全 文 ：食品研究与开发 2006.Vol.27.NO.1
蕨麻(Potentilaanserina),学名鹅绒委陵菜，蔷微
科，属多年生匍匐草本植物，主要产于青海、西藏等
海拔1700～4300m的高寒地区，根向下延长，长成
纺锤型或椭圆型块根,藏医称″卓老洒曾″，具有健脾
益胃、生津止咳、益气补血之功，富含人类必需的18
种氨基酸、多种维生素，多糖和微量元素［1，2］，素有
“人参果”之称。食用人参果的历史悠久，是一种优
良的保健食品，现已成功开发出人参果脯、人参果
八宝粥、人参果酒等特色产品。蕨麻的药用成分的
定性分析表明其含生物类黄酮，但其含量测定未见
文献报道。本文采用蕨麻干果为原料，甲醇为溶剂，
半微量超声波提取，光度法快速测定了总黄酮的含
量，与传统工艺索氏提取法进行了比较，并采用正
交试验对提取工艺进行了优化选择。以猪油为底
物，以碘量法测定了其对脂质过氧化的抑制作用，
并通过光度法测定了其对DPPH·自由基的清除能
力。为蕨麻保健食品的开发提供了依据。
1 材料与方法
1.1实验材料与设备
722型分光光度计 （上海精密科学仪器有限公
司）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有
限公司），工作频率40kHz；索氏抽提器；真空干燥
器；电子天平；电动离心机；粉碎机；微量进样器。
芦丁标准样（中国药品生物制品检定所提供）；
DPPH·（2，2-二苯基-1-苦味酰基自由基，Sigma公
司）；其它试剂均为分析纯。
蕨麻：购于青海（西宁伊品园食品有限公司）。
60℃恒温干燥，粉碎，过80目筛。
1.2实验方法
1.2.1样品中总黄酮的提取
1.2.1.1提取方法的选择
准确称量一定量试样若干份，以甲醇为溶剂，
分别采用索氏提取法和常量、半微量超声波提取法
提取，于510nm处光度法检测提取液中总黄酮的
含量［3］。平行实验三次，比较提取率的大小。索氏提
取试样经70℃低温浓缩、干燥得粗提物，用于抗氧
青海蕨麻中类黄酮的提取及其抗氧化性研究
韩志萍
（榆林学院化学系，榆林 719000）
STUDYONEXTRACTINGTECHNOLOGYOFPOTENTILLAANSERINAANDITSANTI-OXIDANTACTIVITY
HANZhi-ping
（DepartmentofChemistry，YulinColege，Yulin719000）
Abstract：ThemethanolextractconditionsofPotentilaanserinaandtheirantioxidantactivitieswere
studiedsimultaneously.Theoptimumextractionconditionswerechosenbasedontheextractionpro-
ductivitiesunderdiferentextractiontime,theratioofmasstosolvent，extractiontimesandvolumeof
solvent.Anti-oxidativeefectofextractsonlardwasstudied.Theresultsshowedthatextractscouldin-
hibitthereactionoflipidperoxidationofoilsignificantly.Theanti-oxidativeefectofextractswasbeter
thanVcandlemonacid.Potentilaanserinawasapotentialproductsofnatural,safeandefectivean-
tioxidant.
Keywords：Potentilaanserina；flavonoids；ultrasonicextraction；antioxidativeefect
摘要：研究了用甲醇提取蕨麻中类黄酮的工艺条件，并对其进行了抗氧化性能的研究。应用正交试验考察了提取时
间、料液比、提取级数、试样量对提取率的影响，确定了最佳提取工艺。抗氧化试验表明该提取物可有效的延缓油脂脂
质过氧化反应，通过与Vc和柠檬酸进行比较，其抗氧化性能明显优于二者，表明蕨麻提取物是一种安全、高效的天然
抗氧化剂。
关键词：蕨麻；总黄酮；超声波提取；抗氧化性
作者简介：韩志萍（1968-），女，陕西榆林人，讲师。主要从事分析化
学的教学及天然产物的分析。
技术研究
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食品研究与开发2006.Vol.27.NO.1
化性试验。
1.2.1.2提取条件的选择
按L9（34）正交试验设计方案，准确称取一定量
蕨麻试样，以甲醇为溶剂，分析提取时间、料液比、
提取级数和试样量对超声波法提取总皂甙提取量
的影响。相同实验条件同一批次，同一批次平行处
理三份样品。光度法测定各提取液中总黄酮含量。
1.2.2提取物总黄酮的测定
1.2.2.1标准曲线的制作
准确称取干燥恒重的芦丁标准品100mg，用甲
醇溶解，定容至50mL，摇匀得浓度为2mg/mL的
标准贮备液，装入棕色瓶于冰箱内保存备用。准确
吸取10mL标准贮备液于100mL容量瓶中，用体
积分数为50%的甲醇稀释至刻度，摇匀即得浓度为
0.2mg/mL标准应用液。
准确吸取标准应用液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0
mL分别置于25mL，比色管中，各加入5%NaNO21
mL，摇匀；放置5min后加入10%Al（NO3）31mL，摇
匀；放置5min，再加入 4%NaOH10mL，加水至刻
度，混匀，15min后用721型分光光度计在最大特
征吸收波长510mn下测定吸光度，绘制标准曲线。
1.2.2.2样品的测定
称取样品0.1000g于10mL具塞试管中，准确
加入2.00mL甲醇，加塞后放入超声波水浴中超声
30min，离心机分离。倾出清液，残渣中再加入2.00
mL甲醇，二级提取。合并上清液，备用。
准确移取提取液0.20mL于10mL容量瓶中，
以下操作同1.2.2.1，测得的吸光度与校准曲线对
照，计算样品中总黄酮含量。
1.2.3提取物抗氧化性研究
1.2.3.1对食用油脂的抗氧化性试验
准确称取一定比例的提取物及其它抗氧化剂，
用少量乙醇溶解，分别加入100g温热的猪油中，剧
烈搅拌混匀。同时以不加添加物的油脂作空白。将
所有样品放入65±1℃恒温箱中强化保存，定时搅
拌、通入空气，并交换其在恒温箱中的位置。定时取
各种平行样，按照GB5009.37-85碘量法测定动植
物油脂的过氧化值（POV值），并以POV值大小表
示油脂的氧化速度，进而衡量抗氧化剂的活性。
1.2.3.2对DPPH·自由基的抑制试验
取2mL乙醇配制成的0.1%的蕨麻提取液，加
入新制的2×10-4moI/LDPPH·乙醇溶液2mL，充分
混匀，30min后在517nm（自由基强吸收峰）处测量
其吸光度 A，与同浓度的 Vc、柠檬酸比较。对
DPPH·的清除率K按下式计算：
K=［1-（A1-A2）/A0］×100%
式中：A0为自由基的吸光度
A1为自由基加抗氧化剂的吸光度
A2为抗氧化剂的吸光度
2 结果与讨论
2.1与索氏提取法的对照试验
频率高于20kHz的超声波，由于超声空化所产
生的微电流，有效地打破了边界层，即所谓的“破壁”
作用，使扩散速度增加，浸出速度成倍地提高［4～8］。试
样粉碎至80目筛以下，以甲醇为提取剂，半微量试
样分析，可免去脱脂步骤，直接吸取甲醇提取液进
行显色测定。试样量对提取率的影响与文献［3］一致，
常量试样较半微量试样堆积厚度大，破壁及扩散速
度减小，但与索氏提取法相比，仍具有省时、溶剂量
小，提取率高的特点。见表1。
2.2正交试验
为进一步优化超声波提取蕨麻皂甙的实验条
件，按L9（34）正交表安排实验，结果见表2。
以测得的吸光度值为指标，实验结果经统计学
分析，结果表明，提取级数、提取时间对超声提取率
有显著影响，而料液比影响不大。在所选水平下的
最佳实验条件为A2B1C2。
2.3标准曲线
以体积分数50%甲醇溶液为空白，分别测定
系列芦丁标样溶液在510nm处的吸光度，结果表
表1不同提取方法对提取效果的影响（n=3）
方法
索氏
常量超声
半微量超声
提取时间
t/h
3
0.5
0.5
总黄酮
ω/%
2.95
4.26
4.64
试样量
m/g
1.000
1.000
0.100
溶剂量
V/mL
50
20
2
因素
水平
样品
1#
2#
3#
4#
C
提取级数
1
2
1
2
2
1
黄酮提
取量
（ω%）
2.36
3.26
4.56
4.32
A
时间 (min)
1（20）
2（30）
1
1
2
2
B
料液比 (g/mL)
1（1：20）
2（1：30）
1
2
1
2
表2正交试验因素水平表（n=3）
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明在0.008～0.048g/L。范围内芦丁浓度与其吸光度
之间呈线性关系，以芦丁浓度C为横坐标，吸光度
A为纵坐标绘制标样测定散点图，得回归方程、回
归曲线及相关系数，结果见图1。
2.4样品分析
准确称取蕨麻试样6份，按1.2.2.3方法测定总
黄酮质量分数，结果见表3。
2.5蕨麻提取物中黄酮类化合物的定性分析［6］
甲醇提取液定性分析结果如表4所示。提取液
兼有黄酮类和酚类的显色特征，应为类黄酮化合物。
2.6抗氧化性能比较
在猪油中分别加入一定比例（以油重计）的蕨
麻粗提取物和TBHQ(特丁基对苯二酚），进行抗氧
化性试验，试验结果如图2所示。
由图2可知，在猪油中添加提取物后，可以明显
地抑制猪油的过氧化程度，而且随着添加量的增加，
其抗氧化性增强。但较合成抗氧化剂TBHQ略差。
将 0.1%的提取物与 Vc和柠檬酸对比做自由
基清除试验，结果如图3所示。
蕨麻提取物较Vc和柠檬酸有更强的抗氧化作
用，0.1%的蕨麻提取物清除率高达81%，而柠檬酸
为51.4%，Vc为33.3%。
3 结论
3.1以甲醇为溶剂，超声波提取蕨麻类黄酮，正交试验
结果表明最佳工艺为：半微量试样，料液比1：20，提
取时间30min，二级提取。在此条件下，半微量超声波
甲醇提取法比常规索氏提取法提取率高出54%。
3.2以芦丁为对照NaNO2-Al（NO3）光度法在510nm
处检测，青海蕨麻甲醇提取物中总黄酮平均含量为
4.46%。
3.3蕨麻甲醇提取物有较强的抗脂质过氧化和抑制
自由基作用。一定浓度内抗脂质过氧化能力随浓度
增强，略差于人工合成抗氧化剂TBHQ，抗自由基能
力优于Vc和柠檬酸。是一种安全、高效的天然抗氧
化剂。
参考文献：
［1］王晋，张坚，等.青海产蕨麻营养成分的研究［J］.青海医药
杂志，1998（2）：52-53.
［2］李军乔.青海省野生资源植物!鹅绒委陵菜（Potentila
anserineL.）的应用研究［J］.生物学杂志，2003，20（5）：34-
36.
［3］张兰杰，张维华，郑红军.千山决明子总黄酮含量的测定
［J］.食品科学,2003,24(12):101-103.
［4］赵兵，王玉春，欧阳藩，等.超声波在植物提取中的应用
［J］.中草药，1999，30（9）：附1-附3.
［5］严伟，李淑芬，田松江.超声波协助提取技术［J］.化工进
展，2002，21（9）：649-651.
［6］石碧，狄莹.植物多酚［M］.北京：科学出版社，2000：
102-111.
表3样品分析结果 (n=6)
样号
1N6
RSD%
3.2
平均值(%)
4.46
测量值(%)
4.32,4.28,4.64,
4.52,4.56,4.43
表4蕨麻提取物的定性分析
方法
紫外线照射
HCI-Mg
AICI3
香草醛-浓HCI
FeCI3-K3Fe(CN)6
对氨基苯磺酸
-NaNO2
饱和KIO3
结论
黄酮类化合物
的特征反应
酚类的特征
显色反应
现象
呈黄绿色，并有荧
光斑点
桃红
变暗（黄）
红
绿→蓝
黄
红→褐
收稿日期：2005-07-03
A=0.0215C-0.0056(r=0.9998)
图1芦丁标样测定点与线性回归曲线
芦丁含量C/（mg/L）
吸
光
度
图2蕨麻提取物抗氧化性
图3DPPH自由基清除试验
清
除
率
K
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