全 文 :现代生物医学进展 www.shengwuyixue.com Progress inModern Biomedicine Vol.16 NO.19 JUL.2016
doi: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.19.012
前言
罗勒(Ocimum basilicum L.)被古希腊人称为 香草之王 ,
别名九层塔或十里香,是最大众化的料理用香草[1];罗勒是多年
生草本植物,唇形科罗勒属,英文名 Basil[2, 3]。罗勒属植物中变
种及品种繁多,如斑叶罗勒、丁香罗勒、捷克罗勒、德国甜罗勒
等。在众多罗勒品种中,以甜罗勒、灌木罗勒、皱叶罗勒、紫红罗
勒、丁香罗勒等六种较广泛为大众所采用[4]。罗勒的茎、叶富含
挥发油、黄酮类及香豆素等成分,是重要的调香原料[5,6]。目前,
罗勒气味芳香,花色鲜艳,其芳香油具有药用功效且可用于制
造香水,另外罗勒在欧美各国是一种常用的香辛调味蔬菜[7,8]。
罗勒作为药食兼用的芳香植物,日益成为国内外化工及医疗保
健食品研发的热点和重点材料。
研究揭示罗勒资源的香味成分因种类和品种不同而差别
明显。廖超林等利用气相色谱 -质谱计算机联用仪技术在对泰
国圣罗勒精油(Holy basil oil)的挥发性化学成分进行研究分
析,分离鉴定了 22种成分,其主要成分分别是石竹烯、丁香酚、
甲基桉叶烯等为其主要成分,其中石竹烯的相对含量占
45.88%[9];何道航等利用水蒸气蒸馏法和 GC-MS技术对紫罗
勒进行香味成分分析,结果表明粤产紫罗勒精油的主要成分有
芳樟醇、龙蒿脑及榄香烯等,其中龙蒿脑的相对含量占到了
66.81%[10];李玲玲等利用气相色谱与气质联用仪以丁香罗勒为
材料,建立了丁香罗勒精油的测定方法,并确定大根香叶酮 D、
丁香酚、石竹烯等为其主要香味成分 [11];黄碧兰等采用固相微
河南栽培罗勒和丁香罗勒的香气成分差异分析 *
王 娟 1 李晋华 1 王婷婷 1 黄建波 2 熊桂华 2△
(1云南师范大学文理学院 云南昆明 650224;2云南省昆明市政工程设计科学研究院有限公司 云南昆明 650228)
摘要 目的:分析河南栽培罗勒(Ocimum basilicum L.)和丁香罗勒(Ocimum gratissimum L.)成龄叶香气成分的差异。方法:于 2015
年 7月在云南师范大学呈贡校区随机采取长势健壮、无病虫害的河南栽培罗勒和丁香罗勒的成龄叶(自下而上第 5、6片叶),采用
气相色谱 -质谱联用(GC-MS)进行检测;根据峰面积归一化法测定各个组分的相对百分含量。结果:河南栽培罗勒中检出 24种香
气物质,丁香罗勒中有 26种。其中,1,3-二甲氧基苯、石竹烯、乙苯等是 2种罗勒共有的主要香气成分。香叶醛、β-蒎烯、薄荷二烯
是河南罗勒的主要特有香味成分;蒿脑、桉树脑及异龙脑是丁香罗勒的特有成分。结论:河南栽培罗勒和丁香罗勒种的叶片中香
气成分的种类和含量存在明显差异。
关键词:河南栽培罗勒;丁香罗勒;成龄叶;香气成分;气相色谱 -质谱联用
中图分类号:S573 文献标识码:A 文章编号:1673-6273(2016)19-3650-04
Differential Analysis of the Aroma Components of Ocimum Basilicum and
Ocimum Gratissimum in Henan*
WANG Juan1, LI Jin-hua1, WANG Ting-ting1, HUANG Jian-bo2, XIONG Gui-hua2△
(1 The College of Art and Sciences Yunnan Normal University, Kunming, Yunnan, 650224, China;
2 Yunnan Municipal Engineering Design Institute Co., Ltd., Kunming Yunnan, 650228, China)
ABSTRACT Objective: To analyze the differences of aroma components between Ocimum basilicum L. and Ocimum gratissimum
L. by GC/MS technology. Methods: Adult leaves (The fifth or sixth leaf from top to bottom) of the two kinds of basils were selected. The
volatile compounds of both basils were tested by GC-MS, each component was established on the basis of the relative peak area. Results:
There were 24 kinds of aroma components from Ocimum basilicum in Henan, 26 kinds of aroma components in Ocimum gratissimum.
The two basils shared 18 major aroma components, including 1, 3-dimethyl-Benzene, Caryophyllene and Ethylbenzene. The major aroma
components of Ocimum basilicum in Henan were β-Pinene, Menthatriene and Citral. The major aroma components of Ocimum gratissi-
mum were Estragole, Eucalyptol and Isoborneol. Conclusions: There were significantly differences in both aroma kinds and relative con-
tents between t Ocimum basilicum L. and Ocimum gratissimum L.
Key words: Ocimum basilicum in Henan; Ocimum gratissimum; Adult leaf; Aroma components; GC/MS
Chinese Library Classification(CLC): S573 Document code: A
Article ID: 1673-6273(2016)19-3650-04
*基金项目:云南省应用基础研究面上项目(2013FB093)
作者简介:王娟(1982-),女,硕士,研究方向:园艺植物栽培教学及科研工作
△通讯作者:熊桂华(1982-),女,硕士,助理研究员,研究方向:设施园艺,E-mail: hjyan8203@126.com
(收稿日期:2015-12-22 接受日期:2016-01-18)
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图 1 河南罗勒和丁香罗勒带花序的枝条;
A.河南罗勒;B.丁香罗勒
Fig.1 The branch with inflorescences
A. Ocimum gratissimum in Henan B. Ocimum basilicum
萃取(SPME) 对 3个不同罗勒种叶中香气成分的 GC-MS分析
发现β-蒎烯是 3种罗勒共有的主要香气成分[12]。
河南凉拌菜中经常用一种叫做“荆芥”的香草,吃法是和蒜
蓉或黄瓜一起凉拌,也可以拌入凉面,做汤等,其实是一种罗勒
品种(Ocimum basilicum L.)。关于河南栽培的罗勒香味成分还
尚未见报道。丁香罗勒是一年生草本植物,叶属温性,用于调制
意大利菜,混在蒜、番茄中味道独特,增加口感。本研究采用正
己烷萃取法对河南罗勒和丁香罗勒成熟叶的香味进行提取,采
用气相色谱 -质谱联用仪对这两种供试材料进行香气成分及
相对含量分析,以期了解河南栽培罗勒和丁香罗勒香气成分的
差异,为进一步研究罗勒香气成分、及新品种培育提供理论基
础和依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
河南栽培罗勒(O. basilicum in Henan)(图 1A)和丁香罗勒
(O. gratissimum) (图 1B)样品采自云南师范大学罗勒资源圃(呈
贡校区),其中河南栽培罗勒引自河南周口;丁香罗勒引自江西
南昌,选取长势健壮的成龄叶(自下而上第 5及 6片叶)进行检
测,且每一样品选择 3个单株进行 3次重复试验。
1.2 仪器
GC,HP 6890A/MS,HP 5973,美国 Agilent Technologies制
造。
1.3 方法
各称取样品 1 g放入 10 mL样品瓶中,分别加入 5 mL正
己烷,4℃萃取 12 h,取上清 200 μL用 GC-MS仪分析。
1.4 GC/MS分析参数及条件
样品放置于顶空进样仪(75 μm CAR/PD MS SPME fiber.
Supelco, Bellefonte,PA,USA)中,45℃预热并平衡 30 min后取
样进行 GC/MS分析。
GC条件:将样品依次放在 GC/MS仪进样室中,柱温温度
50℃,程序升温 10℃/min至 180℃,保持 5 min,再程序升温
10℃/min至 240℃,保持 5 min;柱流量为 1.0 ml/min;进样口
温度 250℃;柱前压 100 kPa,分流比 10:1;载气为高纯氦气。
MS条件:电离方式 EI;电子能量 70 eV;传输线温度 250
℃;离子源温度 230℃;灯丝发射电流为 150 μA;扫描质量范
围 35-500 amu,扫描每次 2.45 s。
1.5 香气成分分析
将 G1701BA工作站数据处理系统、wiley7n.1标准图谱检
索与人工谱图分析以及峰面积归一化法相结合进行定性、定量
分析。GC-MS联用技术分析的峰面积是花香成分量的直观表
现,可以反映花朵香味物质量。
2 结果
2.1 总离子流图
将正己烷萃取的上清液用 GC-MS分析,图 2是河南栽培
罗勒的香气成分总离子流图;图 3是丁香罗勒的香气成分总离
子流图。
图 2 河南罗勒 GC/MS总离子图
Fig.2 Total ion GC/MS of the volatile compounds in leaves of Ocimum gratissimum in Henan
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2.2 香气成分分析结果
对正己烷萃取法提取的河南栽培罗勒和丁香罗勒的香气
成分进行 GC-MS比较分析,通过与标准谱图对照、分析发现这
两种罗勒品种的香气成分差别较大,分析结果见表 1。
图 3 丁香罗勒 GC/MS总离子图
Fig.3 Total ion GC/MS of the volatile compounds in leaves of Ocimum basilicum
表 1 河南栽培罗勒和丁香罗勒的香味分成
Table 1 The volatile compounds of Ocimum basilicum in Henan and Ocimum gratissimum
编号 No. 延伸时间 RT 物质 Compound
相对面积 Relative area (%)
河南栽培罗勒 丁香罗勒
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
3.274
4.747
5.790
8.015
8.213
8.583
15.068
16.746
18.140
19.551
22.096
23.106
27.361
29.183
29.737
31.025
31.899
32.727
33.759
33.998
34.039
34.111
34.149
34.754
42.228
43.936
45.165
47.733
51.654
三氯乙烯 trichloroethylene
甲苯 Toluene
2-甲基苯乙胺 2-methyl-Benzeneethanamine
苯乙胺 Phenethylamine
乙苯 Ethylbenzene
1,3-二甲氧基苯 1,3-dimethyl-Benzene
萜品烯 -4-醇 Terpinene-4-ol
1-辛烯基甲酯 Octen-1-ol , acetate
桉树脑 Eucalyptol
苯二酚 1,2-Benzenediol
替苯丙胺 Tenamfetamine
2-氯代乙酰胺 2-chloro-Acetamide
异龙脑 Isoborneol
丁酯 butyl ester
蒿脑 Estragole
W -愈创水烯W - Guaiene
3-蒈烯 3-Carene
薄荷二烯 p-Menthatriene
蒎烯 β-Pinene
卡拉烯 Calamenene
W -杜松烯W-Cadinen
T -荜茄醇 T-Cadinol
斯巴醇 Spathulenol
香叶醛 Citral
西松烯 Cembrene
石竹烯 Caryophyllene
6, 10, 14三甲基十五烷 -2-酮 6,10,14-Trimethyl-2-Pentadecanone
邻苯二甲酸异丁酯 Isobutyl phthalate
1,5-二甲氧基环己烯 1,5-dimethyl-Cyclohexene
2.43
13.80
0.69
0.71
7.11
16.13
0
0.42
0
0.80
0
0
0
0.35
0
0.36
3.81
9.19
9.28
0.67
0.70
0.57
0.37
21.65
1.29
4.79
0.93
1.18
2.87
0.74
3.91
0.17
0.20
2.08
4.57
0.27
0.17
3.06
0.17
0.35
0.40
1.44
0.36
76.96
0.15
0
0
0
0
0.30
0.40
0.18
0.36
0.14
0.40
0.36
1.01
0.73
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通过 GC/MS分析鉴定,从河南栽培罗勒叶挥发性成分中
鉴定出了 23种香气成分;从丁香罗勒叶中挥发性成分中鉴定
出了 25种香气成分,其成分主要为烯、烷、醇、酮、酯等。
2种罗勒品种的主要挥发性成分及相对含量见表 1,2种
罗勒含有共有的化合物有 18种,分别为 1,3-二甲氧基苯、丁
酯、石竹烯、甲苯、三氯乙烯、2-甲基苯乙胺、苯乙胺、乙苯等。河
南罗勒的主要香味成分为香叶醛、1,3-二甲氧基苯、β-蒎烯、薄
荷二烯,其相对含量分别为 21.65%、16.13%、9.28%和 9.19%(表
1)。而蒿脑、桉树脑及甲苯这 3种化合物的相对含量的总和为
83.93%,蒿脑含量较高,相对含量达 76.96%,是构成丁香罗勒
的主要香气成分。β-蒎烯、薄荷二烯等萜类化合物以及一些不
同结构的酯类化合物也对河南栽培罗勒具有独特香气有一定
的贡献。此外,β-蒎烯、薄荷二烯、3-蒈烯等是河南罗勒独有的
化合物成分,而蒿脑、桉树脑及异龙脑是丁香罗勒的特有成分。
3 讨论
关于罗勒叶芳香成分,黄碧兰等研究表明罗勒、台湾罗勒
和丁香罗勒成龄叶的香气成分,结果表明 3个罗勒品种的叶片
中香气成分的种类和含量存在明显差异[12];李建文等用气质联
用仪分析罗勒精油成分,得到罗勒挥发油成分 27种[13],其中桉
树脑、1 -乙烯基 -1-甲基 -2,4-二度( 1 -甲基乙烯基)-环己烷、
石竹烯为主要成分,这与本实验结果所述略有不同,但此文献
所述的蒿脑、樟脑,双环 -倍半水芹烯等 10多种成分在水蒸馏
提取的精油成分中没有发现。Dicesare等和 Lucchesi等的测定
罗勒成分中的蒿脑、β-蒎烯和薄荷二烯等为主要成分与本研究
结果相同[14,15]。香气成分的种类种类的差别及相对含量的差异
造成了不同品种的罗勒具有不同的香型[16,17]。与丁香罗勒相比,
引自河南的栽培罗勒香气不刺激、较温和,这与其蒿脑含量相
对较低有关。而江西引种的丁香罗勒香味清冽、较浓、有刺激
性,带有小茴香型香气,这可能与其含有 76.96%的蒿脑有关。
罗勒植物作为药食兼用的植物在河南、江西、安徽等地的
应用历史悠久,有重要的研究开发价值。随着现代分析检测和
分离技术的发展,国内外研究者已从罗勒中鉴定出了多种化合
物,发现了很多具药理作用的物质,并且罗勒精油的销售比例
逐年增加[18-20]。可见罗勒作为一种原料丰富、应用广泛的植物,
无论在传统医学还是现代药理方面均表现出较强的应用价值。
本研究采用正己烷萃取法对河南罗勒和丁香罗勒成熟叶的香
味进行提取,采用相色谱 -质谱联用仪对这两种不同罗勒品种
的挥发性香气成分及含量进行分析,为进一步研究不同品种的
罗勒挥发性香气成分的差异及新品种选育提供理论基础。
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