全 文 ：过某一阈值时 ,才能使脑中 apoE 的表达产生明显改变。(2)
也许脑中 apoE 的表达本身就不受酒精的过多调节 , 而存在着
其它作用机制 ,有待探讨。
血脂 TC 、TG和 LDL-C 较空白对照组呈上升趋势 , 除 10%
酒精浓度组外 ,差别均有统计学意义(P<0.05);HDL-C 则较
空白对照组呈下降趋势 ,差别均有统计学意义(P<0.05)。一
方面 , 酒精可增加体内脂质的合成率 , 减少氧化脂肪酸的比
例 , 并增加酯化脂肪酸的比例;酒精亦可降低脂蛋白酯酶的
活性 ,使 TG 分解代谢减慢 ,而使血浆 TG 水平上升;酒精耗量
可致 LDL水平的增加可能是因为这些脂蛋白从肝中的释放
不能与肝中 TG 的形成和聚积率保持相同步调[ 5] 。 另一方
面 ,慢性酒精接触可减少唾液酸化作用率 , 导致 apoE 中唾液
酸残粒的缺乏[ 6] , 而 apoE 在 HDL-C 经 apoB 、E 受体转移中(即
逆胆固醇转运过程中)起着重要作用 , apoE 的低唾液酸化作
用使得逆转运到肝脏的胆固醇减少 , 从而可引起血浆 HDL-C
的下降。 再则 , 慢性酒精作用也可能通过阻止 apoE 的分
泌[ 7] , 使进入到血浆中的量减少 , 从而引起相应血脂值的变
化。此外 ,体外实验表明 , 较高浓度的乙醇具有一定程度的溶
脂作用 ,这也可能对脂质代谢产生一定的直接作用。
已有研究表明 apoE 是 AS 等心血管疾病发生的保护因
子[ 8] , 而在本实验研究中 ,当少饮或不饮酒时 , 体内的 apoE 的
表达不会因酒精的摄入发生明显降低 , 同时也不致引起血脂
的过度升高和任何组织的轻微病理改变 , 这一作用效应将为
饮酒人群提供健康饮酒指南。
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收稿日期:2006-12-28
文章编号:1000-8020(2007)06-0740-03 ·实验研究 ·
蕨麻醇提物对小鼠慢性缺氧心肌损伤的保护作用
李建宇　李灵芝1　张新宁　李怡
武警医学院药物化学教研室 ,天津　300162
摘要:目的　研究蕨麻对慢性缺氧心肌损伤的保护作用。方法　建立小鼠慢性缺氧心肌损伤模型 , 经蕨
麻醇提物干预后 ,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含
量 ,并通过 Nagar-Olsen 染色观察心肌损伤程度。结果　与模型组比较 , 5g kg 蕨麻醇提物能显著降低慢性缺
氧小鼠血清 LDH(P<0.01)、CK(P<0.05)水平 , 提高 SOD(P<0.05)活性 , 减少 MDA(P<0.01)含量 , 并能明
显减小心肌缺氧损伤面积。结论　蕨麻对慢性缺氧损伤心肌具有保护作用。
关键词:蕨麻　慢性缺氧　心肌　抗氧化
中图分类号:R282.710.05　R972　　　　　　文献标识码:A
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.30672774)
作者简介:李建宇 ,男 ,助教 ,硕士 ,研究方向:抗心血管系统疾病
药物研究 , Tel:(022)60578198 , E-mail:lijianyu118@163.com
1通讯作者:李灵芝 ,女 , 教授 ,博士 ,博士生导师。 研究方向:抗
老年病药物研究 , E-mail:llzhx@tom.com
　　蕨麻(Potentilla anserina L.)为蔷薇科委陵菜属鹅绒委陵
菜的地下块根 ,是一种分布广泛 、蕴藏量大 、天然优质的野生
藏药资源。研究表明[ 1]其富含淀粉 、脂肪酸及人体所需的十
八种氨基酸和多种维生素 , 具有较高的医疗和营养价值。研
究其活性成分[2 ～ 4] , 发现蕨麻中多糖成分具有显著的提高免
疫力与抗氧化活性 , 其总皂苷及其单体蕨麻苷对病毒性肝炎
有较好的治疗效果。 另据报道[ 5] , 蕨麻可显著提高小鼠在减
压缺氧和窒息性缺氧状态的存活率和存活时间 , 提示其具有
抗缺氧活性。但关于蕨麻对心肌缺氧损伤是否具有保护作用
及其抗缺氧作用的有效部位或成分 , 迄今尚未见文献报道。
740　 　　卫　　生　　研　　究 第36卷
因此 ,本文建立了小鼠慢性缺氧损伤模型 , 观察蕨麻醇提物对
心肌慢性缺氧损伤的影响 , 从而为防治心肌缺氧性疾病的新
药研发提供理论依据。
1　材料与方法
1.1　实验动物
昆明种雌性小鼠 25～ 30g , 由中国人民解放军军事医学科
学院实验动物中心提供 ,许可证号:SCK-(军)2002～ 001。
1.2　药品与试剂
蕨麻购自青海 , 粉碎后用 60%乙醇回流提取 , 减压除净
乙醇得浓缩浸膏 EPot(每克浸膏相当于 3.0g 生药), 以 0.3%
羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配成所需浓度的混悬液。乳
酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙
二醛(MDA)试剂盒 , 均购自南京建成生物工程研究所。
1.3　实验分组
小鼠随机分为正常对照组(每日灌胃给予等体积 0.3%
羧甲基纤维素钠 CMC-Na溶液 , 正常环境下饲养)、慢性缺氧
模型组(缺氧前 1h , 给予 0.3% CMC-Na 溶液灌胃)、蕨麻醇提
物高浓度组(缺氧前 1h , 灌胃给予蕨麻乙醇提取物 5 g kg)和
低浓度组(每日于缺氧前 1h 灌胃给予蕨麻乙醇提取物 2.5 g
kg),每组10只。
1.4　慢性缺氧动物模型的建立[6]
缺氧模型组与蕨麻醇提物干预组小鼠灌胃 1h 后 , 放入常
压缺氧箱内 ,通入氮氧混合气体(N2∶O2=90∶10),测氧仪监测
氧浓度 ,箱内放置钠石灰和氯化钙吸收二氧化碳和水 , 8h 后
将动物取出 ,置于正常环境下饲养 , 第二天重复如上过程 , 持
续 14d。
1.5　观察指标及方法
1.5.1　血清 LDH、CK、SOD活性及 MDA含量的测定　末次缺
氧结束后立即处死各组小鼠 ,股动脉取血 , 比色法测定血清中
LDH 、CK的活性 ,黄嘌呤氧化酶法测定血清中 SOD活性 , 硫代
巴比妥酸法测定血清中MDA 的含量。
1.5.2　心肌组织 Nagar-Olsen 染色　心肌组织石蜡切片 , 常规
脱蜡入水 ,入明矾苏木素液 10 ～ 30s , 蒸馏水洗 ,碱性复红染液
浸染 3min , 蒸馏水 、丙酮依次洗涤 , 0.1%苦味酸丙酮液分化 5
～ 10s。丙酮脱水 , 二甲苯透明 ,中性树胶封片。
1.6　统计方法
数据用 x±s表示 , 用 SPSS10.0 统计软件进行单因素方
差分析。
2　结果
2.1　蕨麻对缺氧小鼠血清 LDH和 CK水平的影响
与正常对照组比较 , 缺氧模型组小鼠血清中 LDH(P <
0.01)、CK(P <0.05)活性显著升高;与缺氧模型组相比 , 蕨麻
醇提物高剂量组可显著降低小鼠血清中 LDH 活性(P <
0.01)、CK 活性(P<0.05);而蕨麻醇提物低剂量组小鼠血清
LDH 、CK活力与缺氧模型组无显著差异(P >0.05)(表 1)。
2.2　蕨麻对缺氧小鼠血清 SOD 活性和MDA含量的影响
与正常对照组比较 ,缺氧模型组小鼠血清中 SOD 活性显
著下降(P<0.01),MDA 含量显著增加(P<0.01);蕨麻醇提
取物高剂量组与模型组相比 ,小鼠血清中 SOD 活性显著提高
(P <0.05),MDA 含量显著减少(P<0.01);而蕨麻醇提取物
低剂量组与模型组相比 ,小鼠血清 SOD活性与MDA 含量均无
显著性差异(P >0.05),(表 2)。
表 1　蕨麻对慢性缺氧小鼠血清 LDH ,
CK活性的影响( X±S , n=10)
组别 剂量(g kg)
LDH
(U L)
CK
(U ml)
正常对照组 - 3111.61±733.90 54.97±11.55
慢性缺氧模型组 - 4323.22±684.15(2) 86.90±36.00(1)
蕨麻醇提物高浓度组 5 3086.61±774.53(4) 54.29±19.26(3)
蕨麻醇提物低浓度组 2.5 3522.32±819.85 70.80±23.27
　　注:与正常对照组比较(1)P<0.05 , (2)P<0.01 ,与缺氧模型组
比较(3)P<0.05 ,(4)P<0.01
表 2　蕨麻对慢性缺氧小鼠血清 SOD活性及
MDA 含量的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
SOD
(U ml)
MDA
(nmol ml)
正常对照组 - 197.22±19.66 7.58±2.29
慢性缺氧模型组 - 157.24±33.36(1) 13.34±3.14(1)
蕨麻醇提物高浓度组 5 188.75±16.75(2) 4.88±2.93(3)
蕨麻醇提物低浓度组 2.5 161.18±14.37 12.27±1.64
　　注:与正常对照组比较(1)P<0.05 ,与缺氧模型组比较(2)P<
0.05 , (3)P<0.01
2.3　Nagar-Olsen染色观察结果(图 1 ～ 4)
光学显微镜下可见 , 正常对照组心肌组织呈黄染 , 结构完
整清晰;缺氧模型组心肌呈红染 , 肌纤维粗大 ,排列紊乱;与模
型组比较 , 蕨麻醇提物高剂量组心肌红染面积显著减小 , 黄染
面积比例增大 , 肌纤维层次结构明显有序;而蕨麻醇提取物低
剂量组虽有部分组织黄染 , 但仍可见大片红染 、排列紊乱的心
肌组织。
图 1　正常对照组(×200)
　
3　讨论
在哺乳动物体内 , 心脏是代谢最旺盛的器官之一 , 在正常
情况下 , 其能量需求可通过氧化磷酸化过程满足 , 但当心肌处
于长期缺氧状态时 , 则会由于能量代谢紊乱 , 影响其形态 、结
构及功能。慢性缺氧对心肌的损伤是冠心病 、慢性阻塞性肺
病 、睡眠呼吸暂停 、高原病等疾病发展过程中重要的病理
改变。
第 6期 李建宇 ,等.蕨麻醇提物对小鼠慢性缺氧心肌损伤的保护作用 741　
图 2　慢性缺氧模型组(×200)
　
图 3　蕨麻醇提物高浓度组(×200)
　
图 4　蕨麻醇提物低浓度组(×200)
　
LDH 是参与细胞能量代谢的一个重要的酶 , 可以催化乳
酸生成丙酮酸 ,同时产生 ATP。心肌缺氧损伤时 ,细胞膜完整
性破坏 ,通透性增加 , LDH 将从胞浆中释放出来 ,因此 LDH 是
反映胞膜完整性的重要检测指标。CK 也是重要的心肌酶之
一 ,其释放量直接反映了心肌缺氧损伤的程度 。故血中 LDH 、
　　　　　　　　
CK活性越高 , 表明心肌损伤越严重。本实验结果显示 ,高剂
量蕨麻醇提物可显著降低小鼠血清中 LDH 、CK 活性 , 说明蕨
麻对慢性缺氧心肌损伤具有一定的保护作用。
Nagar-Olsen 染色是显示缺氧心肌的苏木素碱性复红染色
方法 , 属退行性染色。缺氧心肌对复红液的着色力较强 , 分化
时不易脱色 , 故缺氧损伤的心肌组织呈红色;而正常心肌对分
化液的抵抗力差 , 易脱色 ,故呈黄色或黄棕色。本实验结果显
示 , 高剂量蕨麻醇提物可显著减小心肌缺氧损伤的面积 , 增大
正常心肌组织的比例 , 使肌纤维层次结构接近正常 , 从形态学
方面说明蕨麻对慢性缺氧心肌损伤具有一定的保护作用。
近年来 , 人们认为长期缺氧可引起机体抗氧化防御系统
受损 , 并诱发氧自由基的大量产生 ,使机体的氧自由基产生和
清除的动态平衡遭到破坏 , 引起脂质 、蛋白质和 DNA 的氧化
损伤[ 7] 。有学者认为 ,中药保护心脑血管耐受缺氧的机制之
一可能是提高了机体清除氧自由基的能力[ 8] 。李园媛等报道
蕨麻能减慢空气对高原菜籽油的氧化速度[ 9] 。本实验结果显
示 , 5 g kg 蕨麻醇提取物可显著提高小鼠血清中 SOD活性 , 减
少 MDA的产生 , 表明蕨麻醇提物可通过增强心肌清除自由基
的能力 , 对抗缺氧导致的氧化损伤。但 2.5g kg 蕨麻醇提物 ,
与模型组比较只显示出抗氧化作用的趋势 ,而无显著性差异 ,
提示可能与药物浓度有关 , 具体的量效关系还有待于进一步
的研究。
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