全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１４（０２）：１１２～１１６
第一作者简介：唐业刚（１９７９－），男，湖北武汉人，硕士，讲师，研究
方向为细胞工程。Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｙａｎｇ１２６＠１２６．ｃｏｍ．
收稿日期：２０１３－００－００
宜昌百合鳞茎增殖诱导条件研究
唐 业 刚，崔 伟
（武汉生物工程学院，湖北 武汉４３０４１５）
摘 要：以宜昌百合种球诱导的鳞茎无菌系为试材，从外植体处理、固体增殖培养基优化及
液体增殖培养基优化等３个方面对宜昌百合鳞茎的增殖效果进行了研究。结果表明：对外植体
进行创伤处理的鳞茎诱导增殖效果极显著高于不做创伤处理；最佳固体增殖培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ＋琼脂７ｇ／Ｌ，平均增殖倍数可达７．６０倍；最佳液体悬
浮增殖培养基为ＭＳ＋ＴＤＺ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ，平均增殖倍数高达１０．８６，
平均增重倍数可达６．１８；在ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ的培养基下，液
体培养的增殖效果极显著高于固体培养的诱导增殖效果。
关键词：宜昌百合；鳞茎；增殖；固体培养；悬浮培养；培养基
中图分类号：Ｑ ９４９．７１＋８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１４）０２－０１１２－０５
百合属百合科百合属多年生草本球根植物，是一种
集观赏、药用、化妆为一体的花卉［１］，它四季有花，花色艳
丽，色彩丰富，是全球花卉市场珍贵的切花品种之一。
此外，百合富含蛋白质、糖、磷、铁等多种微量元素及生
物活性物质，具有润肺清热、止咳养阴、清心安神等多种
药理学作用［２－３］，国内外市场需求巨大。然而，百合种球
的传统栽培方式繁殖系数极低，繁殖速度很慢，且经多
代繁殖后，常常造成品种退化和病毒积累，严重影响其
产量和质量。运用植物组织培养技术对百合进行无性
繁殖，可较好解决上述问题，因而组织培养技术日渐受
到重视，目前已有较多文献对其进行了报道［４－７］。现以
宜昌百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｌｅｕｃａｎｔｈｕｍＢａｋｅｒ）种球为试材，研究
比较了鳞茎固体增殖培养基及液体繁殖培养基中的最
佳激素配比，以期为百合的快速繁殖提供参考。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试宜昌百合种球购自淘宝网冠莲食品旗舰店。
１．２ 试验方法
１．２．１ 外植体的消毒 去掉所购宜昌百合种球外层腐
烂鳞片，小心取下各内层，分层分别消毒：先用０．３％的
洗衣粉溶液洗８ｍｉｎ，流水冲洗３０ｍｉｎ后，于超净台上用
７５％酒精浸泡３０ｓ，无菌水冲洗２次，再用０．１％升汞浸
泡１０～１５ｍｉｎ，无菌水冲洗５次，用无菌滤纸吸干鳞片表
面水分备用。
１．２．２ 无菌系宜昌百合鳞茎外植体的获得 配制ＭＳ＋
６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋琼脂０．７％＋蔗糖
３％，在ｐＨ ５．８的鳞茎诱导培养基，１２１℃灭菌２５～３０ｍｉｎ。
将消毒后的外、中、内层各层鳞片分别分层切割成长宽
大约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，接种到上述鳞茎诱导培养
基上，接种时注意使鳞片内侧向上接入培养基。培养室
中２５℃先暗培养１５ｄ后，再置于１ ５００ｌｘ，１２ｈ／ｄ的光照
条件下培养至诱导后大量小鳞茎无菌系形成。
１．２．３ 外植体材料不同处理方式对百合鳞茎增殖效果
的影响 选用ＭＳ＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋
蔗糖３％＋琼脂０．７％，ｐＨ ５．８为基本培养基，１２１℃高
温高压灭菌３０ｍｉｎ。选用１．２．２所得的大小相近、长势
较好的无菌系小鳞茎，先将其切割成约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ
小块，然后分别对其作２种不同的处理，Ａ：用手术刀在
上述无菌系小鳞茎外植体表面上划３刀，做创伤处理；
Ｂ：对无菌系宜昌百合小鳞茎外植体不做创伤处理。接
种至上述培养基中，每瓶Ａ、Ｂ处理方式各接种２个鳞
茎，８次平行重复。于培养室中２５℃先暗培养１５ｄ，然
后置于１ ５００ｌｘ、１２ｈ／ｄ光照条件下培养。培养３０ｄ后，
统计肉眼可以区分的宜昌百合小鳞茎个数，分别计算小
鳞茎增殖倍数，小鳞茎增殖倍数＝小鳞茎个数／接种小
鳞茎个数。比较Ａ、Ｂ ２种处理方式对百合小鳞茎增殖
效果的影响。
１．２．４ 固体培养基中不同生长调节剂浓度对百合鳞茎
增殖效果的影响 以 ＭＳ＋琼脂０．７％＋蔗糖３％，ｐＨ
５．８为基本培养基，添加不同浓度的６－ＢＡ和 ＮＡＡ
（表１）。选用１．２．２所得大小相近、长势较好的无菌系
小鳞茎，采用１．２．３中增殖效果好的外植体处理方式，将
２１１
北方园艺２０１４（０２）：１１２～１１６ ·生物技术·
小鳞茎切割成大小约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，分别接种
到表１培养基中，每瓶接种２个，每组培养基做８次平行
重复，培养室中２５℃先暗培养１５ｄ，然后置于１ ５００ｌｘ、
１２ｈ／ｄ光照条件下培养３０ｄ后，统计增殖小鳞茎个数，
计算增殖倍数。
表１ 不同生长调节剂浓度的固体增殖培养基
Ｔａｂｌｅ １ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｌａｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｓｏｌｉｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｍｇ／Ｌ
培养基编号
Ｍｅｄｉｕｍ ｎｕｍｂｅｒ
Ａ－１ Ａ－２ Ａ－３ Ａ－４ Ａ－５ Ａ－６ Ａ－７ Ａ－８
６－ＢＡ ２．０ ２．０ ２．０ ２．０ １．５ １．５ １．５ １．５
ＮＡＡ ０．５ ０．４ ０．３ ０．２ ０．５ ０．４ ０．３ ０．２
１．２．５ 液体悬浮培养中不同生长调节剂浓度对百合鳞
茎增殖效果的影响 以 ＭＳ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖
３％，ｐＨ ５．８为基本培养基，分别添加不同植物生长调节
剂（表２），按１００ｍＬ／２５０ｍＬ锥形瓶装液量进行分装，并
分别加入脱脂棉０．３ｇ，１２１℃灭菌３０ｍｉｎ。以Ｂ－１培养
基（ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％）
为对照，研究新型生长调节剂ＫＴ、ＴＤＺ对百合增殖效果
的影响。选取１．２．２所得大小相近、长势较好的无菌系
小鳞茎，采用１．２．３中Ｂ外植体处理方式，将小鳞茎切割
成大小约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，分别接种到上述表２
培养基中，每瓶接种４个；每组培养基配方做５次平行重
复。接种后于培养室中２５℃、１ ５００ｌｘ、１２ｈ／ｄ光照条件
下，以１００ｒ／ｍｉｎ转速进行摇床摇瓶培养。培养３０ｄ后，
统计小鳞茎个数，计算小鳞茎增殖倍数。
表２ 不同新型生长调节剂浓度的液体
悬浮增殖培养基
Ｔａｂｌｅ ２ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｎｅｗ ｔｙｐｅ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｌｉｑｕｉｄ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｍｇ／Ｌ
培养基编号
Ｍｅｄｉｕｍ ｎｕｍｂｅｒ
６－ＢＡ ＫＴ ＴＤＺ ＮＡＡ
Ｂ－１ １．５ ０．０ ０．０ ０．３
Ｂ－２ ０．０ １．５ ０．０ ０．３
Ｂ－３ ０．０ １．０ ０．０ ０．３
Ｂ－４ ０．０ ０．５ ０．０ ０．３
Ｂ－５ ０．０ ０．０ ０．１ ０．３
Ｂ－６ ０．０ ０．０ ０．２ ０．３
Ｂ－７ ０．０ ０．０ ０．３ ０．３
Ｂ－８ ０．０ ０．０ ０．４ ０．３
１．２．６ 培养基不同物理状态对百合鳞茎增殖诱导效果
的影响 以ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋蔗
糖３％＋琼脂０．７％，ｐＨ ５．８为固体状态培养基，分装在
２５０ｍＬ锥形瓶中，每瓶分装１００ｍＬ；液体状态培养基则
不加琼脂，而是分装后每瓶中加入０．３ｇ脱脂棉，作为接
种支持面，上述２种不同物理状态培养基均于１２１℃高
温高压灭菌３０ｍｉｎ。选取１．２．２所得大小相近、长势较
好的无菌系小鳞茎，采用１．２．３中外植体Ｂ处理方式，将
小鳞茎切割成大小约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，分别接种
到上述固体、液体培养基中，每瓶均接种４个。接种后
于培养室中２５℃下，均以１ ５００ｌｘ，１２ｈ／ｄ光照条件下培
养，其中液体摇瓶培养摇床转速为１００ｒ／ｍｉｎ，２种物理
状态培养基均做７次平行重复。培养３０ｄ后，分别统计
小鳞茎个数，计算小鳞茎增殖倍数。
１．２．７ 液体培养基中不同新型生长调节剂浓度对百
合增重效果的影响 以 ＭＳ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖
３％，ｐＨ ５．８为基本培养基，分别添加１．２．５中的表２
中不同植物生长调节剂，加入脱脂棉０．３ｇ，１２１℃灭菌
３０ｍｉｎ，待其冷却后用天平称重，得接种前质量。选取
１．２．２所得大小相近、长势较好的无菌系小鳞茎，采用
１．２．３中外植体Ｂ处理方式，将小鳞茎切割成大小约
０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，分别接种到上述增重液体悬浮
培养基中，每瓶均接种４个外植体，接种后于天平上称
重，得接种后总质量，培养室中２５℃、１ ５００ｌｘ，１２ｈ／ｄ光
照条件下，于摇床上以１ ０００ｒ／ｍｉｎ转速进行液体悬浮
培养，每种培养基均做５次平行重复试验。培养３０ｄ
后，分别将培养后摇瓶称重，得培养后总质量，按以下方
法计算外植体的增重及外植体的增殖倍数。接种外植
体的初质量＝接种后总质量－接种前质量，培养后外植
体的质量＝培养后总质量－接种前质量，外植体的增
重＝培养后外植体的质量－接种外植体的初质量，外植
体的增重倍数＝外植体的增重／接种外植体的初质量。
１．３ 数据分析
试验数据均采用ＳＰＳＳ １７．０软件进行统计分析
处理。
２ 结果与分析
２．１ 外植体材料创伤处理对百合鳞茎增殖倍数的影响
由表３可知，Ａ处理方式的鳞茎增殖倍数均高于Ｂ，
且其平均增殖倍数极显著高于Ｂ（Ｆ＝１８．２８８，Ｐ＝０．００１＜
０．０１），是Ｂ处理方式的３．３１倍；从标准差可知，Ａ处理
方式鳞茎增殖效果的稳定性较Ｂ差。总体而言，对外
表３ 外植体创伤处理对百合鳞茎增殖的影响结果
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｗｏｕｎｄｅｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｏ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｌｉｌｙ ｂｕｌｂ’ｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
处理方式
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｍｅｔｈｏｄ
鳞茎增殖倍数Ｂｕｌｂ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ／倍
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８
均值
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
标准差
Ｓｔａｎｄａｒｄ
ｄｅｖｉａｔｉｏｎ
Ａ ２．７ ３．８ ２．３ ８．０ ２．４ ５．０ ６．３ ４．７ ４．４０ｂ ２．０２
Ｂ １．５ １．２ １．５ １．３ １．６ １．２ １．３ １．０ １．３３ａ ０．２０
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·生物技术· 北方园艺２０１４（０２）：１１２～１１６
植体进行创伤处理有利于百合小鳞茎的增殖诱导。
２．２ 固体培养基中不同生长调节剂浓度配比对百合鳞
茎增殖效果的影响
由表４可知，培养基Ａ－２、Ａ－３、Ａ－４、Ａ－８对宜昌百
合增殖效果无显著差异，从平均增殖倍数来看，Ａ－２和
Ａ－３培养基配方对宜昌百合小鳞茎增殖倍数相对较
高，其平均增殖倍数分别为７．０３和７．６０，尽管二者无
显著性差异，但由标准差可知，Ａ－３培养基配方（即６－ＢＡ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ）的增殖效果更为稳定，故
Ａ－３培养基配方对小鳞茎的增殖诱导效果相对更好，更
适合在工业化生产中优先考虑。
表４ 固体培养基中不同生长调节剂浓度对百合鳞茎增殖效果的影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｌｉｌｙ ｂｕｌｂ’ｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
培养基编号
Ｍｅｄｉｕｍ ｎｕｍｂｅｒ
鳞茎增殖倍数Ｂｕｌｂ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ／倍
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ 均值 Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
标准差
Ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ
Ａ－１ ４．０ ４．０ ２．０ ２．３ ７．０ ９．０ ２．５ ４．０ ４．３５ａ ２．４５
Ａ－２ １４．０ ８．０ ９．０ ２．０ ３．７ ５．５ － － ７．０３ａｂ ４．２９
Ａ－３ ６．５ １０．５ ８．０ ６．０ ７．０ － － － ７．６０ｂ １．７８
Ａ－４ ３．５ １０．０ ４．０ ４．０ ４．０ １．５ ９．０ ２．３ ５．７９ａｂ ３．９４
Ａ－５ ４．０ ４．０ ３．０ ３．０ ７．０ － － － ４．２０ａ １．６４
Ａ－６ ２．７ ２．０ ５．５ ２．５ ７．０ ４．５ ６．５ － ４．３８ａ ２．０２７
Ａ－７ ３．０ ６．０ ２．０ ４．５ ４．３ ６．０ ３．０ － ４．１１ａ １．５４
Ａ－８ ７．５ ３．０ ５．３ ５．０ ５．５ ３．０ ８．０ ７．０ ５．５４ａｂ １．９０
注：“－”表示样本被污染，数据丢失，下同。
Ｎｏｔｅ：‘－’ｉｎｄａｃａｔｅｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｓａｍｐｌｅ ｄａｔｅ ｌｏｓｓ，ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｂｅｌｏｗ．
２．３ 液体悬浮培养中不同生长调节剂对百合鳞茎增殖
倍数的影响
由表５可知，当液体摇床培养基配方为Ｂ－５、Ｂ－８时
对百合小鳞茎增殖效果极显著（Ｆ＝３．７１７，Ｐ＝０．００５＜
０．０１）高于其它培养基配方的增殖诱导效果，其中，培养
基配方为Ｂ－５时，增殖倍数高达１０．８６倍，培养基配方为
Ｂ－８时，增殖倍数可达１０．５８倍。单从增殖倍数来看，上
述２种培养基配方对宜昌百合液体悬浮培养鳞茎增殖
效果均较好。
表５ 不同新型生长调节剂对百合液体悬浮培养
鳞茎增殖倍数的影响
Ｔａｂｌｅ ５ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｌｉｌｙ ｂｕｌｂ’ｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
编号基编号
Ｍｅｄｉｕｍ
ｎｕｍｂｅｒ
鳞茎增殖倍数Ｂｕｌｂ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ／倍
１ ２ ３ ４ ５
均值
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
标准差
Ｓｔａｎｄａｒｄ
ｄｅｖｉａｔｉｏｎ
Ｂ－１ ８．６ ６．３ ８．３ ５．０ － ６．８３ａ １．４８
Ｂ－２ ８．６ ７．０ ４．７ ３．７ ９．３ ６．６６ａ ２．４２
Ｂ－３ ５．３ ４．３ ６．０ ２．０ － ４．４０ａ １．７５
Ｂ－４ ８．３ ７．０ ４．７ ５．０ ８．０ ６．６０ａ １．６７
Ｂ－５ ８．３ ９．７ ９．０ １３．０ １４．３ １０．８６ｂ ２．６３
Ｂ－６ ８．７ ８．７ ５．３ ２．３ － ６．２５ａ ３．０８
Ｂ－７ ６．０ ９．７ ４．３ １２．３ ６．０ ７．６６ａｂ ３．２６
Ｂ－８ １３．３ １３．０ ９．０ １０．３ ７．３ １０．５８ｂ ２．５８
２．４ 培养基不同物理状态对百合小鳞茎增殖倍数的
影响
由表６可知，当基本培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％，对宜昌百合小鳞茎进行增殖
诱导时，培养基的液体状态增殖倍数极显著（Ｆ＝
１９．１５０，Ｐ＝０．００１＜０．０１）高于固体状态，其平均增殖倍
数高达９．００倍。故液体增殖培养基的增殖倍数极显著
高于固体培养基。
表６ 培养基的不同物理状态对百合小鳞茎
增殖诱导效果的影响
Ｔａｂｌｅ ６ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｓｔａｔｅ ｏｆ
ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｏｎ ｔｈｅ ｌｉｌｙ ｂｕｌｂ’ｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
培养方式
Ｃｕｌｔｕｒｅ
ｍｅｔｈｏｄ
鳞茎增殖倍数Ｂｕｌｂ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｉｍｅｓ／倍
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７
均值
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
标准差
Ｓｔａｎｄａｒｄ
ｄｅｖｉａｔｉｏｎ
液体培养基 １１．３ １１．０ １２．３ ３．３ ６．５ １１．３ ７．０ ９．００ｂ ３．４２
固体培养基 ２．８ ３．０ １．３ ２．３ ３．５ ４．７ ３．８ ３．０６ａ １．０９
２．５ 液体悬浮培养基中不同生长调节剂浓度对百合鳞
茎增重效果的影响
由表７可知，Ｂ－５配方（即ＴＤＺ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．３ｍｇ／Ｌ）为最佳增重培养基，其平均增重最高，达
３．８８ｇ；平均增重倍数亦最高，达６．１８，是对照组Ｂ－１的
１．２７倍。综合上述２个指标来看Ｂ－５（ＴＤＺ ０．１ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ）为最佳液体悬浮增重培养基。
表７ 不同生长调节剂浓度液体悬浮培养基对
百合鳞茎增重效果的影响
Ｔａｂｌｅ ７ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｌｉｌｙ ｂｕｌｂ’ｓ ｗｅｉｇｈｔ ｇａｉｎ
编号基编号
Ｍｅｄｉｕｍ
ｎｕｍｂｅｒ
增重 Ｗｅｉｇｈｔ ｇａｉｎ／ｇ
１ ２ ３ ４ ５
均值
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
平均增重倍数
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ
ｗｅｉｇｈｔ ｇａｉｎ ｔｉｍｅｓ
Ｂ－１ ４．４ ３．２ ３．９ ２．８ － ３．５８ ４．８５
Ｂ－２ ３．６ ２．４ １．２ ０．６ ４．７ ２．５６ ４．６０
Ｂ－３ １．３ ４．９ ３．３ ０．６ － ２．５３ ３．７８
Ｂ－４ ３．２ ３．９ １．７ １．２ ４．１ ２．８２ ４．９９
Ｂ－５ ２．７ ３．８ ２．９ ５．７ ５．３ ３．８８ ６．１８
Ｂ－６ １．０ ２．１ １．６ ０．４ － １．２８ ４．９１
Ｂ－７ ２．７ １．６ ０．７ ３．０ ２．３ ２．０６ ４．６０
Ｂ－８ ４．７ ４．２ １．３ ４．４ ２．６ ３．４４ ４．４５
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北方园艺２０１４（０２）：１１２～１１６ ·生物技术·
３ 讨论与结论
植物细胞在离体条件下仍具有发育为完整植株的
潜能，只要外界环境对外植体刺激得当，激素添加比例
适中，就能将植物细胞进行定向诱导［８］。这种刺激包括
激素刺激、培养条件刺激等，其中以激素刺激的影响最为
重要。该试验结果表明，创伤处理方式极显著高于未进行
创伤处理，这说明在培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％＋琼脂０．７％时，适当对离体宜
昌百合外植体进行创伤处理，是一种比较得当的鳞茎增殖
诱导刺激，可较好激发外植体细胞全能性，考虑到未做创
伤处理时，试验结果的稳定性较好，因此，该试验后续液体
悬浮培养的分试验中未对外植体采用创伤处理。
固体培养基中不同生长调节剂配比对百合鳞茎增
殖诱导效果的影响显著。细胞分裂素与生长素的比例
越高越有利于芽的诱导，细胞分裂素与生长素的比例越
低越有利于根的诱导［８］。该试验中，Ａ－３培养基（６－ＢＡ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ）百合小鳞茎的诱导增殖效
果最佳，表明在该试验条件下，分裂素与生长素最佳比
值约为６．７∶１。而Ａ－２该比值为５∶１的诱导效果仅次
于Ａ－３，且差异不显著，然而在Ａ－７中此比值亦为５∶１
时，诱导增殖诱导效果却又最差，这可能是因为Ａ－２中２
种激素浓度的绝对量均高于Ａ－７所致，从激素浓度绝对
量和激素比值２个方面，综合分析其它激素比值的试验
结果可以发现，百合小鳞茎诱导增殖效果同时受到这２
个方面的影响，这与蒲秀琴等［９］的研究结果相似。当
然，也可能还有其它原因，如经多次续代后引起染色体
加倍、变异［１０－１２］等，这些都有待于进一步深入研究。
从培养基不同物理状态对百合鳞茎增殖诱导效果
的影响来看，相同营养和激素成分的培养基，其液体倍
数状态的鳞茎增殖诱导倍数极显著高于固体状态，其原
因可能在于，与固体培养方式相比，液体悬浮培养基中
的外植体与培养基的接触面积大，植物细胞易于吸收培
养基中的营养成分，因而更有助于细胞的分裂；细胞对
培养基中激素刺激的影响更加敏感，因而更有利于激发
细胞的全能性。试验中液体培养基平均增殖倍数几乎
是固体培养的３倍，这也有力地证明了植物细胞在液体
悬浮培养上的巨大优势。
在液体悬浮培养基不同生长调节剂配比对百合鳞
茎增殖效果的影响预试验中，以培养基配方 ＭＳ＋ＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％，ｐＨ ５．８时，６－ＢＡ
增殖诱导效果较好，因此以此培养基配方作为对照。最
佳配方Ｂ－５虽不如对照组Ｂ－１稳定，但从显著性水平来
看Ｂ－５中ＴＤＺ的诱导增殖效果相比于Ｂ－１，其诱导增殖
效果则表现出极显著水平，这可能与试验中某些偶然误
差造成的，但每个重复试验中，ＴＤＺ的效果均好于对照
组Ｂ－１，因此，总体来看，将新型生长调节剂ＴＤＺ运用到
工业生产中是可以加以考虑的。
徐晓峰等［１３］研究表明，造成上述现象的原因是由于
ＴＤＺ具有生长素和细胞分裂素双重作用的特殊功能所
致；Ｔｈｏｍａｓ等［１４］则认为，ＴＤＺ可诱导植物细胞分裂素
的生物合成，并抑制内源生长素的降解；部分ＴＤＺ被吸
收后可以先储存在植物体中，然后缓慢释，从而使外植
体中的内源激素水平达到一个新的动态平衡，更有效地
刺激小鳞茎的再生。
该试验结果表明，Ｂ－５和Ｂ－８对宜昌百合液体悬浮
培养增殖效果都较好，但从增重均值看，特别是增重倍
数均值对比来看，Ｂ－５则好于Ｂ－８，是最佳液体悬浮增重
培养基。由于二者为同步试验，分别是从鳞茎增殖诱导
的个数和重量二方面探讨液体悬浮培养基的最佳激素
比例，因此，可以确定 ＴＤＺ为０．１ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ 为
０．３ｍｇ／Ｌ为最佳液体悬浮增殖培养基。
在对百合小鳞茎进行增殖诱导时，对外植体作创伤
处理极显著高于不做创伤处理；固体增殖诱导培养基为
６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ是宜昌百合小鳞茎增
殖的最佳培养基，其诱导效果较为稳定，适合工业化生
产；液体悬浮培养基为ＴＤＺ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ，
是最佳宜昌百合小鳞茎液体增殖培养基，表现极显著水
平；在培养基为ＭＳ＋ＢＡ １．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋
蔗糖３％时，液体悬浮培养对百合小鳞茎增殖诱导倍数
极显著高于固体培养。
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５１１
·植物保护· 北方园艺２０１４（０２）：１１６～１１８
第一作者简介：杨烨（１９８７－），男，硕士研究生，研究方向为植物病
害流行与综合防控。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｘ２８３８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．
责任作者：曹克强（１９６３－），男，博士，博士生导师，现主要从事植物
病害流行与综合防治等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｋｑ＠ｈｅｂａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
基金项目：国家公益性行业（农业）科研专项经费资助项目
（２００９０３０３４）；国家苹果产业技术体系资助项目（ＣＡＲＳ－２４）。
收稿日期：２０１３－１０－２４
疏花对“斗南”苹果霉心病防治效果的影响
杨 烨，闫 红 豆，王 雪 静，张 瑜，王 树 桐，曹 克 强
（河北农业大学 植物保护学院，河北 保定０７１０００）
摘 要：以“斗南”苹果为试材，研究比较了疏花蔬果时保留中心花和保留边花对其所结果实
霉心病发病率、单果重及果形指数的影响。结果表明：２０１１年和２０１２年中心花所结果实霉心病
发病率分别为８％和３６％，边花所结果实霉心病的发病率分别为４％和１７％；边花所结果实与中
心花所结果实的单果重、果形指数无显著差异。可见，疏花时选留边花坐果可以降低“斗南”苹果
霉心病的发病率。
关键词：苹果霉心病；疏花；果形指数；发病率
中图分类号：Ｓ ６６１．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１４）０２－０１１６－０３
“斗南”苹果原产于日本，由日本青森县三蒲小太郎
从“麻黑７号”实生苗中选出。属大型果，果实圆锥形，平
均单果重２８０～３６０ｇ，最大单果重４５０～６００ｇ，果形指数
０．８３左右。“斗南”苹果的果皮较薄，底色黄绿，果面鲜
红、无锈、洁净亮丽。果肉乳黄色，肉质细而脆、多汁、味
甜、微香［１－２］。河北省保定地区自２０００年左右引进“斗
南”品种以来，取得了良好的经济效益。但在生产中发
现该品种霉心病发病率较高，有些年份病果率可达
６０％，严重影响了“斗南”苹果的产量和储存。
苹果霉心病是由多种弱寄生菌如链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ
ｓｐｐ．）和粉红单端孢（Ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ Ｌｋ．）等引
起［３］。花期，病菌孢子随风雨传到花器上，至谢花约半
个月，病菌通过萼筒侵入果心。病菌侵入后，发病时间
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Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｌｉｕｍ ｌｅｕｃａｎｔｈｕｍＢａｋｅｒ Ｂｕｌｂ
ＴＡＮＧ Ｙｅ－ｇａｎｇ，ＣＵＩ Ｗｅｉ
（Ｗｕｈａｎ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｗｕｈａｎ，Ｈｕｂｅｉ ４３０４１５）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｂｕｌｂ ｓｔｅｒｉｌｅ ｌｉｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｂｕｌｂ ｏｆ Ｌｉｌｉｕｍ ｌｅｕｃａｎｔｈｕｍＢａｋｅｒ ａｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ ｂｕｌｂ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｒｅｅ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｓｏｌｉｄ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｓｅｌｅｃ－
ｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｗｏｕｎｄｅｄ ｂｕｌｂ ｗａｓ ｓｉｇ－
ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｕｎｗｏｕｎｄｅｄ ｅｘｐｌａｎｔｓ；ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｓｏｌｉｄ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．３ｍｇ／Ｌ＋ｓｕｃｒｏｓｅ ３０ｇ／Ｌ＋ａｇａｒ ７ｇ／Ｌ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ７．６０；ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｌｉｑｕｉｄ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅ－
ｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋ＴＤＺ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ＋ｓｕｃｒｏｓｅ ３０ｇ／Ｌ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ １０．８６，ａｎｄ
ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｗｅｉｇｈｔ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ６．１８；ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ ＭＳ＋６－ＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ｓｕｃｒｏｓｅ ３０ｇ／Ｌ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｌｉｄ
ｍｅｄｉｕｍ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｌｉｕｍ ｌｅｕｃａｎｔｈｕｍＢａｋｅｒ；ｂｕｌｂ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｓｏｌｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ
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