全 文 ：收稿日期：2015- 09- 09
基金项目：国家自然科学基金项目（81202857）；辽宁省高等学校优秀
人才支持计划（LJQ2015070）；2014年辽宁省大学生创新创
业训练计划项目（201410162055）
作者简介：邓仕任（1979-），男，博士，副教授，研究方向为中药药效物
质基础研究。
通信作者：夏林波（1977-），女，博士，副教授。
DOI：10.16247/j.cnki.23-1171/tq. 20151223
Sum 243 No. 12
化 学 工 程 师
Chemical Engineer 2015年第 12期
分
析
测
试
香附子为莎草科植物莎草 Cyperus rotundus L.
的干燥根茎，具有行气解郁，调经止痛的功效，常用
于肝郁气滞，胸胁胀痛，经闭痛经等症[ 1,2 ]，为中医临
床常用中药。其主要成分有挥发油类、黄酮类、糖
类、生物碱类、酚类和萜类等[3 ]。目前，对香附成分及
药理活性的研究主要偏重于其挥发油中的倍半萜
类小极性成分[ 4 ]，最新研究表明，香附中还含有一类
二苯乙烯低聚物 [ 5,6 ]，该类化合物具有较好的抗氧
化、抗炎、抗肿瘤等药理活性，被认为是香附子中的
另一类活性物质，cyperusphenol A（一种二苯乙烯三
聚体）即为其中的代表性成分。目前，国内外尚未见
香附子中 cyperusphenol A含量测定的相关报道。本
实验拟以 cyperusphenol A为指标成分，以十八烷基
硅烷键合硅胶为固定相，建立了香附子药材中
cyperusphenol A的 UHPLC分析方法，相对于常规
HPLC分析方法而言，该方法具有分离度高、分析时
间短、节约溶剂等诸多优点[ 7 ]，可为香附子药材的质
量控制提供相关依据。
1 实验部分
1.1 仪器与试药
Agilent 1290 Infinity高效液相色谱仪（美国安
捷伦）；METTLERAE 240型十万分之一分析天（瑞
UHPLC 法测定香附子中活性
成分 cyperusphenol A含量 *
邓仕任，朱夏敏，王春娇，夏林波 *，朱 江
（辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600）
摘 要：目的：建立高效液相色谱测定香附子药材中 cyperusphenol A含量的方法，为香附子的合理质量
控制提供依据。方法：采用 Poroshell 120 EC- C18色谱柱（3.0×150mm，1.8μm），流动相乙腈 - 水（25∶75，V∶
V），检测波长 280nm。结果：Cyperusphenol A在 0.848~8.48μg·mL-1范围内线性关系良好，r=0.9999（n=6），加
样回收率 99.3%，RSD=1.01%（n=6）；6 批香附子药材中 cyperusphenol A的含量为 3.85~9.94μg·g-1。结论：
cyperusphenol A为香附子药材中的特征活性成分，所建立的含测方法操作简便，结果可靠，可作为香附子药材
质量控制的指标性成分。
关键词：香附子；cyperusphenol A；UHPLC；含量测定
中图分类号：O657.7 文献标识码：A
Determination of cyperusphenol A in fruit of Cyperus rotundus L. from different origin by
UHPLC method*
DENG Shi-ren，ZHU Xia-min，WANG Chen-jiao，XIA Lin-bo*，ZHU Jiang
（College of Medicine, Liaoning Uniuer sity of Traditional Chinese Medicine，Dahan 116600, China）
Abstract：Objective: An HPLC method for determination of cyperusphenol A in fruit of Cyperus rotundus L.
was developed, to provide a quality control method for Cyperus rotundus L. Methods: The chromatography was car－
ried out on a Poroshell 120 EC-C18 column（3.0×150mm，1.8μm）with acetonitrile- water（25∶75, V∶V）as the mo－
bile phase, the detection wavelength was set at 280 nm. Results: Cyperusphenol A could be successfully deter－
mined and the linear rang was 0.848~8.48μg·mL-1（r=0.9995）. The average recoveries（n=6）of the cyperusphenol
A was 99.3%，RSD=1.01%. The content of cyperusphenol A in 6 batches was 3.85~9.94μg·g-1. Conclusion: Cype－
rusphenol A was the specific ingredient in fruit of Cyperus rotundus L. The method is accurate, reliable and sensi－
tive for quality control of fruit of Cyperus rotundus L.
Key WordS：cyperus rotundus L.；cyperusphenol A；UHPLC；determination
士 METTLER）；FA1004B电子天平（上海精密科学
仪器有限公司）；KQ- 250DB型数控超声清洗器（昆
山市超声仪器有限公司）。Cyperusphenol A对照品
为本实验室自行制备，经检测纯度大于 98%（峰面
积归一化法）。甲醇，分析纯；乙腈，色谱纯（天津市
大茂化学试剂厂）；水为娃哈哈纯净水。香附子购自
河北安国药材市场，经辽宁中医药大学中药鉴定教
研室翟延君教授鉴定为莎草科植物莎草 Cyperus
rotundus L.的干燥根茎。
1.2 色谱条件
安捷伦 Poroshell 120 EC- C18 色谱柱（3.0×
150mm，1.8μm）；流动相乙腈 - 水（25∶75，V∶V）；
流速 0.4 mL·min-1；检测波长 280nm；柱温 50℃。
1.3 对照品溶液制备及线性关系考察
取 cyperusphenol A对照品 4.24mg，精密称定，
置 100mL量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，得浓度
为 42.4μg·mL-1的对照品储备液。将该储备液用甲
醇逐级稀释，配成浓度分别为 0.848、2.54、4.24、5.94、
7.63、8.48μg·mL-1的系列对照品溶液。将上述对照
品溶液依次注入液相色谱仪，进样量为 3μL。以峰
面积为纵坐标，绝对进样量（μg）为横坐标，得回归
方程为 y=3.78×104x+43.1，cyperusphenolA在 0.848~
8.48μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9995，n=6）。
1.4 供试品溶液的制备
取香附子粉末（过 40目筛）约 3.0g，精密称定，
置于锥形瓶中，加入 100mL甲醇浸泡过夜，超声提
取 3次，每次 30min，过滤合并提取液，减压浓缩至
干后，以甲醇溶解后转入 10mL容量瓶中，定容至刻
度，测定前置于 4℃保存备用，进样分析前经 0.22μm
滤膜过滤，作为供试品溶液。
2 结果与讨论
2.1 精密度实验
精密称取同一香附子药材按 1.4项下方法制成
供试品溶液，连续进样 6次，测得保留时间 RSD=
0.56%，峰面积 RSD=1.33%，表明仪器精密度良好。
2.2 稳定性
精密称取同一香附子药材按 1.4项下方法制成
供试品溶液，分别在 0、2、4、8、12、24h测定峰面积。
平均峰面积为 233.1，RSD=1.10%（n=6）。表明供试
品溶液在 24h内基本稳定。
2.3 重复性试验
精密称取同一香附子药材 6份，按 1.4项下方法
制成供试品溶液，测得样品中 cyperusphenol A含量
的平均值为 5.59μg·g-1，RSD=1.78%，证明本方法重
复性良好。
2.4 加样回收率试验
取已知 cyperusphenol A含量（5.59μg·g-1）的药
材 9份，每份约 3g，精密称量，3份为一组，置具塞
锥形瓶中，每组精密加入低、中、高浓度 cyperusphe-
nol A对照品贮备液，按 2.3项下方法制备供试品溶
液，结果平均加样回收率 99.1%，RSD=2.13%（n=
9）。
2.5 样品含量的测定
分别取不同产地的香附子药材约 3 g，精密称
定，按 2.3项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条
件下进行分析，其色谱峰见图 1，记录下峰面积，代
入标准曲线，计算出样品中含有 cyperusphenol A的
含量，结果见表 1。
A cyperusphenol A对照品
B 香附子样品
图 1 香附子药材 HPLC图
Fig.1 HPLC of cyperus rotundosl
表 1 香附子药材中 cyperusphenol A含量测定结果
Tab.1 Determination results of cyperusphenol A in cyperus
rotundos L.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
编号
1
2
3
产地
广东
山东
浙江
含量 /μg·g-1
5.59
9.94
8.12
编号
4
5
6
产地
福建
河南
湖南
含量 /μg·g-1
3.85
6.77
5.61
（下转第 50页）
邓仕任等：UHPLC法测定香附子中活性成分 cyperusphenol A含量 *24 2015年第 12期
3 结论
（1）香附子为莎草科植物莎草的根茎，由于莎
草之根相附连续而生，可以合香，所以称为“香附
子”。香附分布很广，历史上曾以广东的三水、横江
为最，而今主产鲁与浙，山东产者称东香附，浙江产
者称南香附，品质均佳，其特点是个大，色棕褐，质
坚实，香气浓。香附具有行气解郁，调经止痛的功
效，明代李时珍《本草纲目》称香附“乃气病之总司，
女科之主帅也。”
（2）香附中的化学成分主要有挥发油、糖类、生
物碱、黄酮和多酚类。目前，对香附的成分及药理活
性的研究大多集中在其挥发油中的单萜、倍半萜等
化合物上，而挥发油成分也被认为与香附的镇痛、
抗炎、解热作用相关。然而，近期日本学者从香附中
分离鉴定出一系列二苯乙烯三聚体和二聚体化合
物，该类化合物骨架由白藜芦醇和白皮杉醇聚合而
成。该类化合物具有较好的抗自由基、抗肿瘤和抗
炎等药理活性，因而也被认为是香附的活性成分之
一，其代表性特征成分即为 cyperusphenol A，具有较
高的研究价值。
（3）本文首次采取 UHPLC法，对 6批不同产地
的香附子药材中的 cyperusphenol A进行了含量测
定，结果分布在 3.85~9.94μg·g-1范围内。检测结果
表明，不同产地的香附子中 cyperusphenol A的含量
有所差异，其中山东、浙江产药材的含量较高，这也
说明道地药材的质量的确较优。
参 考 文 献
［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：化学
工业出版社，2010，241.
［2］ 李英霞，侯立静，严军，等.近 5年国内外香附化学成分及药理
作用研究新进展［J］.现代中药研究与实践，2013，（2）：80- 83.
［3］ 黄险峰，彭国平.香附的化学成分及药理研究进展［J］.中药材，
2003，26：65- 68.
［4］ 解宇环，沈映君，纪广亮，等.香附、藿香挥发油抗炎、镇痛、解热
作用的实验研究［J］.四川生理科学杂志，2005，（3）：132- 135.
［5］ Ito T, Endo H, Oyama M, et al. Novel isolation of stilbenoids with
enantiomeric and meso forms from a cyperus rhizome［J］. Phyto-
chemistry Letters, 2012, 5（2）:267- 270.
［6］ Ito T, Endo H, Shinohara H, et al. Occurrence of stilbene oligomers
in Cyperus rhizomes.［J］. Fitoterapia, 2012, 83（8）:1420- 9.
［7］ Fekete S, Schappler J, VeutheyJ L, et al. Current and future trends in
UHPLC［J］. Trac Trends in Analytical Chemistry, 2014, 63:2- 13.
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
（上接第 24页）
由化合物的红外光谱数据可以看出 ,在
1699cm-1 附近有羧酸酯中羰基的吸收峰 ,1491 和
1364cm-1附近有硝基的吸收,1441cm-1附近有吲哚
啉环上的 N- CH2键吸收,1350, 1172cm-1附近为吲
哚啉环 C3’上偕二甲基的吸收,1247, 1081cm-1附近
是螺环 C- O- C的吸收,而 982cm-1则为螺环 C- O的
吸收峰。
3 结论
合成了一种新的螺吡喃类化合物，利用 X射线
法测定化合物的结构，分析了晶体结构，螺吡喃分
子中 C1- O1键长最大，同时 N1- C12键长最小,这就
表明此化合物在光照时，引起螺碳原子和氧原子之
间键断裂，最容易发生光化学变化。
参 考 文 献
［1］ Han Jie, Ji Ben Men, Progress in synthesis, photochromism and
photomagnetism of biindenylidenedione derivatives［J］.Journal of
Photochemistry and PhotobiologyC: Photochemistry Reviews, 2009,
141- 147.
［2］ Berkovic G, Krongauz V, Weiss V. Spiropyrans and Spirooxazines
for Memories and Switches［J］. Chem.Rev., 2000，100,（5）:1741-
1754.
［3］ 张国峰,陈涛,李冲,等.螺吡喃分子光开关［J］.有机化学，2013，33
（5）: 927- 942.
［4］ 吴丽,王颖伟,杨志范.两种新型吲哚啉螺吡喃的合成及其光致
变色性质研究［J］.精细石油化工, 2013,30（2）: 46- 50.
［5］ 杨素华,林雪松,孙卫东.具有双荧光发射的螺吡喃的合成与
性质研究［J］.化学研究与应用, 2014,26（11）: 1783- 1787.
李 旭：1,3,3- 三甲基 - 5- 乙氧酰基 - 8- 硝基螺[哚啉 - 2,2(2H- 1)苯并吡喃]的合成与晶体结构2015年第 12期 53