全 文 ：第 42 卷第 2 期
2014 年 1 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 42 No. 2
Jan. 2014
HPLC法测定粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量
金绍刚
( 安徽省桐城市中医院药剂科，安徽 桐城 231400)
摘 要:建立了高效液相色谱法对粉萆薢和绵萆薢药材中薯蓣皂苷元的含量测定方法，通过测定比较两者含量大小。方法:
采用反相高效液相色谱法:色谱柱为 Gemini C18 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm)，甲醇∶水 (95∶5)为流动相，流速:1. 0 mL /min，
检测波长:210 nm，对粉、绵萆薢药材中的薯蓣皂苷元进行含量测定。结果表明:线性范围为 0. 120 5 ～ 1. 205 mg /mL，r = 0. 9997，
平均回收率 99. 59%，ＲSD = 0. 46%(n = 5)，粉萆薢的平均含量为 0. 481 1 mg /mL，绵萆薢的平均含量为 0. 101 0 mg /mL。本实验方
法简便，快速，结果可靠，可用于对粉、绵萆薢药材中薯蓣皂苷元的含量测定，得出粉萆薢中薯蓣皂苷元的含量远大于绵萆薢中
的含量。
关键词:粉萆薢;绵萆薢;薯蓣皂苷元;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001 － 9677(2014)02 － 0090 － 03
作者简介:金绍刚 (1965 －)，男，主管中药师，主要从事医院药剂工作。
Determination of Diosgenin in Dioscorea collettii and
Dioscorea Septemloba Thunb by HPLC
JIN Shao － gang
(Department of Medicament，Anhui Chinese Medicine Hospital，Anhui Tongcheng 231400，China)
Abstract:A HPLC method was established to determine Diosgenin content in Dioscorea collettii and Dioscorea
Septemloba Thunb to compare their content. The HPLC method was that column was Gemini C18 (250 mm × 4. 60 mm，
5 μm)，mobile phase consisted of methanol∶water was 95∶5，flow rate was 1. 0 mL /min，and the detection wavelength
was 210 nm. The results showed that linear range was 0. 120 5 ～ 1. 205 mg /mL，r = 0. 9997，average recovery was
99. 59%，ＲSD =0. 46% (n = 10) ，average content in Dioscorea collettii was 0. 481 1 mg /mL，and average content in
Dioscorea Septemloba Thunb was 0. 101 0 mg /mL. The method was simple，rapid，more reliable，and can be used to
determine Diosgenin content in Dioscorea collettii and Dioscorea Septemloba Thunb. The content in Dioscorea collettii was
higher than that in Dioscorea Septemloba Thunb.
Key words:Dioscorea collettii;Dioscorea Septemloba Thunb;diosgenin;high performance liquid chromatography;
content
粉萆薢为薯蓣科植物粉背薯蓣的干燥根茎，绵萆薢为薯蓣
科植物绵萆薢的干燥根茎，两者均为《中华人民共和国药典》
2010 年版收载品种，它们主要含有的化学成分为皂苷和甾体皂
苷类化合物，其中薯蓣皂苷元的含量较高［1］。近年来对粉萆薢
和绵萆薢中薯蓣苷元含量测定的研究较少，有利用反相高效液
相色谱法，但分离效果不理想，药典中又无含量测定标准。从
以往的实验结果可以看出粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量
差别很大［2］，所以制定其含量标准是很有意义的。对粉萆薢和
绵萆薢进行含量测定的高效液相色谱法方便、简单、准确，从
而能对其进行有效的质量控制。建立的含量测定方法将质量控
制指标与活性成分相结合，为萆薢及薯蓣属其他植物的质量控
制提供了科学、有效的依据。本文通过高效液相色谱法对药材
粉萆薢和绵萆薢中含有的薯蓣皂苷元进行含量测定，分离效果
比较好，结果相对可靠，通过实验数据可以比较两者薯蓣皂苷
元的含量大小。
1 实验材料
粉萆薢，统货;绵萆薢 (批号:001007892)，北京同仁
堂;薯蓣皂苷元对照品 (批号:111539 － 200001)，中国药品
生物制品检定所。
2 实验方法
2. 1 色谱条件与系统适用性
色谱柱为 Gemini C18 (250 mm ×4. 60 mm，5 μm);流动相
为甲醇∶水 = 95∶5，检测波长为 210 nm;流速为 1. 0 mL /min;
柱温为 30 ℃;进样体积为 20 μL。在此色谱条件下，系统的理
论塔板数按薯蓣皂苷元计大于 10 000，薯蓣皂苷元与相邻峰的
分离度大于 1. 5，色谱图见图 1、图 2。
第 42 卷第 2 期 金绍刚:HPLC法测定粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量 91
图 1 对照品溶液图谱
图 2 样品溶液图谱
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 供试品溶液的制备
称取萆薢药材 100 g，加入 70%的乙醇 800 mL，回流提取
2 次，每次 1. 5 h，合并滤液，浓缩至无醇味，加水至 120 mL，
置分液漏斗中，用 120 mL 水饱和正丁醇萃取 3 次，合并正丁
醇液，减压浓缩，得粗皂苷。
取约相当于 10 g药材的浓缩液，用 2 moL /L的盐酸 200 mL
(直火加热)回流 4 h，放冷，抽滤，残渣水洗至中性，80 ℃烘
干，加石油醚(60 ～ 90 ℃)120 mL，水浴加热回流 2. 5 h，滤过，
滤液蒸干，残渣加甲醇溶解至 10 mL量瓶中，定容，作为供试
品溶液。
2. 2. 3 对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的薯蓣皂苷元对照品 12. 05 mg，加甲
醇溶解至 10 mL 量瓶中，定容，作为对照品溶液(浓度为
1. 205 mg /mL)。
2. 3 测定方法
分别取对照品溶液溶液和供试品溶液各 20 μL 注入液相色
谱仪，根据色谱图，计算薯蓣皂苷元的峰面积计算其含量。
3 方法学考察
3. 1 线性关系的考察
表 1 线性关系考察表
检测次数 浓度 /(mg /mL) 峰面积值
1 0. 1205 439146
2 0. 2410 920326
3 0. 4820 1802518
4 0. 7230 2660798
5 0. 9640 3509478
6 1. 2050 4299942
将上述制备好的浓度为 1. 20 5 mg /mL的对照品溶液依次稀
释制备成 0. 120 5 mg /mL、0. 241 0 mg /mL、0. 482 0 mg /mL、
0. 723 0 mg /mL和 0. 964 0 mg /mL，取上述溶液，分别按照上述
色谱条件进行测定，测得的结果见表 1。根据测定的结果绘制标
准曲线，以浓度(C)为横坐标(X)，峰面积值(A)为纵坐标(Y)，
得回归方程为 y =4E + 06x + 55592，r = 0. 9997。结果表明:薯蓣
皂苷元在 0. 120 5 ～1. 205 mg /mL范围内线性关系良好。
3. 2 精密度实验
精密吸取浓度为 0. 482 0 mg /mL 的对照品溶液 20 μL，按
照上述色谱条件连续进样 6 针，计算得到薯蓣皂苷元的峰面积
值的 ＲSD = 1. 78%，结果表明:所用仪器的精密度良好。
3. 3 稳定性实验
取同一供试品溶液，分别在放置了 0 h、2 h、4 h、6 h、8 h
的时候精密吸取 20 μL，按照上述色谱条件进样测定，计算得
到薯蓣皂苷元的峰面积值的 ＲSD = 1. 76%，结果表明供试品溶
液在 8 h内稳定。
3. 4 加样回收率实验
取同一已知含量的供试品溶液 5 份，分别精密加入薯蓣皂
苷元对照品溶液，按上述供试品溶液的制备方法制备成供试品
溶液 5 份，每一份供试品溶液精密吸取 20 μL，按照上述色谱
条件连续进样 2 针，测得的结果详见表 2，计算得到平均回收
率 = 99. 59%，回收率 ＲSD = 0. 46%。
表 2 加样回收率实验结果表
已知样品
含量 /mg
加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /%
平均回收
率 /%
0. 333525 0. 30125 0. 633045 99. 43
0. 333525 0. 30125 0. 632199 99. 14
0. 333525 0. 30125 0. 632517 99. 25
0. 333525 0. 30125 0. 635253 100. 16
0. 333525 0. 30125 0. 634748 99. 99
99. 59
4 样品测定
精密吸取处理好的供试品溶液 20 μL，按照上述色谱条件
进样测定，测得的结果详见表 3，该结果表明粉萆薢中薯蓣皂
苷元的含量远远大于绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量。
表 3 样品测定结果表
药材 峰面积值 含量 /%
粉萆薢 20110101 2350736 0. 5788
粉萆薢 20110102 1598200 0. 3935
粉萆薢 20110103 1913662 0. 4711
绵萆薢 20110101 972012 0. 1196
绵萆薢 20110102 770877 0. 0949
绵萆薢 20110103 721099 0. 0887
5 结 论
(1)本次实验中，在以色谱柱为 Gemini 5u C18 (250 mm ×
4. 60 mm 5 μm)，甲醇∶水 = 95∶5 为流动相，210 nm 为检测
波长，1. 0 mL /min为流速，30 ℃为柱温的色谱条件下，萆薢
中薯蓣皂苷元的色谱峰基本分开，分离度良好，可以用于定量
分析。
( 下转第 130 页)
130 广 州 化 工 2014 年 1 月
改变了聚乙烯颗粒表面性质，从而引发高静电［4］。
静电的积累主要可通过反应器静电接地来消除，但杂质引
发的静电是动态变化的。经验总结表明产生正静电的主要杂质
有:乙醇、甲醇、氧气;产生负静电的主要杂质有［3］水、丙
酮。其中氧和 T2 反应产物是一种静电诱导剂，其反应方程式
如下:
T2 +循环空气———水合 AlOX
T2 + O2———Al(OＲ)3
Al(OＲ)3 + T2(加热)———释放静电剂
T2 + H2O———Al(OH)3
Al(OH)———较高摩擦起电(造成树脂细粉粘结)［1］
4. 2 静电的危害
静电会使树脂细粉在反应器壁粘结，使局部过热，测温元
件不准。当反应器壁细粉进一步粘结，就会形成片状物掉落下
来，称为结片，反应一旦结片后，由于片比较大，极大地影响
反应中的硫化状态，使之恶化。硫化不好，撤热不均就会结更
多的片，这是一个恶性循环。另外结片会堵塞 PDS出料系统和
后续系统，反应温度波动也大，运行不平稳，到最后只得停
车。所以说静电危害是巨大的。
5 预防和应对措施
(1)加强原料检测，加强对界区各个原料检测，一旦发现
原料杂质超标，立即向领导汇报，请求提供合格原料。
(2)加强对精制后的原料检测，及时发现原料精制波动，
并且换精制床层，防止进入反应器中杂质含量高。
(3)T2 能够和杂质反应，能够很好的消除反应器中杂质，
但是 T2 和氧反应的产物本身就是一种静电引发剂，因此一定
要确保氧含量低才能开车，在开车初期 T2 控制在一个较高水
平，开起来后再控制在一个合理水平。
(4)用异戊烷进入冷凝模式。异戊烷本来是用来撤热增
加反应产量的［8］。但是人们在使用中发现异戊烷具有很好的
消静电作用，经验总结认为主要是反应中加异戊烷增加了反
应中湿度，减少了粉料间及粉料和反应器壁间的摩擦［5］。与
此同时，异戊烷虽然能很好的消除静电，但是它本身杂质含
量也比较高，所以也要控制异戊烷的加入量，不能太高。武
汉石化开车经验表明没有进入冷凝态，反应能接受的杂质含
量为 2 mmol /kmol以下。进入冷凝模式能够接受杂质含量达到
3 ～ 5 mmol /kmol左右。
(5)投用抗静电剂系统，利用水和氧产生的已知负静电和
正静电去中和反应器中的静电，以达到消除静电的目的。
6 结 语
在聚烯烃这几套装置中，由于我们是气相硫化床法，所以
我们的工艺和催化剂对杂质要求是最高的。微量的杂质波动就
可能导致我们生产的巨大波动，因此我们要严格做好原料杂质
的监控，对于原料波动及时给出应对措施，以保反应平稳运
行。
参考文献
［1］ 刘宏吉，凌勇，翟辉． T2(三乙基铝)在 UNI POL 工艺中的应用［J］．
吉林化工学院学报，2004，21(2):26 － 28．
［2］ 朱宪宝，蔡厚昌．工业流化床乙烯气相共聚合过程的研究［J］．工业
技术，1996． 26(5):311 － 313．
［3］ 蔡祥军．气相法聚乙烯反应器中静电风险的防范［J］． 浙江化工，
2010，41(4):27 － 29．
［4］ 宋占国． Unipol 聚乙烯流化床静电产生及控制方法［J］．精细与专
用化学品，2011． 19(8):37 － 41．
［5］ Park A H，Bi H S，Grace J Ｒ． Ｒeduction of electrostatic charge in gas—
solid fluidized beds［J］． Chem Eng Sci．，2002，57(1) :153 － 162．
［6］ 胜喜梅，李贵生，胜兆泉．聚乙烯装置静电原因分析及预防［J］．河
南化工，2000(7):36 － 37．
［7］ 潘祖仁．高分子化学［M］．北京:化学工业出版社，2007:193 － 194．
［8］ 刘志武，刘源． 冷凝态操作下 LLDPE 高强度棚膜专用树脂开发
［J］．研究与开发，2007，24(1):
檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
1 － 4．
( 上接第 91 页)
(2)根据实验中样品测定的数据可以看出:粉萆薢与绵萆
薢中薯蓣皂苷元的含量相差很大，而且，粉萆薢中薯蓣皂苷元
的含量远远大于绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量。
6 讨 论
在本次实验过程中，可以发现影响薯蓣皂苷元的提取以及
薯蓣皂苷水解为薯蓣皂苷元的因素有很多，因此，在实验中控
制供试品溶液的制备条件是很关键的。薯蓣皂苷元可选择先提
取后水解，或者先水解后提取的方法，在固定其他提取条件时
考察这 2 种方法，结果 2 种方法含量测定相差较大，以先提取
后水解的方法为优［3 － 4］。
参考文献
［1］ 梁晓，师红，高军宁． HPLC法测定萆薢分清丸中薯蓣皂苷元的含量
［J］．陕西中医学院学报，2009，32(1):66 － 67．
［2］ 莫可丰．粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量测定［J］． 中草药，
2003，34(5):470 － 471．
［3］ 粱丽娟，王铁杰，李军，等． HPLC 法测定穿龙薯蓣中薯蓣皂苷、原
薯蓣皂苷和甲基原薯蓣皂苷的含量［J］． 药物分析杂志，2009，29
(5):721 － 724．
［4］ 费洪荣，朱玮，张檀．粉萆薢中皂苷元含量测定方法的研究［J］． 西
北林学院学报，2003，18(3):76 － 78．