全 文 ：铁筷子对胃癌及白血病 K562细胞
体外生长的抑制效应
杨永健 , 刘昕 , 潘兴斌
(兰州医学院 ,甘肃 兰州 730000)
摘要 应用细胞培养技术 ,观察了铁筷子根水提取物对人胃癌细胞及人白血病 K562细胞系集落形成影
响 ,结果表明该提取物对两种恶性肿瘤细胞的生长均有明显抑制作用 ,使其集落形成率显著低于对照
组 ,镜下见细胞膜粗糙 、毛刺 ,并有崩解破坏现象。
关键词 铁筷子 抗肿瘤 胃癌细胞 白血病 K562
铁筷子(Helleborus thibefanus franch)为毛
莨科铁筷子属多年生草本植物 ,药用其根及根茎 ,
有活血散瘀 、消肿止痛 、清热解毒等功效 。国外实
验报道 ,铁筷子根中成分嚏根草甙元在体外对人
体上皮癌 KB细胞有抑制效应[ 1] ,国内尚少有报
道。我院已成功地将该药由野生变为家种[ 2] ,为
进一步开发利用铁筷子的药用潜能 ,笔者就其抗
癌活性作了初步研究 。
1 材料与方法
1.1 药品 中药铁筷子由兰州医学院药圃提供 ,
取其根煎煮 3 次 ,混合煎液过滤 、浓缩 、制成 1%
的溶液(相当于生药 3.33g),灭菌后使用。
1.2 靶细胞 人胃癌细胞株及人白细胞病 K562
细胞株 ,均由兰州医学院血液病研究所传代保株。
1.3 细胞培养体系 1640培养液(美国 GIBCO
公司), FCS(新生小牛血清 ,我院血液研究所制
备), 0.25%琼脂(日本进口 ,国内分装)。
1.4 癌细胞集落形成抑制试验 将传代胃癌细
胞和 K562细胞各自充分混匀后计数 ,分别取 1×
103 个癌细胞加入含 20%小牛血清的细胞培养体
系中 ,对照组加入等量 1640培养液以使容量相
等 ,各自混匀后 ,移入 35mm培养皿 ,置保和湿度 、
37℃、5%CO2 培养箱中培养 ,胃癌细胞培养 7天 ,
K562细胞培养 5 天 ,待培养结束后倒置显微镜下
计≥50个癌细胞组成的集落数 ,每组实验均重复
3次 ,取均值作统计学处理。
集落形成率= 集落数植入细胞数 ×100%
相对抑制率=(1-实验组集落数对照组集落数)×100%
2 结果
2.1 不同浓度铁筷子水提取液对癌细胞集落形
成的抑制作用
经预实验后 ,以半数抑制浓度(IC50)为依据
向培养液中加入铁筷子提取物溶液 ,观察其对癌
细胞集落形成的抑制效应 ,结果如表 1 ～ 2所示。
铁筷子对胃癌细胞和 K562细胞均有显著的抑制作
用 ,集落形成数明显少于对照组。
表 1 铁筷子水提物对胃癌细胞集落形成影响
组别 n 集落数 集落形成率/ % 相对抑制率/ % P 值
对照组 3 58.7±2.08 6.0 - -
2ng/ml 3 40.0±5.57 4.0 33.3 <0.001
4ng/ml 3 28.4±3.11 3.0 48.4 <0.001
表 2 铁筷子水提物对 K 562细胞集落形成的影响
组别 n 集落数 集落形成率/ % 相对抑制率/ % P 值
对照组 3 298.7±10.7 29.6 - -
2ng/ml 3 159.7±35.9 16.0 38.51 <0.001
4ng/ml 3 99.0±3.61 7.9 69.58 <0.001
2.2 癌细胞在琼脂半固体培养基中的生长特点
对照组癌细胞形态完整 、饱满 ,镜下见细胞折
光性强 ,在培养的第二天就可见到双细胞 ,第三 、四
天有较多细胞丛出现 ,形成细胞集落 ,第五天集落
形成达到高峰 ,以后逐渐减少 ,集落数随之下降。
胃癌细胞和 K562细胞受到铁筷子作用后 ,失
去了正常的生长特点 ,终止培养时有许多细胞的
·50· ACMP.Dec., 2001 , Vol.29 , No.6
刺玫果对实验性小鼠体内血栓形成的影响
刘中申1 , 郑甲信2 , 李东3 , 徐颖1 , 程显峰1
(1.黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040;2.哈尔滨地王药业 ,黑龙江
哈尔滨 150001;3.哈尔滨动力区防疫站 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘要 目的:探讨刺玫果抗血栓形成及抑制血小板聚集作用。方法:通过给小鼠连续灌服刺玫果精粉
后 ,对经小鼠尾静脉注射胶原蛋白与肾上腺素的混合诱导剂 ,诱发小鼠血栓性偏瘫和死亡 。观察注射后
5min内小鼠死亡数或 15min内小鼠偏瘫数的未恢复数。结果:刺玫果各剂量组恢复率均高于空白对照
组(P <0.005)。结论:刺玫果具显著的抗血栓形成作用及抑制血小板聚集作用 。
关键词 刺玫果 抗血栓 抗血小板聚集 实验研究
由血栓所致的心脑血管疾病 ,当前正严重地
危害着人类的健康 。因此 ,广大医药工作者正在
积极 、广泛地寻找有效的防治血栓的药物 。刺玫
果具有抗血栓形成及抗血小板聚集的作用[ 1] 。
刺玫果为蔷薇科蔷薇属植物山刺玫(Rosa
davurica Pall)的干燥成熟果实[ 2] 。近年来 ,国内
学者对其药理作用进行了较多的研究 ,发现刺玫
果具有多方面的药理活性[ 3] 。刺玫果浸膏粉对
动脉硬化及胆固醇影响的实验研究尤受人们重
视[ 4] 。但是 ,有关刺玫果抗血栓的药理作用的研
究尚未见专门报导 。因此 ,我们用胶原蛋白 ———
肾上腺素混合诱导剂所致小鼠体内血栓形成为标
志[ 5] ,探讨刺玫果对小鼠体内血栓形成的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 实验动物为昆明种小鼠 40只 ,
雌雄各半 ,体重(18±2.9)g(由黑龙江中医药大学
膜粗糙 、毛刺 、发生崩解 ,大部分形成大丛的细胞
边不光滑 ,有伪足样结构 ,折光性差 ,集落形成明
显低于对照组 ,以 4ng/ml组尢甚 。
3 讨论
肿瘤是临床常见病 、多发病 ,而恶性者死亡率
极高 ,却无特效疗法 、特效药物 ,我国每年因癌瘤
而死亡的人数高达 70万人 ,这是当今威胁人类健
康和生命的最严重疾病 ,故如何治疗癌肿 ,延长患
者生命 ,提高生存质量 ,是人们普遍关注的问题 ,
近年来随着研究方法和研究手段的提高 ,使中医
药在癌症治疗中的运用越来越受到人们的重视 ,
大量的实验研究表明 ,某些中药的抗肿瘤作用机
制之一是通过细胞毒作用 ,即损伤 DNA 而发挥
效力的 ,如人参皂甙 、当归多糖等[ 3 ,4] 。铁筷子成
分对人体上皮癌 KB细胞的作用国外曾有报道 ,
笔者用铁筷子根的水提取物做了上述实验 ,证实
该药确有很好的抑制作用 ,在体外培养基中 ,少量
铁筷子水提取物即有强大的抑制肿瘤细胞生长的
功效。众所周知 ,细胞集落的形成是细胞内 DNA
复制使细胞得以分裂繁殖生长的结果 ,肿瘤细胞
的生长速度极快 ,未受药物影响的对照组 ,在培养
的第二天便有双细胞出现 ,第五天左右集落形成
达高峰 ,镜下见细胞颗粒饱满 ,折光性强 ,表现了
极大的生命力;受铁筷子作用的两种肿瘤细胞 ,生
长速度明显受限 ,集落形成率显著低于对照组 ,其
相对抑瘤率与药物浓度呈正比 。本实验结果表明
铁筷子水提取物中具有直接干扰肿瘤生长的有效
成分 ,可抑制肿瘤细胞在体外培养中的繁殖增长。
而其有效成分究竟是何物 ?对在体肿瘤生长的作
用? 尚有待进一步研究。
4 参考文献
1 郭晓庄.有毒中草药体系大辞典.天津:科技翻译出版
公司 , 1992.435.
2 杨永健 ,祁银德.铁筷子野生移家种的初步研究.中草
药 , 1995 , 26(11):597.
3 黄永平 ,吕美德.人参皂甙和 PHA 对人白血病细胞株
U 937和 K 562的抑制作用.中国中西医结合杂志 ,基础理
论研究特集.1993.124.
4 李兴玉 , 丁慧蓉.当归多糖对肿瘤细胞系的抑制效应.
中国中西医结合杂志 , 基础理论研究特集 , 1993.135.
收稿日期:2001-04-28
·51·中医药学报 2001 年第 29 卷第 6 期