全 文 ：生殖毒性与剂量关系相符 。 A 组中胎鼠的长
度 , 体重均明显低于阴性对照组 , 表现为胚
胎生长迟缓 . 它与畸胎 、 吸收胎 的 大 量 出
现 , 都说明 10 m g / k g c P 也具有明显的胚胎
毒性 J 在木实验条件下 , 畸胎常与死胎 、 吸
收胎同时 出现 , 似乎丧明了同类性质损害的
不同程度的反应咬弓 )。
每种致畸物都有在某器官的最敏感期 内
引起畸形 , 根据国内外的有关资料 ( “ )和本实
验结果 , 可 以认为 10 m g / k g 是 C P 的最小
致畸剂量 , 同时 , 由于 C P 的致畸带非常狭
窄 , 稍低于或高于该值 , 都可能得不致畸结
果 ( “ ) , 因此 , 10 m g / k g 是比较适合的致畸剂
)贡惬。
在胚胎器官形成期这一致畸敏感期内给
药日期不 同 , 产生的胎鼠各器官的致畸敏感
期也不 同 。 W il s o n 认为 ( 5 )第 9 一 n 天为脑和
神经器官的致畸敏感期 , 其中第 10 天为最敏
感期 , 骨骼为 1 0 一 12 天 , 心脏和主动脉弓为
1 0
一
2] 天 , 而泌尿生殖系统则为 1垂一 16 天 。 在
本 次实验仔, , B组 ( 1 0 、 1 1 两天连续给药 ) ,
出现 一 -]’ 大 l西的吸收胎和死胎 , 而 无 活 胎 幸
存 。 可能是两次给药剂量使受损伤的细胞大
幅度增加 , 导致胚胎死亡 , 从而掩盖了致畸
作用的显现 。 A 组亦出现部分死 胎 和 吸 收
胎 , 但多数胚胎仍存活 , 并伴有各种畸形产
生 , 主要表现为脑部组织和骨骼的畸形及胎
鼠的发育迟缓 , 这 与 W i l只On 等的文献报道
是 一致的 。
参考文献
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兴兴狱丫狱兴只兴兴兴兴兴兴只兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴丫兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴兴
癌变 · 畸变 · 突变 1 9 94年第 6卷第 6期
兴安升麻总皂试对丝裂霉素 C诱发人外周血淋巴细胞 S C E 频
率的影响
林 新 蔡有余 ’ 肖培根
中国医学科,学院药用植物资源开发研究所
1 0 0 0 2 ]
化京 1。。。 9违 ’ 中国医学科学院实验动物研究所 北京
摘 要 选择正常健康人为对象 , 研究兴安升麻总 皂试对丝裂霉素(C M M c) 诱发人外周血淋巴细胞姐妹染
色单体互换 ( S i s t e r C h r o过 a t i d E x e h 。 二 g e , SC E )频率的影响 。实验分为 1 0 . 9 4“ g / m l 、 4 3 . 7 5卜g / m l 、 1 7 5 . 0“ g / m 1 3
个升麻剂量组 , D M S O 溶剂对照组 , M M C 阳性对照组和空白对照组 , 比较不同浓度兴安升麻剂量组 , 对
M M C 诱发体外人外周 血细胞 S C E 频 率的羊异 。 结果表明 , M M C 加兴安升麻组 S C E频率 与对照组比较 .
.
3 0
.
有显著统计学意义的改变 P( <。 .。。 1 ), 提示兴安升麻是个浴在的抗突变剂 。
关键词 兴安升麻 , CS E频率 ; 抗突变 ; 丝裂霉素 (C M M C 。; 突变
T H E E F F E C T O F C IM! C IF U G A D A H U R! C A S AP O N IN S O N SC E
F R E QU E N C Y IN D U C E D B Y MM C IN P E R IP H ER AL L YM P H O C Y T E S
O F H UM AN
L i n X i n
,
I n s 亡i云u t e
C a i Y o u y u
l a n d X i a o P e i g e n
o f M e d艺e i n a Z P Za n t D e 沙 e不o Pm e n t , A e a d e n ; y o f M e d艺e a乙 S e i 。九 e ￡s
B e玄j i n g 1 0 0 0 94 , ’ I n s t i t u t e o f L a b o r a t o r y
M e d i e a Z S e玄e n e e s , B e艺j乞儿 9 1 0 0 0 2 1 .
C h 乞n e s e
A n i m a 乙 S e i e n e e s , C l i n e s e A e a d` m y o f
A b s t r a e t T h e e f f e t o f C艺m i e艺f u g a d a h u r i e a S a P o n i n s o n S C E f r e q u e n e y i n d u e e d
b y M M C i n P e r i P h e r a l I y m P h o e y t e s o f h e a l t h y h u m a n w a s s t u d i e d
.
T h e r e w e r e
s i x e x p e r i m e n t a l g r o u p 。 , 1
.
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.
1 0
.
9理.协g / m l , 4 3
.
7 5件g / m l , 17 5
.
0协g / m l C i , , ,艺e f f o g a
d a儿农 r艺e a S a P o n i n s , D M S O e o n t r o l g r o u P , M M C P o , i t i v e e o n t r o l g r o u P a n d
n e g a t i v e e o n t r o ] g r o u P
, e o m P a r e d w i t h e a e h o f t h r e e c o n t r o l g r o u P s
, a ! 1 t h r e e
C艺胡艺e i f ,` g a d a 万翻 r i e a S a P o n i n o g r o u P s s h o w e d d r a m a t i e e h a n名 e : ( P < 0 . 0 0 1 ) . T h e
f a e t t h a t C i阴 i e艺f : ` g a d a h : ` r 乞e a S a P o n i n s e f f e e t i、尸 e j y i n h i b i t s t h e S C E f r e q u e n e y
i dn u
e e d b y M M C i n P e r i P h e r a l l y m P h o e y t e s o f n o r m a l l飞u m a n i n d i e a t e d t h a t
C i , n i e艺了2` g a d a h 友 r i e a S a P o n i n s 15 a P o t e n t i a l a n t i m u t a g e n i e a g e n t .
K e y w o r d s C i n Zi e i f u g a d a几: ` r i e a ; S i s t e r C h r o m a t id E x e h a n g e 一 f r e q u e n e y ; M i t o ln y e i n
C ( M M C ) ; M u t a g e n e s i s ; A n t i
一
m u t a g e n e s i s
,
兴安升麻 ( C i m玄e 艺f : ` g a d a h 、 r 艺e a )为毛艾
科植物 , 以根状茎入药 , 其传统 疗 效 为 解
“ 毒” , 即对中医辩证定性为 “ 毒 ” 的情况 , 如
“ 温毒 ” 、 “ 火毒 ” 、 “ 疫毒 ” 和误食某些食物或
药物等情况均有一定的解毒功效 《 ` )。 现代医
学研究表明兴安升麻具有较强的抗炎 《“ ) , 抗
突变 ( “ )作用 。 为了进 一 步从细胞染色体水平
阐述其抗突变作用 , 进行了人体外周血细胞
姐妹染色单体交 换 (S C E )试验 。
材料和方法
1
. 药品 兴安 升 麻 总 皂 贰 ( c i o Zi c i f u g a
d a h u r ￡c a S a p o n i n s , C d 一 S )由本所化学室提
供 , 为棕黑色固体粉末 。 用时用 D M s o 配
制 , 终浓度分别为 1 0 . 9 4林g m/ l 、 4 3 . 7 5件g /
m l
、
1 7 5
.
0 0协g /m J。 丝裂霉素 C ( M M C ) 为
s i g m a公司产品 、 终浓度为 0 . 5林g /m l .
2
. 细胞培养与实验处理 , 将 R P M l l以 o 培
养液 ( F B s 20 % , P H A o . 4 m g / m l) 分 装 入
1 2只 2 5m l 培养瓶 , 每瓶含培养液 s m l , 将
采集的正常人静脉血 (肝素抗凝 )无菌条件下
接种于培养基内 , 每瓶 4 0 m l , 轻轻摇匀 ,
37 ℃温箱培养 26 h 后 , 从温箱中 取 出 , 将
12 只培养瓶分成 6组 , 3个对照组和 3 个升麻
实验组 , 对照组每组 2 瓶 , 分为空 白对 照
组 , D M S O 对照组和 M M C 阳性对照组 。
实验组 3瓶分别加 1 0 。川 兴安升麻 总 皂 贰
( C d
一 S )液 `终浓度分别为 1 0 . 9 3件I /m l 、 4 3 . 7 5
林s / m l 、 1 7 5 “ s / m l , 同时加 M M C ( 5林g /m z )
] 0 。川 。 实验组另外 3瓶只加相同浓度的兴安
.
3 2
.
升麻皂贰液 。 对照组和实验组于 无 菌 条 件
小` , 每瓶加 5一浪脱氧尿 l密咤核昔 ( 5 一 B U d R )
别邸 , 混匀后于 37 ℃ 温箱中继续培养至 70 h
(终 _ [L培养前 Zh) , 向各培养液中加入 5以g /m l
秋水仙素 1 0 国 , 其终浓度为 0 . 1林g / m l , 使
细胞分裂停 正干中期 . 于 37 ℃ 温箱中 继 续
J音养 Zh 。
3
. 按常规方法制备染色体标木 , S C E 分化
染色和 S C E计数如前文 ( 连 ) 。
结 果
单加兴安升麻 皂贰 ( C d 一 s) 实验组外周
血淋 巴细胞 S C E 频率的分析 , 与各 自空 白
对照组和 D M S O对照组 S C E 频率比较 , 无
统计学差异 ( p > 0 . 0 5 ) , 与各自单 加 M M C
阳性对照组 s C E频率比较 , 均有非常显著统
计学差异 ( p < 0 . 0 1 ) , 见表 1 。 兴安升麻 总
皂贰 ( C d 一 s )加丝裂霉素 C ( M M C )实验组外
T a b 1
.
T h e e f f e e t o f C i m艺e艺f u g a d a h 农 r 乞e a S a P o n i n s o n S C E f r e q u e n e y i n
p e r i p h e r a l Iy m Ph o e y t e s o f n o r m a l h u m a n
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D M S O e o 刀 t r o l
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0
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1 0
。
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4 3
.
7 5
1 7 5
。
0 0
9
。
4 1 士 1 。 8 6 3
9
。
6 8士 1 。 7 2 5
3 6
。
0 8 士 3 。 55 9
9
。
7 2生 2 . 6 2 2 .
1 0
。
0 4生 2 。 1 8 8 ’
1 0
。
9 6 士 2 。 1 8 9 .
C ( l
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S
二
C i
n i i o i f it g a ( Ia li u r i。 。 S a p o n i n s一 P > 0 . 0 5 A s e o m p a r e ` 1 w i t h N e g a t i v e e o 牡 t r o l a 幻 。 1 D M S O e o n t r o l ,
!
P < 0
。
0 01 人 、 ` o n 1 P a r e ( 1 w i t }, M M C e o ” 士r (一1 g r o u p .
周 _血淋 巴细胞 S C E频率分析 , 与各自的空 自
对照组 , D M S O 对照组及单力11 M M C 阳性
对照组 s C E 频率 比较 , 均有非常显著的统计
学差异 ( p < 0 . 0 0 1 ) 。 随着兴安升麻皂贰 ( C d
一
s) 剂量的增加 , 兴安升麻皂贰实验组 s C E
频率逐渐减少 , 剂量一效应呈负相关 (r 二 一
0
.
7 1 9 4 , P < 0
.
0 5 )
, 见表 2及 图 1 。
T a b 2
.
T h e i n h i b i t o r y e f f e e t o f C i m i e i f u g a d a h u r i e a S a P o n i n s o n S C E
f r e q u e n e y i n d u e e d b y M MC i n p e r i p h e r a l l y m p h o e y t e s o f n o
r m a l
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M M C
一几g / n l l
C d
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D M S〔) e ` ) n t r 《 、 l
M M C :` o n t r 。 , l
(了。 l一 5
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0 5
0
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.
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7 5
1 7弓. 0 0
8
。
0 0 士 2 。 5 0 0
8
.
3 3 士 2 。 8 72
3 1
.
6 4 士 6 。 6 5 8
2 0
。
1 6 士 3 。 6 71 .
1 6
。
0 8 士 3 . 2 6 5 .
1 3
。
4 0 士 2 。 7 9 9 “
C d
一
S = C i二 i e ￡j u g a d a h u r i e a S a p o 二 i n s . P < o , o o 1 A 只 e o r ,l p 几 r 。 (! v i t h N o g a t i、
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,
3 2
,
.友汤
丫
周血淋巴细胞 s c E 频率分析表明 , 兴安升
麻总皂贰 ( C d 一 S )有明显仰制 M M C 诱发人
外周血淋巴细胞 s C E 频率 。 并随着兴安升
麻皂贰剂量的提高 , 其抑制作用加强 , 剂量
与 s C E 频率呈竺负 相 关 ( r = 一 0 . 7 1 94 P <
0
.
0 5 )
, 提示兴安升麻总皂贰是个潜在 的 抗
突变剂 , 其作用机理可能与提高抗氧化酶和
谷胧甘肤 S 一转移酶活性有关 ` ” ) 。
504加
阮。`山,沪召少
0
. `
曰公的
C l勺 。 9 4 4 ) 一 l , 1 7 5 。 Q勺
x C。刀 e o n t r a t i a n (协 g / m i〕
F ig l
。
T h e i二 h ib i t o r y e f f e c t o f C i阴 i c ` I“ g a
d a h
u r 犷e a w i t h d i f f e r e 皿 t d o s e s o n
S C E fr e q u e n e y 恤 d u c e d b y M M C i n
p e r i p h
e r魂
1 l y m p h
o e , t e s o f
n o r m比 l
1一 [1 n l 。 ” . C = M M C e o n t r o l ` r o u p 。
讨 论
s C E的机理虽尚未彻底搞清 , 但多数学
者认为它是一种对 D N A损伤的修复方式 (重
组修复 ) , 从而可阻止基因的突变 。 它 包 括
了 D N A 损伤引起的继发性修复和 D N A 合
成的过程 s() 。 因此 , s C E 与基因突变 有 高
度相关性 (“ )。 它已被越来越广泛地用作一种
快速检测致突变剂 ( 7 )和抗突变剂 (8) 的方法 。
兴安升麻皂贰实验组外周血淋巴细胞 s C E频
率分析表明 , 兴安升麻对健康人外周血淋 巴
细胞 S C E 频率均在正常范围内 , 表明兴安
升麻总皂贰本身在试验浓度范围 , 对染色体
D N A 无损伤作用 , 是个安全的 临 床 常 用
药 。
已有报道 , M M C 是一个很强的诱变剂 ,
可诱发微核 ( “ ) 、 s C E 频率升高及染色体 畸
变 l( 。 ) 。 以兴安升麻总皂贰为拮抗剂 ,观察它
对 M M C 诱发人外周血淋巴细胞 s C E频率的
影响。 兴安升麻皂贰加 M M C 实验组人外
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