全 文 ：via Miltiorrhiza and Szechuan Lovage Ｒhizome could significantly prolong the blood coagulation time in mice(P ＜ 0． 01)． Through the total
value of blood effects，the role of blood circulation intensity of the effects obtained are:Salvia miltiorrhiza ＞ safflower ＞ peach kernel oil ＞
Szechuan Lovage Ｒhizome ＞ angelica sinensis ＞ Herba Leonuri． Conclusion:Those herbs tested in the research showed certain blood-promo-
ting effect with varying intensity，can provide reference for relevant studies．
Key words promoting-blood circulation effects of herbs;acute blood stasis rat model;mice thrombosis;
柳叶蜡梅对脂肪乳剂致食积证模型大鼠的影响
*
温慧萍1，雷伟敏2，吴宇锋3，吕圭源3，陈素红3＊＊
(1同济大学丽水中药研究院，丽水 323000;2丽水学院，丽水 323000;3温州医学院，温州 325035 )
摘 要 目的:探讨柳叶蜡梅水提物对脂肪乳剂致食积证模型大鼠的影响。方法:采用脂肪乳剂隔天灌胃 52 天建立食积证
大鼠模型，同时每天灌胃给予受试药。给药后 38 天进行 D-木糖吸收试验，测定血清 D-木糖含量并计算 D-木糖相对残留率;末次实
验采用幽门结扎法取胃，测定胃内容物体积、胃液体积、胃液酸度、胃液中胃蛋白酶活力和胃蛋白酶排出量、胃组织胃蛋白酶活力，
同时取大鼠血清，测定血清中的 NO、NOS含量。结果:与正常对照组比较，模型对照组大鼠胃液胃蛋白酶活力和排出量、血清木糖
残留率、相对木糖残留率降低，而胃内容物体积、胃液体积、NO、iNOS 含量显著性升高。与模型对照组比较，柳叶蜡梅( 0． 5g /kg、2．
0g /kg、4． 0g /kg) 剂量组大鼠血液木糖残留率和相对木糖残留率、胃蛋白酶排出量均显著性增加，而胃内容物总体积和胃液体积显著
性降低，其中柳叶蜡梅低中剂量组( 0． 5g /kg、2． 0g /kg) 能显著性降低 iNOS含量。结论:柳叶蜡梅能增加大鼠进食量、提高血清 D-木
糖残留率，减少大鼠胃内容物体积，促进胃蛋白酶的分泌，减少 NO、iNOS的产生，提示其有明显的促进消化作用。
关键词 柳叶蜡梅;食积证;胃蛋白酶;iNOS
柳叶蜡梅 (Chimonanthus salicifolius S． Y． H)为蜡梅科蜡梅
属植物［1］，主要分布于浙江、江西、安徽等地，在民间应用极其
广泛，主要以其茎叶煎汤口服，用于治疗因感受风寒而引起的
肚痛肚胀、腹泻，或因饮食不当而引起的食积证、腹部胀痛和小
儿疮积等症［2］。目前，除曾有柳叶蜡梅对抗腹泻及治疗盆腔炎
的研究文献报道之外，对本品的其他药理研究极少，本实验旨
在探讨柳叶蜡梅用于饮食不当的食积症，通过观察柳叶蜡梅水
提物对食积症大鼠促胃肠消化作用的实验研究，对其可能作用
机制进行了初步探索，并为进一步发现柳叶蜡梅的有效作用部
位及药理作用机制提供线索。
1 材料和方法
1． 1 试验药物 柳叶蜡梅药材购置于浙江丽水松阳种植基地，
经浙江大学傅承新教授鉴定为蜡梅科(Calycanthaceae)蜡梅属
(Chimonanthus)柳叶蜡梅(Chmonanthus salicifolius S． Y． H) ;乳
酸菌素片，海南海神同洲制药有限公司。
精密称取柳叶蜡梅药材 1500g，加 6 倍体积的饮用水，水煎
煮提取 2 次(第 1 次 2h，第 2 次 1h) ，合并两次滤液，旋转蒸发浓
缩至含生药量为 1g /ml的药液，作为原液，用此原液分别配制成
0． 1g /ml，0． 4g /ml，0． 8g /ml 的药液，分别作为柳叶蜡梅水提物
0． 5g /kg(0． 5g生药 /kg体重)、2． 0g /kg(2． 0g生药 /kg体重)、4．
0g /kg(4． 0g生药 /kg体重)。取乳酸菌素片，即每 24 片稀释成
100ml，超声混匀，即得浓度为 0． 096g /ml的药液。
1． 2 动物 SD 大鼠 60 只，雄性，体重 120 ～ 140g，体重的差异
不超过平均体重的 10%。许可证号 SCK(浙)2008-0033，由浙
江省实验动物中心提供。取猪油 25g 放入 100ml 烧杯，于磁力
搅拌器上加热至 100℃，分别加入 5g胆固醇和 5g奶粉，溶化，再
加入 1g丙硫氧嘧啶，充分搅匀，然后加入 25ml 吐温-80，制成油
相。同时另一烧杯中加入 30ml 蒸馏水和丙二醇 20ml，加热至
60℃，加入 2g去氧胆酸钠，充分搅拌直至完全溶解，制成水相。
然后将水相加入油相，即制成脂肪乳剂原液，将此原液用水稀释
5 倍作为造模药液。
1． 3 试剂 猪油:取新鲜肥猪肉熬制而成、胆固醇:杭州诚信医
疗仪器有限公司，批号 100315、奶粉:黑龙江双城雀巢有限公
司、丙硫氧嘧啶片:批号 110101，南通精华制药有限公司、去氧
胆酸钠:批号 110805，上海伯奥生物科技有限公司。胃蛋白酶
测试盒:批号 20120113，南京建成生物工程研究所;考马斯亮兰
测试盒:批号 20111229，南京建成生物工程研究所、D-木糖试剂
盒:批号 20120113，南京建成生物工程研究所。
1． 4 仪器 SELECTＲA-E 全自动生化仪(荷兰威图) ;微量离
心机(Microcl17，美国 Thermo)、高速冷冻多管离心机(37520，美
国 Heraeus) ;放免仪器(r-911 全自动放免计数仪，中国科技大
学实业总公司生产)。
1． 5 方法 大鼠 60 只，随机为 6 组:正常对照组、模型对照
组、阳性对照组、柳叶蜡梅 (0． 5g /kg、2． 0g /kg、4． 0g /kg)剂量
组，每组 10 只，除正常对照组外，其他各组均其余各组采用脂肪
乳剂隔天灌胃，0． 5ml /(100g·2d) ，持续 52 天，建立食积证大鼠
模型，且正常对照组及模型对照组给予相应体积的蒸馏水，阳性
对照组给予 0． 48g /kg乳酸菌素溶液，其他给药组给予不同剂量
28 中药药理与临床 2013;29(5)
* 项目来源:丽水市科技计划项目( 20100408) ＊＊通讯作者
的柳叶蜡梅水提取液。
1． 5． 1 体征指标观测 监测体重，观察大鼠体重变化趋势，并
观测大鼠的饮食变化
1． 5． 2 D-木糖吸收试验［3］ 于给药第 38 天一次性给予 0．
6mg /ml的 D-木糖溶液 1ml /200g，4h 后取血，按照 D-木糖测试
盒说明书测定血清中 D-木糖残留量，以正常对照组木糖残留量
的均值为 100%，求其他组与正常对照组均值的百分比，即为大
鼠血清 D-木糖相对残留率。
1． 5． 3 胃内容物总体积、胃液体积和 pH值 实验结束前各组
动物禁食不禁水 12h，乙醚麻醉大鼠，采用幽门结扎法收集 4h
内排出的胃内容物并记录体积，以此作为为内容物总体积，将
胃内容物离心，取上清液并记录体积，以此作为胃液体积，然后
采用 pH计测定胃液酸度。
1． 5． 4 胃液胃蛋白酶活力和胃蛋白酶排出量［4］ 胃液中胃蛋
白酶活力测定方法:取胃液 1ml 放入 50ml 的三角烧瓶中，加入
0． 05mol / l 盐酸溶液 15ml，摇匀，放入新鲜制作的蛋白管两根。
塞好瓶口，在 37℃恒温箱中孵育 24 小时，取出蛋白管，测量蛋
白管两端透明部分的长度(mm) ，以四端之值求其平均值，计算
胃蛋白酶活力和胃蛋白酶排出量，计算公式如下:
胃液胃蛋白酶活力(μ /ml) =四端蛋白管透明部分长度均
值 2 × 16
胃蛋白酶排出量(μ /h)= 胃蛋白酶活力 ×每小时胃液量
1． 5． 5 胃组织胃蛋白酶活力 胃蛋白酶可水解蛋白产生含酚
的氨基酸，而酚试剂可被含酚的氨基酸还原成蓝色物质，据此
可通过比色法测定胃组织的胃蛋白活力。本实验取大鼠胃组
织 0． 5g，加 4． 5ml胃蛋白酶测试盒提供的匀浆介质，采用考马
斯亮兰法测定胃组织蛋白含量，然后按照说明书操作步骤测定
胃蛋白酶含量。
1． 5． 6 测定大鼠血清中影响胃肠排空的指标 NO、NOS 含量
取血清，采用酶免法，按照相应试剂盒说明书测定，其中 NOS测
总型 tNOS和分型 iNOS。
2 结果
2． 1 对大鼠体征的影响 各组大鼠体重变化差异不是很明显，
模型对照组体重的增长幅度与给药对照组比，稍显降低，但不
存在显著性差异。造模对大鼠的饮食有一定的影响，其中模型
组的大鼠进食量略低于其他组，但不存在显著性差异。
2． 2 对 D-木糖吸收的影响 如表 1 所示，与正常对照组比较，
模型对照组每 ml血液木糖残留率和相对木糖残留率均显著降
低(P ＜ 0． 01) ;与模型对照组比较，柳叶蜡梅各剂量组血清木糖
残留率均显著升高(P ＜ 0． 01)。
表 1 各组大鼠血清 D-木糖吸收的比较(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
每 ml血液木糖
残留率(%)
相对木糖
残留率(%)
正常对照 2． 10 ± 0． 32＊＊ 100． 00 ± 0． 32＊＊
模型对照 0． 34 ± 0． 11 16． 34 ± 0． 11
乳酸菌素 0． 48 1． 17 ± 0． 30＊＊ 55． 73 ± 0． 30＊＊
柳叶蜡梅 0． 5 0． 68 ± 0． 17＊＊ 32． 54 ± 0． 17＊＊
柳叶蜡梅 2． 0 0． 65 ± 0． 21＊＊ 30． 96 ± 0． 21＊＊
柳叶蜡梅 4． 0 0． 71 ± 0． 22＊＊ 33． 53 ± 0． 22＊＊
与模型对照组比较 * P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01(下同)
2． 3 对胃内容物总体积、胃液体积及胃液 pH值的影响 如表
2 所示，与正常对照组比较，模型对照组大鼠胃内容物总体积和
胃液体积显著增加，胃液 pH 值显著降低;与模型对照组比较，
柳叶蜡梅组大鼠胃内容物总体积，胃液体积均降低，胃液 pH 值
均无显著变化。
表 2 各组大鼠胃内容物体积、胃液体积的比较(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
胃内容物
总体积(ml)
胃液体积
(ml)
胃液 pH值
正常对照 4． 98 ± 1． 55＊＊ 4． 65 ± 1． 43＊＊ 1． 31 ± 0． 09＊＊
模型对照 7． 60 ± 2． 46 6． 73 ± 1． 85 1． 11 ± 0． 02
乳酸菌素 0． 48 5． 23 ± 1． 10＊＊ 4． 30 ± 0． 74＊＊ 1． 12 ± 0． 02
柳叶蜡梅 0． 5 6． 63 ± 1． 95* 5． 86 ± 1． 86* 1． 12 ± 0． 06
柳叶蜡梅 2． 0 6． 52 ± 1． 48* 5． 53 ± 1． 34* 1． 13 ± 0． 09
柳叶蜡梅 4． 0 6． 43 ± 1． 61* 5． 79 ± 1． 48* 1． 11 ± 0． 02
2． 4 对胃液中胃蛋白酶活力、胃蛋白酶排出量、胃组织胃蛋白
酶活力的影响 如表 3 所示，与正常对照组比较，模型对照组大
鼠的胃液胃蛋白酶活力和排出量均降低，胃组织胃蛋白酶活力
无显著升高;与模型对照组比较，柳叶蜡梅组胃蛋白酶活力及胃
蛋白酶排出量及胃液胃蛋白酶活力显著升高，三剂量组的胃蛋
白酶排出量均显著升高。
表 3 各组大鼠胃液胃蛋白酶活力和排出量、胃组织胃蛋白酶活力
的比较(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
胃液中胃蛋白
酶活力(μ /ml)
胃蛋白酶排出量
(μ /h)
胃组织胃蛋白
酶活力(U)
正常对照 191． 48 ± 18． 84* 207． 71 ± 50． 68* 46． 97 ± 12． 08
模型对照 166． 99 ± 38． 17 187． 38 ± 41． 87 43． 89 ± 13． 13
乳酸菌素 0． 48 242． 85 ± 30． 77＊＊ 397． 02 ± 65． 07＊＊ 66． 25 ± 17． 00＊＊
柳叶蜡梅 0． 5 218． 11 ± 33． 52* 307． 62 ± 68． 45＊＊ 55． 75 ± 15． 40
柳叶蜡梅 2． 0 208． 43 ± 39． 57* 281． 63 ± 66． 09＊＊ 53． 51 ± 12． 84
柳叶蜡梅 4． 0 213． 86 ± 36． 36* 302． 89 ± 60． 42＊＊ 55． 21 ± 12． 78
2． 5 对大鼠血清中影响胃肠排空的指标 NO、NOS 含量的影响
如表 4 所示，与正常对照组比较，模型对照组大鼠的 NO、iN-
OS含量显著性升高(P ＜ 0． 01) ;与模型对照组比较，柳叶蜡梅
(0． 5，2． 0g /kg)剂量组 NO、iNOS显著性降低(P ＜ 0． 01)。
表 4 各组大鼠血清中 NO、NOS含量的影响(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
NO
(umol /ml)
tNOS
(U /ml)
iNOS
(U /ml)
正常对照 28． 77 ± 3． 95* 17． 80 ± 4． 36 1． 84 ± 0． 48＊＊
模型对照 30． 65 ± 6． 32 19． 13 ± 6． 02 4． 22 ± 0． 82
乳酸菌素 0． 48 24． 34 ± 5． 69* 16． 13 ± 4． 39 1． 92 ± 0． 54＊＊
柳叶蜡梅 0． 5 28． 09 ± 8． 00* 19． 09 ± 5． 12 3． 04 ± 0． 54*
柳叶蜡梅 2． 0 25． 71 ± 4． 97* 16． 49 ± 5． 12 3． 00 ± 0． 44*
柳叶蜡梅 4． 0 28． 63 ± 6． 72 19． 83 ± 5． 23 2． 88 ± 0． 50*
3 讨论
食积又称积滞，它是因饮食不当、暴饮暴食，影响到机体
的消化功能，使食物停滞胃肠所形成的一种胃肠道疾患。临床
上以食不能消化、嗳气酸馊、肚腹胀满、大便干燥或时干时稀、舌
苔厚腻、脉滑为主要表现，从西医角度来看，食积症表现为消化
不良，为消化腺体分泌少，消化酶活力弱，肠道吸收障碍，消化及
吸收功能相对滞后，容易造成食物停积胃肠［5］。柳叶蜡梅在畲
民中被广泛应用于过食油腻导致的消化不良以及脘腹胀痛，因
此本实验模仿民间过食油腻的饮食习惯造模，采用灌胃脂肪乳
剂的方法造成大鼠食积症。本实验显示与正常对照组相比，模
型组大鼠具有以下特点:①每 ml血液木糖残留率和相对木糖残
38中药药理与临床 2013;29(5)
留率均显著降低。②胃内容物总体积，胃液体积增加，胃酸降
低。③胃蛋白酶活性及胃蛋白酶体积均减少。④血清中 NO，
iNOS均升高，大鼠血清中 NO，iNOS 均升高，iNOS 在病理状态
刺激下，进行转录与翻译，产生 iNOS，从而刺激 NO 释放，从而
引起细胞毒性的产生，iNOS升高与休克、肠粘膜损伤、细胞氧利
用障碍、肠道炎症介质及胃肠吸收障碍密切相关［10］。以上实验
结果表明，脂肪乳剂所致的食积症模型成立。
食积症首先表现出小肠吸收功能障碍，木糖为五碳糖，可
直接在小肠吸收，不需要消化酶参与。吸收后在体内不被肝脏
代谢，经肾排出。因此，定量给予木糖后在一定时间内测定血中
木糖含量即可了解小肠的吸收功能，进而考察药物对小肠吸收
功能的影响［6］，实验结果表明，柳叶蜡梅各个剂量都能明显增
加模型大鼠的小肠吸收功能。为进一步研究柳叶蜡梅的药效，
本实验进一步对胃内容物体积，胃蛋白酶活力及血清 iNOS 等
指标进行了研究［7 ～ 9］，各指标显示柳叶蜡梅水煎液各剂量组可
以显著性促进脂肪乳剂模型大鼠胃内容物总体积，胃液体积的
减少，从而减少胃内容物的滞留而起到缓和消化不良的作用;
并能进一步显著性增加胃液中胃蛋白酶的活力及其排出量，促
进消化吸收功能［7］;最后，柳叶蜡梅低中剂量(0． 5 g /kg、2． 0g /
kg)通过减少 iNOS 的产生，缓和胃肠道吸收障碍等，从而起到
改善脂肪乳剂模型大鼠消化不良的状况。
以上结果表明，柳叶蜡梅水煎煮液能够缓解脂肪乳剂导致
的食积症。
参考文献
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10 罗霜．姜黄素促进小鼠胃肠蠕动作用及机制初步探讨． 青岛大学，
2012∶ 1 ～ 2
乌蕨对 S180 荷瘤小鼠的抑瘤作用*
吴丽珍，曹性玲，周 青，眭荣燕，黄志华＊＊
(赣南医学院，赣州 341000)
摘 要 目的:观察乌蕨水提取物对荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对血清超氧化物歧化酶( superoxide dismutase，SOD) 、谷胱甘肽
过氧化物酶( glutathione peroxidase，GSH-PX) 的活性及丙二醛( malondialdehyde，MDA) 、一氧化氮( nitric oxide ，NO) 含量的影响。方
法:采用右前肢腋部皮下接种 S180 腹水瘤方法建立 S180 荷瘤小鼠模型。于造模后第二天，灌胃给予不同剂量的乌蕨水提取物( 2．
5，5，10 g /kg) 或生理盐水，连续 14 d。观察小鼠体重变化，计算瘤重和肿瘤指数、脾脏指数及胸腺指数，测定小鼠血清中 SOD、GSH-
PX的活性及 MDA、NO的含量。结果:2． 5，5，10 g /kg乌蕨组小鼠肿瘤生长明显受到明显抑制;脾脏指数降低，胸腺指数升高;血清
SOD活性升高，以 5，10 g /kg乌蕨组效果较好; 2． 5 及 10 g /kg乌蕨组小鼠血清 MDA含量比模型组降低; 2． 5 g /kg乌蕨组小鼠血清
NO含量高于模型组，与 CP组相比，2． 5，5 g /kg乌蕨组小鼠血清 NO含量升高; 2． 5 g /kg乌蕨组小鼠血清 GSH-PX活性升高。结论:
乌蕨水提取物具有抗肿瘤作用，其抑瘤作用可能与提高小鼠的抗氧化能力有关。
关键词 乌蕨;S180 荷瘤小鼠;抑瘤作用;抗氧化
乌蕨(Stenoloma Chusanum(L．)Ching)为鳞始蕨科植物的
全草和根茎［1］，具清热、解毒、利湿、止血等功效。药理学研究
表明，乌蕨水提液、乙醇提液及丙酮提液种对超氧阴离子自由
基和羟自由基均有清除作用［2］;乌蕨总黄酮具有较强的抗氧化
性能、自由基清除能力和一定的还原力，可有效抑制脂质过氧
化［3］。肿瘤的发生发展与宿主的自由基水平及其代谢产物有
关［4，5］。乌蕨能通过提高机体的抗氧化能力而起抑制肿瘤的作
用未见相关报道。本实验拟建立 S180 荷瘤小鼠模型，观察乌蕨
对小鼠 S180 肿瘤生长的抑制作用，并检测荷瘤小鼠血清 SOD、
GSH-PX活性和 MDA、NO 含量的变化，探讨其对肿瘤的抑制作
用及机制。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 乌蕨水提取物:乌蕨晒干后粉碎至粗粉，取适
量蒸馏水加热提取 3 次，每次 30 min，过滤，合并 3 次滤液并浓
48 中药药理与临床 2013;29(5)
* 基金项目:赣南医学院青年基金项目( NO: YB201219) ＊＊通讯作者