全 文 ：文章编号: 1009 - 5276( 2003) 12 - 1993 - 03 中图分类号: R - 33 文献标识码: A 收稿日期: 2003 - 05 - 26
褐苞薯蓣对去势小鼠和肾阳虚小鼠的影响
覃俊佳1 周 芳1 王建如2 覃体汉3 何报作1
( 1.广西中医学院, 530001,广西南宁; 2. 广西中医学院护理学院, 530001, 广西南宁;
3. 广西中医学院药学院, 530001, 广西南宁 / /第一作者男, 1936年生,教授)
摘 要: 目的:观察褐苞薯蓣的补肾、雄激素样作用,及急性毒性。方法: 用去势小鼠测定其附性器官重量,用
醋酸泼尼松制造小鼠肾阳虚模型, 测定其体重及体温,用 Bliss法测定 LD50。结果: 褐苞薯蓣和怀山药都显著增加
附性器官重量,显著改善肾阳虚小鼠体重及体温。LD50( g /kg ) : 怀山药,北流、桂平、博白的褐苞薯蓣分别为 357
? 64. 2、312 ? 42. 5、379. 3? 48. 8、427. 1? 44. 9, 容县、邕宁褐苞薯蓣的 M TD 均为 600。结论: 褐苞薯蓣有补肾与
雄激素样作用, 和怀山药比较无明显差异。褐苞薯蓣的急性毒性总的比怀山药低, 其毒性靶器官为脊髓和小肠。
关 键 词: 褐苞薯蓣; 怀山药; 肾阳虚; 补肾作用; 小鼠
薯蓣科植物褐苞薯蓣( Dioscorea persimilis P rain et Burk)
的干燥根茎又名广山药、/ 山药0/ 怀山药0 , 具补脾养胃、生津
益肺、补肾涩精之功效112。根据后者推测, 它对去势小鼠附
性器官有增重作用,对肾阳虚小鼠的症状有改善作用。此作
用国内外均未见有报道。为了观察褐苞薯蓣的上述作用并
和薯蓣佳品怀山药( Dioscorea oppo sita Thumb)比较而进行本
研究,同时测定其急性毒性。
1 材 料
药 物 ( 1)五个产地的 300%褐苞薯蓣隔水煎醇沉液
(已挥去乙醇) :五个产地为广西桂平、北流、容县、博白、邕宁
等五个市县。由何报作教授赴产地采集, 按药典熏硫、干燥
并鉴定原植物。( 2) 300%怀山药(产于河南省温县)隔水煎
醇沉液 (已挥去乙醇 )。( 3) 丙酸睾丸酮注射液: 批号
001104, 浙江医药股份有限公司。
动 物 昆明杂交系小鼠: 普通级, 由广西中医学院实
验动物中心提供,合格证为桂医动字 1104 号。
仪 器 电子分析天平: AEU - 210 型, 日本岛津。电
子数字式体温计: MC - 3B,欧姆龙(大连)有限责任公司。
2 方法与结果
褐苞薯蓣对去势小鼠附性器官重量的影响 按文献122
方法摘取雄性小鼠(体重 18~ 22g)两侧睾丸和附睾, 手术后
22 天(附性器官已充分萎缩) , 将去势小鼠随机分 8 组,即生
理盐水( NS)组、睾丸酮组、怀山药组、容县组, 每组各 10 只
小鼠, 桂平组、北流组、邕宁组、博白组, 每组各 11 只小鼠。
给药剂量( g /kg )睾丸酮为 0. 025,各地山药为 30. 0, NS 与山
药等容积,每天 1 次, ig ,睾丸酮则为 ip,连续 8 天。末次给药
后 24 小时脱颈椎处死小鼠, 称其体重后剖腹,把膀胱、精囊、
前列腺和附着它们的脂肪、结缔组织一起剪下, 置于 10% 中
性福尔马林溶液中固定。次日取出 ,剪下精囊前列腺, 用滤
纸吸干水分后, 置电子分析天平上称重。将精囊前列腺重
( mg)除以小鼠给药后体重( g ) , 所得的商乘 100 叫精囊前列
腺指数。结果统计处理用两组均数比较 t检验和多组均数
比较的显著性测验 ) ) ) 对比限法。这是实验 1。实验 2 与
实验 1不同点是剂量为 15g /kg 和每组小鼠数为 10 只, 但 5
~ 8组实验结束时分别为 8、9、10、8 只。实验结果,见表 1。
表 1 褐苞薯蓣对去势小鼠附性器官重量的影响(ŠX ? s)
组别 精囊前列腺重
( mg)
体 重
( g )
精囊前列腺指数
( mg)
NS 3. 9 ? 1. 5 32. 8? 4. 0 11. 9 ? 4. 7
睾丸酮 376. 3 ? 107. 1 33. 0? 3. 6 1140. 3 ? 378. 6* * *
怀山药 9. 7 ? 3. 5 30. 2? 3. 5 31. 2 ? 13. 1* * *
容 县 7. 8 ? 4. 2 33. 0? 3. 9 23. 6 ? 14. 0* * v
实验 1 桂 平 8. 7 ? 2. 7 30. 8? 3. 0 28. 2 ? 8. 3* * * v
北 流 9. 8 ? 3. 2 32. 3? 3. 6 30. 3 ? 8. 5* * * v
邕 宁 10. 1? 3. 4 31. 4? 3. 2 32. 0 ? 9. 6* * * v
博 白 10. 3? 2. 0 32. 4? 3. 1 31. 8 ? 6. 9* * * v
NS 17. 8? 8. 0 33. 1? 4. 3 56 ? 28
睾丸酮 317. 3 ? 78. 4 34. 8? 3. 9 909? 186* * *
怀山药 21. 7? 4. 9 35. 6? 4. 6 62 ? 15*
容 县 27. 4? 10. 3 37. 9? 2. 4 74 ? 24* v
实验 2 桂 平 24. 6? 5. 7 35. 8? 3. 3 69 ? 18* v
北 流 22. 1? 10. 2 36. 3? 6. 0 69 ? 22* v
邕 宁 22. 8? 6. 1 36. 1? 3. 0 62 ? 12* v
博 白 25. 0? 5. 0 34. 6? 4. 2 73 ? 14* v
与NS 相比, * P > 0. 05, * * P < 0. 05, * * * P < 0. 01。与怀山药比,
v P > 0. 05。
由表 1 的实验 1 可见,与 NS 比, 怀山药及广西的桂平、
北流、邕宁、博白的褐苞薯蓣去势小鼠精囊前列腺指数增大
非常明显( P < 0. 01) , 容县产者增大显著( P < 0. 05)。与
怀山药比较,广西五个产地的褐苞薯蓣增加精囊前列腺指数
无显著差异( P > 0. 05)。提示褐苞薯蓣和怀山药都有性激
素样作用,且作用无显著差异。由表 1 实验 2 可见, 与 NS
比较,怀山药及广西五个产地的褐苞薯蓣在 15g /kg @ 8d 的
剂量下,精囊前列腺指数无显著差异( P > 0. 05)。
褐苞薯蓣对阳虚小鼠体重、体温的影响 按文献132制造
小鼠肾阳虚模型。将醋酸泼尼松片研末制成 0. 8mg /ml的
混悬液,按 8mg /kg的剂量 ig,每天 1 次, 连续 8天后, 小鼠出
现体重、体温下降、毛明显疏松,反应迟钝, 自主活动减少, 蜷
曲拱背等形寒肢冷的肾阳虚现象。将肾阳虚小鼠随机分 7
组,每组 10 只。各组山药给药剂量均为 30g /kg @ 8d, ig。阳
虚对照组给等量 NS, ig。给药时间,隔天给上述剂量的醋酸
#1993#
中 医 药 学 刊 2003 年 12月第 21 卷第 12 期 专 家 论 坛
DOI：10.13193/j.archtcm.2003.12.6.qinjj.005
泼尼松,以维持小鼠肾阳虚。于末次给药后 24 小时称体重,
量体温。将药后体重、体温分别减药前体重、体温,得体重差
值、体温差值。差值的统计处理同实验 2. 1。这是实验 1。
实验 2 与实验 1 不同点为剂量 15g /kg @ 8d,每组小鼠为 10
只。结果见表 2。
表 2 褐苞薯蓣对肾阳虚小鼠的影响(ŠX ? s)
组别 体 重( g) 体 温( e )药前 药后 差值 药前 药后 差值
阳 虚 17. 84 ? 2. 24 17. 80 ? 2. 96 - 0. 04 ? 0. 84 36. 04 ? 1. 46 35. 87 ? 1. 77 - 0. 17 ? 0. 46
怀山药 17. 28 ? 1. 12 22. 05 ? 2. 23 4. 77 ? 2. 40* * * 35. 40 ? 0. 87 37. 03 ? 1. 00 1. 63 ? 0. 63* * *
桂 平 17. 06 ? 2. 05 20. 81 ? 2. 66 3. 75 ? 2. 08* * * v 35. 16 ? 1. 12 36. 73 ? 1. 10 1. 57 ? 1. 55* * * v
实验 1 北 流 16. 96 ? 1. 33 21. 02 ? 2. 56 4. 06 ? 1. 69* * * v 36. 04 ? 0. 69 36. 07 ? 0. 73 0. 03 ? 0. 77* v
博 白 16. 57 ? 1. 74 20. 46 ? 2. 85 3. 89 ? 1. 95* * * v 34. 40 ? 0. 69 35. 91 ? 1. 28 1. 51 ? 1. 22* * * v
邕 宁 16. 84 ? 1. 28 20. 13 ? 1. 91 3. 29 ? 1. 42* * * v 36. 12 ? 1. 14 36. 62 ? 0. 39 0. 50 ? 1. 28* v
容 县 16. 73 ? 1. 21 21. 25 ? 2. 59 4. 52 ? 2. 23* * * v 35. 79 ? 0. 69 36. 39 ? 1. 30 0. 60 ? 0. 87* * v
阳 虚 18. 51 ? 2. 34 18. 75 ? 2. 83 - 0. 24 ? 0. 67 35. 74 ? 1. 14 35. 83 ? 1. 81 0. 09 ? 0. 69
怀山药 18. 51 ? 2. 34 19. 66 ? 2. 31 0. 84 ? 1. 21* * 35. 31 ? 1. 22 35. 86 ? 2. 42 0. 55 ? 0. 84*
桂 平 18. 60 ? 1. 44 19. 48 ? 2. 52 0. 88 ? 1. 32* * 35. 60 ? 1. 31 36. 18 ? 3. 10 0. 58 ? 1. 11*
实验 2 北 流 18. 93 ? 1. 65 20. 13 ? 2. 74 1. 20 ? 1. 84* * 35. 92 ? 0. 85 36. 35 ? 2. 71 0. 43 ? 0. 99*
博 白 19. 10 ? 1. 38 20. 39 ? 3. 15 1. 29 ? 1. 91* * 35. 85 ? 0. 96 36. 62 ? 2. 52 0. 77 ? 1. 45*
邕 宁 19. 08 ? 1. 22 20. 00 ? 3. 01 0. 92 ? 1. 54* * 35. 72 ? 0. 75 35. 82 ? 4. 31 0. 10 ? 1. 36*
容 县 18. 77 ? 1. 65 19. 88 ? 2. 92 1. 11 ? 2. 02* * 36. 11 ? 1. 33 36. 60 ? 3. 83 0. 49 ? 0. 96*
与阳虚组比, * P > 0. 05, * * P < 0. 05, * * * P < 0. 01。与怀山药比, v P > 0. 05。
由表 2 实验 1可见,与阳虚组比较, 对体重,广西五个产
地的褐苞薯蓣和怀山药都能显著增加肾阳虚小鼠体重( P
< 0. 01) , 褐苞薯蓣和怀山药比较体重无明显差异 ( P >
0. 05) ;对体温, 怀山药、桂平、博白、容县产的褐苞薯蓣都能
显著恢复肾阳虚小鼠的体温 ( P < 0. 01 和 P < 0. 05) , 桂
平、博白、容县产的褐苞薯蓣与怀山药比较恢复体温不显著
( P > 0. 05) , 北流、邕宁产的褐苞薯蓣, 对体温影响不显著
( P > 0. 05)。
由表 2 实验 2可见,与肾阳虚组比较, 对体重,怀山药及
广西桂平、北流、博白、邕宁、容县的褐苞薯蓣都能增加肾阳
虚小鼠的体重( P < 0. 05) ,且怀山药与广西五个产地的褐
苞薯蓣比较无显著差异( P > 0. 05) ; 对体温,怀山药和广西
五个产地的褐苞薯蓣都无明显影响( P > 0. 05)。
急性毒性实验 LD50测定: 取体重 18~ 22g 小鼠, 按体
重和性别均匀分组, 每组 10 只, 以浓度为 12g /ml的褐苞薯
蓣和怀山药水煎醇沉液 1 次灌胃给药。结果数据用华西医
科大学 PEMS 软件包进行统计。该软件不接受者改用改良
寇氏公式统计。各地褐苞薯蓣的 LD50 ( g /kg ) 如下: 北流
312. 8 ? 42. 5、桂平 379. 3 ? 48. 8、博白 427. 1 ? 44. 9。怀山
药 LD50为 357? 64. 2。小鼠中毒表现: 先出现镇静, 然后是
扭体反应,最后惊厥(竖尾,跳跃,四肢抽搐, 角弓反张, 腹肌
强烈收缩)而死, 死亡出现在灌胃给药后约 30 分钟。尸体解
剖见全段小肠膨隆,肠腔充满半透明液体, 肠壁充血水肿, 胃
及结肠未见异常。
MTD测定:对预试时以最大浓度 12g /ml, 最大给药容
积0. 5ml /10g 体重1122, 1 次 ig, 测不出最小 100%死亡剂量
的容县及邕宁褐苞薯蓣, 用组间剂量比为 1B0. 7 的剂量, 每
组 10 只小鼠,按剂量由大到小, 逐组进行 ,至倒数第二组有
1 只小鼠死亡时,末组小鼠数增至 20 只而不出现死亡即终
止实验, 该组剂量即为 MTD。结果容县及邕宁的褐苞薯蓣
M TD均为 600g /kg。
3 讨 论
肾阳虚证的实质是什么,文献1102认为, 肾阳虚的主要发
病环节在下丘脑,具有下丘脑 ) ) ) 垂体 ) ) ) 肾上腺皮质 ) ) )
胸腺( HPAT )轴功能紊乱,补肾阳方药右归饮可直接作用在
下丘脑来提高 HPAT 轴功能。文献1112认为, 阳虚证时能量
代谢水平低下,甲状腺继发性功能低下及微循环障碍引起慢
性缺氧。这些因素可能就是阳虚证小鼠形寒肢冷、体温及体
重下降的原因。褐苞薯蓣能显著改善肾阳虚证, 使体温体重
恢复,使去势小鼠精囊前列腺增重, 提示它有补肾作用和雄
激素样作用,其作用点是否也在下丘脑或 HPAT 轴, 有待研
究。
文献142报道, 山药水煎剂也可增加小鼠前列腺、精囊重
量,增强雄激素样作用, 这和本实验结果相一致。
文献1142报道, 药理实验证明,补肾阳药在去势小鼠身上
获得雄激素样反应。由此我们可否推论,由于褐苞薯蓣在去
势小鼠身上有雄激素样作用,所以褐苞薯蓣为补肾阳药。这
种推论是否正确,最终还要临床实践来证明。
褐苞薯蓣和怀山药的急性毒性,根据 LD50值及 M TD 值
由小到大的顺序排列如下:北流< 温县 <桂平< 博白容县及
邕宁。LD50值小者毒性大, 故北流产者毒性相对较大,容县
邕宁两地产者毒性最小。提示产地不同,毒性也有差异。总
的说来褐苞薯蓣毒性比温县怀山药小。我们测得温县怀山
药 LD50为 321 ? 42. 5g /kg , 而文献1132报道的为 LD50 >
2286. 4g /kg,两者相差 7 倍以上, 究其原因也可能为产地不
同。
文献15、62报道肾虚与锌、镁、钙、铁元素低下有关。文
献172报道褐苞薯蓣(广山药)和怀山药都含有上述元素,它们
能改善肾阳虚症状可能与这些元素有关。
文献1102报道, 因老年人甲状腺轴及性腺轴改变与肾阳
虚相似,故肾阳虚之外象意味着下丘脑 ) 垂体 ) 靶腺在一定
程度上的未老先衰。褐苞薯蓣和怀山药对肾阳虚证都有显
著疗效,也就是说有抗衰老作用, 所以是老年人补肾良药和
抗衰老食品。
#1994#
褐苞薯蓣对去势小鼠和肾阳虚小鼠的影响 广西科技厅基础研究项目(桂科基 9819094)
文献17、8、92报道, 褐苞薯蓣和怀山药中均含有 Mn、Fe、
Zn、Ca、Cu、Mg、P 和 Se等元素,褐苞薯蓣的质量与怀山药相
似,褐苞薯蓣与怀山药的核基因组 18SrRNA 基因序列的排
序完全相同。根据上述文献指标,本文指标及其他指标如降
血糖1152、对脾虚证有效116、172等建议将褐苞薯蓣收载入中国
药典。
本文结果表明,褐苞薯蓣有雄激素样作用和改善肾阳虚
证的作用,与怀山药相似。褐苞薯蓣的急性毒性比怀山小。
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(上接第 1989页)临床上多数肾风患者咽喉两侧壁及后壁脉
络瘀滞,呈现红赤或绯红色, 甚者红肿,久久不去。咽喉是肾
风发病之源。由于经络相接,五脏相通, 故邪毒经由肾脏气
血之路,移毒于脾、胃、心、肝、肺诸脏腑。少阴肾脉循喉咙,
挟舌本,注入肺中, 故外邪入侵,盘踞咽喉与肺, 郁结不散, 化
生瘀毒。久之不愈,形成咽喉y肺y肾的恶性循环。此为肾
风标本传变之理。早治之法是病在下取之于上, 清上治下,
法以利咽解毒,透经达络为主。
5本草纲目拾遗6用金荞麦/ 治喉闭, 喉风喉毒0。任老认
为,金荞麦性凉清热, 善开喉闭, 为治疗咽喉肿痛,喉症开关
之要药,清上之功显著。临床常用金荞麦 20g 为君药。若喉
核肿大日久不退者,加甲珠、细辛、肉桂、三棱、莪术之类。
1病例2刘某,男, 19 岁。于 2001 年 1 月 20 日初诊。腰
酸痛乏力半年而就诊。近 1 年来,极易感冒, 近半年,自觉腰
酸乏力,在当地医院诊为/ 慢性肾小球肾炎0, 经中西医治疗
未见明显好转。诊见:腰酸痛, 乏力,咽淡红, 咳嗽有痰,手足
心热,舌淡红, 少苔,脉虚弦有力。尿常规: BLD( + + ) , PRO
( + + ) ,肾功及肾脏 B超正常。西医诊断:慢性肾小球肾炎;
中医诊断: 慢性肾风。辨证为喉肾相关证(肺肾阴虚) , 治以
利咽解毒, 透经达络, 兼化痰止咳。药用金荞麦 20g , 马勃
15g ,细辛 3g, 桔梗 15g, 佛耳草 15g, 平地木 15g, 生茅根 60g,
血草 20g, 土茯苓 100g, 旱莲草 20g, 地骨皮 15g, 白前 15g。2
剂后咳嗽咯痰愈。上方减佛耳草、平地木、白前, 加紫荆皮、
木蝴蝶、山萸肉各 15g ,据证更方, 治疗近 1 年后愈。
4 淡菜补肾填精, 治虚羸劳损
淡菜为贻贝科动物贻贝和其他贻贝类的贝肉, 始载于
5食疗本草6。归肝、肾经,主要有补肾壮阳, 滋肝益精, 养阴
熄风,消瘿散结的功效, 临床可用于肾虚腰痛、肝阳眩晕、虚
劳羸瘦、疝瘕瘿瘤等。任老用淡菜治疗肾风日久,肾虚精亏
之证。
肾虚精亏,命火不足是肾风发病的关键内因,既有先天
所致,又有后天病邪侵害使然 ,尤以慢性肾风多见。慢性肾
风,以虚损为主, 肾中精气不足,真阴真阳亏虚, 腰为肾之府,
腰肾肌腠失于温煦濡养,则腰酸痛而畏寒;水亏不能涵木, 木
失滋荣,则肝气内变, 阳气上亢,郁而生风, 或因命火虚衰, 无
力鼓动清阳上升,则浊毒不降而上僭, 二者均可导致内风头
眩(高血压病)之疾;肾藏精生髓, 髓得命火之温化而生血, 是
精生髓,髓化血之义也,故李中梓谓/ 血之源头在乎肾0 (5士
材三书6 , 肾精不足,命火虚衰, 精气不化, 则不能生髓,又因
浊毒伤髓,髓虚血少, 则成血极(贫血)。久则肾气衰竭, 五脏
俱败,水毒蕴蓄, 终成虚损性肾衰 ,水毒证。因此, 治疗必遵
5素问#阴阳应象大论6/ 精不足者,补之以味0之旨,以补肾填
精为要务。
据古代文献记载, 淡菜能/ 补肾,益血填精0 ( 5随息居饮
食谱6 ) , /补五脏, 益阳事, 理腰脚气0( 5日华子本草6 ) ,任老
认为,淡菜以血肉有情之体, 温而不燥,味咸入肾, 直达病所,
其补肾填精之力远在草木之上。肾精足则气血生, 水可涵
木,肝风自熄, 实有阴阳互化之妙。任老自创之肾损固真散,
即以淡菜等大队血肉有情之品为君。
1病例2王某,女, 40 岁。于 2000 年 3 月 15 日初诊。腰
酸畏寒 3 年而就诊。3年前, 腰酸, 在当地医院诊为/ 慢性肾
小球肾炎0, 经中西医治疗未见明显好转,反而加重。诊见:
腰酸冷,四肢欠温, 全身畏寒, 纳差, 口淡无味, 颜面淡黄色
黯,舌红, 苔薄白,脉沉迟无力。尿常规: BLD( + + + ) , PRO
( + + ) ,肾功及肾脏 B 超正常。西医诊断:慢性肾小球肾炎。
中医诊断:慢性肾风。证属脾肾阳虚, 兼夹瘀浊。治宜益火
健脾,温阳透络。药用: ( 1) 炮附子、肉桂各 5g , 干姜 10g, 生
白术、仙茅各 15g ,烫水蛭 3g, 马鞭草 15g, 土茯苓 150g, 生茅
根 60g, 血草 20g, 九香虫、姜朴各 15g。4 剂。( 2)另服肾损
固真散:淡菜 70g ,海马 60g ,鲍鱼 50g, 海狗肾 3 具,胎盘 1 具
(洗净) , 西花 50g, 血竭 40g, 土茯苓 100g, 砂仁 50g, 酒军
30g,巴戟 50g ,白术 60g ,鹿角菜 70g。共为细面, 每服 3g, 日
3次, 饭前 30 分钟白开水送下。连服半年后 PRO( - ) , 1 年
半后潜血消失,追访患者, 愈后未发。
#1995#
中 医 药 学 刊 2003 年 12月第 21 卷第 12 期 专 家 论 坛