全 文 ：制剂与质量控制
蒙药银露梅质量标准研究※
李怀斌 乌仁图雅△ 侯建平1 王佐稷2 益小刚1
(陕西省咸阳市食品药品检验所业务管理科，陕西 咸阳 712000)
【关键词】 蒙药;槲皮素;色谱法，薄层;色谱法，高压液相
【中图分类号】 Ｒ284． 1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002 － 2619( 2014) 08 － 1224 － 02
※ 项目来源:内蒙古自治区蒙药现代化研究项目(编号:
MX2005BZ008)
△ 通讯作者:内蒙古医科大学蒙医药学院外科教研室，内蒙古
呼和浩特 010110
1 陕西中医学院药理教研室，陕西 咸阳 712000
2 陕西省乾县食品药品监督管理局稽查科，陕西 乾县 713300
作者简介:李怀斌(1962—)，男，副主任中药师，学士。研究方向:
中药质量标准研究、新药研究。
蒙药银露梅为蔷薇科植物银露梅的茎枝。蒙药名为
孟根乌日阿拉格。银露梅作为蒙药传统用药，载于《蒙药
正典》，其性平，味涩，具有固齿、理气、敛黄水等功效。用
于牙病，肺病，胸胁胀满，黄水病。为了保证该药的临床疗
效，有效控制其质量，本研究对内蒙古各地产药材在仔细
观察描述性状的基础上，以槲皮素为对照进行薄层色谱鉴
别研究，并采用高效液相色谱(HPLC)法测定了槲皮素含
量［1 － 2］，从而制定出银露梅药材的质量标准，为蒙药银露
梅的质量控制与评价提供了依据。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 日本岛津 LC － 10AP 高效液相色谱仪、N
2000 色谱工作站、日本岛津 SPD － 10A 型紫外检测器。
BP210 电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)。KQ
－250DB型超声波清洗机(巩义予华仪器有限公司)。
1． 2 药品及试剂
1． 2． 1 药品 银露梅样品来源:内蒙古赛罕乌拉自然保
护区、内蒙古大青山劈柴沟、内蒙古蛮罕山及国家蒙药制
剂中心。槲皮素对照品:购于中国药品生物制品检定所
(批号:10081 － 9905)。
1． 2． 2 试剂 甲醇为色谱纯，水为蒸馏水，浓硫酸，乙酸
乙酯，95%乙醇，其他试剂均为分析纯。
2 薄层色谱鉴别及结果
2． 1 供试品溶液制备 取本品粉末 2 g，加甲醇 － 水
(1∶ 1)50 mL，超声处理 30 min，滤过，滤液浓缩至近干，加
水 50 mL溶解，加浓硫酸 0． 5 mL，加热回流 1 h，放冷，移
至分液漏斗中，用乙酸乙酯液萃取 3 次，每次 20 mL。合
并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加 95%乙醇 2 mL 溶解，作为供
试品溶液。
2． 2 对照品溶液制备 取槲皮素对照品 0． 5 mg，加 95%
乙醇 1 mL，制成对照品溶液。
2． 3 鉴别操作及结果 供试品溶液点样量 5 μL，对照品
溶液点样量 2 μL，采用 4 种不同的吸附剂及展开系统进
行比较优选。①号薄层系统:羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶 G板，环己烷 －乙酸乙酯 －甲酸(10∶ 7∶ 1)为展开剂;
②号薄层系统:硅胶 H 板，甲苯 －甲酸乙酯 －甲酸(5∶ 3 ∶
1)为展开剂;③号薄层系统:0． 5%氢氧化钠溶液为黏合剂
的 G板，甲苯 －氯仿 －丙酮 －甲酸(8∶ 5 ∶ 7 ∶ 1)为展开剂;
④号薄层系统:硅胶 H 板，甲苯 －乙酸乙酯 －甲酸(5∶ 4 ∶
1)为展开剂。依次分别展开，取出，晾干，喷以 3%三氯化
铝乙醇溶液，在 105 ℃加热 2 min，置紫外光灯(365 nm)下
检视。结果①号薄层系统效果最佳(图 1、2、3、4，见封 3)。
3 槲皮素 HPLC含量测定及结果
3． 1 色谱条件 C18色谱柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)，以
甲醇 － 0． 4% 磷酸溶液 (52 ∶ 48)为流动相，流速:
1． 0 mL /min，柱温:30 ℃，检测波长:360 nm［1 － 3］。
3． 2 对照品溶液制备 精密称取槲皮素对照品
17． 00 mg，加甲醇定容至 100 mL，摇匀，即得浓度为
0． 17 mg /mL的对照品溶液。
3． 3 供试品溶液制备 取 4 批银露梅样品粉末(过 40 目
筛)约 1． 0 g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入
80%甲醇 50 mL密塞。称定质量，加热回流 1 h，放冷，再
称定质量，用 80%甲醇补足减失质量，摇匀，滤过。精密
量取续滤液 10 mL，加入盐酸 1 mL，置 90 ℃水浴中加热回
流 1 h，取出，迅速冷却。转移至 25 mL容量瓶中，加 80%
甲醇稀释至刻度，摇匀，用 0． 45 μm微孔滤膜滤过，即得。
3． 4 线性范围考察 精密吸取 3． 2 项槲皮素对照品溶液
1． 5、2． 5、5． 0、7． 5、10． 0 mL，分别定容于 100 mL 容量瓶
中，摇匀，得到浓度分别为 0． 002 55、0． 004 25、0． 008 5、0．
012 5、0． 017 0 mg /mL，精密吸取 10 μL，注入高效液相色
谱仪，记录色谱图，测定峰面积，以峰面积对进样量进行回
归，以取样量为 X 轴，峰面积为 Y 轴，得回归方程 Y = 2E
+ 0． 6X － 18 494，r = 0． 999 8。结果表明:槲皮素在
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0． 025 5 ～ 0． 170 0 μg 范围内，峰面积值与进样量呈良好
的线性关系。
3． 5 稳定性试验 精密称取内蒙古赛罕乌拉自然保护区
样品，按供试品溶液制备方法制成稳定性试验溶液，分别
在 0、1、2、3、8 h，精密吸取 10 μL，注入高效液相色谱仪，测
定，结果相对标准偏差(ＲSD)为 1． 2%。试验结果表明，
供试品溶液在 8 h内稳定性良好。
3． 6 精密度测定 精密吸取 3． 5 样品溶液 10 μL，在上述
色谱条件下重复进样 5 次，结果显示槲皮素峰面积 ＲSD
为 1． 1%，表明系统精密度良好。
3． 7 重复性试验 取内蒙古赛罕乌拉自然保护区样品 5
份，每份约 1． 0 g，分别按 3． 3 方法制成重复性试验溶液，
精密吸取 10 μL，进样分析，槲皮素峰面积 ＲSD 为1． 68%
(n = 5)，方法重复性良好。
3． 8 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品(3． 7
中的样品)6 份，每份约 1． 0 g，加入适量的槲皮素对照品，
按供试品溶液制备方法制成加样回收试验溶液。分别精
密吸取 10 μL，进样分析。加样回收率试验结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
序号 取样量(g) 样品中对照品的量(mg) 加入对照品量(mg) 峰面积 测得总量(mg) 加样回收率(%) 平均回收率(%) ＲSD(%)
1 0． 985 4 1． 119 4 0． 302 4 206 030． 406 1． 407 7 95． 34
2 0． 991 0 1． 125 7 0． 302 4 207 149． 000 1． 415 4 95． 80
3 1． 002 0 1． 138 3 0． 907 2 298 713． 094 2． 041 0 99． 50
96． 72 2． 169
4 1． 005 0 1． 141 7 0． 907 2 298 710． 250 2． 041 0 99． 13
5 0． 990 5 1． 125 2 0． 604 8 248 240． 297 1． 696 1 94． 39
6 0． 992 0 1． 126 9 0． 604 8 250 070． 000 1． 708 6 96． 18
由表 1 可见，平均回收率为 96． 72%，ＲSD为2． 169%。
加样回收率良好。
3． 9 样品含量测定 取 4 批银露梅样品粉末各 1． 0 g，分
别精密称定，按 3． 3 方法进行供试品溶液制备，各精密吸
取 10 μL，注入高效液相色谱仪，测定。样品含量测定结
果见表 2。
表 2 样品含量测定结果
药材来源 取样量(g) 峰面积 1 峰面积 2 含量 1(mg /g) 含量 2(mg /g) 平均含量(mg /g)
内蒙古赛罕乌拉自然保护区
1． 053 0 163 458． 297 163 159． 594 1． 113 6 1． 111 6 1． 112 6
1． 038 0 158 979． 797 156 206． 594 1． 098 8 1． 097 8 1． 098 3
内蒙古大青山劈柴购
1． 001 0 189 671． 703 200 268． 297 1． 350 0 1． 425 5 1． 387 8
1． 002 1 202 424． 234` 203 613． 906 1． 418 9 1． 433 7 1． 426 3
内蒙古蛮罕山
1． 001 2 116 295． 500 116 407． 203 0． 838 6 0． 839 4 0． 839 0
1． 000 3 115 419． 797 120 510． 555 0． 833 1 0． 869 8 0． 851 4
国家蒙药制剂中心
1． 001 1 237 091． 797 237 753． 797 1． 698 9 1． 703 6 1． 701 3
1． 000 7 235 552． 000 235 117． 813 1． 688 5 1． 685 4 1． 687 0
由表 2 可见，4 批样品中槲皮素的平均含量
1． 263 0 mg /g，最高为 1． 701 3 mg /g，最低为0． 839 0 mg /g，
考虑本次收集样品量小、产地少等因素，故规定本品按干
燥品计算，每克含槲皮素不得少于 0． 5 mg。
4 讨 论
4． 1 本试验所用样品均经过了原植物鉴定，并在试验前
进行了性状比较与鉴定，确保了试验结果的一致性。
4． 2 4 个地区所产药材薄层色谱结果一致，考虑以后增
加银露梅对照药材与槲皮素同时做对照，增强鉴别的专
属性。
4． 3 对样品中杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分进行检
查［4］，在正式标准中对其指标做了规定，确保了所制订标
准的完整与实用。
本试验建立了蒙药银露梅鉴别与含量测定方法，定性
专属性强，定量精密度高，稳定性好，可作为蒙药银露梅的
质量控制重要项目。
参考文献
［1］ 王焕芸，王玉华，贾彦胜，等．丁香药材中槲皮素的定性鉴别
和含量测定［J］． 内蒙古医学院学报，2008，30(S1):534 －
537．
［2］ 孙文基，谢世昌．天然药物成分定量分析［M］．北京:中国医
药科技出版社，2003:400 － 403．
［3］ 张文霞，包文芳，赵淑华．高效液相色谱法测定文冠木各部
位中杨梅树皮素和槲皮素的含量［J］．沈阳药科大学学报，
2000，17(3):194 － 196．
［4］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:2010 年版［M］．北
京:中国医药科技出版社，2010:附录 47 － 53．
(收稿日期:2013 － 05 － 13)
(本文编辑:李珊珊)
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蒙药银露梅质量标准研究
(正文见1224—1225页）
图1①号薄层系统薄层色谱图 图2②兮傅层系统薄层色谱图
图3③号薄层系统薄层色谱图 图4④号薄层系统薄层色谱图
1为采自内荣占赛罕乌拉自然保护区洋品供试液<2为采@内蒙古大靑山劈柴沟样品供试液;3为采自内萦古蛮罕山样品供试液为槲皮
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