全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(5)∶456 ～ 458
基金项目:贵阳市科技计划项目(201120422 号)
作者简介:段亚平(1956—) ，女，贵州贵阳，主任护师，从事老年病的临床工作。Email:21298993@ qq． com
铁筷子总黄酮对 D －半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究
段亚平，李 媛，李姝臻
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 观察铁筷子总黄酮对 D －半乳糖诱导的衰老模型小鼠的影响，初步探讨其抗衰老作用机制。方法 以 D －半乳
糖诱导 6 周，建立小鼠衰老模型，给予铁筷子总黄酮干预 3 周后，分别测定小鼠的脾脏、脑和胸腺指数，检测小鼠的血清及肝组
织匀浆、脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化脂质产物丙二醛(MDA)的含量。结果 与对照组比较，模型组小鼠脾
脏、脑及胸腺指数、SOD含量均降低，MDA含量升高。与模型组比较，治疗组小鼠的脾脏、脑及胸腺指数、SOD 的含量明显升
高，MDA的含量明显下降。结论 铁筷子总黄酮延缓 D －半乳糖所诱导衰老的机制可能与清除体内自由基、提高免疫功能
有关。
关键词:铁筷子总黄酮;衰老;脏器指数;抗氧化;免疫增强
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)05 － 0456 － 03
The anti － aging effect of total flavonoids from Chimonanthus praecox on aging mice induced
by D － galactose
DUAN Ya － ping，LI Yuan，LI Shu － zhen
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang，Guizhou，550002 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To investigate the anti － aging effect of total flavonoids from Chimonathus praecox(L．)Link (FCP)on
aging mice induced by D － galactose．METHODS The aging mice model was established by injection of D － galactose for six weeks，
then the mice were orally given FCP for three weeks． The spleen index，brain index ，thymus index and the content of SOD，MDA in
the blood，liver and brain tissue were measured． RESULTS Compared with blank group，the spleen index，brain index，thymus index
and the content of SOD were significantly decreased but the MDA was significantly rose in model group． However，compared with model，
the FCP could significantly raise the spleen index，brain index ，thymus index and the content of SOD in the blood，brain and liver
tissue，and decrease the level of MDA in the blood，brain and liver tissue． CONCLUSION The FCP exhibits significant anti － aging
activity． The mechanism may be related to its enhancement of activity of scavenging free radicals and improving the immunity function．
Key words:Total flavonoids from Chimonathus praecox;Aging;Viscera index;Antioxidation;Immune enhancement
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)05 － 0456 － 03
衰老是一个正常而又复杂的生理、病理过程，自
由基在其中扮演了重要角色。随着年龄的增加，机
体内氧化与抗氧化两个系统之间的平衡逐渐失衡，
机体清除氧自由基的能力逐渐减弱，导致体内氧自
由基的积累。过剩的自由基作用于细胞膜、线粒体、
核酸、蛋白质和酶类等，导致不可逆损伤，从而导致
衰老、退行性疾病及肿瘤等的发生。总黄酮是传统
中药及民族药中的有效物质，广泛应用于炎症性疾
病、心血管疾病、老年退行性疾病如老年痴呆等疾病
的治疗。铁筷子为中国苗族传统药物，为腊梅科腊
梅属植物腊梅 Chimonanthus praecox(L．)1ink． 及山
腊梅 Chimonanthus nitens Oliv． 的干燥根，对其药理
活性的研究主要集中在镇痛、抗炎等方面［1 － 2］。铁
筷子总黄酮还具有改善衰老动物学习记忆的能力，
但机制尚不清楚。现采用 D －半乳糖诱导小鼠制备
衰老模型，考察铁筷子总黄酮的抗衰老作用及其初
步机制。
1 实验部分
1. 1 仪器、试药与动物
721 型紫外分光光度计(上海尤尼柯公司)。铁
筷子总黄酮(FCP，贵阳中医学院药理教研室) ，总黄
酮含量 ＞ 50%，用时以生理盐水配制;D － 半乳糖
(北京索莱宝科技有限公司) ;丙二醛、超氧化物歧
化酶(南京建成生物工程研究所)。昆明种小鼠 50
只［贵阳医学院实验动物中心，合格证号:SCXK
(黔)2002 － 0001］体重 18 ～ 22 g，♀♂兼用。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 动物的分组与给药 参照文献［3］，建立 D －
半乳糖致小鼠衰老模型。将 50 只小鼠随机均分为
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2013.05.007
对照组、模型组、阳性组(Vit E 组)及铁筷子总黄酮
高、低剂量组。除对照组外，于各组小鼠颈部皮下注
射 D －半乳糖 250 mg·kg －1·d －1，qd，连续 6 周，建立
衰老模型。于对照组小鼠颈部 sc 同体积生理盐水。
模型建立后，治疗组分别给予高、低(0. 5、0. 25 g·
kg －1·d －1，相当于生药 5、2． 5 g·kg －1·d －1)剂量的铁
筷子总黄酮，阳性组给予 0． 1 g·kg －1·d －1Vit E，对照
组及模型组 ig同体积生理盐水，qd，连续 3 周。
1． 2． 2 铁筷子总黄酮对衰老模型小鼠胸腺、脾脏、
脑指数的影响 给药 3 周后，取小鼠称重，断头取
血，迅速取出胸腺、脾脏、脑，用预冷生理盐水漂洗两
次，用滤纸拭干称重，记录肝脏、脾脏、胸腺的重量，
计算脏器指数。结果表明:与正常对照组比较，衰老
模型小鼠的胸腺、脾脏、脑指数明显降低。铁筷子总
黄酮高、低剂量给药后，均可以提高小鼠胸腺、脾脏、
脑指数，其中，高剂量组(0． 5 g·kg －1·d －1)与模型组
比较具有显著意义，而低剂量组(0． 25 g·kg －1·d －1)
只提高了小鼠的胸腺指数，与模型组比较具有显著
意义，对脾脏、脑指数也有影响，但与模型组比较无
显著差异(表 1)。
1． 2． 3 铁筷子总黄酮对衰老模型小鼠血清、脑组织
及肝脏匀浆中 SOD、MDA 含量的影响 给药 3 周
后，小鼠断头取血，分离血清;迅速取出鼠脑及肝脏，
制备肝脏、脑组织 10%匀浆。按照试剂盒说明进行
表 1 铁筷子总黄酮对胸腺、脾脏、脑指数的影响(%，珔x ± s，n =10)
Table 1 The effects of FCP on thymus index，spleen index and
brain index(%，珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg － 1·d － 1 Thymus index Spleen index Brain index
Blank － 1． 82 ± 0． 32 5． 16 ± 0． 70 9． 37 ± 0． 84
Model － 1． 43 ± 0． 29* 3． 88 ± 0． 56＊＊ 7． 94 ± 0． 45＊＊
Vit E 0． 1 1． 80 ± 0． 39# 4． 56 ± 0． 44# 8． 66 ± 0． 70#
FCP 0． 5 1． 74 ± 0． 25# 4． 51 ± 0． 49# 8． 71 ± 0． 84#
0． 25 1． 81 ± 0． 41# 4． 17 ± 0． 70 8． 55 ± 1． 30
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;compared with
model group:# ＜ 0． 05
血清、肝脏及脑组织匀浆中 SOD、MDA含量的测定。
结果表明:与正常对照组比较，模型组小鼠血清、肝
脏匀浆及脑组织匀浆中 SOD 的活性明显降低。铁
筷子总黄酮高、低(0. 5、0． 25 g·kg －1·d －1)剂量可显
著提高模型小鼠血清及脑组织匀浆中 SOD活性，而
对于肝组织匀浆中 SOD含量的影响方面，仅有高剂
量与模型组比较作用显著;与正常对照组比较，模型
小鼠血清、肝脏及脑组织匀浆中 MDA 的含量明显
升高。铁筷子总黄酮高剂量组小鼠血清、肝脏匀浆
及脑组织匀浆中 MDA 的含量较模型组明显降低，
低剂量组与模型组比较仅显著降低了脑组织匀浆中
MDA的含量，而对血清及肝组织匀浆中 MDA 含量
无显著的降低作用(表 2)。
表 2 铁筷子总黄酮对血清、肝组织、脑组织 SOD、MDA的影响(珔x ± s，n =10)
Table 2 The effect of FCPL on the contents of SOD and MDA in blood，liver and brain tissue(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg －1
SOD /U·mg －1
blood spleen tissue brain tissue
MDA /nmol·mg －1
blood spleen tissue brain tissue
Blank － 140． 06 ± 12． 25 142． 03 ± 10． 71 125． 45 ± 10． 56 4． 38 ± 0． 75 1． 31 ± 0． 40 3． 85 ± 0． 86
Model － 99． 39 ± 11． 61* 104． 00 ± 12． 46* 85． 54 ± 9． 91* 7． 18 ± 0． 91* 2． 16 ± 0． 34* 6． 23 ± 1． 13*
Vit E 0． 1 130． 54 ± 14． 60## 128． 71 ± 14． 19## 114． 55 ± 14． 87## 5． 19 ± 1． 07## 1． 52 ± 0． 28## 4． 10 ± 0． 82##
FCP 0． 5 126． 29 ± 13． 12## 126． 89 ± 11． 84## 110． 22 ± 18． 51## 5． 61 ± 1． 20## 1． 56 ± 0． 20## 4． 21 ± 0． 97##
0． 25 117． 50 ± 11． 38## 116． 49 ± 15． 97 98． 99 ± 13． 24# 5． 94 ± 1． 39 1． 62 ± 0． 38 4． 99 ± 1． 07#
Compared with blank group:* P ＜ 0． 01;Compared with model group:#P ＜ 0． 05，##P ＜ 0． 01
1． 2． 4 统计学处理 实验数据均以 珋x ± s 表示，采
用方差分析 Anova，组间比较采用 t 检验。P ＜ 0． 05
为差异有统计学意义。
2 讨论
D －半乳糖模型是根据衰老的代谢学说建立的
一种亚急性衰老模型，比较符合机体自然衰老时的
过程［4］。文中研究发现:连续使用 D － 半乳糖后，
模型小鼠的脑、脾脏、胸腺指数下降，显示这些组织
器官萎缩退化，给以铁筷子总黄酮干预后，铁筷子
总黄酮减少了 D －半乳糖所致的器官萎缩，增加了
脑指数，显示铁筷子总黄酮可能对改善衰老动物的
认知、学习行为有一定影响，但需进一步研究。同
时，铁筷子总黄酮增加了脾脏、胸腺的脏器指数，提
示增强免疫可能是铁筷子总黄酮延缓衰老的作用
途径之一。
SOD是一种能够清除体内自由基的酶，具有抗
氧化损伤作用，检测体内 SOD活性可间接反映机体
清除自由基、保护细胞免受自由基损伤的能力［5］。
MDA是机体在氧自由基作用下生成的脂质过氧化
物，反应机体内脂质过氧化水平，间接反映出细胞的
损伤程度［6］。文中证实:连续 sc D －半乳糖后，造
成模型小鼠的血清、脑组织匀浆、肝脏匀浆中 SOD
活性下降，造成 MDA 含量增加。给予铁筷子总黄
酮治疗后，血清、脑组织匀浆及肝脏匀浆中的 SOD
含量升高，增加了机体的抗氧化系统能力，机体清除
754第 5 期 段亚平，等。铁筷子总黄酮对 D －半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究
华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(5)∶458 ～ 460
过氧化脂质产物的能力增加，使 MDA 活性下降，减
轻了自由基氧化损伤对机体组织细胞的毒性作用，
提示抗氧化作用可能是铁筷子总黄酮延缓衰老的作
用机制之一。
参考文献:
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收稿日期:2012 － 12 － 29
作者简介:李强，正攻读药理学专业的硕士学位。Email:alcm333@ sina． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:anshengsun@ yahoo． com． cn
异钩藤碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌细胞肥大的作用
李 强，侯化化，徐 洋，张婧怡，孙安盛*
(遵义医学院药理学教研室 贵州省基础药理学重点实验室，贵州 遵义 563000)
摘要:目的 研究异钩藤碱(Iso)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引起的大鼠心肌肥大的抑制作用，并探讨其机制。方法 采用初
生大鼠原代心肌细胞培养法，BCA法检测细胞总蛋白含量，测定细胞表面积和心房利钠因子 mRNA 的表达以观察 Iso 对 Ang
Ⅱ诱发心肌细胞肥大的抑制作用。通过测定细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性、Real time RT
－ PCR检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达，探讨 Iso可能的作用机制。结果 AngⅡ 0． 1 μmol·L －1明显促进了心
肌细胞肥大，增加心肌细胞表面积、蛋白含量，降低细胞上清液中 NO含量及 NOS活性，降低 eNOS mRNA表达。Iso 1、10 μmol
·L －1明显抑制 AngⅡ诱发心肌细胞肥大的作用，增加细胞中 NO的合成、释放和增加 NOS活性，上调 eNOS mRNA的表达。结
论 Iso可抑制 AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，其作用机制可能与促进 NOS的活性、增加 NO合成和释放有关。
关键词:异钩藤碱;心肌细胞;肥大;血管紧张素Ⅱ;一氧化氮;一氧化氮合酶
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)05 － 0458 － 03
Inhibitory effect of isorhynchophylline on cardiomyocyte hypertrophy induced by angiotensinⅡ
LI Qiang，HOU Hua － hua，XU Yang，ZHANG Jing － yi，SUN An － sheng*
(Department of Pharmacology of Zunyi Medical College，the Key Laboratory of Basic Pharmacology of Guizhou Province，Zunyi，Guizhou，
563000 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To study the inhibitory effect of isorhynchophylline(Iso)on cardiomyocyte hypertrophy induced by angio-
tensinⅡ(AngⅡ)in vitro，and to explore possible mechanisms． METHODS The primary cardiomyocytes were isolated from neonatal
rats． The cardiomyocyte surface area，protein content，activity of nitric oxide synthetase(NOS)and content of nitric oxide(NO)were
measured． The mRNA expressions of atrial natriuretic factor(ANF)and endothelial nitric oxide synthase(eNOS)of cardiomyocytes
were analyzed by Real time RT － PCR． RESULTS 0． 1 μmol·L －1AngⅡ significantly induced cardiomyocytes hypertrophy． The cell
surface area，protein content and ANF mRNA expression were increased． But the NOS activity and NO content were markedly
decreased． 1，10 μmol·L －1 Iso significantly depressed cardiomyocytes hypertrophy by AngⅡ － induced，increased the activity of NOS
and release of NO，up － regulated the expression of eNOS mRNA，respectively． CONCLUSION Iso can significantly attenuate the car-
diomyocyte hypertrophy induced by AngⅡ，and this effect appears to be related to the increase of NO production and the release．
Key words:Isorhynchophylline;Cardiomyocyte;Hypertrophy;AngiotensinⅡ;Nitric oxide;NOS
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)05 － 0458 － 03
异钩藤碱和钩藤碱为同分异构体，是传统中药 钩藤 Uncaria rhynchophylla(Miq．)Jackson所含主要