全 文 ：特 产 研 究 Special Wild Economic Animal and Plant Ｒesearch 47
文章编号:1001 －4721 (2014)02 －0047 －04
收稿日期:2014 － 03 － 03
作者简介:陈人萍(1983 －) ，女，吉林省德惠市人，硕士研究生，研究实习员，从事天然产物化学及活性成分研究。
牛尾菜乙醇提取物抗类风湿性关节炎作用研究
陈人萍1，张英华1，刘卫1，王琳2
(1．吉林省中医药科学院，长春 130012;2．长春医学高等专科学校，长春 130031)
摘要:为考察牛尾菜乙醇提取物抗类风湿性关节炎的作用，采用佐剂性关节炎模型研究其抗炎作用，采用醋酸扭体和福尔马
林模型研究其镇痛作用。结果表明，牛尾菜乙醇提取物0. 6g /kg剂量组、0. 3g /kg剂量组可显著抑制大鼠佐剂性关节炎的继发
性炎症，且可明显降低血清中白细胞介素 － 6、白细胞介素 － 1β和肿瘤坏死因子 － α含量;0. 8g /kg剂量组和0. 4g /kg剂量组显
著抑制醋酸扭体模型小鼠的疼痛反应;不同剂量组均可显著抑制福尔马林模型大鼠疼痛反应的 2 个时相。
关键词:牛尾菜;乙醇提取物;类风湿性关节炎
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标识码:A
Study on Anti － rheumatoid Arthritis Activities of
Ethanol Extract from Smilax riparia A． DC．
CHEN Ｒen － ping1，ZHANG Ying － hua1，LIU Wei1，WANG Lin2
(1． Jilin Traditional Chinese Medicinal Science Academy，Changchun 130021，China;
2． Changchun Medical College，Changchun 130031，China)
Abstract:To study the anti － rheumatoid arthritis activities of ethanol extract from Smilax． riparia． A． DC． Adjuvant arthritis model in
rats was used to study the anti － inflammatory activities，and acetic acid writhing model and formalin model in mice were used to study
the analgesic effect． The results showed that 0. 6g /kg and 0. 3g /kg groups of ethanol extracts from S． riparia had an obvious inhibitory
activity to adjuvant － induced arthritis in rats，and decreased the level of IL － 6，IL － 1β and TNF － α in the serum;0. 8g /kg and
0. 4g /kg groups had an obvious inhibitory activity to acetic acid － induced writhing reaction in mice;All groups had an obvious inhibito-
ry activity to the two phases of formalin － induced pain reaction in rats．
Key words:Smilax riparia;ethanol extract;rheumatoid arthritis
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，ＲA)是一
种病因尚未明了的慢性全身性炎症性疾病，以慢性、
对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表
现，急性活动期常伴有剧烈的晨僵、疼痛、肿胀等。
许多细胞因子在 ＲA 发病过程中起着重要的作
用［1，2］。白细胞介素 － 1β(IL － 1β)在类风湿性关节
炎的骨侵蚀和软骨破坏中发挥重要作用;白细胞介
素 － 6(IL － 6)在炎症细胞因子和免疫调节网络中
具有关键性的作用［3］;肿瘤坏死因子(TNF － α)能
刺激滑膜细胞和软骨细胞合成并释放前列腺素 E2
(PGE2)和胶原酶，引起骨和软骨的吸收破坏
［4］。因
此，降低血清中此类细胞因子的水平也是治疗类风
湿性关节炎的途径之一。
牛尾菜为百合科植物牛尾菜(Smilax． riparia．
A． DC．)的根及根茎，异名金刚豆藤、马尾伸根等，
在全国分布较广，民间常用于治疗类风湿性关节
炎［5］，但鲜见其药理作用的研究报道。为进一步证
实牛尾菜抗类风湿性关节炎作用，本试验采用佐剂
48 特 产 研 究 2014 年第 2 期
性关节炎模型［6］研究其乙醇提取物的抗炎作用及
其对炎性细胞因子的影响;采用醋酸扭体和福尔马
林模型［7］研究其镇痛作用。
1 实验材料
1. 1 药品与试剂
牛尾菜乙醇提取物(吉林省中医药科学院植物
化学研究所提供) ;阿司匹林肠溶片(石家庄康力药
业有限公司) ;雷公藤多苷片(浙江得恩德制药有限
公司) ;弗氏完全佐剂(美国 sigma 公司) ;IL － 6、IL
－ 1β和 TNF － α ELISA试剂盒(上海森雄科技实业
有限公司)。
1. 2 试验动物
Wistar 大鼠(98 只，雌、雄各半，体重 150g ～
200g，中国医学科学院试验动物研究所提供) ;昆明
种小鼠(50 只，雌、雄各半，体重20g ～ 24g，吉林大学
试验动物中心提供)。
1. 3 试验仪器
680 型全自动酶标仪(美国 BIO － ＲAD 公司) ;
DH －360 型电热恒温培养箱(北京中兴伟业仪器有
限公司)。
2 方法与结果
2. 1 牛尾菜乙醇提取物抗炎作用研究
2. 1. 1 牛尾菜乙醇提取物对佐剂关节炎大鼠足肿
胀的影响 取大鼠 48 只，雌、雄各半，随机分为 6
组，每组 8 只。第 1 组为空白对照组，第 2 组为模型
对照组，第 3 组为阳性对照组(雷公藤多苷组，给药
剂量为0. 025g /kg) ，第 4 组、第 5 组、第 6 组分别为
牛尾菜乙醇提取物的高剂量组、中剂量组、低剂量组
(给药剂量分别为0. 6g /kg、0. 3g /kg、0. 15g /kg) ，空
白对照组大鼠右后足跖皮下注射 0. 1mL 液体石蜡，
其他组注射弗氏完全佐剂 0. 1mL 致炎。致炎后第
10 天开始每天灌胃给药 1 次，对照组给予同体积蒸
馏水，共给药 12d。预先测量大鼠的正常右后足跖
部周径，再分别于致炎后第 13 天、第 17 天和第 21
天测量大鼠右后足跖部周径，并以其与正常值的差
作为足跖肿胀度，结果见表 1。
表 1 牛尾菜乙醇提取物对佐剂性关节炎大鼠足肿胀的影响
Table 1 Effects of ethanol extract from S． riparia on adjuvant － induced paw swelling in rats
组 别
Group
剂量(g /kg)
Dose
肿胀度 Sweiiing degree(mm，珔X ± SD)
13d 17d 21d
模型对照组
Model control
— 5. 4 ± 0. 24 7. 2 ± 1. 53 9. 9 ± 0. 06
阳性对照组
Positive control
0. 025
3. 2 ±
0. 77＊＊
4. 3 ±
0. 94＊＊
5. 5 ±
1. 03＊＊
牛尾菜乙醇提取物
Ethanol extract from Smilax. riparia
0. 6 3. 9 ± 0. 85* 4. 9 ± 0. 82* 6. 5 ± 1. 98*
0. 3 4. 3 ± 0. 82 5. 2 ± 0. 65* 7. 6 ± 0. 82*
0. 15 4. 3 ± 0. 56 6. 3 ± 0. 34 8. 3 ± 0. 49
注:与模型对照组比较，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01 Note:Compared with the model control group，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01
结果表明，牛尾菜乙醇提取物0. 6g /kg剂量组、
0. 3g /kg剂量组能够显著抑制大鼠的佐剂性关节炎
继发性炎症。
2. 1. 2 牛尾菜乙醇提取物对佐剂性关节炎大鼠炎
性细胞因子的影响 致炎后第 21 天，从大鼠腹腔主
动脉采血，3000r /min离心 5min，采用 ELISA 法测定
IL － 6、IL － 1β和 TNF － α含量，结果见表 2。
第 2 期 陈人萍，等:牛尾菜乙醇提取物抗类风湿性关节炎作用研究 49
表 2 牛尾菜乙醇提取物对佐剂性关节炎大鼠血清 IL －6、IL －1β和 TNF － α的影响
Table 2 Effects of ethanol extract from S． riparia on IL －6，IL －1β，and TNF －α in the serum of adjuvant －induced arthritis rats
组 别
Group
剂量(g /kg)
Dose
IL － 6 IL － 1β TNF － α
(pg /mL，珔X ± SD)
空白对照组
Blank control
— 50. 6 ± 3. 63 47. 0 ± 0. 64 32. 7 ± 0. 34
模型对照组
Model control
— 66. 4 ± 4. 52# 59. 2 ± 4. 45# 34. 6 ± 0. 47#
阳性对照组
Positive control
0. 025 52. 0 ± 2. 81*
47. 3 ±
0. 81*
32. 5 ±
0. 49＊＊
牛尾菜乙醇提取物
Ethanol extract from Smilax. riparia
0. 6
48. 5 ±
2. 18＊＊
47. 0 ±
0. 88*
32. 6 ± 0. 58*
0. 3 57. 4 ± 7. 30
48. 8 ±
0. 94*
32. 9 ± 0. 63*
0. 15 65. 4 ± 3. 44 50. 1 ± 0. 92 33. 1 ± 0. 54
注:与模型对照组比较，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01;与空白对照组比较，#P ＜0. 05
Note:Compared with the model control group，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01;compared with the blank group，#P ＜0. 05
结果表明，与空白对照组比较，模型对照组佐剂
性关节炎大鼠血清中 IL － 6、IL － 1β 和 TNF － α 含
量显著升高;与模型对照组比较，牛尾菜乙醇提取物
0. 6g /kg和0. 3g /kg剂量组大鼠血清中 IL － 6、IL － 1β
和 TNF － α含量显著降低，并且与阳性对照组比较
无显著性差异。
2. 2 牛尾菜乙醇提取物镇痛作用研究
2. 2. 1 牛尾菜乙醇提取物对醋酸所致小鼠疼痛反
应的影响 取小鼠 50 只，雌、雄各半，随机分为 5
组，每组 10 只。第 1 组为模型对照组，第 2 组为阳
性对照组(阿司匹林组，给药剂量0. 1g /kg) ，第 3
组、第 4 组、第 5 组分别为牛尾菜乙醇提取物的高剂
量组、中剂量组、低剂量组(给药剂量分别为
0. 8g /kg、0. 4g /kg、0. 2g /kg) ，连续灌胃 6d，每天给药
1 次，对照组给予同体积蒸馏水。于末次给药后 1h，
腹腔注射 0. 8%醋酸溶液 0. 2mL，记录 15min 内小
鼠的扭体次数，结果见表 3。
结果表明，牛尾菜乙醇提取物0. 8g /kg剂量组和
0. 4g /kg剂量组能显著抑制醋酸所致小鼠疼痛反应，
和阳性对照组比较，无显著性差异，并且0. 8g /kg剂
量组作用强于0. 1g /kg阳性对照组。
2. 2. 2 牛尾菜乙醇提取物对福尔马林所致大鼠疼
痛反应的影响 取大鼠 50 只，雌、雄各半，随机分为
表 3 牛尾菜乙醇提取物对醋酸所致小鼠疼痛反应的影响
Table 3 Effects of ethanol extract from S． riparia on ace-
tic acid － induced writhing reaction in mice
组 别
Group
剂量(g /kg)
Dose
扭体次数
Writhing times
(珔X ± SD)
模型对照组
Model control
— 17. 1 ± 1. 32
阳性对照组
Positive control
0. 1
10. 3 ±
1. 39＊＊
牛尾菜乙醇提取物
Ethanol extract from Smilax． riparia
0. 8 8. 1 ± 1. 04＊＊
0. 4 11. 9 ± 1. 84*
0. 2 13. 7 ± 1. 61
注:与模型对照组比较，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01。下表同。
Note:Compared with the model control group，* P ＜0. 05，＊＊P ＜0. 01． The same
as in the following table．
5 组，每组 10 只。第 1 组为模型对照组，第 2 组为
阳性对照组(阿司匹林组，给药剂量0. 1g /kg) ，第 3
组、第 4 组、第 5 组分别为牛尾菜乙醇提取物的高剂
量组、中剂量组、低剂量组(给药剂量分别为
0. 6g /kg、0. 3g /kg、0. 15g /kg)。连续灌胃 6d，每天给
药 1 次，对照组给予同体积蒸馏水。于末次给药后
1h，右侧后跖皮下注射 2. 0%的福尔马林溶液 0. 1mL，
记录注射后0min ～ 5min(第 1 时相)和15min ～ 30min
(第 2 时相)大鼠舔致炎足(即疼痛反应)的累积时
50 特 产 研 究 2014 年第 2 期
间，结果见表 4。
表 4 牛尾菜乙醇提取物对福尔马林所致大鼠疼痛反应的影响
Table 4 Effects of ethanol extract from S． riparia on Formalin － induced pain reaction in rats
组 别
Group
剂量(g /kg)
Dose
疼痛反应持续时间 Duration of pain reaction(s，珔X ± SD)
第 1 时相
First phase(0min ～ 5min)
第 2 时相
Second phase(15min ～ 30min)
模型对照组
Model control
— 62. 6 ± 6. 41 251. 5 ± 15. 59
阳性对照组
Positive control
0. 1 43. 0 ± 4. 81*
199. 8 ±
14. 27*
牛尾菜乙醇提取物
Ethanol extract from Smilax． riparia
0. 6
33. 1 ±
3. 89＊＊
163. 3 ±
9. 80＊＊
0. 3
37. 0 ±
5. 61＊＊
199. 5 ±
14. 19*
0. 15 38. 7 ± 6. 50*
194. 8 ±
15. 87*
结果表明，牛尾菜乙醇提取物0. 6g /kg、0. 3g /kg
和0. 15g /kg剂量组均能显著抑制福尔马林所致大鼠
疼痛反应，且对疼痛的 2 个时相均有显著的抑制作
用。
3 结论
在牛尾菜乙醇提取物抗炎作用研究试验中，牛
尾菜乙醇提取物0. 6g /kg剂量组、0. 3g /kg剂量组能
够显著抑制大鼠的佐剂性关节炎继发性炎症;对炎
性细胞因子影响的试验中，与模型对照组比较，牛尾
菜乙醇提取物0. 6g /kg剂量组和0. 3g /kg剂量组对大
鼠血清中 IL － 6、IL － 1β 和 TNF － α 含量有显著的
抑制作用，并且与阳性对照组比较无显著性差异。
在牛尾菜乙醇提取物镇痛作用中，牛尾菜乙醇
提取物0. 8g /kg剂量组和0. 4g /kg剂量组对醋酸所致
小鼠疼痛反应有显著的抑制作用，且0. 8g /kg剂量组
作用强于阳性对照组0. 1g /kg(P ＜ 0. 01) ;而牛尾菜
乙醇提取物各个剂量组均能显著抑制福尔马林所致
大鼠疼痛反应的 2 个时相。
疼痛和炎症是类风湿性关节炎的两大主要症
状，试验结果表明，牛尾菜乙醇提取物具有抗类风湿
性关节炎作用，可望为治疗类风湿性关节炎提供新
的药物。
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