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实验用蕨麻小型猪血液生理生化指标测定及分析



全 文 :实验用蕨麻小型猪血液生理生化指标测定及分析
潘金春,闵凡贵,王希龙* ,刘香梅
(广东省实验动物监测所,广东 广州 510260)
摘要:对实验用蕨麻小型猪的血液生理生化指标进行测定及分析。采取 54 头蕨麻小型猪的血液,检测 19 项生理指标和 12 项生化指标,并对结
果进行统计分析。结果:蕨麻小型猪性别之间比较,血液生理生化指标只有中性粒细胞 (NEUT)和总胆固醇 (TC)存在显著差异,其他指标差
异不显著。而与封闭群五指山小型猪相比,血液生理指标有 7 项差异显著,血液生化指标有 8 项差异显著。蕨麻小型猪和封闭群五指山小型猪分
别有 7 项和 8 项血液生理指标、10 项和 6 项血液生化指标处于人正常参考值内。结果表明蕨麻小型猪和封闭群五指山小型猪和人的血液生理生化
特性存在一定的相似性,可用于比较医学等生物医学应用,也可逐步替代犬、非人灵长类用于药物非临床安全评价和生物医学研究。
关键词:实验用蕨麻小型猪;血液;生理生化指标
中图分类号:Q955;Q956 文献标识码:A 文章编号:0529-5130(2012)06-0081-03
蕨麻猪又名合作猪、山猪,是甘南当地藏族群众
在海拔 3 000 m左右的严酷自然环境中以放牧的方式
培育出来的小型猪种中一个优秀的独特地方品种。蕨
麻猪体型短小,生长发育缓慢,饲养管理粗放,是一
种适应高海拔、寒冷气候的小型猪。由于蕨麻猪分布
在偏僻的高原地带,很少受外来血缘的影响,同时在
畜牧业生产中,因其体型小、繁殖性能较低,一般未
能进行杂交改良用于畜牧业生产,现仍保存原始的均
一矮小基因库,且其遗传背景清楚[1 - 2]。蕨麻猪适应
高寒恶劣环境的能力较强,比其他地方猪品种具有更
丰富的基因资源,可以培育成独特的小型猪品
系[3 - 4]。但与国内其他小型猪相比,目前蕨麻猪的实
验动物化研究明显滞后。为了保护这一宝贵的小型猪
资源,并促进其进行实验动物化,广东省实验动物监
测所于 2010 年从甘南原产地引进蕨麻猪种猪 80 头构
建蕨麻小型猪封闭群,并进行保种、繁育、实验动物
化等相关研究,取得了初步成效。本研究对蕨麻小型
猪的血液生理生化指标进行测定,并与封闭群五指山
收稿日期:2011-10-20;修回日期:2012-04-05
基金项目:广东省实验动物重点实验室 (2007B060101002) ;广
州市 科 技 计 划 项 目 (11A66100095) ;广 东 省 科 技 计 划 项 目
(2011B020305002,2011B060400020)。
作者简介:潘金春 (1979- ) ,男,助理研究员,硕士。
* 通讯作者:王希龙,博士,研究员,主要从事小型猪遗传育种
与实验动物化方面的研究,E-mail:hnxsswxl@ yahoo. com. cn。
小型猪进行比较分析,了解其血液生理生化指标的背
景,为其实验动物化研究与应用提供参数。
1 材料与方法
1. 1 试验动物与管理
蕨麻小型猪,4 ~ 18 月龄,由广东省实验动物监
测所实验用小型猪饲养繁育基地提供。蕨麻小型猪饲
养于符合普通级实验猪环境条件的猪舍内,采用防暑
降温等措施保障饲养环境质量,同时每日清扫栏圈 2
次,栏内设自动饮水器,上下午各投料 1 次。
1. 2 主要试剂与设备
5 mL EDTA 抗凝管,75% 乙醇,5 mL 注射器,
1. 5 mL、5 mL EP 管,Sysmex XT-2000iv 动物专用全
自动血液分析仪 (所用试剂为 Sysmex 公司生产) ,
Roche P800 全自动生化分析仪 (所用试剂为罗氏公
司生产)。
1. 3 血样采集
小型猪禁食不禁水 12 h,前腔静脉采血 4 mL,
其中抗凝血和非抗凝血各 2 mL。
1. 4 检测指标
抗凝血轻轻混匀后用 Sysmex XT-2000iv动物专用
全自动血液分析仪检测 19 项血液生理指标:白细胞
(WBC)、中 性 粒 细 胞 (NEUT)、淋 巴 细 胞
(LYMPH)、单核细胞 (MONO)、
櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔櫔
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·18·畜牧与兽医 2012 年 第 44 卷 第 6 期
(EO)、嗜碱性粒细胞 (BASO)、红细胞 (RBC)、
血红蛋白 (HGB)、红细胞比值 (HCT)、红细胞平
均体积 (MCV)、红细胞平均血红蛋白含量 (MCH)、
红细胞平均血红蛋白浓度 (MCHC)、红细胞分布宽
度标准差 (RDW-SD)、红细胞分布宽度变异系数
(RDW-CV)、血小板计数 (PLT)、血小板分布宽度
(PDW)、血小板平均体积 (MPV)、大型血小板比值
(P-LCR)、血小板压积 (PCT)。
非抗凝血 4 000 r /min离心 10 min 分离血清,用
Roche P800 全自动生化分析仪检测 12 项生化指标:
谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、碱性磷酸
酶 (ALP)、总蛋白 (TP)、葡萄糖 (GLU)、尿素氮
(BUN)、肌酐 (CREA)、总胆固醇 (TC)、甘油三
酯 (TG)、白蛋白 (ALB)、球蛋白 (GLB)、总胆红
素 (TBILI)。
1. 5 数据处理及比较分析
用 EXCEL软件对所测数据进行统计分析,并与
同一基地中饲养的封闭群五指山小型猪及人类血液生
理生化指标作比较分析,差异显著性用 t检验。
2 结果
2. 1 蕨麻小型猪血液生理指标
蕨麻小型猪血液生理指标所测结果见表 1,雌雄
比较,除 NEUT差异显著外,其他指标无显著差异。
表 1 蕨麻小型猪血液生理指标
项目 雄性 (n = 11) 雌性 (n = 43)
WBC / (109·L -1) 19. 06 ± 5. 14 16. 54 ± 4. 78
RBC / (1012·L -1) 8. 19 ± 0. 49 8. 16 ± 0. 77
HGB / (g·L -1)
147. 91
± 16. 56
152. 77 ± 19. 05
HCT /% 47. 83 ± 6. 07 49. 03 ± 5. 97
MCV / fL 58. 61 ± 7. 88 60. 13 ± 5. 33
MCH/pg 18. 12 ± 2. 25 18. 70 ± 1. 47
MCHC / (g·L -1)
310. 09
± 13. 21
311. 63 ± 12. 51
PLT / (109·L -1)
314. 8
± 85. 84
272. 63
± 103. 65
RDW-SD / fL 41. 17 ± 5. 64 40. 92 ± 2. 83
RDW-CV /% 22. 67 ± 4. 67 21. 37 ± 1. 69
PDW/fL
157. 00
± 26. 00
135. 76 ± 14. 27
MPV / fL 11. 45 ± 0. 95 10. 52 ± 0. 76
P-LCR /% 35. 45 ± 5. 85 30. 06 ± 5. 10
PCT /% 0. 33 ± 0. 00 0. 30 ± 0. 09
NEUT / (109·L -1) 7. 81 ± 4. 40
5. 02
± 2. 37*
LYMPH/ (109·L -1) 10. 58 ± 2. 94 10. 68 ± 3. 06
MONO / (109·L -1) 0. 10 ± 0. 10 0. 13 ± 0. 12
EO / (109·L -1) 0. 37 ± 0. 22 0. 54 ± 0. 49
BASO / (109·L -1) 0. 19 ± 0. 09 0. 18 ± 0. 13
注:* 表示差异差异显著 (P < 0. 05)。下同。
2. 2 蕨麻小型猪血液生化指标
蕨麻小型猪血液生化指标所测结果见表 2,雌雄
比较,除总胆固醇 (TC)差异显著外,其他指标无
显著差异。
表 2 蕨麻小型猪血液生化指标
项目 雄性 (n = 11) 雌性 (n = 40)
ALT / (U·L -1) 40. 00 ± 7. 91 36. 70 ± 6. 68
AST / (U·L -1)
56. 00
± 16. 66
51. 68 ± 23. 45
ALP / (U·L -1)
114. 18
± 52. 22
97. 38 ± 57. 77
TP / (g·L -1) 79. 51 ± 6. 80 76. 62 ± 7. 85
ALB / (g·L -1) 43. 33 ± 4. 64 41. 52 ± 5. 87
GLB / (g·L -1) 36. 18 ± 7. 87 35. 10 ± 7. 39
BUN / (mmol·L -1) 4. 45 ± 1. 17 4. 38 ± 1. 03
CREA / (μmol·L -1)
108. 55
± 17. 49
99. 55 ± 20. 19
GLU / (mmol·L -1) 5. 14 ± 0. 98 4. 86 ± 1. 31
TC / (mmol·L -1) 1. 73 ± 0. 57
2. 20
± 0. 46*
TBILI / (μmol·L -1) 0. 81 ± 0. 44 0. 67 ± 0. 33
TG / (mmol·L -1) 0. 56 ± 0. 25 0. 58 ± 0. 23
2. 3 蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪及人类血液
生理指标比较
将蕨麻小型猪的血液生理指标与同一基地中饲养
的封闭群五指山小型猪[5]及人类血液生理同类指标
进行比较,其结果显示蕨麻小型猪与封闭群五指山小
型猪相比有 7 项指标差异显著 (表 3) ,其中 2 项 P
< 0. 05,5 项 P < 0. 01,其他指标差异不显著。蕨麻
小型猪有 7 项血液生理指标处于人正常参考值内,而
封闭群五指山小型猪有 8 项血液生理指标处于人正常
参考值内。
表 3 蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪
血液生理指标比较
项目 人正常参考值
蕨麻小型猪
(n = 54)
封闭群五指山小型猪
(n = 44)
WBC 4. 00 ~ 10. 00 17. 05 ± 4. 96 16. 97 ± 5. 48
RBC 3. 90 ~ 5. 90 8. 17 ± 0. 72 8. 74 ± 1. 86*
HGB 116. 0 ~ 179. 0 151. 78 ± 18. 66 155. 98 ± 28. 78
HCT 37. 0 ~ 52. 0 48. 79 ± 6. 01 51. 79 ± 9. 57
MCV 80. 0 ~ 98. 0 59. 82 ± 5. 98 59. 79 ± 5. 88
MCH 27. 2 ~ 34. 3 18. 59 ± 1. 68 18. 00 ± 1. 70
MCHC 27. 2 ~ 34. 3 311. 31 ± 12. 68 301. 50 ± 12. 23**
PLT 99. 0 ~ 303. 0 281. 22 ± 101. 67 339. 43 ± 109. 80**
RDW-SD 40. 0 ~ 53. 0 40. 97 ± 3. 55 42. 53 ± 4. 20
RDW-CV 10. 0 ~ 14. 5 21. 63 ± 2. 66 21. 98 ± 2. 69
PDW 10. 0 ~ 18. 0 138. 00 ± 17. 35 14. 13 ± 2. 47**
MPV 6. 5 ~ 12. 5 10. 62 ± 0. 83 10. 62 ± 1. 03
P-LCR 13. 0 ~ 43. 0 30. 63 ± 5. 46 31. 42 ± 7. 34
PCT 0. 12 ~ 0. 24 0. 30 ± 0. 08 0. 21 ± 0. 06**
NEUT 1. 8 ~ 6. 4 5. 59 ± 3. 13 6. 53 ± 2. 63
LYMPH 1. 9 ~ 8. 0 10. 66 ± 3. 04 9. 30 ± 4. 73
MONO 0. 16 ~ 1. 00 0. 12 ± 0. 12 0. 60 ± 0. 25**
EO 0. 02 ~ 0. 30 0. 50 ± 0. 45 0. 35 ± 0. 22*
BASO 0 ~ 0. 1 0. 19 ± 0. 12 0. 19 ± 0. 15
注:蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪比较,**表示差异差异
极显著 (P < 0. 01)。下同。
·28· Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 6
2. 4 蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪及人类血液
生化指标比较
将实验用蕨麻小型猪的血液生化指标与同一基地
中饲养的封闭群五指山小型猪[5]及人类血液生化同
类指标进行比较,其结果显示蕨麻小型猪与封闭群五
指山小型猪相比有 8 项指标差异显著 (表 4) ,其中 2
项 P < 0. 05,6 项 P < 0. 01,其他指标差异不显著。
蕨麻小型猪有 10 项血液生化指标处于人正常参考值
内,而封闭群五指山小型猪有 6 项血液生化指标处于
人正常参考值内。
表 4 蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪
血液生化指标比较
项目 人正常参考值
蕨麻小型猪
(n = 51)
封闭群五指山小型猪
(n = 37)
ALT 0 ~ 40 37. 41 ± 7. 02 78. 61 ± 21. 37**
AST 0 ~ 40 52. 61 ± 22. 08 62. 26 ± 29. 60
ALP 42 ~ 140 101. 00 ± 56. 55 243. 89 ± 144. 99**
TP 60. 0 ~ 85. 0 77. 24 ± 7. 67 83. 81 ± 9. 01**
ALB 30. 0 ~ 55. 0 41. 91 ± 5. 63 33. 88 ± 5. 30**
GLB 20. 0 ~ 40. 0 35. 33 ± 7. 43 49. 99 ± 8. 67**
BUN 2. 10 ~ 7. 90 4. 40 ± 1. 05 5. 06 ± 3. 74
CREA 35 ~ 124. 00 101. 49 ± 19. 82 136. 18 ± 41. 78**
GLU 3. 9 ~ 6. 1 4. 92 ± 1. 24 5. 71 ± 2. 39*
TCHO 2. 80 ~ 5. 70 2. 10 ± 0. 52 2. 39 ± 0. 68*
TBILI 0 ~ 20. 5 0. 70 ± 0. 35 0. 46 ± 0. 56
TG 0. 40 ~ 1. 81 0. 58 ± 0. 23 0. 59 ± 0. 24
3 讨论
血液生理生化指标不仅对了解动物的生理状态有
指导意义,而且也是病理学、生理学、毒理学研究以
及探讨人类疾病的发病机理等研究中的重要参考指
标[5]。本研究测定实验用蕨麻小型猪的血液 19 项生
理指标和 12 项生化指标,在这些指标中性别之间比
较总体差异较小,只有 NEUT 和 TC 存在显著差异。
由于这两项指标可能受到健康及营养等因素的影响,
另外雄性数量相比雌性较少,因此需要进一步增加样
本数测量确认。
实验用蕨麻小型猪与封闭群五指山小型猪相比,
血液生理指标有 7 项差异显著,血液生化指标有 8 项
差异显著。而与近交系五指山小型猪、广西巴马小型
猪、贵州小型猪相比,血液生理指标分别有 10[6 - 7]
(共 15 项比较)、19[8]、12[7] (共 14 项比较)项差
异显著 (P < 0. 05) ,血液生化指标分别有 11[9 - 10]、
10[11]、6[9] (共 11 项比较)项差异显著 (P <
0. 05)。与 6 月龄的哥廷根小型猪比较[12],在 12 项
生 理 指 标 中,雄 性 RBC、 NEUT%、 LYMPH%、
EO%、BASO%、PLT 等 6 项差异不显著,雌性
RBC、NEUT%、LYMPH%、EO% 等 4 项差异不显
著;在 6 项生化指标中,雄性全部差异显著 (P <
0. 05) ,而雌性有 TC、TG两项无显著性差异。
总体而言,不同小型猪之间的血液生理生化指标
的差异较大,说明遗传基础是血液生理生化指标差异
的主要因素。相对而言,实验用蕨麻小型猪与封闭群
五指山小型猪的差异较小,而这 2 种小型猪在同一条
件下饲养及检测,因此气候、管理、环境、营养及检
测方法等条件也可能会对血液生理生化指标产生
影响。
蕨麻小型猪和封闭群五指山小型猪分别有 7 项和
8 项血液生理指标处于人正常参考值内,分别有 10
项和 6 项血液生化指标处于人正常参考值内。说明蕨
麻小型猪和封闭群五指山小型猪和人的血液生理生化
特性存在一定的相似性,可用于比较医学等生物医学
应用,也可逐步替代犬、非人灵长类用于药物非临床
安全评价和生物医学研究。
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