全 文 ：基金项目:“ 863”创新药物和中药现代化项目(2004AA223730-14)
作者简介:高慧敏 ,女 ,博士研究生　　＊通讯作者:王智民 ,男 , 研究员　　Tel:(010)84014128　　Fax:(010)84014128　　E-mail:zhmw123@
263.net
白木通化学成分研究(Ⅱ)
高慧敏 ,王智民＊(中国中医科学院中药研究所 ,北京 100700)
摘要:目的　研究白木通藤茎的化学成分。方法　通过反复硅胶柱色谱 、ODS 柱色谱和重结晶的方法分离纯化 ,根据化合物的
理化性质和波谱数据鉴定结构。结果　分离得到 5 个化合物 ,分别为 2α, 3β , 23 , 29-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic acid(Ⅰ),齐墩
果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※3)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅱ), 齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷
(Ⅲ), 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1※2)-α-L-arabino pyranosyl-30-norolean-12-en-28-oic acid(Ⅳ), 3-O-β-D-葡萄糖-(1※3)-α-L-阿拉伯
糖-常春藤皂苷(Ⅴ)。结论　5 个化合物均为首次从本植物中分离得到。
关键词:白木通;化学成分;三萜皂苷
中图分类号:R284　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2006)06-0418-03
Studies on Chemical Constituents in Stem of Akebia trifoliate var.australis
GAO Hui-min , WANG Zhi-min＊(Institute of China MateriaMedia , China Academy of Chinese Medical Sciences , Beijing 100700 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the chemical constituents of the stem of Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.var.australis(Diels)Rehd.
METHODS　The compounds were isolated and purified by recrystallization and column chromatography with silica gel and ODS.Their struc-
tures were elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral analysis.RESULTS　Five compounds were identified as 2α, 3β ,
23 , 29-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic acid(Ⅰ), oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1※3)-α-L-arabinopyranoside(Ⅱ), oleanolic acid-3-
O-β-D-glucopyranosyl-(1※2)-α-L-arabinopyranoside(Ⅲ), 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1※2)-α-L-arabinopyranosyl-30-norolean-12-en-28-oic
acid(Ⅳ), hederagen-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1 ※3)-α-L-arabinopyranoside(Ⅴ).CONCLUSION 　These compounds are isolated from
Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.var.australis(Diels)Rehd for the first time.
KEY WORDS:Akebia trifoliata var.australis;chemical constituents;triterpene saponins
　　白木通 [ Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.var.
australis(Diels)Rehd] 为木通科木通属植物 ,其干燥
藤茎作为木通入药收载于 2005年版中国药典一部 ,
味苦 ,性微寒 ,入心 、小肠 、膀胱经 ,具清心火 , 利小
便 ,通经下乳之功效 ,主治胸中烦热 、喉痹咽痛 、尿
赤 、五淋 、水肿 、周身挛痛 、经闭乳少[ 1] 。为探讨其药
效物质基础 ,对白木通的干燥藤茎进行了系统的化
学成分研究 ,前文报道[ 2] 6个化合物 ,本实验继续报
道从其体积分数为 70%乙醇提取物的乙酸乙酯部
位分离得到的 5 个三萜及其苷类化合物 , 分别为
2α,3β ,23 , 29-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic acid(Ⅰ),
齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※3)-α-L-吡喃阿
拉伯糖苷(Ⅱ),齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※
2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅲ), 3-O-β-D-glucopyra-
nosyl-(1 ※2)-α-L-arabino pyranosyl-30-norolean-12-en-
28-oic acid(Ⅳ),3-O-β-D-葡萄糖-(1※3)-α-L-阿拉伯
糖-常春藤皂苷(Ⅴ)。这 5个化合物均为首次从本
植物中分离得到。
1　仪器与材料
显微熔点测定仪(DDR-8109型 ,未经校正),
Jabstec型质谱仪(Micromass公司), JEOL Teol AL -
300 ,500 核磁共振仪(JEOL 公司),C18(40 ～ 75 μm ,
FU JI silysia chemical LTD.),柱色谱用硅胶(青岛海
洋化工厂),阿拉伯糖 、葡萄糖对照品(Sigma 公司),
其他实验试剂均为分析纯或化学纯。
新鲜的白木通采自四川峨嵋 ,经中国中医科学
院中药研究所生药室何希荣老师鉴定为木通科
(Lardizabalaceae)植 物 白 木 通 [ Akebia trifoliata
(Thunb.)Koidz.var.australis (Diels)Rehd] 的干燥
藤茎。
2　提取分离
干燥的白木通藤茎 3 kg 用 10倍量体积分数为
70%乙醇回流提取 3次 ,每次 1 h ,滤过 ,合并滤液;
减压回收溶剂得体积分数为 70%乙醇提取物 ,将其
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以适量水稀释 ,依次用乙酸乙酯 、水饱和正丁醇萃
取。取乙酸乙酯部位粉末 57 g 上硅胶(160 ～ 200
目)柱色谱 ,依次用石油醚-乙酸乙酯(1∶4)、氯仿-乙
酸乙酯(1∶1)、氯仿-甲醇(9∶1 , 3∶1)、甲醇洗脱得到
Fr.1 ～ 6部分 ,Fr.4 ～ 5部分通过反复硅胶柱色谱 ,
反相 C18柱色谱纯化结合结晶法 ,从中得到化合物 Ⅰ
(25 mg), Ⅱ(10 mg), Ⅲ(7.5 mg), Ⅳ(20 mg), Ⅴ(10
mg)。
3　结构鉴定
化合物 Ⅰ :白色粉末 ,mp 271 ～ 273 ℃, 0.1%香
草醛浓硫酸显蓝色 , Liebermann-Burchard 反应阳性 ,
示为三萜类化合物 。FAB-MS:1009[ 2M +H] + , 527
[M+Na] + ,487[M+H-H2O] + , 469[ 487-H2O] + ,
451 ,423 ,264 ,233 ,201 ,145;1H-NMR(Pyr-d5 ,300 MHz)
δ:5.49(1H , brs , H-12);13C-NMR 数据见表 1 ,与文
献[ 3-4]化合物基本一致 ,鉴定化合物Ⅰ为 2α,3β ,23 ,
29-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic acid。
表 1　化合物Ⅰ ～ Ⅴ的13C-NMR数据(Pyr-d5)
Tab 1　13C-NMR spectral data of compound Ⅰ ～ Ⅴ(Pyr-d5)
No Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ No Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
1 47.7 38.7 38.7 38.7 38.9 22 32.7 33.1 33.2 38.4 33.2
2 68.9 26.9 26.5 26.5 26.2 23 66.5 28.1 28.2 30.0 64.4
3 78.2 88.6 88.8 88.7 81.9 24 14.4 16.9 16.8 16.8 13.6
4 43.6 39.6 39.5 39.5 43.6 25 17.5 15.4 15.5 15.4 16.1
5 48.1 55.8 55.8 55.8 47.8 26 17.3 17.3 17.4 17.3 17.5
6 18.5 18.4 18.5 18.4 18.2 27 26.1 26.1 26.1 26.1 26.2
7 32.8 33.2 33.3 33.1 32.9 28 180.2 180.0 180.0
8 39.8 39.7 39.7 39.7 40.1 29 73.8 33.2 33.3 107.1 33.2
9 47.9 48 48.0 47.9 48.2 30 19.7 23.7 23.8 23.8
10 38.4 37 37.0 36.9 36.9 Ara-1 107.4 104.9 104.9 106.5
11 23.7 23.7 23.8 23.7 23.9 2 72.0 81.1 81.1 72.0
12 122.5 122.5 122.4 123.1 122.6 3 84.1 73.4 73.4 84.3
13 145.0 144.8 144.8 144.2 144.8 4 69.4 68.3 68.3 69.3
14 42.2 42.1 42.1 42.1 42.2 5 67.1 65.0 65.0 67.0
15 28.3 28.3 28.3 28.2 28.4 Glc-1 106.4 106.1 106.1 106.4
16 23.9 23.6 23.7 23.7 23.7 2 75.7 76.4 76.5 75.7
17 47.1 46.4 46.5 47.0 46.7 3 78.4 78.1 78.2 78.4
18 41.3 41.9 41.9 47.0 42.0 4 71.5 71.5 71.5 71.7
19 41.2 46.6 46.7 41.9 46.5 5 78.7 78.1 78.2 78.7
20 36.6 30.9 30.9 148.5 30.9 6 62.6 62.5 62.5 62.8
21 29.1 34.2 34.2 30.0 34.3
　　化合物Ⅱ:白色粉末 ,易溶于甲醇 、吡啶 ,无明显
紫外吸收 ,泡沫 、Liebermann-Burchard 和 Molish 反应
阳性 ,提示为三萜皂苷;酸水解得皂苷元 ,与齐墩果
酸对照品共薄层检识 Rf值一致;酸水解检出阿拉伯
糖和葡萄糖。1H-NMR(Pyr-d5 , 500 MHz)δ:5.47(1H ,
brs ,12-H),5.40(1H , d , J =7.5 Hz , glc-1), 4.75(1H ,
d , J =7.5 Hz , ara-1), 1.30(3H , s , Me), 1.00 , 0.98 ,
0.96 ,0.95(each 3H , s , 4×Me),0.82(6H , s ,2×Me);
13C-NMR数据见表 1 , 其苷元和糖部分分别与文
献[ 5-6]数据比较基本一致 ,鉴定化合物 Ⅱ为齐墩果
酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※3)-α-L-吡喃阿拉伯糖
苷 ,即文献报道的 guaianin N[ 7] 。
化合物 Ⅲ:白色粉末 , 263 ～ 266 ℃,易溶于甲
醇 、吡啶 , 无明显紫外吸收 , 泡沫 、Liebermann-Bur-
chard和Molish反应阳性 ,提示为三萜皂苷;酸水解
检出阿拉伯糖和葡萄糖 。ESI-TOF-MS:773[ M +
Na] +;1H-NMR(Pyr-d5 , 500 MHz)δ:5.46(1H ,brs ,12-
H), 5.18(1H , d , J =8.0 Hz , glc-1), 4.95(1H , d , J =
5.5 Hz , ara-1), 1.27(3H , s , Me), 1.03 , 0.99 , 0.98 ,
0.95(12H , s , 4×Me), 0.82(6H , s ,2×Me)。13C-NMR
数据见表 1 ,其与文献[ 6] saponin PE相比 ,除苷元部分
缺少一个羧基外 ,其余基本一致;结合 ESI-TOF-MS
给出的准分子离子峰和 HMBC 中高场区氢与13C-
NMR中 δ180.0 左右有相关点 ,说明 28位羧基在13
C-NMR中没有表达出来 。因此鉴定化合物 Ⅲ为齐
墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1※2)-α-L-吡喃阿拉
伯糖苷(即 saponin PE)。
化合物Ⅳ:白色粉末 ,易溶于甲醇 、吡啶 ,无明显
紫外吸收 ,泡沫 、Liebermann-Burchard 和 Molish 反应
阳性 ,提示为三萜皂苷;酸水解检出阿拉伯糖和葡萄
糖 。综合1H-NMR和13C-NMR可知该物质为 30位去
甲齐墩果烷型皂苷 。1H-NMR(Pyr-d5 , 500 MHz)δ:5.47
(1H ,brs ,12-H),3.22(1H ,dd , 18-H), 4.79 , 4.74(each
1H ,brs , 20-H), 5.20(1H , d , J =7.5 Hz , ara-1), 4.97
(1H , d , J =6.0 Hz , glc-1);1.24 , 1.23 , 1.14 , 1.03 ,
0.99(each 3H , s ,5×Me)。该化合物13C-NMR数据见
表 1 ,其与文献[ 6 ,8]比较基本一致 ,化合物Ⅳ鉴定为 3-
O-β-D-glucopyranosyl-(1※2)-α-L-arabinopyranosyl-30-no-
rolean-12-en-28-oic acid。
化合物Ⅴ:白色粉末 ,易溶于甲醇 、吡啶 ,无明显
紫外吸收 ,泡沫 、Liebermann-Burchard 和 Molish 反应
阳性 ,提示为三萜皂苷;酸水解检出阿拉伯糖和葡萄
糖 。1H-NMR(Pyr-d5 ,500 MHz)δ:5.45(1H ,brs ,12-H),
3.28(1H ,dd , 18-H), 5.32(1H , d , J =8.0 Hz , ara-1),
4.97(1H , d , J =7.5 Hz , glc-1), 1.22(3H , s , Me),
1.00 ,0.98(6H , s , 2 ×Me), 0.92 , 0.91(9H , s , 3 ×
Me);13C-NMR数据见表 1 ,其苷元和糖部分分别与
文献值[ 5 ,9]比较基本一致 ,化合物Ⅴ鉴定为3-O-β-D-
glucopyranosyl-(1※3)-α-L-arabinopyranosyl-23-hydroxy-
olean-12-en-28-oic acid 即 3-O-β-D-葡萄糖-(1※3)-α-
L-阿拉伯糖-常春藤皂苷 。
致谢:北京大学医学部分析测试中心乔梁 、微量化学研究所
涂光忠代测核磁共振谱 , 军事医学科学院分析测试中心薛燕
代测质谱 , 四川中药研究所舒光明和徐洪贵联系采集药材。
·419·中国药学杂志 2006年 3月第 41卷第 6期　　　　　　　　　　 Chin Pharm J , 2006 March , Vol.41 No.6
基金项目:山东省卫生系统高层次人才 1020工程项目;济南市青年科技明星计划资助课题
作者简介:赵丽霞 ,女 ,硕士研究生　　＊通讯作者:郭秀丽 ,女 ,博士 ,副教授 ,硕士生导师　　Tel:(0531)88382011　　E-mail:zhlx1805@sina.com
川芎嗪烟酸酯对神经细胞氧化损伤的保护作用
赵丽霞a ,郭秀丽a＊ ,刘新泳b(山东大学药学院;a.新药药理研究所;b.药物化学研究所 ,济南 250012)
摘要:目的　观察川芎嗪烟酸酯(TMPN)对 H2O2 引起的体外培养大鼠脑皮层神经细胞及人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化
性损伤的保护作用 ,并初步探讨其作用机制。方法　H2O2诱导体外培养大鼠脑皮层神经元及 SH-SY5Y细胞进入氧化应激状
态 ,观察 TMPN对神经细胞氧化损伤的保护作用。结果　TMPN 能显著升高氧化损伤神经细胞的存活率 , 减少乳酸脱氢酶
(LDH)的漏出 ,对 H2O2诱导的神经细胞内游离钙浓度([ Ca2+] i)的升高有明显的抑制作用 ,并能减少胞内脂质过氧化物丙二醛
(MDA)的生成 ,提高谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论　TMPN可以有效保护活性氧对培
养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y 细胞的氧化损伤 ,维持细胞的正常生理功能 , 其机制可能与TMPN抑制H2O2 诱导的[ Ca2+] i异
常升高 ,减少脂质过氧化物生成 , 增加抗氧化物质的含量有关。
关键词:川芎嗪烟酸酯;神经细胞;氧化损伤
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2006)06-0420-04
Protective Effect of Tetramethylpyrazine Nicolate on Nerve Cells Injured by Hydrogen Peroxide
ZHAO Li-xiaa , GUO Xiu-lia＊ ,LIU Xin-yongb(a.Department of Newdrug Pharmacology;b.Department of Pharmaceutical Chemistry ,
School of Pharmaceutical Science , Shandong University , J i nan , 250012 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To investigate the protection of tetramethylpyrazine nicolate on oxidative damage in both primary cortical cells
and human neuroblastoma cells line(SH-SY5Y).METHODS　Both primary cortical cells and human neuroblastoma SH-SY5Y cells line were
injured using H2O2.The protective effect of tetramethylpyrazine nicolate on nerve cells was observed.RESULTS　TMPN increased the injured
cells surrival rate , decreased partly the leak of lactate dehydrogenase(LDH).TMPN reduced the elevated level of intracellular calcium concen-
tration([ Ca2+] i)and malondialdehyde (MDA)induced by oxidative damage , increased the activity of superoxide dismutase(SOD) and the
contents of Glutathione peroxidase(GSH-Px)level in injuried cells.CONCLUSION　TMPN has potent protection on oxidative damage , its po-
tential mechanism relates to suppressing the generation of reactive oxygen species and inhibiting the intra-cellular calcium overload.
KEY WORDS:tetramethylpyrazine nicolate;nerve cell;oxidative damage
　　川芎嗪烟酸酯(TMPN)是以川芎嗪(TMP)为先
导化合物 ,进行结构改造和修饰而合成的新一代川
芎嗪类化合物。TMP是中药川芎的主要活性成分之
一 ,自 20世纪 70年代以来川芎嗪被用作氧自由基
清除剂和抗血栓 、抗高血压药物 、钙离子拮抗剂 ,广
泛用于治疗心脑血管系统疾病 。近年来研究表明 ,
TMP能透过血脑屏障 ,富集于脑 ,尤其是脑干[ 1-2] ,
有很强的中枢作用 。由于 TMP 分子中的甲基很容
易被氧化 ,生成极性和水溶性较大的代谢物而迅速
排出体外 ,所以 TMP 在体内的半衰期短 ,生物利用
　　
REFERENCES
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(收稿日期:2005-07-08)
·420· Chin Pharm J , 2006 March , Vol.41 No.6　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2006年 3月第 41卷第 6期