,任 平 .论脾主药动学 [ J ].成都中医药大学学报 , 2001,
( 1): 6-6.