全 文 ：药　物　生　物　技　术
Pharmaceutical Biotechnology　2004 ,11(1):25 ～ 28
青藏高原蕨麻植物抗氧化作用的研究
李园媛1 , 2 ,袁勤生2
(1.青海师范大学生命科学系 , 广西 西宁 810008;2.华东理工大学生工学院 , 上海 200237)
摘　要　青藏高原蕨麻抗氧化作用的研究采用 Na2S2O3-I2 碘量法及 DDPH·法测定干鲜蕨麻提取物的抗氧
化作用 ,结果表明:不同溶剂蕨麻提取物对高原菜籽油的抗氧化作用依次是 PBS>冰乙酸>水>甲醇>氯仿>
正己烷>乙酸己酯>石油醚;不同浓度乙醇溶液蕨麻提取物 , 对 DPPH·清除率依次是 75%乙醇>50%乙醇>
30%乙醇>95%乙醇>无水乙醇。在两种实验方法中 ,证明干鲜蕨麻提取物都具有较好的抗氧化作用 , 鲜蕨麻
提取物的抗氧化作用要强于干蕨麻。
关键词　蕨麻;二苯代苦味酰基自由基;抗氧化作用
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1005-8915(2004)01-0025-04　　
　　在《中国高等植物图鉴》和《新编拉汉英植物名
称》中 ,蕨麻(Patenti llaunserina)属蔷薇科鹅绒委
陵菜属植物的块根 ,又名人参果 、长寿果 、蓬莱果
等 ,蕨麻藏语称“卓老沙僧”是一种常用藏药 ,具有
健脾益肾 ,生津止渴 ,益气补血等功效[ 1] ,生于海
拔 2 500 ～ 4 500米的草甸 、河漫滩附近 。分布面分
34 057平方千米 ,资源量约为 415吨 ,青海省主产
于黄南 ,海南 ,果洛 ,玉树等地 ,海拔 2 500 ～ 4 500
米的森林 、灌丛 、草曼河滩地 、向阳山坡 。
蕨麻含有丰富的蛋白质 ,氨基酸的种类安全 ,
必需氨基酸占总氨基酸的比例达 35%以上。各种
微量元素含量和维生素 C 、E ,含量明显高于其他
块根类食物 ,Ca、Fe 、Zn 的含量是其他块根类食物
的10 ～ 100倍 ,维生素 C 、E 的含量是基他块根类食
物的 10～ 50倍[ 2] 。蕨麻作为藏药具有较高的医药
价值和营养价值 ,鉴于此本研究从蕨麻中提取抗氧
化物质 ,并对其抗氧化作用进行了初步研究 ,旨在为
青藏高原的藏药资源的综合开发和利用提供依据 。
1　材料与方法
1.1　仪器与材料
202-V1 恒温干燥箱(上海实验总厂);BECK-
MANModel J2-21M 冷冻离心机;WFZ UV-2100
型紫外可见分光光度计(由外商独资上海合利仪器
有限公司制造);XW-80A 漩涡混合器(上海精科实
业有限公司);HYG-H 回转式恒温调速药瓶柜(上
海欣蕊自动化设备有限公司)。高原菜籽油(青海
西宁市售)野生蕨麻(青海海北州产);DPPH·(二
苯代苦味酰基自由基 1.1-Diphenyl-2-picry l-hydra-
zly , Sigma公司产品);无水乙醇 、石油醚 、甲醇 、乙
酸己酯 、冰醋酸 、氯仿 、磷酸氢二钠 、磷酸二氢钠 、正
己烷 、Vc(抗坏血酸)、柠檬酸 、硫代硫酸钠 、碘化钾
均为 AR级 ,淀粉为 BR级 ,PBS(0.2 mol/ L PH 值
7.8磷酸盐缓冲液)。
1.2　蕨麻抗氧化物质的提取
1.2.1　方法 1　将自然干燥的陈年蕨麻在药品粉
碎机上粉碎 ,过 40目筛 ,称取 20 g 样品 ,按 1/10
加入不同溶剂于 250 m l锥形瓶中 ,在摇床上提取
5 h ,共提取 3次 ,过滤 ,合并滤液 ,旋转蒸发仪上浓
缩并干燥 ,加收溶剂 ,计算提取物浸出率。
1.2.2　方法 2　鲜蕨麻 50 g ,直接用 3 倍体积不
同乙醇浓度的溶剂在果汁榨机上制取提取液 ,冷冻
离心 10 000 r/min取上清液 ,上清液分两部分 ,一
部分于旋转薄膜蒸发仪浓缩并干燥 ,计算浸出率;
另一部分作 DPPH·抗氧化性质实验 。
1.3　提取物的抗氧化性测定
1.3.1　测定 1　取 9份 50 g 高原菜籽油作底物 ,
加入相当于高原菜籽油质量的 0.1%的不同溶剂
提取物 ,用少量的相应溶剂溶解提取物 ,其中水溶
剂提取物 、PBS 溶剂提取物用少量无水乙醇溶解 ,
25
收稿日期:2003-07-18　修回日期:2003-11-10
作者简介:李园媛 , 1964出生 ,女 ,满族 ,讲师 ,华东理工大学访问学者 ,研究方向:应用生物化学
并与高原菜籽油混匀为均相 ,其中一份作空白氧
化 ,置于(70±5)℃恒温箱中 ,锥形瓶悬空恒温箱底
部10 cm , 5 h定期搅拌并交换锥形瓶在恒温箱中
的位置 ,每隔一定时间测定高原菜籽油的过氧化
(POV)值 ,测定方法按照GB5009.37—85。
1.3.2　测定 2　DPPH·法测定[ 3] ,将蕨麻的不同
乙醇浓度提取液制成 1 mg/1ml浓度的溶液备用 ,
配 2×10-4浓度的 DPPH·无水乙醇溶液于冰箱中
避光保存。按表 1加样 ,每管总体积 4 ml ,在漩涡
器上充分混匀 , 30 min后在 517 nm(强吸收波长)
处 ,测定各管 A 值 ,每一样品 A 值平行测 3次 ,取
平均值 。其中不同乙醇浓度提取物分别取 3 , 6 ,9 ,
12 ,15 ,20 , 30 , 40 , 50 , 60 ,70 , 80 , 90 ,100 μl加相应
溶剂稀释至2 ml ,对 DPPH·的清除率 K计算公式:
清除率K=[ 1-(A i-A j)/AC] ×100%
Tab 1　Adding sample w ay s of DPPH·analy sis
A Adding sample w ay s
Ac 2 ml　2×10-4mo lL-1DPPH·+2 ml Solvent
Ai
2 ml　2×10-4molL-1DPPH·+2 ml Ex tracts from
different concentration ethanol
Aj
2 ml Ex tracts from different concentration ethanol
+2 ml So lvent
2　结　果
2.1　不同溶剂蕨麻提取物的抗氧化性
2.1.1　不同溶剂蕨麻提取物的浸出率
1.n-hexant;2.Acetic acid giacial;3.Ethy acetate;4.Trichloromethane;5.Pet roleum ether;6.Water;7.PBS;8.Methanol
Fig 1　Lixiviation rate of different solvent from patenntilla-unserina
　　不同溶剂蕨麻提取物的浸出率见图 1 ,其中 1-
8分别代表正己烷 、冰乙酸 、氯仿 、石油醚 、水 、PBS 、
甲醇 ,从图 1可看出 ,不同溶剂对鲜蕨麻的提取率
普遍高于蕨麻粉 ,在 8种溶剂中 , PBS 、冰乙酸是较
理想的溶剂 ,而乙酸己酯石油醚提取率很低 , PBS
是植物组织中提取 SOD的常用溶剂 ,而冰乙酸作
为溶剂提取抗氧化物质在文献中有报道[ 4] 。氯
仿 、甲醇 、正己烷 、水对干鲜蕨麻都有一定的抽提效
果。其差异与溶剂的极性有关[ 5] 。
2.1.2　不同溶剂于鲜蕨麻提取物对高原菜籽油的
POV 值　不同溶剂鲜蕨麻提取物对高原菜籽油的
POV 值见图2 ,抗氧化效果越好其 POV 值越低 ,从
图 2中可知 ,提取物的抗氧化能力依次为 PBS>冰
醋酸>水>甲醇>氯仿>正己烷>乙酸己酯>石
油醚 ,而蕨麻粉的抗氧化能力顺序与鲜蕨麻提取物
相同 ,但其 POV 值普遍高于鲜蕨麻 ,高于的平均蕨
麻 ,高于的平均植物±8.6%,说明鲜蕨麻的抗氧化
性强于干蕨麻 。
Fig 2　Antioxidative effect 1 of different kinds of solvent ex-
tracts from fresh patentilla-unserina
2.2　不同浓度乙醇溶液干鲜蕨麻提取液的抗氧化性
2.2.1　不同浓度乙醇溶液干鲜蕨麻的浸出率　不
26 药 物 生 物 技 术 第 11 卷第 1 期　
F ig 3　L Ixiviation rate of different concentration ethanol
同浓度乙醇溶液对干鲜蕨麻的浸出率见图 4 ,浸出
率的大小依次为:30%乙醇>50%乙醇>75%乙醇
>95%乙醇>无水乙醇 ,随着乙醇浓度的增加浸出
率降低 ,说明不同浓度乙醇溶液对干鲜蕨麻的浸出
率与溶剂的极性有关 ,极性越大浸出率越高。不同
浓度乙醇溶液对鲜蕨麻的浸出率普遍高于蕨麻粉 。
F ig 4 　Scavenging rate of fresh patentilla-unserina on DP-
PH·　　　
2.2.2　不同浓度乙醇溶液蕨麻提取液对 DPPH·
的清除率　不同浓度乙醇溶液干鲜蕨麻提取液对
DPPH·的清除率见图 4。从图中可知 ,不同浓度乙
醇鲜蕨麻提取液对 DPPH·清除率大小依次为:
75%乙醇>50%乙醇>30%乙醇>95%乙醇>无
水乙醇 , 5种提取液在浓度 1.5 ～ 7.5 μg/ml之间
曲线上升缓慢 ,在 7.5 ～ 30μg/ml之间曲线上升较
快 ,清除率达到最高值 ,在 30 ～ 50 μg/ml。而干蕨
麻的清除率普遍低于鲜蕨麻 , 低于的平均值为
±10.3%。　
2.3　四种抗氧化剂的的比较
1.PBS ext racts from P-U;2.75%ethaol ext racts from P-U;3.Vc;
4.Lem on acid
Fig 5 　Scavenging rate of four k inds of antioxidant on
DPPH·
分别取 0.01%浓度的鲜蕨麻 PBS 提取液 、
75%乙醇提取液 、维生素 C 溶液 、柠檬酸溶液 ,测
定对 DPPH·的清除率 ,四种抗氧化剂清除率的比
较见图 5 ,在相同浓度 、作用时间及其它外界条件
相同的条件下 ,两种鲜蕨麻的提取液有更强的抗氧
化作用 , PBS 提取液对 DPPH·的清除率高达
92.3%, 75%乙醇为 80%,柠檬酸为 51.1%、Vc为
33.3%。
3　讨　　论
(1)提取物的量与蕨麻麻所含的各类物质的
总量及溶剂有关 ,不同溶剂对蕨麻抗氧化物质的溶
解度不同所提取的抗氧化物质的总量和种类也不
同 ,导致不同溶剂提取物的抗氧化能力不同 ,其抗
氧化能力与浸出率直接相关。PBS 提取物的抗氧
化性明显高于其它溶剂 ,这于所提取的 SOD 物质
有关 ,SOD是生物大分子 ,是具有催化活性的蛋白
质 ,由于 SOD是氧自由其清除剂[ 6] ,所以对高原菜
籽油有很好的抗氧化作用。
(2)不同溶剂干鲜蕨麻提取物的 POV值均比
空白油样低 ,表明不同溶剂提取物都有一定的抗拉
化能力 ,在相同浓度下抗氧化能力依次为 PBS>冰
乙酸>水>甲醇>氯仿>正己烷>乙酸己酯>石
油醚 ,PBS 提取物的抗氧化能力最强 ,石油醚与正
己烷抗氧化作用接近而偏低 。
(3)清除率曲线下降的原因是受提取液颜色
的影响 ,随着浓度的增大 ,比色的透光率减弱 ,颜色
的深浅与浸出率成正比关系 ,30%乙醇提取液的曲
27李园媛等:青藏高原蕨麻植物抗氧化作用的研究
线明显下降 ,说明其颜色较深 ,直接影响了清除率
的测定 ,而无水乙醇提取液的曲线是一条逐渐上升
的曲线 ,其清除率与颜色几乎无关 ,其它 3 条曲线
呈现不同程度的下降 。
(4)蕨麻中维生素 C 的含量为 5.44%,维生
素E 的含量为 3.58%明显高于其他块根类食
物[ 2] ,维生素 C 维生素 E 都是抗氧化剂[ 9] ,两种鲜
蕨麻的提取液比维生素 C 、柠檬酸溶液有更强的抗
氧化作用 ,与此有关 。
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Study on the Patentilla Unserinas Antioxidative Effect
LI Yuan-yuan1 , 2 , YUAN Qin-sheng2
(1.Qinghai Normal University , Xining 810008 , China;2.East China Universi ty of Science and Tech-
nology , Inst itute of Biotechnology , Shanghai 200237 , China)
Abstract　Antioxidative act ivit ies on different solvents ex t racts f rom fresh patenti lla-unserina and patenti lla
unserina powder were studied by DPPH·(1.1-diphenyl-picrylhydrazy L)f ree radical method , and Na2S2O3-
I2 ti trimetric method respectively.The result show ed that the antioxidat lve ef fect of different solvent ex tracts
on vegetable oil decreased in the order of PBS>acetic acid g lacial>water>methanol>t richloromethane>n-
hexane >ethyl acetate >petrooleum ether.The sequence of scavenging rate on DPPH · of different
concenntrations ethanol ex t ract is 75%ethanol>50%ethanol>30%ethano>95%ethanol>100%ethanol.
Both the f resh patenti lla-unserina and the patentil la-unserina powder have good antioxidative effect in the
tw o experiments.The antio xidative ef fect of fresh patenti lla-unserina was bet ter than that of patenti lla-un-
serina powder.
Key words　Patent il la unserina , DPPH·, Antlo xidative effeet
·信　息·
2004-B-21　PCT 用于治疗眼压过高和青光眼的组合物-含前列腺素化合物
2004-B-22　PCT 包含核糖和叶酸的营养制剂及其药用
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2004-B-26　PCT 酪蛋白衍生肽及其治疗用途-治疗免疫性疾病
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