全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
累计释放量逐渐增大，可能是由于包裹于内水相的
药物穿过油层释放出来。与未包裹的人参总皂苷溶
液相比，复乳延缓了药物的释放，能维持长久的药物
有效浓度，减少给药次数。
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［责任编辑 仝燕］
［收稿日期］ 20130627(023)
［基金项目］ 江西省教育厅科学技术基金项目(GJJ13789);江西省卫生厅中医药科研基金重点课题(2009Z11)
［通讯作者］ * 王小平，硕士，副教授，从事中药炮制与新药开发研究，Tel:0794-8239328，E-mail:jxrcwxp@ 163. com
薯莨总鞣质的提取工艺优选
王小平* ，王进，陈建章，尹建康
( 江西中医药高等专科学校，江西 抚州 344000)
［摘要］ 目的:优选薯莨总鞣质的提取工艺。方法:以总鞣质含量与转移率为评价指标，通过单因素试验筛选提取方法、
药材粉碎度、润湿时间等因素，采用 L9(3
4)正交试验考察乙醇体积分数、渗漉液收集量、渗漉流速对薯莨总鞣质提取工艺的影
响。结果:选用乙醇渗漉法，最佳工艺条件为渗漉前浸泡时间 24 h，药材粉碎粒度为粗粉，润湿时间 2 h，乙醇体积分数 80%，
收集 8 倍量渗漉液，渗漉流速 4 mL·kg －1·min －1。结论:该工艺稳定可行，适用于薯莨片的工业化生产。
［关键词］ 薯莨;提取工艺;正交试验;总鞣质;单因素试验
［中图分类号］ Ｒ283. 6;Ｒ284. 2 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2014)03-0035-04
［doi］ 10． 11653 /syfj2014030035
Optimization of Extracting Process of Total Tannins in Diascoreo cirrhosa
WANG Xiao-ping* ，WANG Jin，CHEN Jian-zhang，YIN Jian-kang
(Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine，Fuzhou 344000，China)
［Abstract］ Objective:To optimize extraction process of total tannins in Diascoreo cirrhosa． Method:
With content and transfer rate of total tannin as indexes，which was detenninated by UV． Single factor tests were
adopted to screen extracting method， grinding degree，wetting time and other factors， effects of ethanol
concentration，percolation velocity，collected liquid of percolate on extracting technology was investigated by
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L9 (3
4)orthogonal test． Ｒesult:Ethanol percolation method was adopted，its optimum extraction process was as
follows:soaked 24 h before percolation，grinding degree of herbs with coarse powder，wetting time 2 h，ethanol
concentration of 80%，percolation velocity of 4 mL·kg －1·min －1，collected 8 times the amount of percolation
solution． Conclusion:Optimized extraction process was stable and practicable，which was suitable for industrial
production of D． cirrhosa tablets．
［Key words］ Diascoreo cirrhosa;extraction process;orthogonal design;total tannins;single factor test
出血证为妇科临床常见病［1］，鉴于妇科出血的
特殊性，单纯应用西药止血药的疗效并不佳，故应考
虑选用具有多靶点、多成分、多环节作用特点的中药
制剂治疗该病症。薯莨主要含有鞣质、酚类成分，具
有抗菌、抗溃疡、抗病毒、抗菌、止血及降压等作
用［2-3］，在民间被广泛用于治疗出血症［4］。现代药
理试验表明薯莨可有效缩短出血时间和凝血时
间［5-7］。由薯莨水提浸膏制备的薯莨片收载于部颁
标准，主要用于治疗月经过多、功能性子宫出血及产
后出血［8］，但由于薯莨主要含有缩合鞣质，在水提
加热过程中易致其氧化、脱水缩合为不溶于水的鞣
酐沉淀，且浸膏收率高，存在服药量大、药效不稳定
等问题。本实验以总鞣质含量及转移率为评价指
标，通过正交试验优选薯莨总鞣质的提取工艺，为薯
莨片的二次开发提供参考。
1 材料
TU-1901 型紫外-可见分光光度计(北京普析通
用分析仪器有限公司)，AB265-S 型电子分析天平
(瑞士梅特勒-托利多仪器集团)，FST-Ⅲ-10 型精密
型超纯水机(上海富诗特仪器设备有限公司)。薯
莨购自抚州市临川区医药公司，经江西中医药高等
专科学校李秀英副教授鉴定为薯蓣科植物薯莨
Dioscorea cirrhosa Lour． 的块茎，儿茶素对照品购自
中国食品药品检定研究院，批号 110877-200001，所
用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 总鞣质的含量测定［9］
2. 1. 1 对照品溶液的制备 精密称取儿茶素对照
品 23. 75 mg置于 25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释
至刻度，摇匀，即得。
2. 1. 2 供试品溶液的制备 精密称取薯莨粉末约
0. 1 g，置 50 mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，超
声处理 30 min，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液
1 mL至 10 mL棕色量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇
匀，即得。
2. 1. 3 标准曲线的绘制 精密称取对照品溶液
0. 5，1，2，3，4，5 mL，分别置于 10 mL量瓶中，加甲醇
定容至刻度，摇匀，得系列对照品溶液。精密量取各
溶液 0. 5 mL，分别加至包有锡箔的试管中，各加入
3%香草醛甲醇溶液 2. 5 mL 和 30%浓硫酸甲醇溶
液 2. 5 mL，摇匀，避光显色 20 min，以相应试剂为空
白，照紫外-可见分光光度法于 500 nm 处测定吸光
度(A)，以 A为横坐标，质量浓度为纵坐标，得回归
方程 C = 0. 200 5A － 0. 022 1(r = 0. 999 8)，表明儿
茶素在 4. 75 ～ 47. 50 mg·L －1与 A呈良好线性关系。
2. 1. 4 精密度试验 取对照品溶液适量，按 2. 1. 3
项下方法连续测定 6 次，结果 A 的 ＲSD 0. 13%，表
明仪器精密度良好。
2. 1. 5 稳定性试验 取供试品溶液分别于制备后
1，2，3，5，7，9 h按 2. 1. 3 项下方法测定 A，结果 ＲSD
1. 77%，表明供试品溶液在 9 h内稳定性良好。
2. 1. 6 重复性试验 精密称取同批薯莨粉末 6 份，
每份 0. 1 g，按 2. 1. 2 项下方法制备供试品溶液，按
2. 1. 3 项下方法测定 A，结果以儿茶素计算总鞣质平
均质量分数 189. 04 mg·g －1，ＲSD 1. 77%，表明该方
法重复性良好。
2. 1. 7 加样回收率试验 分别精密称取已知总鞣
质含量的薯莨粉末 6 份，每份 0. 05 g，各加入儿茶素
对照品 10 mg，按 2. 1. 2 项下方法制备供试品溶液，
按 2. 1. 3 项下方法测定 A，计算总鞣质平均回收率
99. 48%，ＲSD 2. 81%，表明该方法的回收率良好。
2. 1. 8 样品测定 分别精密称取薯莨粉末 3 份，每
份 0. 1 g，按 2. 1. 2 项下方法制备供试品溶液，按
2. 1. 3 项下方法测定 A，计算总鞣质平均质量分数
197. 33 mg·g －1，ＲSD 2. 01%。
2. 2 不同提取方法比较［8，10］
2. 2. 1 煎煮法 取薯莨粗粉 3 份，每份 25 g，分别
加 10 倍量水煎煮 3 次，每次 1 h，合并煎液，滤过，合
并滤液，测定体积(另取样 10 mL 备用)，于 80 ℃减
压浓缩成稠膏状，80 ℃减压干燥成干浸膏，精密称
重，计算平均浸膏收率。
2. 2. 2 乙醇回流法 取薯莨粗粉 25 g，共 3 份，分
别用 10 倍量 90%乙醇回流提取 2 次，每次 1 h，滤
过，合并滤液，测定体积(另取样 10 mL 备用)，于
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80 ℃减压浓缩成稠膏状，80 ℃减压干燥成干浸膏，
精密称重，计算平均浸膏收率。
2. 2. 3 乙醇渗漉法 取薯莨粗粉 25 g，共 3 份，
分别用 90% 乙醇润湿 2 h，装筒，浸泡 24 h，以
2 mL·kg －1·min －1的速度进行渗漉，收集渗漉液至无
鞣质显色反应为止，测定体积(另取样 10 mL 备
用)，于 80 ℃减压浓缩成稠膏状，80 ℃减压干燥成
干浸膏，精密称重，计算平均浸膏收率。
分别称取 3 种方法制备的干浸膏，按 2. 1. 2 项
下方法制备供试品溶液，按 2. 1 项下方法测定 3 种
提取液和干浸膏中总鞣质含量，结果见表 1。
表 1 薯莨总鞣质不同提取工艺的比较(珋x ± s，n = 3)
方法
提取液中总鞣质
质量 / g 转移率 /%
平均浸膏收率 /%
浸膏中总鞣质
质量 / g 转移率 /%
煎煮 4. 480 ± 0. 412 90. 10 28. 60 ± 2. 87 1. 635 ± 0. 245 33. 05
乙醇渗漉 4. 424 ± 0. 343 89. 41 24. 46 ± 1. 94 2. 988 ± 0. 217 60. 39
乙醇回流 4. 298 ± 0. 366 86. 86 22. 74 ± 1. 70 1. 998 ± 0. 228 40. 19
注:浸膏收率% =干浸膏质量 /药材取样量 × 100%;提取液中总鞣质转移率% =提取液中总鞣质质量 /(药材取样量 ×药材中总鞣质质量
分数)× 100%;浸膏中总鞣质转移率 =干浸膏中鞣质量 /(药材取样量 ×药材中鞣质质量分数)× 100%。
由表 1可知，采用乙醇渗漉法与煎煮法制备的提
取液中总鞣质含量及转移率相近，均稍高于乙醇回流
法，但煎煮法提取液的体积大，为后续处理增加了困
难。当将煎煮法提取液制备成干浸膏时，虽然浸膏收
率较高，但总鞣质含量及转移率均明显低于乙醇渗漉
法，原因是煎煮法制备的水提液后续浓缩、干燥工序
中加热时间长，而缩合鞣质受热后易形成鞣酐沉淀，
导致总鞣质含量迅速下降，故选择乙醇渗漉法。
2. 3 单因素试验考察
2. 3. 1 药材粉碎粒度 取薯莨药材适量，分别粉碎
成最粗粉、粗粉、中粉、细粉。称取不同薯莨药材粉
末各 3 份，每份 50 g，分别置于 250 mL 烧杯中，加
90%乙醇 100 mL润湿 2 h，装入同一规格渗漉筒中，
浸泡 24 h，以 2 mL·kg －1·min －1的速度进行渗漉，收
集渗漉液 500 mL。试验过程中发现薯莨细粉组的
渗漉速度太慢而放弃收集。依法测定前 3 种粒度薯
莨渗漉液中总鞣质含量，计算平均转移率分别为
73. 18% (ＲSD 4. 27%)，85. 74% (ＲSD 5. 09%) ，
86. 15%(ＲSD 4. 11%) ，结合渗漉速度，确定薯莨药
材粉碎粒度为粗粉。
2. 3. 2 润湿时间 取薯莨粗粉适量至烧杯中，加 2
倍量 90% 乙醇拌匀，分别于 30，60，90，120，150，
180，240 min挑选较大的薯莨颗粒，观察药材润湿情
况，结果润湿 120 min时颗粒方可充分润透。
2. 3. 3 乙醇体积分数 称取薯莨粗粉 50 g，共 12
份，等分成 4 组，各组依次加入 2 倍量体积分数为
30%，50%，70%，90%的乙醇溶液拌匀，润湿 2 h，其
余操作同 2. 3. 1 项，收集渗漉液 500 mL，计算平均
转 移 率 分 别 为 69. 83%，76. 52%，82. 04%，
86. 76%，ＲSD 分 别 为 7. 22%，5. 73%，4. 80%，
4. 97%，故选择 70% ～90%的乙醇溶液。
2. 3. 4 浸泡时间 称取薯莨粗粉 50 g，共 12 份，等
分成 4 组，各加入 2 倍量 90%乙醇拌匀，润湿 2 h，
装入同一规格渗漉筒中，分别浸泡 6，12，24，48 h，以
2 mL·kg －1·min －1渗漉速度进行渗漉，收集渗漉液
500 mL，依法测定渗漉液中总鞣质含量，计算平均
转 移 率 分 别 为 76. 77%，83. 16%，86. 50%，
86. 45%，ＲSD 分 别 为 2. 54%，1. 07%，4. 65%，
3. 88%，故选择渗漉前浸泡时间 24 h。
2. 3. 5 渗漉流速 称取薯莨粗粉 50 g，共 12 份，等
分成 4 组，各加入 2 倍量 90%乙醇拌匀，润湿 2 h，
装入同一规格渗漉筒中，浸泡 24 h，分别以 2，3，4，
5 mL·kg －1·min －1的速度渗漉，收集渗漉液 500 mL，
计算总鞣质平均转移率分别为 86. 45%，85. 80%，
85. 29%，78. 90%，ＲSD 分别为 5. 34%，3. 89%，
2. 04%，6. 15%。
2. 3. 6 渗漉液收集量 称取薯莨粗粉 50 g，共 3
份，各加入 2 倍量 90%乙醇，拌匀，润湿 2 h，装入同
一规格渗漉筒中，浸泡 24 h，以 2 mL·kg －1·min －1的
速度进行渗漉，分段收集渗滤液，每 20 mL 为 1 份，
收集至第 26 份时渗漉液基本无鞣质显色反应，故选
择渗漉液收集量宜 ＜ 12 倍。
2. 4 提取工艺优化 根据项目合作单位生产实际
情况，确定渗漉筒中药材填充径高比 1 ∶ 5。在单因
素试验基础上，选取乙醇体积分数、渗漉液收集量、
渗漉流速为考察因素，以总鞣质含量和转移率为考
察指标，称取薯莨粗粉 9 份，每份 50 g，按 L9(3
4)正
交表进行试验，因素水平见表 2，试验安排及结果见
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王小平，等:薯莨总鞣质的提取工艺优选
表 3，方差分析见表 4，5。
表 2 薯莨总鞣质提取工艺正交试验因素水平
水平
A乙醇体积分数
/%
B收集量
/倍
C渗漉流速
/mL·kg －1·min －1
1 70 8 2
2 80 10 3
3 90 12 4
表 3 薯莨总鞣质提取工艺正交试验安排及直观分析
No． A B C D(空白)
总鞣质
质量浓度
/ g·L －1
转移率
/%
1 1 1 1 1 14. 54 58. 95
2 1 2 2 2 13. 73 69. 58
3 1 3 3 3 12. 07 73. 40
4 2 1 2 3 18. 41 74. 64
5 2 2 3 1 16. 32 82. 70
6 2 3 1 2 13. 83 84. 10
7 3 1 3 2 18. 28 74. 11
8 3 2 1 3 16. 85 85. 39
9 3 3 2 1 14. 47 87. 99
质量浓度 K1 40. 34 51. 23 45. 22 45. 33
K2 48. 56 46. 90 46. 61 45. 84
K3 49. 60 40. 37 46. 67 47. 33
Ｒ 3. 09 3. 62 0. 48 0. 67
转移率 K1 201. 93 207. 70 228. 44 229. 65
K2 241. 44 237. 67 232. 21 227. 79
K3 247. 49 245. 50 230. 21 233. 43
Ｒ 15. 19 12. 60 1. 26 1. 88
表 4 总鞣质质量浓度方差分析
方差来源 SS f MS F P
A 17. 155 2 8. 578 23. 826 ＜ 0. 05
B 19. 925 2 9. 963 27. 673 ＜ 0. 05
C 0. 449 2 0. 224 0. 623 ＞ 0. 05
D(误差) 0. 720 2 0. 360
注:F0. 05(2，2)= 19. 00(表 5 同)。
表 5 总鞣质转移率方差分析
方差来源 SS f MS F P
A 408. 302 2 204. 151 74. 255 ＜ 0. 05
B 265. 470 2 132. 735 48. 279 ＜ 0. 05
C 2. 372 2 1. 186 0. 431 ＞ 0. 05
D(误差) 5. 499 2 2. 749
由直观分析可知，各因素对总鞣质含量的影响
顺序为 B ＞ A ＞ C，方差分析表明因素 A，B 具有显著
性影响，C 因素则无显著性影响，最佳工艺条件为
A3B1C3。各因素对总鞣质转移率的影响顺序为 A ＞
B ＞ C，因素 A，B 具有显著性影响，C 因素则无显著
性影响，最佳工艺条件为 A3B3C2。综合生产实际考
虑，确定薯莨总鞣质的最佳提取工艺为 A2B1C3，即
提取溶媒为 80% 乙醇，收集 8 倍量渗漉液，流速
4 mL·kg －1·min －1。
2. 5 验证试验 称取薯莨粗粉 3 份，每份 2. 5 kg，
按优选的工艺条件进行重复性试验，结果渗漉液中
总鞣质平均质量浓度 18. 37 g·L －1(ＲSD 5. 26%)，
转移率 86. 53%(ＲSD 3. 45%)，表明该工艺重复性
好且稳定可行。
3 讨论
缩合鞣质是由黄烷-3-醇或黄烷-3，4-二醇类通
过 4，8 或 4，6 位以 C-C缩合而成的一类结构比较复
杂的多元酚类化合物，易溶于水、乙醇、丙酮等溶剂，
该成分用酸、碱处理或久置均不能水解，但在空气中
久置或在加热过程中易致缩合成高分子不溶于水的
产物“鞣红”，故本实验选用不需加热的乙醇渗漉法
与薯莨片的煎煮法及常用的乙醇回流法进行比较。
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