免费文献传递   相关文献

红葱萃取物对离体大鼠主动脉血管环的影响研究



全 文 :· 1376· China Pharm acy 2009 Vol.20 No.18 中国药房 2009年第 20卷第 18期
红葱萃取物对离体大鼠主动脉血管环的影响研究
刘西京 1 , 2 * ,汪程远 3 ,王乃利 1 , 2 ,李荣先 1 , 2(1.深圳清华大学研究院 ,深圳市 518057;2.深圳中药及天然药物
研究中心 ,深圳市 518057;3.重庆工商大学药物化学与化学生物学研究中心 ,重庆市 400067)
中图分类号 R285;R932 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2009)18-1376-03
摘 要 目的:研究红葱萃取物(氯仿和乙酸乙酯萃取物)对离体大鼠胸主动脉血管环的影响作用 。方法:将大鼠分为 3组 ,即空白
和氯仿 、乙酸乙酯萃取物组 ,用 Powerlab生物信号采集与分析系统测定离体主动脉血管环张力的变化 。结果:与空白组比较 ,氯仿
和乙酸乙酯萃取物组的血管环明显舒张 ,对苯肾上腺素(PE)和 KCl引发的预收缩有显著抑制作用(P <0.05或 P <0.01)。氯仿
部位较乙酸乙酯部位萃取效果好(P<0.05或 P <0.01)。结论:红葱的氯仿和乙酸乙酯萃取部位既能直接舒张血管环 , 亦能抑制
PE和 KCl对血管环的预收缩作用 。
关键词 红葱;胸主动脉;大鼠
Effect of Eleutherine Americana Extracts on RatsVascular Ring of Aorta ex Vivo
LIU Xi-jing ,WANG Nai-li ,LI Rong -x ian(Shenzhen Research Inst itute o f Tsinghua Unive rsity , Shen-
zhen 518057 , China)
LIU Xi-jing ,WANG Nai-li , LI Rong -xian(Shenzhen Tradi tional Chinese M edicines & Natural Products
Research Center , Shenzhen 518057 , China)
WANG Cheng-yuan(Research Center of Pharmaceutical Chemist ry & Chemobio lo gy ,Chongqing Techo logy
and Business Unive rsity ,Chongqing 400067 ,China)
ABSTRACT OBJECT IVE:To study the e ffects o f E leutherine americana ex tracts(chlo ro form and ace tic ether ex tracts)on
isolated ra tsvascula r ring o f tho racic aor ta.METHODS :The rats were assigned to one o f the following 3 groups:blank
group , chlo ro fo rm ex t ract g roup and e thy l aceta te ex tract g roup.Tensions of the vascula r rings w ere measured wit h Pow erlab
biological signal analy tical system.RESULTS:As compare wit h blank , t he vascula r rings were significantly relaxed in chlo-
ro form ex t ract -treated and ethy l acetate ex tract-trea ted groups , suggesting the m arked inhibitory e ffects of the chlorofo rm
ex tract and the ethy l aceta te ex t ract of E leu therine americana on the pre -cont rac tion of the vascular rings induced by
pheny lephr ine(PE)and KCl (P <0.05 or P <0.01).The ex t rac tion efficacy of chlo ro form ex t ract w as be tter than that of
e thyl aceta te ex tract(P <0.05 or P <0.01).CONCLUSION :T he chlorofo rm ex tract and the ethy l ace tate ex t rac t o f Eleuthe_
r ine americana can directly dilate vascula r rings and inhibit the pre-contraction o f the vascula r rings induced by pheny le-
phr ine (PE)and KCl.
KEY WORDS Eleutheri ne americana ;Thoracic aor ta;Rats
*助理研究员 ,博士。研究方向:中药化学成分和活性研究。 E-
mail:lxj-1975@yahoo.com.cn
红葱为鸢尾科红葱(E leutherine americana M err.et K.
Heyne)的全草或鳞茎 , 又名小红蒜 、红葱头 、百步还阳 ,在我国
云南 、广西、海南等地有栽培 , 在民间主要作为治疗冠心病、心绞
痛等心血管疾病的药物 [1] 。但目前该药物的药理作用研究还比较
少 , 为了较好的阐明红葱的药理作用和机制 , 为进一步开发和临
床用药提供理论基础 ,本文首次报道了不同红葱萃取部位对大鼠
主动脉血管环的影响 ,探讨其作用机制和物质基础 。
1 材料
1.1 仪器
Pow erlab生物信号采集与分析系统 、M LT1030/D trans-
ducer 张力传感器(澳大利亚AD公司)。
1.2 试药
红葱购自云南西双版纳 , 并由深圳清华大学研究院王乃利
教授鉴定为真品 。丹参酮ⅡA对照品 (中国药品生物制品检定
所 , 批号:20060508);混合气体:95%O 2+5%CO 2(深圳高发气
体有限公司);苯肾上腺素 (PE , 美国 Sigm a公司 , 纯度>
98%);5×台氏液 、10×CaCl2贮备液 、1×台氏液(笔者自制);
盐酸 、氯化钾 、氯化钠 、硫酸镁、碳酸氢钠 、磷酸二氢钾 、葡萄糖 、
氯化钙 、二甲亚砜(DMSO)均为分析纯 。
1.3 动物
SPF级Wista r大鼠 , ♂,体质量 250 ~ 300 g ,由广东省医学
实验动物中心提供(动物合格证号:2008A020)。适应性饲养 1周
后实验。
2 方法 [2]
2.1 样品的制备
不同的有效部位萃取:红葱药材 1 kg 60%乙醇提取 ,分别
用氯仿(C)、乙酸乙酯(E)萃取 ,得到各自的有效部位 6 、8 g 。
梯度浓度溶液的配制:C部位首先用 DMSO 溶解 ,配成浓度
为 0.3 mg ·mL -1的液体 , 取一定量该液体 , 用蒸馏水稀释成浓
度分别为 0.03 、0.003 mg ·mL -1的稀释液 。E部位配制方法同
上 。空白对照为相应的 DMSO 用蒸馏水稀释 。
2.2 大鼠离体主动脉血管环的制取
中国药房 2009年第 20卷第 18期 Ch ina Pharmacy 2009 V ol.20 No.18 · 1377·
颈椎脱臼处死大鼠 , 迅速取出主动脉 , 置于通有混合气体的
4 ℃台氏液中 , 剔除血管外壁的脂肪和结缔组织 。将血管条截成
小段 ,每段 2 ~ 3mm左右;取一段血管条 ,穿过固定的小棒 ,再用
小钩将血管挂起 ,小钩用细棉线连至传感器。最后将血管浸泡于
装有台氏液 、通有混合气体并保持 37 ℃恒温的反应池中 。通过软
件 , 监控血管条的拉力状态 , 将平衡状态的拉力调整至 0.8 g 左
右;平衡 1 h ,每 15 min换台氏液 1次。用 60mmol的 KCl刺激
3次 , 待血管收缩到最强并稳定时 , 换洗台氏液 5次 , 将 KCl洗
净 ,用 5 mL台氏液定容 ,准备实验 。
2.3 实验分组与药物处理
2.3.1 PE对血管的预收缩作用:加入终浓度为 1μmol的 PE
预收缩血管 ,待血管收缩到最强时 ,张力不再变化 ,依次加入累积
浓度的红葱 C 、E萃取物和丹参酮 ⅡA 。
2.3.2 KCl对血管的预收缩作用:加入终浓度为 6 mmol的
KCl ,同“2.3.1”项下实验。
2.3.3 对血管的直接作用:直接以不同累积浓度的红葱 C 、E
萃取物和丹参酮ⅡA作用于血管环 。每个浓度的样品用 8个动脉
条重复试验 。前一次加药后 ,血管舒张完全并达到平衡状态时 ,
加下一个浓度的药物 。记录平衡、收缩 、舒张各个环节的血管张
力 。舒张率(%)=(血管环预收缩最大张力 —不同药物浓度血
管环张力)/(血管环预收缩最大张力 —基础平衡张力)×100%;当
直接作用于血管环时 , 舒张率(%)=(基础平衡张力 —不同药
物浓度血管环张力)/基础平衡张力×100%。
2.4 统计学方法
试验所有数据均以测得血管环舒张率来表示 , 检测结果以
x ±s表示 ,红葱提取物组与空白组比较作 t 检验 ,红葱萃取物组
间 t检验。所有资料用 SPSS 11.0软件包处理。
3 结果
3.1 不同累积浓度的红葱萃取物对 PE引起主动脉预收缩的
影响
以不同累积浓度的红葱 C萃取物和 E萃取物作用于用 PE
预收缩的血管环 ,对血管环的收缩有抑制作用 ,C萃取物在累积浓
度达 300×10 -6 g ·L -1以上时 , 与空白组比较 , 有显著性差异
(P <0.01);E萃取物则在累积浓度达 1 000×10 -6 g ·L -1时 ,
与空白组比较有显著性差异 (P<0.01), 且在累积浓度达到
300×10 -6 g ·L -1以上时 , 2个萃取物组相应的浓度之间比较
有显著性差异(P <0.01)。C 萃取物组舒张作用较 E 萃取物组
好 ,丹参酮ⅡA 组作用较 C部位和 E部位强 。不同部位不同浓
度的红葱萃取物对 PE 预收缩大鼠主动脉舒张率的影响见
表1。
表 1 不同部位不同浓度的红葱萃取物对 PE预收缩大鼠主动脉舒张率(%)的影响(n=8)
Tab 1 Effects of d ifferent part of extracts(at dif ferent concentration)from Eleutherine americana on relaxat ion(%)of
rat thoracic aorta pre-constricted by PE(n=8)
组别 不同浓度(×10-6 g ·L -1)下舒张率/%
3 10 30 100 300 1 000
空白组 0.28±0.50 1.43±2.13 3.80±2.10 6.90±4.13 1.27±3.30 14.59±4.68
C萃取物组 3.65±6.35 5.40±5.78 8.11±6.90 14.49±10.90 55.48±19.83*# 88.28±13.84*#
E萃取物组 2.23±3.73 4.21±3.18 7.21±4.43 10.64±6.35 19.52±11.27* 40.50±15.93*
丹参酮ⅡA组 31.80±17.39* 47.64±19.89* 69.00±25.05* 82.57±18.58* 95.83±15.80* 97.95±13.31*
与空白组比较:*P<0.01;与 E萃取物组比较:#P<0.01
vs.blank group:*P<0.01;vs.E extract group:#P<0.01
3.2 不同累积浓度的红葱萃取物对 KCl引起主动脉预收缩
的影响
血管环用KCl预收缩处理后 ,在累积浓度达到 30×10 -6 g ·
L -1以上时 ,对血管环收缩有抑制作用 , C萃取物组与空白组比
较 ,有显著性差异(P<0.01);E萃取物在 30×10 -6 g ·L -1浓度
以上时 ,E萃取物与空白组比较 ,有显著性差异(P<0.05或 P<
0.01);在 100×10 -6 g ·L -1浓度以上时 , 2个萃取物组间比较 ,有
显著性差异(P<0.05或 P<0.01),C萃取物组舒张作用更强 。丹
参酮Ⅱ A作用较 C部位和E部位强 。不同部位不同浓度的红葱萃
取物对 KCl预收缩大鼠主动脉舒张率的影响见表 2。
表 2 不同部位不同浓度的红葱萃取物对 KCl预收缩大鼠主动脉舒张率(%)的影响(n=8)
Tab 2 Effects of dif ferent extraction parts(at different concentration)from Eleutherine americana on relaxation (%)of
rat thorac ic aorta pre-contracted by KCl(n=8)
组别 不同浓度(×10-6 g ·L -1)下舒张率/ %
3 10 30 100 300 1 000空白组 1.45±1.60 2.16±1.91 4.59±2.48 7.44±2.62 10.33±3.25 14.10±3.66
C萃取物组 0.36±0.98 3.98±2.14 11.20±3.32** 20.95±4.40**# 35.48±6.14**# 55.38±11.51**# #
E萃取物组 2.63±2.41 3.99±3.03 9.06±4.55* 15.08±6.04* 27.52±8.21** 37.87±10.05**
丹参酮ⅡA组 31.75±10.97** 42.86±11.28** 56.18±15.61** 66.45±12.23** 81.90±12.72** 89.39±12.58**
与空白组比较:*P<0.05 , * *P<0.01;与 E 萃取物组比较:#P<0.05 , ##P<0.01
vs.blank group:*P<0.05 , **P<0.01;vs.E extract group:#P<0.05 , ##P<0.01
3.3 不同累积浓度的红葱萃取物对血管环的直接作用
以不同累积浓度的红葱 C萃取物和 E萃取物直接作用于
血管环 , 在达到 100×10 -6 g · L -1以上浓度时 , C 萃取物组和
E萃取物组与空白组比较 , 均有显著性差异(P <0.01), 说明
2个萃取物对血管环均有直接的舒张作用;2组之间比较 , C 萃
取物组较 E 萃取物组舒张作用更强 ,在累积浓度达到 100×
10 -6g ·L -1以上时 ,有显著性差异(P <0.05或 P <0.01)。丹
参酮Ⅱ A作用较 C部位和 E部位强 。不同部位不同浓度的红葱
萃取物直接对大鼠主动脉舒张率(%)的影响见表 3。
4 讨论
红葱 C萃取物和 E 萃取物对 PE和 KCl预处理的血管环
的收缩有抑制作用 ,还可直接舒张血管环 。统计结果显示 ,C萃
取物组的效果较 E萃取物组好(P <0.05),提示红葱中舒血管
作用的物质主要存在于 C部位 。
红葱在民间作为治疗冠心病 、心绞痛的药物长期应用 , 但
至今尚无这方面的药理实验报道 , 本文就红葱对大鼠主动脉血
· 1378· China Pharm acy 2009 Vol.20 No.18 中国药房 2009年第 20卷第 18期
Δ深圳市医疗卫生系统 2005年科技计划非资助项目
*主管药师。研究方向:天然药物化学与药理 。电话:0755-
83366388-2132。E-mail:tombeer818@gmail.com
枳 子乙酸乙酯提取部位的解酒作用研究 Δ
时 涛 1 * , 陈振德 2(1.深圳市第二人民医院 , 深圳市 518035;2.深圳市人民医院/暨南大学第二临床医学
院 ,深圳市 518020)
中图分类号 R285;R284 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2009)18-1378-03
摘 要 目的:研究枳 子乙酸乙酯提取部位的解酒作用 。方法:将小鼠随机分成 5组 ,即空白 、模型(生理盐水)、阳性(灌胃海王金
樽 20 g ·kg -1)和乙酸乙酯提取物高 、低剂量组(乙酸乙酯提取物相当于 20 、10 g 生药 ·kg -1)。研究各种提取物对急性酒精中毒小
鼠血清谷丙转氨酶(SGPT)活性 、肝脏丙二醛(M DA)含量 、醇脱氢酶(ADH)活性 、还原型谷胱甘肽(GSH)含量 、超氧化物歧化酶
(SOD)活性的影响。结果:枳 子乙酸乙酯提取部位可降低急性酒精中毒小鼠血清 SGPT 活性和肝脏M DA 含量 , 升高小鼠肝脏
ADH 、SOD活性和 GSH含量 。结论:枳 子乙酸乙酯提取部位具有显著的解酒效果 ,值得进行深入研究 。
关键词 枳 子;解酒;乙酸乙酯提取部位
Effect of Ethyl Acetate Extract of the Seeds of Semem Hoveniae against Alcohol ism
SHI Tao(Shenzhen Second Peoples Hospital , Shenzhen 518035 , China)
CHEN Zhen -de (Shenzhen People s Hospi tal & Jinan University 2nd Co llege of Clinic Medicine ,
S henzhen 518020 , China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study on the effect o f ethy l acet ate ex tract of the seeds of Semem Hoveniae.against alco-
ho lism.M ETHODES:T he mice were divided into four g roups:model g roup (i.g.norm al saline), positive g roup(i.g.Hai-
w ang jinzun 20 g · kg -1), low -dose group of e thyl acet ate ex t rac t (i.g.ethy l acetate ex tract 10 g · kg -1), and high-dose
group o f e thy l ace tate ex tract(i.g.ethy l acet ate ex tract 20 g ·kg -1).T he effects of dif ferent ex tracts on serum SGPT ac tiv ity ,
M DA conten t and ADH activity , GSH content and SOD activity in live r tissue of mice with acute alcoho lism w ere de term ined.
RESU LTS:Serum SGPT activ ity and M DA content were dow n-regula ted w hile ADH activity , GSH content and SOD activity
in live r tissue o f acute alcoholism mice w ere up-regulated by the et hy l aceta te ex tract o f the seeds of Hovenia Dulcis T hunb.
CONCLUS ION :The e thy l aceta te ex t ract of t he seeds of S emem Hoveniae exhibited remarkable anti -alcoho lism efficacy ,
and w hich is wor thy o f fur ther study.
KEY WORDS The seeds o f Semem Hoveniae ;Anti-alcoholism;Ethy l ace tate ex t ract
表 3 不同部位不同浓度的红葱萃取物直接对大鼠主动脉舒张率(%)的影响(n=8)
Tab 3 Direct ef fec ts of dif ferent part of extractions (at different concentrat ions)from Eleutherine americana on relax-
ation (%)of rat thoracic aorta(n=8)
组别 不同浓度(×10-6 g ·L -1)下舒张率/ %
3 10 30 100 300 1 000
空白组 0.30±1.30 1.24±1.62 3.10±1.40 4.82±1.53 7.97±2.52 10.49±2.57
C萃取物组 0.16±1.36 2.16±1.84 5.44±3.14 13.90±4.31*# 19.21±6.03* 29.84±7.99*#
E萃取物组 0.25±1.98 1.81±2.34 5.23±3.08 9.80±2.64* 14.62±4.36* 19.83±6.67*
丹参酮ⅡA组 10.30±7.44* 20.45±7.58* 25.93±9.70* 29.54±9.05* 34.09±9.01* 37.50±9.72*
与空白组比较:*P<0.01;与 E萃取物组比较:#P<0.05
vs.blank group:*P<0.01;vs.E ex tract g roup:#P<0.05
管环的舒张作用进行了初步的探讨 。本研究发现红葱萃取物对
PE和 KCl预处理的血管环的收缩有抑制作用 , 还可直接舒张
血管环 ,降低血管环张力的作用 ,在 3 ~ 1 000×10 -6 g ·L -1范
围内呈浓度依赖性 。C部位较 E部位效果好 。
中医药在治疗冠心病等疾病时 , 除了扩张冠状动脉外 , 还
可能与抗血栓形成 、降低血脂 、清除自由基和保护内皮细胞等
作用有关[3 ] 。本实验仅仅是红葱萃取物对血管舒张作用的初步探
讨 , 对血管环收缩的抑制作用是否与内皮细胞有关 , 是否与提
高 NO 的含量 、降低血脂等对心血管有着重要影响的因素有
关 ,还有待进一步研究 。
参考文献
[ 1] Chen Z ,Huang H ,WangC , et al.Hongconin , a new na_
phthalene deriva tive from Hong-cong , the rhizom e of
Eleuther ine americana merr.and heyne(ir idaceae)[ J].
Chem Pharm B ull ,1986 , 34(7):2 743.
[ 2] Vidrio H ,Fernández G.Inf luence o f endo thelium in do_
se -dependent inhibition and po tentiation by isoniazid
of isoso rbide dinitrate relaxa tion of rat ao rta[ J] .J Car-
d iovasc Pharmacol ,2001 , 37(5):630.
[ 3] 马月静.中医药治疗冠心病及其心绞痛研究进展 [ J] .中
国药房 , 2005 , 16(21):1 665.
(收稿日期:2008-09-10 修回日期:2009-02-27)