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桂竹糖芥甙体内抗肿瘤活性的初步研究



全 文 :3 讨论
脑梗死(又称缺血性脑卒中)发病原因及病理机理十分复
杂 ,而大动脉管壁粥样硬化脱落的微栓子是造成血栓栓塞最常
见的原因 ,它可由胆固醇 、纤维素和血小板组成 , 最常来源于颈
内动脉(ICA)颅外段。致病的危险因素有高血压 、糖尿病 、心脏
病 、TIA(短暂性脑缺血发作)、肥胖 、吸烟 、血脂水平高等。本实
验采用中药活脑康(主要成分:羌活 、丹参 、赤芍 、五灵脂 、鸡血
藤 、生地黄 、甘草等), 临床试用已取得满意疗效。丹参性微寒 ,
主要作用活血化瘀 、清心安神 , 现代医学认为丹参可通行血脉 、
扩张血管 、调整血流动力学;而五灵脂性温味甘 ,可化瘀止血 ,
常用于瘀血阻滞病症;鸡血藤能活血补血 、舒筋通络;甘草具补
中益气 、调和诸药作用 , 是佐使之品;生地黄可以补血。目前认
为活脑康可改善微循环 ,扩张血管 , 调整血液流变学 , 并透过血
脑屏障进入脑细胞 ,具有抗缺氧 , 防止血栓形成 , 抑制血小板聚
集等功能。血浆一氧化氮(NO)是在一氧化氮合酶(NOS)作用
下由 L-精氨酸氧化而成 , NO在缺血性损伤中的作用仍有争
议 ,部分原因是因为 NO 的复杂生物学特性 ,对受损脑存在着利
和有害两方面作用。 NO 作为有效的血管扩张剂和血小板聚
集 、白细胞粘附的抑制剂可通过增加侧支循环 , 阻止血小板和
白细胞对微血管的阻塞而改善缺血后血流;另一方面 NO作为
一种细胞毒素可通过多种机制负面影响脑缺血。但据最新报
道显示 , NO在缺血早期(<2h)可能因其促进血管扩张 , 抑制血
小板粘附 ,增加半暗区血流而对组织有益 , 但缺血后 2h 即无保
护作用 , 在脑缺血中晚期由于 NOS 活性上调 , 产生大量 NO 导
致组织损伤加重 , NO 介导的细胞死亡可通过坏死性和凋亡性
细胞死亡两种途径产生 , NO 具有神经元之间的信使作用 ,介导
谷氨酸等兴奋性氨基酸的细胞毒性作用 , 高浓度的 NO 对细胞
尚有直接毒性作用 ,本实验显示:B组大鼠血浆 NO含量 NOS 活
力均有所升高 ,与 A组比较 , 有显著差异(P<0.05), 而 C 组经
活脑康治疗后两指标均下降 ,与 B 组比较差异显著(P<0.01),
中药活脑康通过降低血浆 NO、NOS , 间接抑制缺血性损伤。 中
药活脑康降低大鼠脑缺血时 , 因 NOS 活力上调诱导性血浆 NO
的大量生成 ,减轻 NO 对脑细胞的毒性作用 ,降低 NO 大量生成
引起的神经细胞死亡 ,这对指导临床具有一定意义。
参考文献:
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桂竹糖芥甙体内抗肿瘤活性的初步研究
周敏 ,段玉敏 ,白云
(黑龙江中医药大学药理教研室 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:研究桂竹糖芥甙的抗肿瘤活性。方法:采用肉瘤 S180和肝癌 HAc 腹水瘤 , 分为高中低三个剂量组口服给
药。结果:对实体瘤小鼠的抑瘤率大于 30%,使肝腹水小鼠的生命延长率达到 65%。结论:通过实验证明 ,桂竹糖芥甙
有体内抗肿瘤活性。
关键词:桂竹糖芥;肿瘤移植;抗肿瘤活性
中图分类号:R285.5   文献标识码:A   文章编号:1002-2392(2004)02-0059-02
收稿日期:2003-10-21
作者简介:周敏(1953-),女 ,教授 ,主要从事药理学专业教学及科研工
作。
  肿瘤细胞具有较高 Na+ , K+-ATP酶活性 , 且同其恶性度
成正比[ 1] , 而 SOD酶的活力与肿瘤有密切的联系[ 2] 。因此 , 笔
者选用从十字花科属植物桂竹糖芥种子中提取的 Eryslmum-
cherantholdes作为 Na , K-ATP 酶及 SOD 酶的抑制剂 , 对昆明种
小鼠移植性肿瘤进行治疗 ,并观察其体内抗肿瘤活性及其对荷
瘤小鼠免疫功能的影响。
1 实验材料
受试药物 桂竹糖芥甙由黑龙江商业大学中药教研室提
供。
受试动物 昆明种小鼠雌雄各半由黑龙江中医药大学实
验动物中心提供。
试剂与药品 注射用环磷酰胺 , 上海第十二制药厂 , 批号
010820;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒 , 南京建成生物工程研究
所。
2 方法与结果
2.1 对荷瘤小鼠体内抑瘤作用的影响[ 3]
实验用荷瘤小鼠均按常规方法接种肿瘤细胞。分别从传
代 7天的小鼠腹中取出生长良好的乳白色腹水 , 以 1∶2 无菌生
·59·中医药学报 2004 年第 32卷第 2 期
理盐水稀释S180和肝癌 HAc瘤细胞 ,以 0.2ml/只接种于小鼠腋
下。接种次日 ,随机分为五组 , 除环磷酰胺腹腔注射外均为口
服给药 ,每天 1 次连续 9天。停药次日 , 分别将两批动物处死 ,
剥取皮下实体瘤瘤块 , 分别称重 , 计算出瘤重及抑瘤率。结果
见表 1、表 2。
表 1 桂竹糖芥甙对小鼠肉瘤 S180的抑制作用
组别 给药剂量(mg/kg)
例数
(只)
平均体重
开始    结束
平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%)
阴性对照 10 21.89±2.48 23.83±4.17 1.91±0.53
EC 168 10 22.00±1.94 23.65±3.00 0.99±0.28* 48.2
84 10 21.95±3.26 23.77±5.03 0.79±0.35* 58.6
42 10 21.60±2.72 23.15±5.38 1.41±0.98 26.2
环磷酰胺 30 10 21.50±3.32 20.30±2.33 0.30±0.18* 84.3
 注:与阴性对照组比较具有显著性差异*P<0.01
表 2 桂竹糖芥甙对小鼠肝癌 HAC的抑制作用
组别 给药剂量(mg·kg)·-1
例数
(只)
平均体重
开始    结束
平均瘤重
g( x±s)
抑瘤率
(%)
阴性对照 10 21.1±1.76 28.1±4.38 2.120±0.435
EC 168 10 21.8±1.42 30.1±2.36 1.217±0.290 42.6*
84 10 21.3±1.41 28.9±3.27 0.952±0.289 55.1**
42 10 21.4±1.65 27.9±2.87 1.651±0.308 22.1
环磷酰胺 30 10 21.1±1.79 25.5±3.47 0.453±0.227 78.6**
 与阴性对照组比较具有显著性差异**P<0.01;与阴性对照组比较具有显著性差异*P <
0.05
表 1、表 2 结果表明 ,桂竹糖芥甙高中剂量组同阴性对照组
比较 , 对 S180和HAc 实体瘤有明显的抑制作用 , 抑瘤率均大于
30%,并具有显著性差异。
2.2 对肝癌腹水型小鼠生命延长率的影响[ 4]
取生长良好的肝癌HAc小鼠腹水 ,以 1∶2无菌生理盐水稀
释 ,小鼠腹腔接种 0.2ml/只 , 接种次日 ,随机分为 5 组 , 均为口
服给药 ,每天 1 次连续给药 9天。 停药后观察各组小鼠的平均
生存时间 ,并求出生命延长率。结果见表 3。
表 3 桂竹糖芥甙对肝癌 HAc小鼠生命延长率的影响
组别 给药剂量(mg·kg·-1)
例数
(只)
平均存活天数
天( x±s)
生命延长率
(%)
阴性对照 10 13.45±3.72
EC 168 10 19.06±4.18 41.7
84 10 21.86±4.34 62.5*
42 10 18.32±3.86 35.2
环磷酰胺 30 10 20.26±3.74 50.6
 注:与阴性对照组比较具有显著性差异*P<0.05
表3 结果证明 , 桂竹糖芥甙中剂量与阴性对照组比较 , 能
明显延长肝癌腹水小鼠生存时间 ,使生命延长率大于 50%并具
有显著性差异。
2.3 对 S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响[ 3]
取生长良好的 S180小鼠腹水 ,以 1∶2无菌生理盐水稀释 , 以
0.2ml/只接种于小鼠腋下 , 接种次日 ,随机分为 4 组 , 口服给药
每天1 次连续 9 天。次日按 0.1ml/10g 尾静脉注射 1∶2 稀释的
印度墨汁 ,分别于注射后 1min和 10min 从眼眶静脉丛取血 25vl
放入含有 2ml 0.1%Na2CO3溶液试管中 ,在 650nm 处测吸光度 ,
根据公式吞噬指数 K=logOD1-logOD2
T2-T1 和矫正吞噬指数α=
3
K
× 体重肝重+脾重求出α,结果见表 4。
表 4 桂竹糖芥甙对 S180荷瘤小鼠吞噬功能的影响
组别 给药剂量(mg·kg·d-1)
例数
(只)
矫正吞噬指数α
( x±s)
阴性对照组 10 4.47±1.33
EC 84 10 6.14±1.65*
环磷酰胺 30 10 5.11±1.67
空白对照 10 5.04±1.59
 注:与阴性对照组比较具有显著性差异*P<0.05
  表 4结果表明 , 桂竹糖芥甙能增加荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞
的吞噬功能 , 使α明显增加 , 且与阴性对照组比较具有显著性
差异。
2.4 对 S180荷瘤小鼠超氧化物歧化酶(SOD)的影响
取生长良好的 S180小鼠腹水 ,以 1∶2无菌生理盐水稀释 , 以
0.2ml/只接种小鼠腋下 , 接种次日 , 随机分为 4 组 , 口服给药每
天1 次连续 9 天 ,停药次日 , 将鼠摘眼球取血然后按 SOD测试
试剂盒说明书步骤进行 ,结果见表 5。
表 5 桂竹糖芥甙对荷瘤小鼠 SOD活性的影响
组别 给药剂量(mg·kg·d-1)
鼠数/组
(只)
SOD 酶活力
(μ·ml)
提高百分率
(%)
阴性对照 10 93.4±28.4
空白对照 10 117.8±36.4 26.1
EC 84 10 129.6±38.4 38.8*
环磷酰胺 30 10 99.5±30.2 0.1
 注:与阴性对照组比较具有显著性差异*P<0.05
3 讨论
上述研究证明 ,桂竹糖芥甙对 S180和 HAc 荷瘤小鼠有明显
的抑瘤作用;能明显的延长肝腹水小鼠的生存时间;可增强荷
瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能;能明显的增强荷瘤小鼠 SOD
活性。综上结果可认为桂竹糖芥甙具有明显的体内抗肿瘤活
性并能增强荷瘤小鼠机体免疫功能。
参考文献:
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·60· ACMP.April , 2004 , Vol.32 , No.2